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    海參肽的抗氧化穩(wěn)定性及對(duì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用

    2023-12-05 08:09:32王倩倩馮鳳琴
    中國(guó)食品學(xué)報(bào) 2023年10期
    關(guān)鍵詞:海參清除率自由基

    王倩倩,杜 鵑,馮鳳琴*

    (1 浙江大學(xué)生物系統(tǒng)工程與食品科學(xué)學(xué)院 杭州310058 2 杭州康源食品科技有限公司 杭州 310003)

    一般情況下,體內(nèi)的自由基(細(xì)胞代謝的中間產(chǎn)物)是不斷產(chǎn)生的,以維持活性氧正常的代謝平衡[1-2]。然而,過(guò)多的自由基會(huì)攻擊細(xì)胞的不飽和脂肪酸和蛋白質(zhì),引起脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA 等大分子的氧化,從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。大量研究表明:癌癥、阿爾茨海默癥、2 型糖尿病和心血管疾病等慢性疾病都與體內(nèi)活性氧含量的增加有關(guān)[3-4]。因此,有必要尋求能夠維持體內(nèi)自由基代謝平衡的外源性抗氧化劑來(lái)改善人體生理機(jī)能,從而達(dá)到預(yù)防慢性疾病的目的。目前,通過(guò)蛋白水解從食物蛋白制備的生物活性肽包括谷物類[5]、蔬菜類[6]、蛋類[7]、堅(jiān)果類[8]、奶類[9]、魚類[10]等被證明具有顯著的抗氧化活性。與化學(xué)合成的抗氧化化合物相比,食物來(lái)源的抗氧化肽無(wú)不良副作用。另外,抗氧化肽不僅在體外和細(xì)胞模型中具有清除自由基和脂質(zhì)氧化抑制的活性,而且還可改善活性氧介導(dǎo)的包括小鼠和果蠅在內(nèi)的氧化應(yīng)激損傷[11-12]。

    海參(Holothurians),棘皮動(dòng)物門海參綱動(dòng)物,可能早在寒武紀(jì)時(shí)期就出現(xiàn)了。在世界范圍內(nèi)已知約有50 種海參可被食用,其中以海參、刺參和梅花參為主要屬。自古以來(lái),海參因具有抗氧化、抗癌、抗炎、抗凝血、抗疲勞和抗衰老等促進(jìn)健康的功效而用于醫(yī)藥行業(yè)[13-14]。海參體壁中含有豐富的蛋白質(zhì)(約80%~90%),是制作海參肽的良好來(lái)源,且已被證明具有良好的體外和體內(nèi)抗氧化活性[15-16]。目前關(guān)于海參肽的研究主要集中在制備工藝、分離純化及生物活性等方面,而有關(guān)加工、儲(chǔ)藏條件對(duì)其活性的影響研究較少[17-18]。本文通過(guò)研究不同水解度海參肽(SCP-L 和SCP-H)在不同環(huán)境因素(溫度、pH、食品配料、金屬離子、模擬胃腸液消化)條件下對(duì)海參肽抗氧化穩(wěn)定性的影響,評(píng)估其對(duì)H2O2誘導(dǎo)L929 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用,以期為海參肽的實(shí)際應(yīng)用提供一定的理論支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    不同水解度的海參肽(低水解度DH=27.73%,SCP-L;高水解度DH=33.57%,SCP-H)由杭州康源食品科技有限公司提供。

    小鼠成纖維細(xì)胞L929 購(gòu)于中科院上海細(xì)胞庫(kù),培養(yǎng)基為含有胎牛血清(10%)和雙抗(1%)的RPMI1640,培養(yǎng)條件為37 ℃,5%CO2。

    胎牛血清,浙江天杭生物科技股份有限公司;RPMI1640 培養(yǎng)基、雙抗、0.25%胰酶,上海源培生物科技股份有限公司;LDH、SOD、GSH-Px和MDA試劑盒,南京建成生物工程研究所。

    1.2 儀器與設(shè)備

    BSA224S 電子分析天平、PB-10 pH 計(jì),賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;HH-6 數(shù)顯恒溫水浴鍋,常州澳華儀器有限公司;Infinite M200 Pro 酶標(biāo)儀,瑞士帝肯集團(tuán)公司;超凈工作臺(tái),蘇州凈化設(shè)備有限公司;HC-3018R 高速冷凍離心機(jī),安徽中佳科學(xué)儀器有限公司;MCO-170AICUVDL-PC CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱,日本松下電器產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 體外抗氧化活性

    1)DPPH 自由基清除率[19]在離心管中依次加入200 μL 海參肽溶液(5,10,15,20,25,30 mg/mL)和400 μL DPPH 溶液(0.05 mmol/L),混勻后置于室溫下避光反應(yīng)0.5 h,于517 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光值。同時(shí)做樣品對(duì)照和空白對(duì)照,并通過(guò)公式(1)計(jì)算:

    2)羥自由基清除率[20]在離心管中依次加入200 μL 硫酸亞鐵溶液(9 mmol/L)、200 μL 水楊酸-乙醇溶液(9 mmol/L)、200 μL 海參肽溶液(5,10,15,20,25,30 mg/mL)和200 μL H2O2(0.03%),混勻后置于37 ℃水浴鍋中反應(yīng)0.5 h,于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光值。同時(shí)做樣品對(duì)照和空白對(duì)照,并通過(guò)公式(2)計(jì)算:

