• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    魚類性別特異分子標(biāo)記篩選及分子性控育種研究現(xiàn)狀與展望

    2023-12-28 05:29:10陳松林
    水產(chǎn)學(xué)報 2023年11期

    劉 洋,陳松林*

    (1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所,海水養(yǎng)殖生物育種與可持續(xù)產(chǎn)出全國重點實驗室,山東 青島 266071;2.山東省海洋漁業(yè)生物技術(shù)與遺傳育種重點實驗室,山東 青島 266071;3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點實驗室,山東 青島 266071)

    1 引言

    中國是水產(chǎn)養(yǎng)殖大國,近二十年來,中國水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量一直占世界水產(chǎn)養(yǎng)殖總產(chǎn)量的三分之二左右,具有舉足輕重的地位。魚類是水產(chǎn)養(yǎng)殖的主體,魚類養(yǎng)殖業(yè)是保障國家糧食安全的重要產(chǎn)業(yè)。2022 年我國水產(chǎn)養(yǎng)殖總產(chǎn)量5 565.46 萬t,其中魚類養(yǎng)殖產(chǎn)量2 903.04 萬t,占水產(chǎn)養(yǎng)殖總產(chǎn)量的52.16%。培育養(yǎng)殖魚類良種,提高單位水體的魚類養(yǎng)殖產(chǎn)量,增加魚類養(yǎng)殖收益,是踐行“打好種業(yè)翻身仗”、實踐大食物觀、增加我國優(yōu)質(zhì)蛋白供應(yīng)渠道與總量、提高我國食品安全指數(shù)和改善全民膳食結(jié)構(gòu)的有效途徑。

    許多魚類都存在典型的性別二態(tài)性現(xiàn)象,雌雄個體在生長速率上存在明顯差異。如羅非魚(Oreochromisspp.) 和黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)等淡水魚類雄魚比雌魚生長速率快30%~200%,而大麻哈魚(Oncorhynchus keta)、鱖(Siniperca chuatsi)和半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)等魚類的雌性個體比雄性個體生長快,特別是半滑舌鰨,其雌性個體生長速率比雄性個體快2~4 倍。因此,開展上述魚類的性別控制研究,培育全雄(或全雌)苗種,進(jìn)行單性養(yǎng)殖對于提高單位養(yǎng)殖產(chǎn)量具有重要意義。魚類性別控制和單性養(yǎng)殖一直都是國際上的重要研究課題,而性別特異分子標(biāo)記作為開展性別決定機制研究與性別控制的基礎(chǔ)工具,始終是魚類性別決定和性別控制研究中的前沿?zé)狳c,國際上一直都在尋找不同魚類性別特異的分子標(biāo)記,并建立可靠的遺傳性別鑒定方法。

    自20 世紀(jì)90 年代以來,科學(xué)家紛紛采用限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)、隨機擴增多態(tài)性DNA 標(biāo)記 (random amplified polymorphic DNA,RAPD)、擴增片段長度多態(tài)性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)和簡單重復(fù)序列(simple sequence repeats,SSR)等不同的分子標(biāo)記技術(shù),嘗試發(fā)掘魚類性別特異分子標(biāo)記。國外早期研究取得的進(jìn)展主要包括Devlin 等[1]在大鱗鉤吻鮭(O.tshawytscha)上開發(fā)出了Y 染色體特異的雄性特異標(biāo)記,這是最早的魚類性別特異分子標(biāo)記的報道;Allendorf 等[2]通過差減雜交方法在虹鱒(O.mykiss)上獲得了1 個雄性特異的DNA 片段;Iturra 等[3]用RAPD 技術(shù)和集團分離分析法(bulked segregant analysis,BSA)在虹鱒基因組中找到了2 個雄性特異的分子標(biāo)記;Lee 等[4]用BSA 方法在尼羅羅非魚(O.niloticus)上找到10 個與表型性別連鎖的微衛(wèi)星標(biāo)記,這些標(biāo)記可以用于不同Y 染色體等位基因功能的研究和具有1 個或者幾個Y 染色體拷貝的親魚的鑒定;Griffiths 等[5]在三刺魚(Gasterosteus aculeatus)中找到了2 個雄性特異的AFLP 標(biāo)記,但當(dāng)應(yīng)用于另外兩種刺魚時,卻未能正確的鑒定其性別;Ezaz 等[6]用AFLP 技術(shù)掃描尼羅羅非魚基因組,找到3 個Y 染色體連鎖的AFLP 標(biāo)記,然而這些標(biāo)記卻不能鑒別無親緣關(guān)系的個體性別,表明這些標(biāo)記并不是物種通用的雄性特異分子標(biāo)記。

