基于信號(hào)通路角度綜述中醫(yī)藥治療痛風(fēng)性腎病相關(guān)研究進(jìn)展

王宏媛 劉湘玲 劉洋 李彩云 張遠(yuǎn)輝 （天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院/國(guó)家中醫(yī)針灸臨床醫(yī)學(xué)研究中心 天津 300381）

痛風(fēng)性腎?。╣outy nephropathy，GN），又稱高尿酸血癥腎?。╤yperuricemic nephropathy，HN），是由于體內(nèi)嘌呤代謝障礙，使血尿酸水平長(zhǎng)期處于過飽和狀態(tài)，過多的尿酸鹽結(jié)晶沉積于腎臟所導(dǎo)致的慢性腎臟病變［1］。痛風(fēng)性腎病發(fā)生的病理機(jī)制可能與炎癥反應(yīng)發(fā)生、內(nèi)皮功能障礙、纖維化、血管平滑肌細(xì)胞的增殖、腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活以及腎小球動(dòng)脈硬化等過程相關(guān)［2-3］。臨床癥狀常表現(xiàn)為由于尿濃縮功能下降導(dǎo)致夜尿增多，晚期因腎小球?yàn)V過功能下降出現(xiàn)腎功能不全的表現(xiàn)，如高血壓、水腫、貧血等。研究表明，中醫(yī)藥治療痛風(fēng)性腎病可改善臨床癥狀，達(dá)到降尿酸、改善腎功能、減少蛋白尿等療效，聯(lián)合應(yīng)用可減少西藥用量，提高有效率，減輕西藥毒副作用，具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)［4-5］。本文基于信號(hào)通路角度綜述近年來(lái)中醫(yī)藥治療GN 的相關(guān)研究進(jìn)展，總結(jié)相關(guān)作用機(jī)制，以期為GN 的中西醫(yī)治療提供參考，為后續(xù)科研工作提供思路。

1 NLRP3 炎癥小體信號(hào)通路

NOD 樣受體熱蛋白3（NLRP3）炎癥小體是一種胞質(zhì)多蛋白復(fù)合物，由NLRP3、細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（ASC）和天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶（Caspase-1）前體組成［6］，可與多條信號(hào)通路相互作用［7］。在HN 中，NLRP3 炎癥小體可被尿酸鹽單鈉結(jié)晶激活，活化的NLRP3 炎癥小體刺激IL-1β、IL-18 等炎性因子的分泌，促使腎血管壁炎癥細(xì)胞聚集、平滑肌細(xì)胞增殖以及血管舒張，導(dǎo)致腎小球與腎小管間質(zhì)損傷以及腎纖維化的發(fā)生［8-9］。研究表明，中藥黃芩的主要活性成分黃芩苷能通過參與富含半胱氨酸蛋白61 調(diào)節(jié)NLRP3 炎癥小體的過程來(lái)保護(hù)腎功能，并劑量依賴性地減輕HN 小鼠模型的腎損傷［10］。中草藥提取物車前子多糖［11］、牡丹花總黃酮［12］、龍膽苦苷［13］以及中藥復(fù)方五苓散［14］、四物湯［15］、驅(qū)風(fēng)止痛散［16］和中成藥復(fù)方珍珠調(diào)脂膠囊［17］、威草膠囊［18］等均被證實(shí)能夠抑制NLRP3 炎癥小體的活化，下調(diào)IL-1β、IL-18 等下游炎性因子表達(dá)、成熟及釋放，延緩炎癥反應(yīng)進(jìn)程，改善GN 腎臟組織的炎癥性損傷，保護(hù)腎功能。

