雜交構(gòu)樹葉對(duì)大午金鳳蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)的物理性狀和營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)的影響

魏攀鵬，閆靈敏，屈偉，王兆貴，蔣兵兵，李曉，王洋，呂文竹，曾煥青，李軍，王品勝，梁博*

(1. 河南省高新技術(shù)實(shí)業(yè)有限公司/河南省構(gòu)樹產(chǎn)業(yè)工程技術(shù)研究中心，河南 鄭州 450002；2. 河南省科學(xué)院，河南 鄭州 450002；3. 河南省納普生物技術(shù)有限公司，河南 鄭州 450002；4. 國(guó)家智慧農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心，北京 100862；5. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，北京 100081；6. 蘭考縣畜牧局，河南 開封 475300；)

現(xiàn)階段，我國(guó)畜牧行業(yè)中以傳統(tǒng)玉米-豆粕型飼料原料為主的蛋白質(zhì)飼料，其資源極為短缺，而我國(guó)規(guī)?；半u養(yǎng)殖生產(chǎn)中對(duì)飼料原料的需求量卻在日益增加，因此因地制宜推行糧改飼、開發(fā)利用新型蛋白質(zhì)飼草資源迫在眉睫。用太空搭載、雜交選育等手段培育出的“中科1號(hào)101”雜交構(gòu)樹(hybridBroussonetiapapyrifera)在野生構(gòu)樹分布廣、種子易傳播萌發(fā)、根系發(fā)達(dá)、生命力頑強(qiáng)、耐鹽堿貧瘠和干冷濕熱等優(yōu)點(diǎn)的基礎(chǔ)上，具有產(chǎn)量高、易推廣種植、材飼兼用、飼用價(jià)值優(yōu)的特點(diǎn)[1]，其粗蛋白(CP)、粗脂肪(CFA)、鈣(Ca)、磷(P)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)含量分別為17.78%～26.47%、1.58%～5.31%、2.23%～3.64%、0.30%～0.61%、25.48%～39.51%、17.07%～26.13%，將其富含7種畜禽必需氨基酸(EAA)、CP含量高達(dá)26%的全葉加工制成粉后可作為優(yōu)質(zhì)的畜禽飼料原料，且研究表明畜禽飼糧中添飼構(gòu)樹葉是大有裨益、切實(shí)可行的[2]。大午金鳳蛋雞是我國(guó)自主培育的具有生產(chǎn)性能高、適應(yīng)性強(qiáng)、綜合效益高等諸多優(yōu)點(diǎn)的高產(chǎn)紅羽粉殼蛋雞。因此，本研究擬通過1.5%～8%雜交構(gòu)樹葉等量替代產(chǎn)蛋初期蛋雞基礎(chǔ)飼糧中部分玉米豆粕的飼喂試驗(yàn)，闡明雜交構(gòu)樹葉對(duì)大午金鳳蛋雞產(chǎn)蛋初期雞蛋品質(zhì)的物理性狀和營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)的影響，以期為蛋雞飼喂雜交構(gòu)樹葉后能生產(chǎn)出易儲(chǔ)耐放、便于運(yùn)輸、營(yíng)養(yǎng)全面和放心有口感的雞蛋提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

雜交構(gòu)樹全葉：采自生長(zhǎng)于河南省科學(xué)院構(gòu)樹產(chǎn)業(yè)工程技術(shù)研究中心蘭考試驗(yàn)示范基地(以下簡(jiǎn)稱：省科學(xué)院構(gòu)樹基地)種植區(qū)1～2年生、株高長(zhǎng)至140 cm的夏季雜交構(gòu)樹中科1號(hào)101，經(jīng)葉片除塵、自然風(fēng)干、加工粉碎、過篩后，測(cè)得雜交構(gòu)樹全葉粉中含有9.98%水分、20.96% CP、3.14% CFA、8.71% 粗纖維(CFI)、14.61%粗灰分、41.92%無氮浸出物、2.56% Ca、0.31% P、2.45%谷氨酸(Glu)、1.91%天冬氨酸(Asp)、1.63%亮氨酸(Leu)、1.20%苯丙氨酸(Phe)、1.18%賴氨酸(Lys)、1.10%甘氨酸(Gly)、0.91%蘇氨酸(Thr)、0.83%酪氨酸(Tyr)、0.17%蛋氨酸(Met)。試驗(yàn)蛋雞：270只147日齡健康、精神狀態(tài)良好、產(chǎn)蛋率相近、體重1.49～1.50 kg、脛長(zhǎng)99.10～99.30 mm的大午金鳳商品代蛋雞?；A(chǔ)飼糧如表1所示。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ)) %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將試驗(yàn)蛋雞以單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的方法分成6個(gè)組(45只/組)：0(對(duì)照)組、1.5%組、2.5%組、3.5%組、4.5%組、8%組，3個(gè)重復(fù)/組，每個(gè)重復(fù)5籠，3只/籠。這6個(gè)組蛋雞分別以質(zhì)量占比0、1.5%、2.5%、3.5%、4.5%和8%雜交構(gòu)樹全葉粉替代基礎(chǔ)飼糧中部分玉米和豆粕進(jìn)行飼喂(見表1)。預(yù)試期7 d，正試期56 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在省科學(xué)院構(gòu)樹基地養(yǎng)殖區(qū)進(jìn)行，傳統(tǒng)三層全階梯式籠養(yǎng)(長(zhǎng)×寬×高=36.0 cm×38.5 cm×37.5 cm/籠)。各組除設(shè)置的飼糧不同外，光照、空間方位、均勻分布等其他因素均相同。舍內(nèi)采用自然通風(fēng)+機(jī)械縱向負(fù)壓通風(fēng)模式和人工光照+自然光照方式。舍內(nèi)溫度、濕度、光照、驅(qū)蟲、免疫、消毒程序和投料量均按照河北大午農(nóng)牧集團(tuán)《大午金鳳商品代標(biāo)準(zhǔn)和飼養(yǎng)管理手冊(cè)》執(zhí)行。采用自由采食和飲水，每天07：30、15：00各喂料1次(各試驗(yàn)組當(dāng)天飼糧現(xiàn)用現(xiàn)配)。舍內(nèi)產(chǎn)生的雞糞每天10：00用自動(dòng)刮糞機(jī)清理1次。雞群飼喂、健康有無異常、產(chǎn)蛋等相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù)由專人負(fù)責(zé)記錄。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及其方法

