一例鴿大腸桿菌病的診治措施

文│劉建兵（安徽省池州市貴池區(qū)動物疫病預防與控制中心）

1855年，Escherichia分離并描述了大腸桿菌（Escherichia coli E.coli），它構(gòu)成了所有溫血動物大腸中主要的需氧微生物菌群。鴿大腸桿菌病是由埃希大腸桿菌的某些致病菌所引起的禽病總稱，其中危害嚴重的有大腸桿菌性敗血癥、腸炎、臍帶炎、全眼球炎、氣囊炎、大腸桿菌性肉芽腫與關(guān)節(jié)炎等。大腸桿菌是人和動物包括禽類腸管的常在菌。其特征為敗血癥和劇烈腹瀉，嚴重時可脫水，可引起幼禽大量死亡與發(fā)育不良。一般在每克腸內(nèi)容中有70萬～100萬個大腸桿菌，通常不足以引起動物發(fā)病。只有在機體感染其他病原微生物或有應激因素存在，機體抵抗力下降時才有可能并發(fā)或誘發(fā)大腸桿菌病，觀賞鴿、信鴿亦然。近年來，隨著我國經(jīng)濟水平的提升，養(yǎng)鴿業(yè)向規(guī)?；?、高密度化養(yǎng)殖發(fā)展，大規(guī)模養(yǎng)殖逐年增加。鴿大腸桿菌病的發(fā)生率有上升趨勢，會造成較大的經(jīng)濟損失。

筆者研究鴿大腸桿菌病的診治措施，對養(yǎng)鴿過程中降低大腸桿菌疾病的傳播，挽回鴿養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟損失，促進安徽省池州市貴池區(qū)鴿業(yè)發(fā)展具有重要意義。

一、材料與方法

1.試驗材料。

（1）試驗樣本。無菌采集病死鴿子的肝、脾和腎，放于4℃進行保存。

（2）主要試劑。普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、細菌微量生化反應管、革蘭氏染色劑、藥敏紙片，頭孢曲松鈉、卡那霉素、恩諾沙星、諾氟沙星、強力霉素、阿米卡星、氨芐西林、左氟沙星、氧氟沙星、利福平藥敏試紙、去離子水。

（3）主要儀器設備。眼科剪、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、載玻片、接種環(huán)、吸水紙、顯微鏡、無菌鑷子。

2.方法。

（1）病情調(diào)查及發(fā)病情況。發(fā)病鴿子日齡、用藥情況、免疫情況、治療經(jīng)過、死亡率和發(fā)病率等。

（2）臨床癥狀及診斷。主要觀察排糞狀態(tài)、精神狀態(tài)、皮膚病變、采食量和飲水量等。

（3）病理觀察。主要觀察心臟、腎、關(guān)節(jié)、氣囊、氣管、脾等組織病理變化情況。

（4）細菌分離與鑒定。眼科剪使用酒精燈燒紅消毒后，等待1分鐘后，將肝的表面組織按長方形剪開，揭開表面組織，使用滅菌后的接種環(huán)蘸取剪開后里面的組織液，分別在普通瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基進行劃線培養(yǎng)，脾和腎的細菌分離方法參照以上方法。接種完成后做好標記，放到37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18小時。

18小時后培養(yǎng)基長出菌落。取載玻片，在其中間表面滴加1滴生理鹽水，使用接種環(huán)挑起單個菌落，在滴入的生理鹽水中攪拌均勻，使用酒精燈外焰進行固定，開始進行革蘭氏染色。在玻片中滴加2滴草酸結(jié)晶紫溶液染色1分鐘，使用水沖洗干凈，滴加2滴碘液覆蓋上面1分鐘，使用水沖洗干凈，用吸水紙將水分吸取干凈，滴加2滴95%的乙醇脫色20秒，使用水沖洗干凈，再使用吸水紙將水分吸取干凈，滴加2滴番紅染色液復染1分鐘，用水沖洗干凈，用吸水紙將水分吸取干，顯微鏡下觀察病原體形態(tài)特征。

（5）藥敏試驗。將上述單菌落進行純培養(yǎng)后使用十字劃線法將菌落接種于普通瓊脂培養(yǎng)基上，將藥敏片用無菌鑷子貼在普通瓊脂培養(yǎng)基的表面，要注意藥敏片之間的距離要相等。貼好后放到37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18小時，觀察結(jié)果，測量抑菌圈大小。判斷標準參照CLSI M100-S20（CLSI，2010）（極敏：抑菌圈大于20毫米；高敏：抑菌圈直徑為20～15毫米；中敏：抑菌圈直徑為10～15毫米；低敏：抑菌圈直徑小于10毫米）。