2 NF-κB 相關(guān)信號(hào)通路

2.1 NF-κB 信號(hào)通路

核轉(zhuǎn)錄因子kappaB（NF-κB）是存在于多種細(xì)胞中的重要轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，通常以p50-p65 異二聚體的形式與其抑制性蛋白結(jié)合，并以非活化狀態(tài)貯存于細(xì)胞質(zhì)中［19］。TLR4 是一種跨膜蛋白，屬于模式識(shí)別受體toll 樣受體家族（TLRs）的成員，當(dāng)受到來(lái)自細(xì)胞內(nèi)、外的有效刺激時(shí)，活化的TLRs與髓樣分化因子88（MyD88）結(jié)合，激活I(lǐng)κB 激酶使其磷酸化，NF-κB 由此迅速?gòu)囊种茽顟B(tài)轉(zhuǎn)化為活化狀態(tài)，從而參與包括免疫、炎癥、細(xì)胞增殖與凋亡等在內(nèi)諸多基因轉(zhuǎn)錄與表達(dá)過程的調(diào)節(jié)［20-22］。研究表明，尿酸晶體可通過激活NF-κB 信號(hào)通路而引發(fā)腎臟炎癥［23-24］。

中藥鐵皮石斛［25］、梔子主要活性成分京尼平苷的衍生物［26］以及中藥復(fù)方五苓散［14］等均被證實(shí)可通過調(diào)節(jié)TLR4/NF-κB 信號(hào)通路的表達(dá)，降低HN大鼠的IL-6、IL-8 和TNF-α 等炎性細(xì)胞因子水平，有效減少腎臟中的尿酸鹽積累，減輕炎癥，保護(hù)腎臟。甜葉菊提取物［27］、鵝掌楸提取物［28］被證實(shí)可通過抑制NF-κB 信號(hào)通路的激活，下調(diào)炎癥因子的釋放，緩解HN 進(jìn)展。此外，牡丹花總黃酮對(duì)GN 大鼠的腎臟保護(hù)與抗炎作用，也與抑制NF-κB 信號(hào)通路的活化相關(guān)［12］。雞矢藤提取物被證明可通過介導(dǎo)GN 大鼠模型NF-κB 信號(hào)通路的活化來(lái)影響腎臟ABCG2 蛋白的表達(dá)，調(diào)節(jié)其尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、表型轉(zhuǎn)化蛋白、腎損傷分子的表達(dá)情況，緩解尿酸所致的腎小管上皮細(xì)胞損傷，從而減輕腎損害［29］。

2.2 ROS/NF-κB 信號(hào)通路

活性氧（ROS）是機(jī)體氧化應(yīng)激的產(chǎn)物，在細(xì)胞增殖及分化、免疫、炎癥細(xì)胞活化等多種生物過程中起著重要作用，可參與多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)及活性因子的調(diào)節(jié)，研究表明，ROS/NF-κB信號(hào)通路在腎臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用［30-31］。金文敏等［32］研究認(rèn)為，中藥復(fù)方右歸飲可抑制GN 大鼠的ROS/NF-κB 信號(hào)通路，降低24 h 尿蛋白量，下調(diào)相關(guān)炎性因子水平，升高腎組織SOD 活性，保護(hù)腎臟。

2.3 PI3K/AKT/NF-κB 信號(hào)通路

此外，PI3K/AKT 信號(hào)通路是調(diào)節(jié)炎癥的重要途徑，已被證實(shí)可參與NF-κB 信號(hào)通路的調(diào)節(jié)［33］。中成藥復(fù)方珍珠調(diào)脂膠囊可調(diào)節(jié)PI3K/AKT/NF-κB信號(hào)通路，抑制AKT 和p65 磷酸化，逆轉(zhuǎn)IKBα的下調(diào)，通過抑制腎臟中尿酸累積、炎癥和纖維化來(lái)改善HN［17］。

3 Nrf2 信號(hào)通路

核因子E2 相關(guān)因子2（Nrf2）是一種轉(zhuǎn)錄因子，參與包括線粒體呼吸、細(xì)胞自噬、能量代謝、mRNA翻譯等在內(nèi)的多種細(xì)胞生物過程，是細(xì)胞異生和氧化應(yīng)激反應(yīng)的主要協(xié)調(diào)因子之一，具有復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，在炎癥、免疫、細(xì)胞增殖分化等過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用［34-35］。研究表明，通過調(diào)節(jié)Nrf2 信號(hào)通路可改善腎纖維化，緩解腎缺血性再灌注損傷，在腎臟疾病的發(fā)生、發(fā)展與治療中具有重要意義［36-37］。甜葉菊提取物可通過調(diào)節(jié)Nrf2 信號(hào)通路，改善尿酸相關(guān)的腎臟炎癥及腎臟纖維化，減少炎癥因子的浸潤(rùn)和腎臟中尿酸積累，保護(hù)腎臟，緩解GN 的進(jìn)展［27］。