在正試期第56天收集當(dāng)天新鮮雞蛋樣品，以各組每個(gè)重復(fù)為單位采集10枚雞蛋并編號(hào)標(biāo)記，在雞蛋采集后24 h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室完成蛋品質(zhì)物理和營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)的測(cè)定。

1.4.1 蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)

蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)測(cè)定或計(jì)算方法：蛋重用電子天平(精度0.000 1 g)稱量；蛋形指數(shù)用蛋形指數(shù)測(cè)定儀(精度0.02 mm)測(cè)量雞蛋縱徑和最大橫徑長(zhǎng)度，以橫徑/縱徑×100%計(jì)算；將蛋清和蛋黃完全分離，收集蛋黃后用電子天平(ESJ200-4A，精度0.000 1 g)稱量蛋黃重量。蛋黃相對(duì)重=蛋黃重量(g)/蛋重(g)×100%；蛋黃顏色用多功能蛋品質(zhì)分析儀測(cè)定；用鑷子剝離蛋內(nèi)殼膜后，用電子天平稱量蛋殼重量；蛋殼相對(duì)重=蛋殼重量(g)/蛋重(g)×100%；鑷子剝離蛋內(nèi)殼膜后，用蛋殼厚度測(cè)量?jī)x分別測(cè)量蛋殼銳端、中部、鈍端的厚度，這3點(diǎn)的平均值為蛋殼厚度，精確到0.01 mm。

1.4.2 蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)

蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)均為全蛋(蛋清+蛋黃)中的營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)。總CP含量用石墨消解儀器SH220F、自動(dòng)凱氏定氮儀K9840(均產(chǎn)自山東海能科學(xué)儀器有限公司)測(cè)定，脂肪酸(FA)含量用脂肪測(cè)定儀SOX406(山東海能科學(xué)儀器有限公司)測(cè)定，維生素(Vit)含量、氨基酸(AA)含量用高效液相色譜儀Waters2695(杭州瑞析科技有限公司)測(cè)定，膽固醇(CHOL)含量用總膽固醇(TC)測(cè)定試劑盒(A111，南京建成生物工程研究所)測(cè)定，生命元素含量用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(Agilent Technologies 7900 ICP-MS，安捷倫科技公司)測(cè)定。蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)測(cè)定方法均嚴(yán)格按照測(cè)定儀器的使用說明書進(jìn)行操作。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)先用WPS Office XLS進(jìn)行初步匯總整理，再用IBM SPSS Statistics 23.0軟件進(jìn)行One-way ANOVA方差分析，方差齊性檢驗(yàn)合理，Duncan’s進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)，以P<0.01(差異極顯著)、P<0.05(差異顯著)作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，用“平均值”表示試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)的影響

由表2可知，各處理組與對(duì)照組相比，蛋重等蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)均無顯著性差異(P>0.05)。

表2 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)的影響

2.2 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)的影響

2.2.1 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中CP和FA指標(biāo)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，1.5%組雞蛋中總CP含量極顯著降低(P<0.01)，而4.5%和8%組則均極顯著提高(P<0.01)。雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中FA的影響含量見表4。