    我國養(yǎng)殖魚類多達(dá)200 余種,很多魚類都存在性別二態(tài)性現(xiàn)象,具有單性育種的必要性,因此,魚類性別特異分子標(biāo)記篩選對于我國魚類性別控制和養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展尤其重要。國內(nèi)學(xué)者自20世紀(jì)初就開展了魚類性別特異分子標(biāo)記篩選的研究,目前,我國已在半滑舌鰨等三十多種養(yǎng)殖魚類上篩選到性別特異分子標(biāo)記,并建立了分子標(biāo)記輔助性控技術(shù),使我國在魚類性別特異分子標(biāo)記篩選上躋身國際前列。下面本文系統(tǒng)回顧一下我國魚類性別特異分子標(biāo)記篩選的研究歷程、取得的重要進(jìn)展及今后的發(fā)展方向。

    2 我國魚類性別特異分子標(biāo)記研究歷程

    2.1 我國魚類性別特異分子標(biāo)記研究的探索期(2001—2006)

    借鑒國外魚類性別特異分子標(biāo)記的研究經(jīng)驗,國內(nèi)學(xué)者在不同魚類上開展了相應(yīng)的研究,嘗試在養(yǎng)殖魚類中找到性別特異分子標(biāo)記。如常重杰等[7]利用40 種隨機引物在2 種泥鰍的3 個地理群體雌雄各30 尾個體中未發(fā)現(xiàn)性別特異片段;宋平等[8]應(yīng)用RAPD 在黃顙魚中也沒有找到性別特異的DNA 片段;李建中等[9]共采用了120 個隨機引物,以雌、雄性異源四倍體鯽(Carassius auratus)、鯉(Cyprinus carpio)DNA 池為模板,同時進(jìn)行RAPD擴增,發(fā)現(xiàn)有14 個重復(fù)性好、帶型清晰明亮且雌雄群體有差異,但在進(jìn)一步驗證中,只有引物S129 在雌雄個體間存在差異。

    2.2 我國魚類性別特異分子標(biāo)記篩選的突破期(2007—2012)

    半滑舌鰨性別特異分子標(biāo)記的發(fā)現(xiàn) 半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)主要生活于我國的黃渤海海域,其肉味鮮美,營養(yǎng)豐富,深受消費者歡迎,市場價值高。但半滑舌鰨雌雄個體生長差異大,研究表明,2 齡雌性成魚體重平均為同齡雄魚的3.28 倍[10],而在普通養(yǎng)殖群體中,雄魚比例高達(dá)80%左右,這導(dǎo)致半滑舌鰨養(yǎng)殖產(chǎn)量降低、成本升高,影響了半滑舌鰨苗種的推廣和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此,開展半滑舌鰨性別控制研究,提高雌魚比例,對于半滑舌鰨養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展具有重要意義。要進(jìn)行性別控制,首先要能進(jìn)行遺傳性別鑒定,因此,篩選半滑舌鰨性別特異分子標(biāo)記成為進(jìn)行性別控制育種研究的重要前提。

    半滑舌鰨雌性特異AFLP 標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所陳松林團隊,采用64 個AFLP 引物組合對半滑舌鰨雌雄魚基因組進(jìn)行了掃描,篩選到 7 個雌性特異的DNA 條帶,并首次開發(fā)出半滑舌鰨雌性特異的AFLP 分子標(biāo)記M1。隨后,根據(jù)雌性特異AFLP 標(biāo)記M1 的核苷酸序列設(shè)計一對引物,成功將M1 轉(zhuǎn)化為SCAR 標(biāo)記。使用研發(fā)的SCAR 標(biāo)記分別擴增57個雌性和55 個雄性半滑舌鰨個體的DNA,在所有雌性個體中均擴增出一個特異的DNA 條帶,而所有雄性個體中則未擴增出該條帶,從而證明了黃海所開發(fā)的半滑舌鰨雌性特異標(biāo)記與PCR 技術(shù)的有效性[11],這也是我國發(fā)現(xiàn)的第一個魚類性別特異分子標(biāo)記。