4 TGF-β1/Smad3 信號(hào)通路

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）是腎臟炎癥和纖維化過程中的重要細(xì)胞因子，在大量疾病模型的研究中，TGF-β 的亞型TGF-β1及其下游信號(hào)通路的抑制可緩解腎纖維化，而TGF-β1的過表達(dá)則可誘導(dǎo)腎纖維化［38］。Smad 信號(hào)通路是TGF-β的關(guān)鍵下游信號(hào)通路，包含多種亞型，其中Smad3是腎纖維化和炎癥的關(guān)鍵介質(zhì)［39］。同時(shí)，TGFβ/Smads 與其他信號(hào)通路之間具有復(fù)雜的相互作用，如p38/MAPK、NF-κB 信號(hào)通路等，在疾病條件下，多條通路共同作用，從而對(duì)腎臟的炎癥和纖維化起到積極或消極的調(diào)節(jié)作用［40］。

Liu 等［41］研究表明，中藥復(fù)方滋腎清熱通絡(luò)方可通過調(diào)控GN 大鼠的TGF-β1/Smad3 信號(hào)通路，改善腎脂肪酸氧化，緩解腎臟纖維化。此外，土茯苓提取物可顯著抑制TGF-β1和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）的表達(dá)，改善高尿酸血癥大鼠的腎臟纖維化，并下調(diào)相關(guān)炎性因子，抑制腎臟氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)［42］。車前草提取液則被證實(shí)可通過調(diào)節(jié)TGF-β1/p38MAPK/NF-κB 信號(hào)通路，抑制TGF-β1、TNF-α、IL-1 等炎癥因子的釋放和表達(dá)，改善GN 大鼠腎臟炎癥因子浸潤(rùn)、腎纖維化等，緩解腎組織損傷［43］。

5 JAK2/STAT3 信號(hào)通路

Janus 激酶家族（JAK）和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活劑（STATs）共同構(gòu)成了調(diào)節(jié)細(xì)胞因子表達(dá)的主要信號(hào)通路之一，即JAK/STAT 信號(hào)通路，可調(diào)節(jié)基因表達(dá)與細(xì)胞的活化、增殖及分化。研究表明，JAK/STAT 信號(hào)通路的激活在炎癥浸潤(rùn)、細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）積累和腎小管間質(zhì)纖維化的發(fā)展中起重要作用，其中兩者亞型構(gòu)成的JAK2/STAT3 信號(hào)通路尤為重要，可以抑制腎纖維化并保護(hù)腎功能［44-45］。

小檗堿是黃連、黃柏等中藥的重要活性成分，實(shí)驗(yàn)表明，小檗堿可調(diào)節(jié)尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)，抑制JAK2/STAT3 信號(hào)通路的激活，下調(diào)IL-1β、IL-6和TNF-α 等炎性因子水平，發(fā)揮抗高尿酸血癥和腎臟保護(hù)作用［46］。甜葉菊提取物［27］、鵝掌楸提取物［28］也可通過調(diào)節(jié)JAK2/STAT3 信號(hào)通路的活化，發(fā)揮抗腎臟炎癥以及纖維化的作用，緩解GN 進(jìn)展。

6 JNK 信號(hào)通路

c-Jun 氨基末端激酶（JNKs）家族是絲裂原活化蛋白激酶（MAPKs）超家族的成員之一，參與調(diào)控細(xì)胞增殖與分化、細(xì)胞凋亡、應(yīng)激反應(yīng)等多種細(xì)胞生物過程，在神經(jīng)退行性疾病、腫瘤、慢性炎癥性疾病、糖尿病、缺血再灌注損傷等多種疾病和病理?yè)p傷的發(fā)生發(fā)展中起重要作用［47］。