表3 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中CP的影響 %

表4 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中FA的影響 %

4.5%組雞蛋中丁酸(C4H8O2)和十三烷酸甘油三酯(C42H80O6)的含量均極顯著提高(P<0.01)；3.5%組雞蛋中肉蔻酸/肉豆蔻酸(C14H28O2)和反式油酸(C18H34O2)含量均最高、且極顯著提高(P<0.01)；3.5%、4.5%和8%組雞蛋中棕櫚油酸/棕櫚亞酸/肌膚軟脂酸(C16H30O2)含量呈劑量依賴性顯著提高(P<0.05)；2.5%、3.5%和8%組雞蛋中油酸甲酯(順-9-十八碳烯酸甲酯，C19H36O2)含量均極顯著降低(P<0.01)。各處理組雞蛋中十六烷酸/軟脂酸/棕櫚酸(C16H32O2)、十八烷酸/硬脂酸(C18H36O2)和γ-亞麻酸(C18H30O2)含量基本上呈顯著劑量依賴性下降，1.5%組最高，8%組最低；與對(duì)照組相比，1.5%組雞蛋中C16H32O2含量<對(duì)照組(P<0.01)，8%組雞蛋中C18H36O2含量>對(duì)照組(P<0.01)，雞蛋中C18H30O2含量由大到小順序排列為：1.5%組>2.5%組、3.5%組>4.5%組>2.5%組>對(duì)照組、8%組，且差異極顯著(P<0.01)。

2.2.2 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中TC和AA指標(biāo)的影響

雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中TC的影響見表5。與對(duì)照組相比，3.5%組雞蛋中TC的含量極顯著提高了22.67 mg/100 g(P<0.01)。

表5 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中TC的影響

由表6可知：3.5%和4.5%組雞蛋中總氨基酸(TAA)含量分別極顯著提高了0.55%和0.36%(P<0.01)；3.5%、4.5%和8%組雞蛋中Asp和Glu含量呈劑量依賴性極顯著提高(P<0.01)；各處理組雞蛋中絲氨酸(Ser)含量極顯著降低了0.18%～0.24%(P<0.01)；8%組雞蛋中精氨酸(Arg)含量顯著降低(P<0.05)；3.5%組雞蛋中異亮氨酸(Ile)含量顯著升高(P<0.05)和1.5%組雞蛋中Leu含量顯著降低(P<0.05)；雞蛋中Lys含量在各處理組之間存在一定的差異顯著性(P<0.05)；各處理組雞蛋中Thr、Cys、組氨酸(His)和Tyr含量下降，Gly、脯氨酸(Pro)、丙氨酸(Ala)、纈氨酸(Val)、胱氨酸(Cys)、Met和Phe含量升高，但與對(duì)照組相比均差異不顯著(P>0.05)。

表6 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中AA的影響 %

2.2.3 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中Vit和礦物元素指標(biāo)的影響

由表7可知，3.5%、4.5%和8%組雞蛋中VD3含量均極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，且以4.5%組最為明顯。各處理組雞蛋中VA、VE、Na、K和Ca含量隨著雜交構(gòu)樹葉在蛋雞飼糧中替代量的增加先增加而后降低，且與對(duì)照組相比：2.5%組雞蛋中VA和VE含量分別極顯著提高了22.00和0.65 μg/100 g(P<0.01)；3.5%組雞蛋中K含量極顯著提高了28.70 mg/kg(P<0.01)；1.5%～8%組雞蛋中Na含量分別極顯著提高了146.27、160.30、174.74、188.14和157.57 mg/kg(P<0.01)；4.5%組雞蛋中Ca含量極顯著高于其他各組，且比對(duì)照組提高了4.90 mg/kg(P<0.01)。另外，與對(duì)照組相比：1.5%～8%組雞蛋中Fe含量分別極顯著提高了3.40、5.00、3.93、4.26和3.83 mg/kg(P<0.01)；3.5%和8%組雞蛋中Zn含量分別極顯著降低了1.10和0.57 mg/kg(P<0.01)。

表7 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中VIT和礦物元素指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)物理性狀指標(biāo)的影響