    半滑舌鰨性別特異微衛(wèi)星標(biāo)記的研發(fā)半滑舌鰨是ZW 型性別決定類型[12]。根據(jù)遺傳學(xué)經(jīng)典理論,半滑舌鰨雌魚產(chǎn)生Z 型和W 型兩種卵子,通過人工雌核發(fā)育可以生產(chǎn)ZZ 型雄和WW型超雌兩種雌核發(fā)育魚苗,將WW 超雌魚苗培育成熟,然后與ZZ 雄魚交配,即可大量生產(chǎn)ZW型全雌魚苗。而要篩選培育WW 超雌個體,其前提是必須能鑒定出WW 超雌個體和普通ZW 雌性個體,因此半滑舌鰨WW 超雌個體的鑒定成為研制半滑舌鰨全雌魚苗的關(guān)鍵。而中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所2007 篩選到的半滑舌鰨雌性特異AFLP 標(biāo)記是一種顯性遺傳標(biāo)記,盡管能區(qū)分ZZ 雄魚和ZW 雌魚,但難以區(qū)分ZW 雌和WW 超雌。因此,探索能夠區(qū)分半滑舌鰨ZW 雌魚和WW 超雌的分子標(biāo)記,對于篩選和大量培育超雌個體,進(jìn)而培育半滑舌鰨全雌苗種,具有重要意義。為此,中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所在完成半滑舌鰨全基因組測序和組裝的基礎(chǔ)上,對雌、雄魚基因組序列進(jìn)行比對發(fā)現(xiàn)了性別連鎖的微衛(wèi)星標(biāo)記并進(jìn)行了驗證。結(jié)果表明,其中1 個微衛(wèi)星標(biāo)記CseF-SSR1 與半滑舌鰨性別緊密連鎖,是性別特異微衛(wèi)星標(biāo)記。采用CseFSSR1 引物分別擴增性成熟的半滑舌鰨雌、雄魚各12 尾,雌魚可以擴增出2 個片段,而雄魚只能擴增出其中1 個片段,因此,確定僅在半滑舌鰨雌性中擴增出的DNA 片段為W 染色體特異片段[13]。

    采用上述微衛(wèi)星標(biāo)記對半滑舌鰨卵裂雌核發(fā)育孵出前胚胎進(jìn)行鑒定,從39 尾異精卵裂雌核發(fā)育孵出前胚胎中檢測到4 個只含有W 染色體片段胚胎,由此初步表明,在半滑舌鰨異精卵裂雌核發(fā)育孵出前胚胎中含有約10%的超雌個體。半滑舌鰨性別特異微衛(wèi)星標(biāo)記為半滑舌鰨性別控制和全雌育種提供了重要技術(shù)手段,在半滑舌鰨繁殖用親魚鑒定、雌核發(fā)育魚苗鑒定、性別控制以及高雌苗種培育中具有重大應(yīng)用價值和廣闊的推廣前景。

    黃顙魚雄性特異AFLP 標(biāo)記的發(fā)現(xiàn) 黃顙魚是我國重要淡水養(yǎng)殖魚類。但黃顙魚存在雌雄生長速率差異大,雌魚生長速率明顯慢于雄魚,據(jù)報道,雄魚要比雌魚生長速率快2 倍。因此,開展黃顙魚性別控制研究,培育全雄黃顙魚苗種,對于黃顙魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義和應(yīng)用價值。中國科學(xué)院水生生物研究所桂建芳團隊2009年使用256 個AFLP 引物組合對三種遺傳性別的6 個樣品(XX 混合樣品、XX 個體、XY 混合樣品、XY 個體、YY 混合樣品和YY 個體)進(jìn)行PCR 擴增后分析,發(fā)現(xiàn)共有24 個引物組合能夠擴增出Y 或X 染色體連鎖的片段。其中,引物組合E6M3 和E5M12 擴增出X 染色體連鎖片段Pf63-X 和Pf512X;由此發(fā)現(xiàn)了黃顙魚性染色體連鎖的DNA 片段,篩選到黃顙魚X 和Y 染色體連鎖的AFLP 標(biāo)記[14],解決了黃顙魚遺傳性別鑒定的技術(shù)難題。

    2.3 我國魚類性別特異分子標(biāo)記篩選的快速發(fā)展期(2013—2023)

    我國魚類性別特異分子標(biāo)記篩選工作的爆發(fā)性增長 由于性別特異分子標(biāo)記在魚類性別決定機制研究和性控育種中的重要作用,長期以來,我國魚類科研工作者一直努力在不同魚類上篩選性別特異標(biāo)記。然而,RFLP、RAPD、AFLP和SSR 等分子標(biāo)記開發(fā)與鑒定通量低,工作量大,加之魚類性別決定機制復(fù)雜,大多數(shù)魚類具有性染色體分化不明顯,性別特異區(qū)間小等特點,篩選到性別特異標(biāo)記的魚類種類較少。2014 年,中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所陳松林領(lǐng)銜完成了我國第一個養(yǎng)殖魚類(半滑舌鰨)全基因組測序工作[15],建立了通過雌、雄魚基因組序列比對篩選性別特異分子標(biāo)記的方法,大大提高了性別特異分子標(biāo)記的篩選精度。隨著全基因組測序在水產(chǎn)動物中的普及和測序成本的降低,高通量的基因組測序在魚類性別特異標(biāo)記的篩選中已經(jīng)從參考工具發(fā)展為常用的技術(shù)手段,再加上通過傳統(tǒng)分子標(biāo)記技術(shù)篩選性別特異標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展和經(jīng)驗的積累,我國魚類性別特異分子標(biāo)記的研究進(jìn)入快速發(fā)展期 (表1),在包括半滑舌鰨、黃顙魚、條石鯛、尼羅羅非魚、鯉、大口鲇、大黃魚、烏鱧、平鲉、大刺鰍、黃姑魚、翹嘴紅鲌、金錢魚、鳙、鰱、奧利亞羅非魚、斑石鯛、圓斑星鰈、鰻鱺、黃姑魚、斑鱧、卵形鯧鲹、四棘金錢魚、鯪魚、香魚、大口黑鱸、長吻鮠、弓背青鳉、光倒刺鲃等三十多種魚類中篩選到性別特異分子標(biāo)記。

