TVCDS 聯(lián)合ki-67、AFU 及AFP 檢測在卵巢腫瘤性質(zhì)診斷中的應(yīng)用價(jià)值

蔣霞 侯莉 趙晶 李金燕 方敏★

卵巢癌早期無明顯特異性癥狀，因此臨床漏診及誤診率較高。及時(shí)對卵巢腫瘤性質(zhì)做出評估，對患者臨床診療有積極意義［1］。影像學(xué)檢查、血清標(biāo)志物檢測可為腫瘤早期診斷、治療方案選擇、預(yù)后評估提供參考依據(jù)。經(jīng)陰道彩色多普勒超聲（transvaginal color Doppler ultrasonography，TVCDS）有助于了解患者病灶部位血流情況并進(jìn)行量化分析，對卵巢腫瘤診斷有積極參考價(jià)值［2］。細(xì)胞核增殖抗原（Nucleus proliferation antigen，ki-67）、α-L-巖藻糖苷酶（Alpha-L-fucosidase，AFU）、甲胎蛋白（α-fetal protein，AFP）均是與腫瘤相關(guān)的因子。ki-67 是一種核蛋白，可反映腫瘤細(xì)胞增殖活性，以往研究指出，ki-67 與卵巢惡性腫瘤患者預(yù)后不良密切相關(guān)［3］。AFU、AFP 為肝癌標(biāo)志物，兩者聯(lián)合檢測可提高原發(fā)性肝癌診斷率［4］。本研究旨在分析TVCDS 聯(lián)合ki-67、AFU 及AFP 檢測在卵巢腫瘤良、惡性診斷中的應(yīng)用價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2020 年1 月至2023 年3 月德州市婦女兒童醫(yī)院收治的200 例卵巢腫瘤患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者及家屬均知曉本次研究；②經(jīng)B 超、MRI 等確診，且符合《婦產(chǎn)科學(xué)·第8 版》［5］中有關(guān)卵巢腫瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)，且病理檢查確診為卵巢良性或惡性腫瘤；③臨床資料完整；④均進(jìn)行TVCDS 檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并感染或傳染性疾病者；②凝血功能異常、嚴(yán)重心肺功能不全者；③合并生殖系統(tǒng)炎癥、其他生殖系統(tǒng)腫瘤等。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。

1.2 方法

1.2.1 TVCDS 檢查

所有患者在入院時(shí)均進(jìn)行TVCDS 檢查，檢查儀器為美國GE 公司的Voluson E8/E10 型彩色多普勒超聲儀，已婚者選擇陰道超聲探頭，頻率為5～9 MHz，未婚為腹部探頭，頻率為2～5 MHz。取膀胱截石位，經(jīng)陰道或腹部恥骨聯(lián)合部位放置探頭，檢查子宮附件，發(fā)現(xiàn)病灶后觀察其位置、大小、形態(tài)、邊界、包膜等情況，并觀察病灶內(nèi)部回聲、血流中心信號(hào)等。

惡性腫瘤評估標(biāo)準(zhǔn)［6］：超聲可見腫瘤內(nèi)部有豐富血流，搏動(dòng)指數(shù)＜0.1，阻力指數(shù)＜0.5；Alaczar 超聲評分≥6 分，同時(shí)符合上述標(biāo)準(zhǔn)判定為惡性腫瘤。

1.2.2 ki-67、AFU 及AFP 檢測

獲取患者空腹時(shí)靜脈血液5 mL，離心機(jī)離心（3 000 r/m，10 min，離心半徑10 cm）后獲取血清待檢，采用GC25 底物法檢測（邁瑞B(yǎng)S-800 全自動(dòng)生化分析儀及北京世紀(jì)沃德生物科技有限公司AFU試劑盒）AFU，使用化學(xué)發(fā)光法測定［羅氏Cobase602型電化學(xué)發(fā)光分析儀（瑞士）及配套羅氏診斷公司試劑盒］AFP。獲取患者病理組織標(biāo)本進(jìn)行ki-67檢測：采用10%甲醛固定標(biāo)本，常規(guī)處理后進(jìn)行免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)，選擇鼠抗人單克隆抗體（1∶50）。

ki-67、AFU 及AFP 陽性結(jié)果評估：細(xì)胞核中出現(xiàn)黃色沉淀記為ki-67 陽性表達(dá)細(xì)胞，ki-67 陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)≥30%，認(rèn)為是ki-67 陽性表達(dá)［7］；AFU＞40 U/L 為惡性［8］；AFP＞20 μg/L 判定為惡性［9］。診斷效能評估［10］：靈敏度=［真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）］×100%，特異度=［真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）］×100%，準(zhǔn)確度=［（真陽性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)］×100%。