雞蛋蛋品質(zhì)的物理性狀指標(biāo)分析發(fā)現(xiàn)，蛋重與蛋黃質(zhì)量、蛋殼重量、蛋殼厚度存在一定的正相關(guān)性。蛋形指數(shù)是對(duì)雞蛋橢圓形狀規(guī)范程度的描述，僅影響種蛋的孵化率和破蛋率，并不影響雞蛋的營(yíng)養(yǎng)食用價(jià)值，而蛋黃重量和蛋黃相對(duì)重越大，雞蛋承載的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)水平就越高。本試驗(yàn)結(jié)果表明雜交構(gòu)樹葉對(duì)雞蛋的蛋形指數(shù)、蛋黃重量和蛋黃相對(duì)重均無顯著影響。蛋黃顏色的深淺與家禽機(jī)體不能自行合成、只能通過從飼糧中攝食積累的類胡蘿卜素的種類和數(shù)量有關(guān)[3]。飼糧中添加不同比例的雜交構(gòu)樹葉能不同程度的加深蛋黃顏色，表明雜交構(gòu)樹葉含有一定量的類胡蘿卜素。蛋殼質(zhì)量的優(yōu)劣在種蛋抵抗外源病菌、昆蟲等侵襲，以及在蛋黃/清的保鮮程度、營(yíng)養(yǎng)成分是否丟失、儲(chǔ)存期限等方面發(fā)揮著重要的作用，運(yùn)送途中因蛋殼破損造成的雞蛋損失達(dá)7%，而蛋殼重量、蛋殼相對(duì)重和蛋殼厚度是評(píng)價(jià)蛋殼品質(zhì)的間接方法[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加雜交構(gòu)樹葉后對(duì)蛋殼重量、蛋殼相對(duì)重和蛋殼厚度(在0.20～0.50 mm正常的范圍)均無顯著影響，這可能是形成蛋殼過程中所需的鈣、磷等元素的含量不受外源飼糧成分的影響，而是由蛋雞機(jī)體先天性遺傳調(diào)控所致。

3.2 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)的影響

3.2.1 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中CP和FA指標(biāo)的影響

4.5%和8%組雞蛋中CP的含量均顯著高于對(duì)照組和其余各處理組，說明當(dāng)雜交構(gòu)樹葉替飼比≥4.5%時(shí)促進(jìn)了蛋雞機(jī)體內(nèi)形成雞蛋時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)的吸收、利用和沉積，推測(cè)其原因可能與替飼4.5%雜交構(gòu)樹葉時(shí)增加了蛋雞對(duì)飼糧的采食適口性有關(guān)。

C4H8O2作為一種短鏈FA，通過碳水化合物在蛋雞結(jié)腸中被微生物發(fā)酵而產(chǎn)生后富集于雞蛋，也可以被上皮細(xì)胞分解產(chǎn)生能量或作為FA合成的底物，其在畜禽機(jī)體的細(xì)胞免疫、抗氧化、腸道發(fā)育及防御保護(hù)、菌群穩(wěn)態(tài)等方面產(chǎn)生重要的作用[5]。本研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)雜交構(gòu)樹葉的替飼比為2.5%～4.5%時(shí)，雞蛋中C4H8O2的含量呈劑量依賴性顯著提高，而替飼比為8%時(shí)，其含量卻極顯著性下降且與對(duì)照組相比無差異性，這表明高添加替飼比的雜交構(gòu)樹葉對(duì)雞蛋中C4H8O2的沉積代謝機(jī)制具有阻抑作用。甘油三酯(TAG)是組成禽蛋總脂質(zhì)占比最高的營(yíng)養(yǎng)組分，在禽蛋食品的儲(chǔ)存和加工中起著重要的作用[6]。本試驗(yàn)中，雜交構(gòu)樹葉在蛋雞飼糧中替代量≥1.5%時(shí)，雞蛋中C42H80O6的含量呈顯著性先升后降的趨勢(shì)，表明適量的雜交構(gòu)樹葉可以促進(jìn)雞蛋形成過程中對(duì)C42H80O6的積累，其促進(jìn)機(jī)制與構(gòu)樹葉中黃酮的作用密不可分[7]。C14H28O2來源于熱帶草本植物肉豆蔻，其在動(dòng)物組織、畜禽產(chǎn)品總FA中的占比很少，本試驗(yàn)各組雞蛋中C14H28O2的含量不足0.6%也印證了這一點(diǎn)[8]，其也是新生嬰兒由母體宮內(nèi)被動(dòng)供給營(yíng)養(yǎng)到體外主動(dòng)哺乳營(yíng)養(yǎng)的嗅覺感官信號(hào)[9]，而作為卵生非哺乳類蛋雞所產(chǎn)雞蛋中C14H28O2從體內(nèi)的形成沉積到產(chǎn)出體外后即使含量少也依然能檢測(cè)到，推測(cè)C14H28O2在雞胚胎發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)供給中同樣也起著重要的信號(hào)傳導(dǎo)作用。