    魚類性別特異分子標(biāo)記的優(yōu)化與鑒定應(yīng)用 為了使性別特異分子標(biāo)記更好進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用,在一些養(yǎng)殖魚類中,性別特異分子標(biāo)記及配套的遺傳性別鑒定方法得到了優(yōu)化。以半滑舌鰨為例,研究表明半滑舌鰨存在自然性逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象,在養(yǎng)殖群體中存在偽雄魚,這種偽雄魚遺傳性別為ZW 雌性,生理性別為雄性,可產(chǎn)生精子并繁育后代。然而,其后代中偽雄比例占ZW 型魚的90%以上,導(dǎo)致雌性比例大為降低。因此,在繁育前將雄性親本進(jìn)行遺傳性別鑒定,剔除偽雄魚,是培育半滑舌鰨高雌苗種的有效手段,而利用性別特異分子標(biāo)記在養(yǎng)殖場對雄性親魚進(jìn)行快速性別鑒定就顯得尤為重要。然而,一般情況下養(yǎng)殖現(xiàn)場的實驗條件惡劣,方法有限,鑒定速度和準(zhǔn)確度難以保障。半滑舌鰨AFLP 雌性特異標(biāo)記是顯性標(biāo)記,只能在ZW 雌魚中擴增出一個條帶,無法鑒別出由于DNA 提取質(zhì)量差而導(dǎo)致的假陰性結(jié)果;而開發(fā)的半滑舌鰨微衛(wèi)星性別特異標(biāo)記,在Z 和W 染色體上擴增的片段只有12 bp的差異,適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳分型,這在養(yǎng)殖場難以實現(xiàn)。針對這種情況,中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所陳松林團隊從已開發(fā)的半滑舌鰨SSR 性別特異分子標(biāo)記中選擇Z 和W 染色體中擴增到的片段相差最大的一個(35 bp)重新設(shè)計引物,提高擴增片段中差異片段的占比,同時選用較高濃度的瓊脂糖,提高小片段的分辨率,成功開發(fā)出了可用于瓊脂糖分型的適用于養(yǎng)殖場現(xiàn)場鑒定的半滑舌鰨性別特異標(biāo)記。以這一標(biāo)記為核心工具,優(yōu)化鑒定流程,在保證質(zhì)量的同時縮短DNA提取時間,開發(fā)出了一套半滑舌鰨遺傳性別快速鑒定方法,大大提高了養(yǎng)殖現(xiàn)場遺傳性別鑒定的速度,并將鑒定結(jié)果準(zhǔn)確率提高到100%[23]。此外,陳松林團隊還結(jié)合半滑舌鰨性別相關(guān)基因的研究,開發(fā)出了差異片段為113 bp 的性別特異標(biāo)記,進(jìn)一步降低了適于鑒定的瓊脂糖濃度,提高了鑒定效率[24]。在黃顙魚中,圍繞開發(fā)的雄性特異標(biāo)記,也進(jìn)行了性別鑒定流程的優(yōu)化,提升了性別鑒定效率,為“全雄1 號”、“全雄2 號”新品種的研發(fā)提供了技術(shù)保證[52]。

    3 魚類分子標(biāo)記輔助性控育種

    目前,性別特異分子標(biāo)記已經(jīng)在部分魚類性控育種中得到了應(yīng)用,并取得了顯著的成效。如在半滑舌鰨良種培育過程中,首先通過建立雄性候選親本遺傳性別現(xiàn)場快速鑒定技術(shù),剔除偽雄魚,保證了后代的高雌性比例在40%左右,隨后對高雌苗種結(jié)合家系選育與基因組選擇育種技術(shù),培育出了抗哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)感染能力提高30.9%、18 月齡體重平均提高 17.7%、養(yǎng)殖成活率平均提高 15.7%的高雌速生抗病半滑舌鰨新品種“鰨優(yōu)1 號”[53]。

    由于黃顙魚具有明顯的性別二態(tài)性,在相同養(yǎng)殖條件下,第一年雄性黃顙魚比雌魚的生長速率快約30%,在養(yǎng)殖的第二年,雌雄生長差異接近3 倍。黃顙魚通過人工誘導(dǎo),可以得到XY 型生理雌魚,進(jìn)而繁育出YY 型超雄魚,與XX 型雌魚交配即可建立黃顙魚全雄繁育體系。黃顙魚雄性特異標(biāo)記的研發(fā),可以通過分子手段精準(zhǔn)區(qū)分XY 型正常雄魚和YY 型超雄魚,大大降低篩選YY 型超雄魚的工作量,解決了黃顙魚“全雄1 號”、“全雄2 號”等全雄新品種技術(shù)難點。黃顙魚 “全雄1 號”比普通黃顙魚增產(chǎn)35%,而2023 年新通過審定的黃顙魚“全雄2 號”在相同養(yǎng)殖條件下,12 月齡體重提高12.42%[54-56]。