二、結(jié)果與分析

1.發(fā)病情況。池州市貴池區(qū)烏沙鎮(zhèn)某鴿場飼養(yǎng)鴿15000羽，采用離地面架空養(yǎng)殖。該場鴿群出現(xiàn)個別鴿炸毛，精神狀況差，嗉囊料少，排黃白色稀糞便，每天都有零星死亡，并在隨后的幾天內(nèi)鴿群的發(fā)病率增多，死亡率亦增加，死亡高峰時每天死亡數(shù)可達幾十只。在整個疫情期間，表現(xiàn)臨床癥狀的病鴿發(fā)病率達21%，死亡率為15.6%。

2.流行病學調(diào)查。

（1）病史的調(diào)查。本病以前每年均發(fā)生，發(fā)生時間多為2～6月。

（2）飼養(yǎng)環(huán)境的調(diào)查。該場鴿公棚內(nèi)墊料潮濕、結(jié)塊，通風不良，鴿群通棚混養(yǎng)，養(yǎng)殖羽數(shù)偏大，運動場亂、臟，飼養(yǎng)過程中糞便直接接觸鴿體。

（3）天氣情況。在安徽皖南地區(qū)，4月多為溫差大、濕度大，空氣流通性差等，這是促使該病發(fā)生的主要因素之一。

3.臨床癥狀與病變。公棚技術(shù)人員觀察病鴿臨床癥狀表現(xiàn)如下：鴿體干瘦，個別鴿炸毛，精神狀況差，嗉囊料少，排黃白色稀糞便。因菌株、數(shù)量、鴿的體質(zhì)、年齡及侵害部位的不同臨診表現(xiàn)有所不同。腸毒血癥或腸道外局部感染可引起氣囊炎、眼炎、腹腔炎等多種炎癥。少數(shù)呈敗血癥可引起鴿的心包炎，肝周炎。臨診見到以下幾種類型。

4.病理剖檢變化。對于該發(fā)病鴿群，筆者共剖檢4只病鴿和病死鴿，觀察其各器官的病理變化，并記錄如下。

病例1：鴿體消瘦，剖檢可見嗉囊內(nèi)有未消化食料，有特殊臭味，腸道充血、出血，十二指腸最嚴重，脾腫大、色深，有時腹腔積液。心包、肝周及氣囊覆蓋有淡黃色干絡樣物。腸系膜粘連，有黃色干擾物（見圖1）。

病例2：鴿體消瘦，剖檢可見胸、腹氣囔，囔壁增厚內(nèi)含黃白色干酪樣物。

病例3：鴿體消瘦，輸卵管增粗，管內(nèi)蓄積白色干酪樣滲出物，肝出血、發(fā)黃，心外膜出血，腿部肌肉出血，盲腸內(nèi)有出血點，頭顱出血，胃內(nèi)容物發(fā)綠。

病例4：鴿體消瘦，可見腎腫大、充血。心包膜混濁，心包積液有淡黃色液體，心肌松軟，肝呈銅綠色。有時可見患鴿突然死亡，肌肉豐滿，嗉囊內(nèi)充滿食物，腸道出血，肌胃角質(zhì)層呈墨綠色。其他臟器無明顯病變。病程稍長者，其他臟器可見纖維素樣滲出物附著。（見圖2）

◎圖2 腎腫大

5.細菌分離與鑒定結(jié)果。在LB瓊脂培養(yǎng)基上，菌落呈圓形，灰白色，中間隆起，菌落光滑比較濕潤，未見其他不同形狀的菌落。

經(jīng)鏡檢，發(fā)現(xiàn)其呈短桿菌，陰性（見圖3）。

◎圖3 細菌染色特征

根據(jù)臨床癥狀初步診斷為大腸桿菌疾病。經(jīng)實驗室剖檢診斷，病原革蘭氏染色顯示陽性，菌群顏色呈紅色。最終確診為大腸桿菌疾病，臨床表現(xiàn)有腸炎、臍帶炎、全眼球炎、氣囊炎、大腸桿菌性肉芽腫與關(guān)節(jié)炎，心包炎、肝周炎、腹膜炎等病變癥狀，部分病鴿有急性敗血癥出現(xiàn)。