構(gòu)樹葉中含有亞油酸、反亞油酸和亞油酸乙酯[10]。本研究中發(fā)現(xiàn)當(dāng)飼糧中雜交構(gòu)樹葉替飼比≥1.5%時(shí)，雞蛋中C16H32O2的含量卻逐漸下降，因此認(rèn)為雞蛋中C16H32O2的含量受飼糧中亞油酸的種類影響，且雜交構(gòu)樹葉替飼比的增加間接造成了飼糧中亞油酸、反亞油酸和亞油酸乙酯含量的增加，進(jìn)而導(dǎo)致雞蛋中C16H32O2含量顯著性逐漸下降。C16H30O2是一種穩(wěn)定性較好的雙鍵單不飽和FA，在機(jī)體降糖代謝、抗炎等方面發(fā)揮著重要作用，其在構(gòu)樹葉片內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜FA中的含量為44.69%[11]，其在飼喂發(fā)酵構(gòu)樹的育肥羔羊肉中的含量無顯著性[12]，本研究中其在雞蛋中含量的高低與雜交構(gòu)樹葉替飼比是否≥3.5%有顯著性關(guān)系，而這是否與雜交構(gòu)樹葉的飼喂動(dòng)物和方法有關(guān)尚有待于進(jìn)一步研究。C18H36O2是在雞胚發(fā)育中被吸收利用率最高的飽和FA[13]，各試驗(yàn)組雞蛋中的C18H36O2含量隨著飼糧中雜交構(gòu)樹葉替飼比的增加而下降，但當(dāng)替飼比≥1.5%時(shí)均極顯著高于對(duì)照組，這可能與雜交構(gòu)樹葉中C18H36O2的含量對(duì)蛋雞體內(nèi)脂質(zhì)代謝的負(fù)反饋調(diào)節(jié)有關(guān)[14]。C19H36O2是一種與植物油風(fēng)味成分類似的不飽和FA[15]，其在雞蛋中的含量與蛋雞品種有關(guān)[16]，而本研究發(fā)現(xiàn)與飼糧中雜交構(gòu)樹葉添加量也有關(guān)。雞蛋中C19H36O2含量隨雜交構(gòu)樹葉過量替飼而顯著降低，推測(cè)由雜交構(gòu)樹葉中某種成分過量攝入時(shí)抑制了蛋雞輸卵管膨大部中腺體分泌C19H36O2所致。C18H34O2是一種常添加于蛋黃派等煎炸、市售包裝食品增加酥脆感、延長(zhǎng)保質(zhì)期的反式脂肪酸，過量攝入會(huì)增加心血管疾病概率、造成肥胖、肝功能異常、女性不育、嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育受阻[17]。當(dāng)雜交構(gòu)樹葉在蛋雞飼糧中替飼比≥3.5%時(shí)，C18H34O2在雞蛋中的含量比對(duì)照組極顯著地提高了1.66%～2.40%，可能是飼糧中3.5%雜交構(gòu)樹葉刺激了蛋雞的采食量，進(jìn)而飼糧中C18H34O2在蛋雞體內(nèi)大量富集，蛋雞為避免其對(duì)自身機(jī)體危害又將過多的C18H34O2富集于雞蛋所致[18]。C18H30O2廣泛分布于夜來香、山芝麻、?？频榷喾N植物中，其在脊椎動(dòng)物體內(nèi)是由亞油酸代謝產(chǎn)生的一種全順式為6，9，12-十八碳三烯酸的多不飽和必需FA，在機(jī)體心血管、免疫、生殖和內(nèi)分泌系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的生理作用，因其對(duì)老人及嬰幼兒具有營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)食療功效被稱為“21世紀(jì)功能性食品的主角”[19]。動(dòng)物體內(nèi)不能合成亞油酸，本研究1.5%～4.5%組(尤其是1.5%組)雞蛋中C18H30O2含量極顯著提高，也提示食用1.5%～4.5%(尤其是1.5%)雜交構(gòu)樹葉替代比的雞蛋在一定程度上或許可滿足人體對(duì)C18H30O2的需要；雞蛋中C18H30O2在各處理組中的變化規(guī)律與C18H36O2一致，這說明C18H30O2和C18H36O2極有可能在雞蛋脂肪酸的沉積代謝中具有協(xié)同作用。

3.2.2 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中CHOL和AA指標(biāo)的影響

本研究替飼雜交構(gòu)樹葉1.5%組雞蛋中CHOL含量最低，這可能與其抑制了蛋雞卵母細(xì)胞溶菌酶和受體在脂質(zhì)代謝中的作用有關(guān)[20]；另外，飼喂雜交構(gòu)樹葉各組雞蛋、蛋殼的均重在正常范圍，雞蛋中TC的含量與雞蛋中CHOL的總含量相符，此結(jié)果理論上能滿足人體日飲食所需TC的最佳攝食需要量(≤300 mg)的要求[21]。