    尼羅羅非魚和奧利亞羅非魚是羅非魚屬中的兩個不同物種,分別為兩種不同的性別決定類型,尼羅羅非魚是XY 型,奧利亞羅非魚是ZW 型。中國水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所使用分子標(biāo)記輔助性控技術(shù),以選育的尼羅羅非魚通過性逆轉(zhuǎn)及測交得到超雄個體(YYn♂),再與選育的奧利亞羅非魚雌性(ZW)雜交得到WY 型雌魚,再與 YYn♂雜交獲得超雄羅非魚 YYa♂,得到的YYa♂作為父本,連續(xù)5 代選育的尼羅羅非魚雌性作為母本,所得子代即為“粵閩1 號”新品種,其自然雄性率達(dá)到98.31%,在相同養(yǎng)殖條件下,“粵閩1 號”平均體重比同期養(yǎng)殖的吉富羅非魚提高 23.77%,父本超雄羅非魚制種相對簡單,便于推廣[57]。

    截止到2023 年,我國審定的水產(chǎn)新品種共計283 個,其中魚類新品種142 個,包括半滑舌鰨“鰨優(yōu)1 號”、黃顙魚“全雄1 號”、“全雄2 號”、虹鱒“全雌1 號”、羅非魚“鷺雄 1 號”、“粵閩1 號”、“夏奧1 號”、雜交鱧“雄鱧1 號”、翹嘴鱖“鼎鱖 1 號”、翹嘴鲌“全雌 1 號”、黃姑魚“全雌1 號”等11 個全雌/雄或高雌/雄水產(chǎn)新品種,性別特異分子標(biāo)記在這些新品種培育中起到了重要的作用。

    4 展望

    4.1 持續(xù)開發(fā)養(yǎng)殖魚類性別特異分子標(biāo)記

    我國養(yǎng)殖魚類物種眾多,具有巨大的開發(fā)潛力和推廣前景。許多養(yǎng)殖魚類存在性別差異現(xiàn)象,有必要進(jìn)行性別控制和單性育種技術(shù)研究。性別特異標(biāo)記是進(jìn)行性控育種的重要基礎(chǔ)工具,然而,我國養(yǎng)殖魚類性別特異標(biāo)記開發(fā)尚不充分,不能完全覆蓋所有養(yǎng)殖魚類的有關(guān)需求。近年來,在全基因組測序技術(shù)的輔助下,通過雌、雄個體的基因組重測序數(shù)據(jù)進(jìn)行高通量比對,作為一種有效的技術(shù)手段,大大加快了養(yǎng)殖魚類性別特異分子標(biāo)記的開發(fā)進(jìn)程。因此,整合建立我國養(yǎng)殖魚類全基因組測序平臺,集成基于基因組數(shù)據(jù)的魚類性別特異標(biāo)記篩選流程和技術(shù)體系,預(yù)期將對進(jìn)一步提高魚類性別特異分子標(biāo)記的開發(fā)效率和普及程度起到推動作用。

    4.2 強化魚類性別特異分子標(biāo)記篩選方法創(chuàng)新

    在脊椎動物中,魚類的進(jìn)化地位較低,性別決定機制復(fù)雜,受到環(huán)境和遺傳因素的共同影響。在基因組層面上,有些魚類沒有性染色體,有些魚類的性別決定區(qū)域很小,這為魚類性別特異標(biāo)記的篩選帶來了困難。現(xiàn)有的篩選方法,難以滿足魚類性別特異分子標(biāo)記的研發(fā)需要,如大菱鲆目前還沒有找到有效的性別特異分子標(biāo)記。因此,針對魚類基因組與性別決定機制的復(fù)雜現(xiàn)象,創(chuàng)新篩選方法,突破大菱鲆等魚類的性別特異標(biāo)記篩選難題,或?qū)⒊蔀槲磥眙~類性別特異標(biāo)記篩選的重要研究方向。

    4.3 優(yōu)化魚類性別特異分子標(biāo)記的應(yīng)用方法

    性控育種是提高養(yǎng)殖魚類產(chǎn)量的重要方法,性別特異分子標(biāo)記的研發(fā)為魚類性控育種提供了有效工具。目前,雖然我國科研人員在三十多種養(yǎng)殖魚類篩選到性別特異分子標(biāo)記,然而已經(jīng)應(yīng)用于良種培育的性別特異標(biāo)記還只有半滑舌鰨、黃顙魚、羅非魚、烏鱧、翹嘴鱖、黃姑魚、虹鱒等少數(shù)魚類,其他大多數(shù)養(yǎng)殖魚類中采用性別特異標(biāo)記培育良種的研究仍有待突破。