1.3 觀察指標(biāo)

獲取患者病理檢查結(jié)果，對比良、惡性患者ki-67、AFU、AFP 以及TVCDS 血管分型、血流參數(shù)情況，并分析TVCDS、ki-67、AFU、AFP 單獨(dú)及聯(lián)合診斷對卵巢腫瘤良、惡性診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）描述，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，等級資料使用秩和檢驗(yàn)（Z）；一致性采用Kappa值，其中Kappa值≤0.20 為極低一致性，0.21～0.40 為一致性一般，0.41～0.60 為一致性中等，0.61～0.80 為高度一致性，0.81～1.00 為幾乎完全一致；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理檢查結(jié)果

經(jīng)病理檢查結(jié)果可知，200 例患者中惡性16例，其中漿液性囊腺癌10 例，卵巢子宮內(nèi)膜樣癌6 例；良性184 例，其中成熟型囊性畸胎瘤88 例，漿液性囊腺瘤43 例，黏液性囊腺瘤31 例，纖維瘤22 例。

2.2 良、惡性患者ki-67、AFU、AFP 比較

惡性組ki-67陽性率、AFU、AFP水平均明顯高于良性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1、圖1。

圖1 ki-67 免疫組化染色圖示（400×400）Fig. 1 Immunohistochemical staining diagram of Ki-67（400×400）

表1 良、惡性患者ki-67、AFU、AFP 比較［n（%），（）］Table 1 Comparison of ki-67，AFU and AFP between benign and malignant patients［n（%），（）］

表1 良、惡性患者ki-67、AFU、AFP 比較［n（%），（）］Table 1 Comparison of ki-67，AFU and AFP between benign and malignant patients［n（%），（）］

2.3 良、惡性患者TVCDS 血管分型情況比較

良、惡性患者TVCDS 血管分型情況比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），惡性組患者以3 型（68.75%）為主，良性組則以1型為主（65.76%）。見表2。

表2 良、惡性患者TVCDS 血管分型情況比較［n（%）］Table 2 Comparison of TVCDS vascular classification between benign and malignant patients［n（%）］

2.4 良、惡性患者TVCDS 血流參數(shù)情況比較

惡性組患者PSV、EDV 值均高于良性組，而RI值則明顯低于良性組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 良、惡性患者TVCDS 血流參數(shù)情況比較（）Table 3 Comparison of TVCDS blood flow parameters between benign and malignant patients（）

2.5 不同檢測對卵巢腫瘤良、惡性的鑒別診斷效果

聯(lián)合檢測與病理檢查結(jié)果幾乎完全一致（Kappa=0.851），TVCDS、AFP 一致性中等（Kappa=0.560，Kappa=0.480）、AFU、ki-67 一致性一般（Kappa=0.291，Kappa=0.358），且聯(lián)合檢測對卵巢腫瘤良、惡性診斷準(zhǔn)確度為97.50%、靈敏度為97.28%、特異度76.19%，高于TVCDS、ki-67、AFU、AFP 單獨(dú)檢測（P＜0.05）。見表4、5。

表4 TVCDS、ki-67、AFU、AFP 單獨(dú)及聯(lián)合診斷卵巢腫瘤性質(zhì)結(jié)果與病理結(jié)果的對照Table 4 Comparison between the results of TVCDS，ki-67，AFU and AFP alone and in combination for diagnosing ovarian tumor properties and pathological results

表5 TVCDS、ki-67、AFU、AFP 單獨(dú)及聯(lián)合診斷對卵巢腫瘤良、惡性的診斷效果Table 5 Diagnostic efficacy of TVCDS，ki-67，AFU and AFP alone and in combination for benign and malignant ovarian tumors