本研究檢測(cè)了替飼雜交構(gòu)樹葉后各組雞蛋中的TAA和17種AA。雞蛋中TAA含量的高低是對(duì)雞蛋中富含近20種AA總含量的一種反映[22]。由表4可知，只有當(dāng)雜交構(gòu)樹葉在蛋雞飼糧中替代量達(dá)到3.5%～4.5%時(shí)才能顯著性提高雞蛋中TAA含量，AA含量豐富的雜交構(gòu)樹葉過量替飼(8%組)能極顯著性降低雞蛋中TAA含量，說明蛋雞對(duì)組成雜交構(gòu)樹葉中蛋白質(zhì)基本單位的各種AA的總含量在雞蛋中的沉積是有閾值限制的。對(duì)試驗(yàn)各組雞蛋中17種AA的含量檢測(cè)后不難發(fā)現(xiàn)，各組雞蛋中Asp、Glu、Leu含量位居前三且均>1%，這與構(gòu)樹葉中AA含量最多的也是Asp、Glu、Leu不謀而合，而這3種AA分別在治療肝臟和膽汁分泌障礙、促進(jìn)紅細(xì)胞生成和改善腦細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)及活躍思維、促進(jìn)腸道生長(zhǎng)發(fā)育和功能改善及保障胎兒正常發(fā)育等方面起著極為重要的作用[23]，因此替飼比為3.5%～8%雜交構(gòu)樹葉不僅在雞蛋中產(chǎn)生了較為明顯、逐漸趨于平穩(wěn)值的Asp、Glu和Leu沉積，而且食用此替飼比例組蛋雞所產(chǎn)的雞蛋也將會(huì)有益于人體生命健康。Ser常以天然形式L-Ser和D-Ser兩種類型存在于體內(nèi)分別參與核苷酸、蛋白質(zhì)、FA、糖異生等和突觸傳遞、突觸可塑性等各種生命活動(dòng)密切相關(guān)的多種代謝、生理功能調(diào)節(jié)[24]。本研究各處理組雞蛋中Ser含量均顯著性低于對(duì)照組，且各處理組之間無顯著性差異，說明1.5%～8%替飼比雜交構(gòu)樹葉能降低雞蛋中Ser沉積量，且雞蛋中Ser含量?jī)H與飼糧中是否含有構(gòu)樹組分直接關(guān)聯(lián)，而與飼糧中構(gòu)樹組分添飼量無關(guān)。林炎麗[23]研究發(fā)現(xiàn)調(diào)制方式、切碎方式和刈割高度等因素對(duì)構(gòu)樹中Ser含量無顯著差異，這說明Ser是構(gòu)樹及雞蛋中相對(duì)穩(wěn)定的非必需AA。Arg是家禽體內(nèi)重要的一種α-型功能性必需AA，參與尿素、肌酸、蛋白質(zhì)和多胺的合成，并具有腸道屏障、抗炎癥、抗氧化、機(jī)體免疫、提高畜禽生長(zhǎng)性能等諸多生理性功能調(diào)節(jié)作用[25-26]。我們發(fā)現(xiàn)過量替飼雜交構(gòu)樹葉后雞蛋中Arg含量才顯著下降，可能與蛋雞體內(nèi)過量攝入雜交構(gòu)樹葉后在腸道吸收代謝過程中Arg與雜交構(gòu)樹葉中含有1.18% Lys的拮抗作用有關(guān)[26]。動(dòng)物半必需AA除Ser和Arg外，還有Gly、Cys、Tyr。本研究發(fā)現(xiàn)雞蛋中Gly、Cys和Tyr含量與雜交構(gòu)樹葉的替飼量無顯著性關(guān)系，這可能與實(shí)驗(yàn)設(shè)置雜交構(gòu)樹葉的替飼比例有關(guān)，當(dāng)替飼比>8%時(shí)是否會(huì)產(chǎn)生顯著性影響有待進(jìn)一步研究。

Thr是Gly合成尿酸的前體，是家禽生長(zhǎng)所必需的且繼Met、Lys之后的第三個(gè)限制性AA[25]；Pro又稱為吡咯烷，除了在雞的生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋中的蛋白質(zhì)合成外，還具有生理和調(diào)節(jié)作用，但在雞體內(nèi)不能充分合成，只能通過飼料獲得[27]。Ala是家禽體內(nèi)一種不可缺少的非必需AA，是家禽體內(nèi)由谷氨酰胺、Glu、Asp或支鏈AA等功能性AA在腸道代謝過程產(chǎn)生的含氮物質(zhì)；Val作為家禽體內(nèi)三大必需支鏈AA之一，也是肉雞玉米-豆粕型飼糧的第四限制性AA，其結(jié)構(gòu)與支鏈AA類似，是占居蛋白質(zhì)核心位置且最疏水的中性AA；Met又稱甲硫氨酸，既是飼喂玉米-豆粕型飼糧蛋雞生長(zhǎng)發(fā)育所必需的的第一限制性AA，也是穩(wěn)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、參與蛋白質(zhì)表面序列獨(dú)立識(shí)別及其合成和DNA甲基化的含硫必需AA；Phe是蛋雞腎臟和肝臟中經(jīng)羥化酶催化作用氧化成Tyr的前體物質(zhì)，其在雞蛋中的來源可由蛋雞攝食和Phe的羥基化獲得。His又稱氨基咪唾基丙酸，在家禽體內(nèi)是一種必需AA、作為肌肽合成極為重要的限制因子具有很強(qiáng)的抗氧化作用。雖然Thr、Pro、Ala、Val、Met、Phe和His在家禽體內(nèi)AA或蛋白質(zhì)代謝中各自存在著一定的關(guān)聯(lián)、起著重要的作用，但是這7種AA在本試驗(yàn)各組雞蛋中的含量并無顯著差異性，說明雞蛋中這7種AA含量的差異與玉米豆粕型飼糧中雜交構(gòu)樹葉的替飼量無關(guān)。