    在實際的性控育種工作中,遺傳性別的鑒定往往要在養(yǎng)殖場等簡易實驗條件下進(jìn)行,高效的鑒定流程、簡單的鑒定方法和可靠的鑒定結(jié)果是更好實現(xiàn)性控育種目標(biāo)的必要條件。因此,在研發(fā)得到性別特異分子標(biāo)記之后,圍繞性別特異分子標(biāo)記,結(jié)合高效核酸提取或分離技術(shù),建立簡潔有效的鑒定技術(shù)流程,將為養(yǎng)殖魚類單性良種培育提供可靠的遺傳性別鑒定技術(shù)手段。

    (作者聲明本文無實際或潛在的利益沖突)

    99热这里只有精品一区| 亚洲国产精品国产精品| 丝袜喷水一区| av天堂中文字幕网| 看非洲黑人一级黄片| 丰满乱子伦码专区| 三级毛片av免费| 男女那种视频在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 国产成人精品久久久久久| 看非洲黑人一级黄片| 中文字幕熟女人妻在线| 免费在线观看成人毛片| 国产午夜精品一二区理论片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国内精品宾馆在线| 亚洲在线自拍视频| 九九在线视频观看精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 欧美成人a在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 成人综合一区亚洲| 欧美三级亚洲精品| 美女黄网站色视频| 国产亚洲精品久久久com| 午夜精品国产一区二区电影 | 99热6这里只有精品| av在线老鸭窝| 精品熟女少妇av免费看| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产在视频线精品| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日本色播在线视频| 岛国在线免费视频观看| 成人亚洲精品av一区二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲精品,欧美精品| 国国产精品蜜臀av免费| 久久精品夜色国产| 日韩成人伦理影院| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩强制内射视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产精品国产高清国产av| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产 一区精品| 欧美性猛交黑人性爽| 国产淫片久久久久久久久| 老女人水多毛片| h日本视频在线播放| av国产免费在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲成人久久爱视频| 成人综合一区亚洲| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲成人久久爱视频| 欧美潮喷喷水| 久久国产乱子免费精品| 青春草亚洲视频在线观看| 秋霞在线观看毛片| 久久久久久久久久成人| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲最大成人中文| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲av熟女| 国产精品伦人一区二区| 色综合色国产| 七月丁香在线播放| 好男人在线观看高清免费视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产黄片美女视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 久久亚洲精品不卡| 99久久精品国产国产毛片| 男女那种视频在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品女同一区二区软件| 久久99热6这里只有精品| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 精品人妻视频免费看| 免费观看人在逋| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久久久久伊人网av| 亚洲va在线va天堂va国产| 午夜久久久久精精品| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品日韩av在线免费观看| 三级毛片av免费| 日韩在线高清观看一区二区三区| 99久久人妻综合| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 久久精品夜色国产| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲伊人久久精品综合 | 少妇熟女aⅴ在线视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜精品在线福利| 亚洲在线观看片| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 男插女下体视频免费在线播放| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 欧美又色又爽又黄视频| 毛片一级片免费看久久久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 少妇的逼好多水| 国产美女午夜福利| 国产精品国产高清国产av| 亚洲综合色惰| 久久人人爽人人片av| 欧美人与善性xxx| 久久精品国产自在天天线| 亚洲av熟女| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av播播在线观看一区| 日日撸夜夜添| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 久久久久九九精品影院| 久久精品夜色国产| 国产精品一区www在线观看| 日本黄色片子视频| 看黄色毛片网站| 久久久亚洲精品成人影院| 国产av不卡久久| 亚洲国产最新在线播放| 成年av动漫网址| 91精品一卡2卡3卡4卡| 日日啪夜夜撸| 国产成人福利小说| 男人和女人高潮做爰伦理| 别揉我奶头 嗯啊视频| www.av在线官网国产| 国产精品久久久久久久电影| 久久欧美精品欧美久久欧美| 免费电影在线观看免费观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久人人爽人人片av| 夜夜爽夜夜爽视频| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲伊人久久精品综合 | 中文字幕制服av| 看黄色毛片网站| 麻豆久久精品国产亚洲av| 精品久久久久久久久亚洲| 激情 狠狠 欧美| 麻豆成人午夜福利视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国产 一区 欧美 日韩| 两个人的视频大全免费| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 真实男女啪啪啪动态图| 国产一区二区三区av在线| av国产久精品久网站免费入址| 国产成人精品一,二区| 亚洲av中文av极速乱| 久久精品久久精品一区二区三区| 级片在线观看| 精品人妻视频免费看| 97热精品久久久久久| 天堂网av新在线| 日本-黄色视频高清免费观看| 成年女人看的毛片在线观看| 丰满少妇做爰视频| 一级爰片在线观看| 久久久久久九九精品二区国产| 成人特级av手机在线观看| 热99re8久久精品国产| 麻豆一二三区av精品| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 床上黄色一级片| 亚洲av免费高清在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品不卡视频一区二区| 22中文网久久字幕| 亚洲av福利一区| 男插女下体视频免费在线播放| 国产av一区在线观看免费| 看十八女毛片水多多多| 日本午夜av视频| 我要搜黄色片| 女人被狂操c到高潮| 亚洲性久久影院| 人人妻人人澡欧美一区二区| 舔av片在线| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 