3 討論

據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，卵巢腫瘤發(fā)病占女性腫瘤的14%左右，且其早期癥狀并不明顯，多數(shù)患者在就診時(shí)多為晚期，預(yù)后差［］。早期明確診斷卵巢腫瘤并進(jìn)行針對性治療對患者尤為重要。

隨著分子診斷在臨床中的不斷發(fā)展，血清腫瘤標(biāo)志物也逐漸受到重視。本研究結(jié)果顯示，與良性組相比，惡性組患者Ki-67 陽性率及AFU、AFP 表達(dá)水平明顯升高。Ki-67 是細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白，其表達(dá)情況與細(xì)胞增殖狀態(tài)密切相關(guān)，研究顯示，Ki-67 陽性率越高，腫瘤的增殖情況越活躍，Ki-67 可作為預(yù)測腫瘤臨床行為、評估治療效果、預(yù)測預(yù)后的重要參數(shù)［12］。也有研究顯示，在卵巢癌患者中Ki-67 陽性率明顯升高，且與患者臨床分期密切相關(guān)，與本研究結(jié)果類似［13］。AFU 是一種溶酶體酸性水解酶，在細(xì)胞和體液中廣泛存在，可參與含巖藻糖基的蛋白、糖脂類生活性大分子的代謝，以往研究顯示，其與女性生殖器腫瘤發(fā)生、發(fā)展存在相關(guān)性。AFP 為最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物，常用于肝癌診斷中。研究顯示，卵巢癌與卵巢良性腫瘤患者中AFP 水平表達(dá)存在差異，其在卵巢癌中表達(dá)明顯升高，可作為臨床輔助診療手段［14］。

超聲檢查為臨床多種腫瘤診斷的重要方式，TVCDS則是婦科腫瘤檢查中常用的一種，具有操作方便、無創(chuàng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。臨床發(fā)現(xiàn)，卵巢良性病變新生血管多在周邊形成，惡性病變則從腫瘤中央開始，在超聲中表現(xiàn)為血流豐富、生長迅速等特點(diǎn)。在TVCDS檢查中，盆腔內(nèi)結(jié)構(gòu)處于超聲近場，獲得圖像清晰度高，利用彩色多普勒顯像技術(shù)可直觀地了解患者病灶部位血流差異，對良、惡性腫瘤鑒別有積極意義。本研究通過對比兩組患者血管分型及血流參數(shù)情況可知，惡性組患者惡性組患者以3型（68.75%）為主，良性組則以1 型為主（65.76%），惡性組PSV、EDV 值均高于良性組，而RI 值則明顯低于良性組，與上述研究結(jié)果相符。惡性腫瘤患者RI值降低，提示在癌變過程中隨著患者病情加重，癌細(xì)胞對營養(yǎng)的需求增大，癌細(xì)胞內(nèi)部的血流量也明顯增加。以往研究通過分析超聲檢查血流參數(shù)與卵巢癌惡性程度相關(guān)性，結(jié)果顯示，血流速度加快、血流量/血容量上升、局部血流阻力降低者其惡性程度越明顯，與本研究結(jié)果一致［15］。

為提高對腫瘤性質(zhì)鑒別準(zhǔn)確性，臨床常以多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測來彌補(bǔ)單項(xiàng)檢查不足，以此提高診斷準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示，TVCDS、ki-67、AFU、AFP 單獨(dú)檢測與病理檢查一致性不高，而聯(lián)合檢測與病理檢查結(jié)果幾乎一致，提示聯(lián)合檢測可提高對卵巢腫瘤性質(zhì)鑒別的診斷效能。從影像學(xué)檢查中可獲得患者病灶基本情況，結(jié)合血清學(xué)檢查查漏補(bǔ)缺，可為臨床提供更為準(zhǔn)確的參考信息。郝淑琴［16］等人研究也同樣證實(shí)超聲檢查聯(lián)合多種腫瘤標(biāo)志物對卵巢腫瘤性質(zhì)鑒別的可靠性。

綜上所述，TVCDS 聯(lián)合血清ki-67、AFU 及AFP 可提高卵巢腫瘤性質(zhì)鑒別的準(zhǔn)確度、靈敏度及特異度，降低漏診及誤診風(fēng)險(xiǎn)。