Ile化學(xué)結(jié)構(gòu)式與Leu相同，但其理化性質(zhì)完全區(qū)別于Leu，又稱異白氨酸，它是家禽體內(nèi)由甲基側(cè)鏈形成的支鏈AA中唯一的生糖兼生酮必需和限制性AA，也是家禽體內(nèi)谷氨酰胺合成的底物，具有調(diào)節(jié)AA、糖和脂代謝，促進(jìn)機(jī)體所需蛋白質(zhì)、胰島素和生長(zhǎng)激素等合成或分泌，抑制蛋白質(zhì)分解，為機(jī)體供能等作用[28]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，蛋雞飼糧中部分玉米豆粕用適量(3.5%)的雜交構(gòu)樹葉替代后可顯著提高雞蛋中Ile含量，過量(8%)替代后雞蛋中Ile含量幾乎無任何變化。推測(cè)雞蛋中Ile含量與玉米豆粕型蛋雞飼糧中含有0.64%～0.81% Ile雜交構(gòu)樹葉的替飼量存在供需反饋關(guān)系[29]。被稱為“生長(zhǎng)性AA”的Lys作為蛋雞體內(nèi)由酪蛋白水解產(chǎn)生的一種生酮氨基羧酸，也是蛋雞自身不能合成，在普遍缺乏Lys的玉米-豆粕型蛋雞飼糧中添飼Lys可彌補(bǔ)蛋雞體內(nèi)Lys需求[30]。本研究發(fā)現(xiàn)替飼不同比例雜交構(gòu)樹葉后各組蛋雞飼糧中Lys含量均為0.88%，高于前人報(bào)道的18～32周齡產(chǎn)蛋雞對(duì)Lys的需求量(0.82%)[31]，但是各組雞蛋中Lys含量與對(duì)照組相比并未產(chǎn)生顯著差異性影響，說明雞蛋中Lys含量與雜交構(gòu)樹葉替飼玉米豆粕的量無關(guān)，而與飼糧中Lys含量有關(guān)。

3.2.3 雜交構(gòu)樹葉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋初期蛋中VIT和礦物元素指標(biāo)的影響

VD3主要通過食物攝入和皮膚皮脂腺中的7-脫氫膽甾醇(7-C27H44O)由陽(yáng)光照射后轉(zhuǎn)化而得[32]，因此各試驗(yàn)組雞蛋中VA、VD3和VE含量與各組蛋雞攝入飼糧中VA、VD3和VE含量有關(guān)。與對(duì)照組相比，在各處理組中只有2.5%組雞蛋中VA、VD3和VE含量極顯著性提高、且達(dá)到峰值，這足以說明當(dāng)雜交構(gòu)樹葉替飼玉米豆粕的為2.5%時(shí)蛋雞能從飼糧中獲得VA、VD3和VE的最大攝入量。