中文字幕av成人在线电影| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品野战在线观看| 国产成人免费观看mmmm| 久热久热在线精品观看| 日韩av不卡免费在线播放| 91久久精品国产一区二区成人| 精品久久久噜噜| 日韩欧美精品v在线| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩大片免费观看网站 | 看免费成人av毛片| 淫秽高清视频在线观看| 一级爰片在线观看| 草草在线视频免费看| 国产美女午夜福利| 国产午夜福利久久久久久| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 午夜亚洲福利在线播放| 久久久久免费精品人妻一区二区| 最新中文字幕久久久久| 国产亚洲一区二区精品| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 可以在线观看毛片的网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 久99久视频精品免费| 国产精品国产高清国产av| 久久精品影院6| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 永久网站在线| 国产成人精品婷婷| 国产淫片久久久久久久久| 97超碰精品成人国产| 日本午夜av视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产在视频线在精品| 国产成人精品久久久久久| АⅤ资源中文在线天堂| 男女国产视频网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | kizo精华| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲18禁久久av| 性插视频无遮挡在线免费观看| 久久精品国产亚洲av天美| 精品国产露脸久久av麻豆 | av在线观看视频网站免费| 日本av手机在线免费观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| h日本视频在线播放| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品人妻久久久久久| 深夜a级毛片| 日韩亚洲欧美综合| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 乱人视频在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产私拍福利视频在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 久久99精品国语久久久| 国产美女午夜福利| 一区二区三区高清视频在线| 禁无遮挡网站| 国产高清不卡午夜福利| 搡老妇女老女人老熟妇| 91狼人影院| 亚洲内射少妇av| 国产av一区在线观看免费| 国产一区二区三区av在线| 乱系列少妇在线播放| 国产老妇女一区| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲无线观看免费| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产综合懂色| 99热网站在线观看| 亚洲不卡免费看| 村上凉子中文字幕在线| 精品无人区乱码1区二区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 欧美zozozo另类| 尾随美女入室| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 一级爰片在线观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| www日本黄色视频网| 少妇人妻精品综合一区二区| 身体一侧抽搐| 久久久色成人| 日本黄大片高清| 好男人视频免费观看在线| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 欧美激情久久久久久爽电影| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日韩一区二区视频免费看| 99久久中文字幕三级久久日本| 中文字幕免费在线视频6| 村上凉子中文字幕在线| 久久精品久久久久久久性| 国产高清有码在线观看视频| 日本熟妇午夜| 日本av手机在线免费观看| 国产亚洲精品av在线| 国产一区二区在线av高清观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 少妇丰满av| 最近的中文字幕免费完整| 我的老师免费观看完整版| 一级毛片我不卡| 色综合色国产| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产免费男女视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 一个人看的www免费观看视频| 国产黄色小视频在线观看| 欧美日本视频| 一级二级三级毛片免费看| a级一级毛片免费在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 婷婷色av中文字幕| 日韩国内少妇激情av| 亚洲在线自拍视频| 身体一侧抽搐| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品久久久久久久电影| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 最近最新中文字幕免费大全7| 成人性生交大片免费视频hd| 国产成人一区二区在线| 日本wwww免费看| 国产高清有码在线观看视频| 国产色爽女视频免费观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产三级在线视频| 午夜免费激情av| 久久久久久久久久久免费av| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产毛片a区久久久久| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美+日韩+精品| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产淫语在线视频| 色综合站精品国产| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲内射少妇av| 日韩视频在线欧美| 亚洲欧洲日产国产| a级一级毛片免费在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 天堂网av新在线| 亚洲18禁久久av| 国产成人精品一,二区| 国产一区亚洲一区在线观看| 联通29元200g的流量卡| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 男女国产视频网站| av在线亚洲专区| 国产69精品久久久久777片| 只有这里有精品99| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲自拍偷在线| 欧美3d第一页| 男女下面进入的视频免费午夜| 18禁动态无遮挡网站| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产一级毛片在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| a级毛色黄片| 午夜福利在线在线| 女人被狂操c到高潮| 国产一区二区三区av在线| 免费看日本二区| 哪个播放器可以免费观看大片| 欧美成人精品欧美一级黄| 婷婷色综合大香蕉| 国产乱人偷精品视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产乱人偷精品视频| av免费在线看不卡| 国产探花在线观看一区二区| 变态另类丝袜制服| 中文字幕av在线有码专区| 嫩草影院精品99| 麻豆成人av视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 色综合色国产| 最近手机中文字幕大全| 中文天堂在线官网| 国产视频内射| 最新中文字幕久久久久| 国产 一区 欧美 日韩| 五月玫瑰六月丁香| 