6.藥物敏感試驗結(jié)果。恩諾沙星抑菌圈14毫米，多粘霉素抑菌圈12毫米，氯霉素抑菌圈11毫米，丁胺卡那抑菌圈10毫米。

◎圖4 藥物敏感試驗結(jié)果

三、治療

1.治療原則。該場治療鴿大腸桿菌病采用密度、清潔和科學調(diào)配糧食相結(jié)合的原則。另外要加強管理和做好消毒工作，提高鴿群免疫力，防止繼發(fā)感染。

2.病鴿隔離及對環(huán)境、用具等消毒。對病鴿和健康鴿進行分群飼養(yǎng)，同時改善鴿舍環(huán)境，合理通風透氣，保持適宜舍溫、濕度，對舍內(nèi)進行全面清掃，清除糞便及墊料，及時擴欄，降低飼養(yǎng)密度，對運動場表層進行翻新。對食槽、飲水器等用具清洗，并用1∶500“菌毒滅”（ 聚維銅碘溶液）消毒。

3.治療方案。

（1）大腸桿菌眾多的血清型和耐藥菌株的不斷出現(xiàn)為疾病診治帶來了一定的困難，要取得理想的效果在有條件的情況下應先做藥敏試驗。

（2）抗生素的最大特點是作用的非專一性，這種特點常常造成動物體內(nèi)微生物菌群失調(diào)，進而導致對其他疾病的易感性增高，所以在病鴿恢復期應注意微生態(tài)制劑和多種維生素的使用，幫助鴿體優(yōu)勢菌群的恢復和抗病能力的提高。

（3）復方磺胺間甲氧嘧啶鈉＋丁胺卡那霉素（氟六甲＋腸痢新）按說明量配比，全天飲水，連用4天，死亡減少。就目前而言，丁胺卡那霉素效果優(yōu)于其他眾多抗生素。在大腸桿菌流行或嚴重發(fā)病的鴿棚應用自家苗預防效果較為理想。

四、討論

1.診斷。本次診斷是基于流行病學調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病理變化及鑒別診斷等手段初步診斷其為疑似鴿大腸桿菌病。流行病學調(diào)查結(jié)果表明，該發(fā)病鴿群的鴿舍環(huán)境潮濕，通風換氣不良，養(yǎng)殖密度大；臨床表現(xiàn)為病鴿體干瘦，個別鴿炸毛，精神狀況差，嗉囊料少，排黃白色稀糞便，不愛活動，肛門周圍羽毛被糞便污染、黏連在一起；在病理變化上主要表現(xiàn)為兩側(cè)腸道漿膜、黏膜充血、出血、腫脹。上述特點與鴿大腸桿菌病的臨床表現(xiàn)基本一致，采用細菌分離鑒定與藥敏試驗確定本次診斷的病例為鴿大腸桿菌病。

2.病因。鴿大腸桿菌病的途徑是種鴿（父母鴿）帶菌，將病原體垂直傳給下一代雛鴿；種蛋被大腸桿菌所污染或在孵化期間大腸桿菌經(jīng)蛋孔侵入蛋的內(nèi)部；接觸傳染可通過鴿的相互接吻、集鴿，或經(jīng)污染的日糧、飲水、墊料、排泄物及塵埃（鴿舍灰塵每克含大腸桿菌10萬個或更多）等傳播。經(jīng)呼吸道、消化道、泄殖腔及皮膚創(chuàng)傷途徑侵入體內(nèi)。

筆者認為該場鴿公棚內(nèi)發(fā)生鴿大腸桿菌病有以下幾個因素。

（1）溫度與濕度。該次鴿群發(fā)生鴿大腸桿菌病正處梅雨季節(jié)，此期間本地長期降雨，氣溫逐漸提高，早晚溫差大，為鴿大腸桿菌病傳播誘發(fā)提供有利的條件。

（2）衛(wèi)生與消毒。由于飼養(yǎng)員對鴿大腸桿菌病的認識不夠，衛(wèi)生、消毒不夠重視，易對場地、飼料和飲水造成污染，空氣粉塵污染，從而容易導致鴿大腸桿菌病的暴發(fā)。