中藥復(fù)方大黃附子湯可通過調(diào)控JNK信號(hào)通路，減少腎組織內(nèi)TGF-β1表達(dá)和腎小管上皮細(xì)胞凋亡，改善腎間質(zhì)纖維化，保護(hù)腎功能，延緩HN 的進(jìn)展［48］。此外，鵝掌楸提取物減輕炎性因子浸潤(rùn)、保護(hù)腎臟的作用也與抑制JNK 信號(hào)通路的活化相關(guān)［28］。

7 MMP-7/Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路

MMP 是一類依賴鋅的內(nèi)肽酶家族，研究表明，它們可通過靶向不同的底物蛋白來(lái)調(diào)節(jié)腎臟纖維化過程?；|(zhì)金屬蛋白酶-7（MMP-7）是MMP 家族的重要成員，在正常成人腎臟中幾乎不表達(dá)，但在急性腎損傷（AKI）和慢性腎?。–KD）中的表達(dá)則會(huì)上調(diào)［49］。Wnt 家族分泌信號(hào)蛋白在器官發(fā)生、組織穩(wěn)態(tài)和腫瘤形成過程中均起著重要作用，Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)已被證明在腎臟發(fā)育和疾病中發(fā)揮作用。MMP-7 是Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)的直接靶標(biāo)，兩者共同構(gòu)成MMP-7/Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路［50-51］。研究表明，黃芩素可通過作用于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）抑制高尿酸血癥誘導(dǎo)的腎纖維化，緩解腎臟氧化應(yīng)激，發(fā)揮腎臟保護(hù)作用［52］。

8 討論

中醫(yī)藥干預(yù)GN 的發(fā)生發(fā)展受多條信號(hào)通路作用影響，主要通過參與炎癥和腎臟纖維化等相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用，各信號(hào)通路之間既相互獨(dú)立，又彼此聯(lián)系，有著復(fù)雜的交互作用機(jī)制。研究表明，尿酸鹽結(jié)晶可通過激活NLRP3 炎癥小體間接加速NF-κB 活化，而活化的NF-κB 也可反過來(lái)參與NLRP3 的轉(zhuǎn)錄，從而形成惡性循環(huán)，加速腎損傷［6］。有文獻(xiàn)報(bào)道，TGF-β/Smad 信號(hào)通路可與NF-κB 協(xié)同作用，缺乏TGF-β1的大鼠表現(xiàn)出異常的NF-κB 激活，兩者之間有著復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制［53-54］。此外，NF-κB 可通過誘導(dǎo)合成相關(guān)效應(yīng)因子抑制JNK 信號(hào)通路，JAK/STAT、Nrf2 與NF-κB 信號(hào)通路之間也可通過一系列分子機(jī)制相互作用［55-56］。而TGF-β信號(hào)通路可誘導(dǎo)Wnt/β-連環(huán)蛋白超家族成員的表達(dá)，使Wnt/β-信號(hào)通路表達(dá)上調(diào)，影響器官纖維化過程［57］。

由此可見，中草藥、中草藥提取物、中藥復(fù)方、中成藥等在改善高尿酸性腎損害過程中，并非通過單一信號(hào)通路作用于相關(guān)靶點(diǎn)發(fā)揮作用，而是多信號(hào)通路協(xié)同、交互作用，具有龐大而復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，而目前的研究多停留在單一通路和靶點(diǎn)之間的作用，未進(jìn)一步闡明中藥組分發(fā)揮作用時(shí)，相關(guān)信號(hào)通路與靶點(diǎn)在體內(nèi)的協(xié)同、拮抗等交互作用機(jī)制，有待進(jìn)一步的探索與研究。此外，目前的研究尚存在其他局限性，如中醫(yī)藥治療GN 的相關(guān)信號(hào)通路探究多為動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，尚缺乏體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及高質(zhì)量的臨床試驗(yàn)驗(yàn)證；多數(shù)中藥及中藥組分的研究中，僅表明與相應(yīng)信號(hào)通路相關(guān)，而未落實(shí)到具體的靶點(diǎn)等。中醫(yī)藥治療GN 具有廣闊的發(fā)展前景，期望隨著科技的進(jìn)步以及研究的不斷完善，能夠彌補(bǔ)當(dāng)前不足，拓展新道路，為痛風(fēng)性腎病的預(yù)防與治療提供新的思路。