本研究在測(cè)定了試驗(yàn)各組雞蛋中人體所需的常量元素Na、K、Ca和必需的微量元素Fe、Zn、Se這6種礦物元素后，發(fā)現(xiàn)各處理組雞蛋中Na含量均極顯著性高于對(duì)照組，當(dāng)雜交構(gòu)樹葉替飼比≤4.5%時(shí)呈劑量依賴性遞增，而當(dāng)>4.5%時(shí)卻又下降，這可能是試驗(yàn)用的雜交構(gòu)樹葉積累了所在蘭考種植生長(zhǎng)鹽堿地中的Na，然后被蛋雞攝食、代謝，最終限量性富集于雞蛋中。另外，各處理組雞蛋中K含量與雜交構(gòu)樹葉的替飼量基本上呈先升后降的趨勢(shì)，3.5%組雞蛋中K含量位于鐘形曲線頂點(diǎn)，且過低(1.5%)或過高(8%)替飼組雞蛋中K含量均低于對(duì)照組，說明飼糧組分(替飼部分玉米豆粕的雜交構(gòu)樹葉)對(duì)蛋雞體內(nèi)K的代謝起著關(guān)鍵作用。有研究表明蛋雞對(duì)K的需要通過攝食常規(guī)飼糧即可滿足[33]，因此蛋雞很可能是在攝入含有相應(yīng)比例雜交構(gòu)樹葉飼糧中的K后，先存儲(chǔ)于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液、肌肉和血球等中，再間接代謝沉積于雞蛋中的，由此推測(cè)含1.5%雜交構(gòu)樹葉的飼糧中K過低最終造成沉積于雞蛋中K含量過低，含8%雜交構(gòu)樹葉飼糧中K過高最終造成了沉積于雞蛋中K含量雖略低于對(duì)照組但相比于3.5%和4.5%組卻顯著下降。從雞蛋中K元素營(yíng)養(yǎng)富集效應(yīng)考慮，建議以3.5%雜交構(gòu)樹葉替代飼糧中玉米豆粕效果最佳。本試驗(yàn)各組基礎(chǔ)飼糧中除雜交構(gòu)樹葉添飼比不同外，Ca含量幾乎一致，而本研究發(fā)現(xiàn)雞蛋中Ca含量隨著雜交構(gòu)樹葉替代飼糧中部分玉米豆粕的比例的增加而增加，比例過高時(shí)(8%)則隨之顯著性下降，顯然此結(jié)果由雜交構(gòu)樹葉中含有2.56% Ca隨著雜交構(gòu)樹葉替飼比例的增加造成了飼糧中Ca含量的增加，最終通過蛋雞攝入代謝致使雞蛋中Ca含量增加；而過量添飼時(shí)蛋雞可能又通過體內(nèi)Ca代謝作用將攝入過多的Ca沉積于蛋殼中增加了蛋殼重量，這也導(dǎo)致了本研究中蛋殼重量相似的變化規(guī)律。當(dāng)然，當(dāng)超過量(8%)攝入雜交構(gòu)樹葉時(shí)蛋雞又間接地將攝入雜交構(gòu)樹葉中含有的Ca暫時(shí)沉積于骨骼或通過糞便排出體外，并對(duì)雞蛋中Ca富集造成抑制[34-35]。

眾所周知，雞蛋中最易被人體吸收利用的Fe的含量在一定程度上也影響著人體攝食補(bǔ)Fe的量。本研究表明飼糧中部分玉米豆粕被雜交構(gòu)樹葉替飼后可將雞蛋全蛋中Fe含量提高3.4%～5%，這是否與雜交構(gòu)樹葉中含有的Fe被蛋雞間接攝食后代謝積累于雞蛋有關(guān)尚有待于進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)結(jié)果表明，替飼比為1.5%～8%雜交構(gòu)樹葉并未顯著提高雞蛋中Zn含量，因此蛋雞攝入雜交構(gòu)樹葉后并未對(duì)體內(nèi)蛋黃和蛋清中Zn的沉積產(chǎn)生顯著促進(jìn)作用。Se作為被科學(xué)家稱之為人體“抗癌之王”的微量元素，當(dāng)雞蛋中Se含量達(dá)到0.15～1.20 mg/kg時(shí)可稱之為“安全的富Se雞蛋”，且越接近于0.5 mg/kg更利于人們?nèi)粘Ｍㄟ^攝食雞蛋中Se達(dá)到抑制甲狀腺功能減退、提高生育能力、增強(qiáng)免疫力、減少病毒感染等功效。因此從各處理組的結(jié)果來看，雖然蛋雞飼糧中用雜交構(gòu)樹葉替飼部分玉米豆粕后并未對(duì)雞蛋中Se含量造成顯著性影響，但若經(jīng)常食用1.5%雜交構(gòu)樹葉飼喂蛋雞所產(chǎn)生的雞蛋更有助于人體健康。

4 結(jié)論

雜交構(gòu)樹葉作為可替代產(chǎn)蛋初期蛋雞飼糧中部分玉米、豆粕的綠色、天然、高蛋白植物添加劑，其不同替飼比對(duì)雞蛋品質(zhì)的物理性狀指標(biāo)并未產(chǎn)生顯著差異性影響。1.5%、2.5%、3.5%、4.5%、8%替代比分別對(duì)于提高雞蛋中FA、VIT、CHOL和AA、FA、總CP含量的效果最佳；替飼比為3.5%～4.5%綜合效果最佳，且最適宜在生產(chǎn)中應(yīng)用。若充分研究開發(fā)利用雜交構(gòu)樹葉這一豐富的高蛋白植物資源，其在替飼玉米豆粕方面的飼用價(jià)值和前景將更加廣闊。

致謝：感謝蘭考縣人民政府和蘭考縣畜牧局對(duì)河南省科學(xué)院構(gòu)樹基地蛋雞試驗(yàn)實(shí)施過程中的政策支持，感謝河南諾爾飼料有限公司對(duì)試驗(yàn)蛋雞飼用飼料的營(yíng)養(yǎng)配比和供應(yīng)，感謝河南省科學(xué)院副院長(zhǎng)高正龍和河南省高新技術(shù)實(shí)業(yè)有限公司總經(jīng)理范毅對(duì)文稿提出的寶貴意見。