（3）光照通風。光照強度和通風方式也是促使該病發(fā)生的重要因素，鴿舍采光條件不合理，糞便潮濕清理不及時，通風不合理，鴿棚濕度大。

（4）養(yǎng)殖密度。由于通棚養(yǎng)殖，飼養(yǎng)密度過大，合理分欄，適宜的養(yǎng)殖密度可有利于鴿群保持生長運動狀態(tài)，減少個體之間差異過大，從整體上提高抗病能力。

（5）飼養(yǎng)方式。不同飼養(yǎng)方式導致感染鴿大腸桿菌病的機會有顯著差別。在應激因素方面，應激反應不僅有利于鴿大腸桿菌病的發(fā)病，而且還促進鴿大腸桿菌病的惡化。應激反應包括飼料改變、氣候變化和營養(yǎng)失調(diào)，鴿群受到人為驚嚇等。因此，保持適宜的環(huán)境，減少應激，也利于克服鴿大腸桿菌病的發(fā)生。

3.防治建議。

（1）加強飼養(yǎng)管理，消除應激因素。鴿大腸桿菌病多發(fā)于飼養(yǎng)管理不良、營養(yǎng)較差的鴿群；選用優(yōu)質(zhì)的配合飼料勿用發(fā)霉變質(zhì)的飼料，可使鴿群正常發(fā)育，具有較強的抗病能力；飲水器要每天清洗、太陽光照射。及時調(diào)整飼料配合方案，特別在鴿感染鴿大腸桿菌病期間應在飼料中添加維生素A和益生菌。管理人員要隨時注意消除應激因素，日常飲水應添加氨基酸、維生素，電解質(zhì)等抗應激藥物，尤其是在惡劣氣候條件下做好保溫工作，避免風寒和噪音應激因素誘使該病的發(fā)生。

（2）加強消毒，搞好環(huán)境衛(wèi)生。保持鴿棚清潔，搞好環(huán)境衛(wèi)生，保證飲水器、食槽、巢盆等清潔，加強生物安全措施。在飼養(yǎng)中要特別加強飼料、飲水的衛(wèi)生管理，盡可能地減少糞便對飼料、飲水的污染。經(jīng)常用熱水或熱堿水對各種料桶、飲水器、棲架進行清洗消毒，定期清理運動場下的糞便，換以干凈的混有熟石灰的黏土。此外也應對飼養(yǎng)員所用的器具和飼養(yǎng)服進行定期消毒，嚴格限制交叉使用，防治病原傳播。

（3）注意鴿棚干燥、通風，嚴防潮濕擁擠。鴿大腸桿菌病最易發(fā)生在2～6月，尤其是在高溫多雨的梅雨季節(jié)，鴿舍要保持干燥通風，避免鴿棚潮濕、適時通風換氣，降低鴿舍有害氣體，稀釋病原菌濃度，防止呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生。

（4）藥物預防及疫苗接種預防。用于預防大腸桿菌病的常用藥物有鹽酸環(huán)丙沙星、鹽酸小檗堿、黃芪多糖、復合維生素B等。另用滴眼液對病鴿的眼部進行滴眼治療。其方法是每支8毫升的“氯霉素滴眼液”（含20毫克氯霉素）內(nèi)加入“地塞米松磷酸鈉”（每支含5毫克）一支，混合后用七號注射針頭給病鴿滴入眼內(nèi)，每次每側(cè)病眼滴入兩滴，每天4次，連續(xù)用到病鴿眼部康復為止。在飼養(yǎng)工作中應提倡穿梭用藥、輪換用藥和聯(lián)合用藥等多種用藥方式，以減緩抗藥性的產(chǎn)生，但抗藥性的出現(xiàn)給防治該病帶來極大的挑戰(zhàn)。正因如此，采用疫苗接種是控制該病發(fā)生的重要方向。

五、總結(jié)

筆者對鴿死亡病例進行剖析，通過相關(guān)試驗和鑒定方法查明病因。此案例對鴿大腸桿菌病防控有一定的借鑒意義。飼養(yǎng)管理應控制密度、合理通風采光，規(guī)范飼養(yǎng)管理，科學合理地調(diào)配飼料，保持潔凈衛(wèi)生，對控制大腸桿菌病的感染和傳播有一定效果。定期接種疫苗，做好大腸桿菌病的預防工作。一旦發(fā)生鴿群異常，應立即請獸醫(yī)人員診療，及時控制疫情傳播擴散，降低病死率，預防繼發(fā)性感染，全面提高大腸桿菌病的治療效果。