中文字幕av在线有码专区| 久久久精品94久久精品| 联通29元200g的流量卡| 久久亚洲精品不卡| 免费在线观看成人毛片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费看光身美女| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美又色又爽又黄视频| 午夜福利在线观看吧| 一个人看视频在线观看www免费| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产综合懂色| 国产免费一级a男人的天堂| 国模一区二区三区四区视频| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av成人精品一二三区| 老司机福利观看| 国产极品天堂在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 精品久久久久久久久久久久久| 午夜a级毛片| 老司机福利观看| 婷婷色综合大香蕉| 一级黄片播放器| 国产乱人视频| 国产高清有码在线观看视频| 久久久久久久久久成人| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲av福利一区| 一区二区三区免费毛片| 国产精品野战在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 日本熟妇午夜| 免费无遮挡裸体视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产一区有黄有色的免费视频 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 色噜噜av男人的天堂激情| 午夜精品在线福利| 全区人妻精品视频| 男女视频在线观看网站免费| 麻豆一二三区av精品| 国产精品,欧美在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 婷婷色综合大香蕉| a级毛色黄片| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲欧美清纯卡通| 国产黄片美女视频| 舔av片在线| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品一区二区三区四区久久| videos熟女内射| 亚洲欧洲国产日韩| 成人亚洲精品av一区二区| 久久国产乱子免费精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产av在哪里看| 少妇人妻精品综合一区二区| 日韩欧美 国产精品| 国产亚洲av嫩草精品影院| 在线观看66精品国产| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产精品乱码一区二三区的特点| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产精品三级大全| 精品国内亚洲2022精品成人| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| www.色视频.com| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 黄片wwwwww| 极品教师在线视频| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 中文资源天堂在线| 国产精品久久视频播放| 久久久亚洲精品成人影院| 91精品国产九色| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 18禁在线无遮挡免费观看视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产单亲对白刺激| 黑人高潮一二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 美女内射精品一级片tv| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 免费黄网站久久成人精品| 99在线人妻在线中文字幕| 国产午夜精品论理片| 最后的刺客免费高清国语| 男人舔奶头视频| 亚洲人成网站在线播| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产成人一区二区在线| 日本一二三区视频观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品久久久久久久久久久久久| 一级毛片电影观看 | 日韩一区二区视频免费看| 淫秽高清视频在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 免费黄色在线免费观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 99热精品在线国产| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美精品一区二区大全| 特大巨黑吊av在线直播| 少妇的逼好多水| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精华一区二区三区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产精品精品国产色婷婷| 夫妻性生交免费视频一级片| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 在线观看一区二区三区| 欧美潮喷喷水| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 九色成人免费人妻av| 国产精品国产高清国产av| 简卡轻食公司| 国产一区二区在线观看日韩| av专区在线播放| 亚洲国产精品成人综合色| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲av电影不卡..在线观看| 色哟哟·www| 亚洲经典国产精华液单| 99热6这里只有精品| 美女国产视频在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久久精品94久久精品| 国产老妇女一区| 日本黄色片子视频| 亚洲av福利一区| www.av在线官网国产| 乱系列少妇在线播放| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 18+在线观看网站| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲av成人精品一区久久| 国产黄色小视频在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 久久久久久久久久久丰满| 我要看日韩黄色一级片| 国产午夜福利久久久久久| 特大巨黑吊av在线直播| 成年女人永久免费观看视频| 免费av不卡在线播放| 青春草国产在线视频| 黑人高潮一二区| 黄色一级大片看看| 51国产日韩欧美| 免费av毛片视频| 亚洲无线观看免费| 1024手机看黄色片| 成人国产麻豆网| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 精品久久久久久久久亚洲| 国产在线男女| 插阴视频在线观看视频| 免费观看a级毛片全部| 成人欧美大片| 亚洲国产最新在线播放| 精品人妻视频免费看| 久久这里有精品视频免费| 午夜老司机福利剧场| 国产一区二区三区av在线| 国产淫语在线视频| 国模一区二区三区四区视频| 精品人妻视频免费看| 国产激情偷乱视频一区二区| 美女内射精品一级片tv| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲三级黄色毛片| 久久午夜福利片| 少妇人妻一区二区三区视频| 免费人成在线观看视频色| 午夜福利在线观看吧| 久久国产乱子免费精品| 午夜视频国产福利| 禁无遮挡网站| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 在线观看av片永久免费下载| videos熟女内射| av视频在线观看入口| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 日韩制服骚丝袜av| 内射极品少妇av片p|