    3)ABTS 自由基清除率[21]0.5 mL ABTS 溶液(7 mmol/L)與0.5 mL K2S2O8(2.45 mmol/L)混合均勻,室溫避光保存16 h 后使用。然后用蒸餾水稀釋至734 nm 波長(zhǎng)處吸光度為0.7±0.02。取100 μL 的海參肽溶液(5,10,15,20,25,30 mg/mL)與100 μL 的ABTS 工作液混勻,避光反應(yīng)10 min,于734 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。同時(shí)做空白對(duì)照,并通過(guò)公式(3)計(jì)算:

    1.3.2 環(huán)境穩(wěn)定性

    1)溫度 將海參肽溶液(15 mg/mL)分別置于20,40,60,80,100 ℃的水浴鍋中水浴1 h,冷卻至室溫后,測(cè)定其·OH 清除率。

    2)pH 分別用鹽酸和氫氧化鈉將海參肽溶液(15 mg/mL)的pH 值調(diào)節(jié)至3,5,7,9,11,在室溫下放置1 h,測(cè)定其·OH 清除率。

    3)食品配料 在海參肽溶液(15 mg/mL)中分別添加5%的氯化鈉、葡萄糖、淀粉、蔗糖、乳糖,在室溫下放置1 h,測(cè)定其·OH 清除率。

    4)金屬離子 在海參肽溶液(15 mg/mL)中分別添 加500 μg/mL 的KCl,CaCl2,MgCl2,ZnCl2和CuCl2,在室溫下放置1 h,測(cè)定其·OH 清除率。

    5)胃腸道蛋白酶[22]胃消化階段:將海參肽按照1∶10(g/mL)的比例加入到胃蛋白酶液中,置于37 ℃水浴鍋中模擬胃消化1 h。滅酶后冷凍干燥以獲得模擬胃消化階段的海參肽。胃腸消化階段:將胃消化階段的海參肽滅酶后,用NaHCO3(0.9 mol/L)溶液將pH 值提高到5.3,并進(jìn)一步用氫氧化鈉(1 mol/L)將pH 值調(diào)節(jié)至6.8,然后同樣按照1∶10(g/mL)的比例加入到胰蛋白酶液中,并將混合物置于37 ℃中模擬腸消化2 h。消化完成后將混合液置于沸水浴中加熱10 min 以滅酶活,然后將其冷凍干燥以獲得模擬胃腸消化的海參肽。最后將獲得胃和胃腸消化階段的海參肽配制成質(zhì)量濃度為15 mg/mL 的溶液,分別測(cè)定其·OH清除率。

    1.3.3 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

    1.3.3.1 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞生長(zhǎng)的影響 參照王倩倩等[23]的方法培養(yǎng)L929 細(xì)胞,并計(jì)算細(xì)胞的存活率。其中海參肽的質(zhì)量濃度分別為0,0.2,0.4,0.8,1.6 mg/mL。

    1.3.3.2 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞損傷的保護(hù)作用 參照王倩倩等[23]的方法培養(yǎng)L929 細(xì)胞,構(gòu)建H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞氧化損傷模型,并計(jì)算細(xì)胞的存活率。其中海參肽的質(zhì)量濃度 分別為0,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/mL。

    1.3.3.3 抗氧化指標(biāo)測(cè)定 將細(xì)胞按照1×105個(gè)/孔的密度接種到6 孔板中,然后按照1.3.3.2 節(jié)描述的步驟處理后,收集細(xì)胞和培養(yǎng)液。分別測(cè)定上清液中LDH 活力和細(xì)胞內(nèi)SOD 活力、GSH-Px 活力和MDA 含量。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)采用SPSS 26.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,結(jié)果表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 抗氧化穩(wěn)定性

    2.1.1 體外抗氧化方法和海參肽濃度篩選 為了篩選出海參肽的體外抗氧化效果最優(yōu)的評(píng)價(jià)方法和最佳質(zhì)量濃度,比較了3 種體外化學(xué)評(píng)價(jià)方法,分析了不同質(zhì)量濃度的影響。由圖1 可知,當(dāng)質(zhì)量濃度在5~30 mg/mL 范圍內(nèi)時(shí),SCP-L 和SCP-H的上述3 種體外抗氧化能力均隨著質(zhì)量濃度的增加而增加。在3 種體外抗氧化評(píng)價(jià)方法中,SCPL 的半抑制質(zhì)量濃度分別為56.48,19.58,11.58 mg/mL,SCP-H 的半抑制質(zhì)量濃度分別為46.97,18.40,9.89 mg/mL,得出海參肽對(duì)羥自由基清除能力效果最好,故選擇該試驗(yàn)方法作為后續(xù)評(píng)價(jià)不同環(huán)境因素對(duì)海參肽氧化穩(wěn)定性影響的評(píng)價(jià)指標(biāo)。就該方法而言,海參肽質(zhì)量濃度在5~15 mg/mL 范圍內(nèi)時(shí),羥自由基清除率有較大變化,在15 mg/mL 時(shí),分別達(dá)到了67.83%和74.05%,此后隨著質(zhì)量濃度的增加,清除率逐漸增加,而增加不顯著。因此,選擇海參肽質(zhì)量濃度15 mg/mL 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

    圖1 不同水解度海參肽的體外抗氧化活性Fig.1 The antioxidant activity in vitro of SCP-L and SCP-H

    值得注意的是,在上述3 種體外抗氧化評(píng)價(jià)方法中,當(dāng)兩種海參肽的質(zhì)量濃度相同時(shí),SCP-H的體外抗氧化活性均高于SCP-L。分子質(zhì)量較小的生物活性肽可以更有效地與自由基相互作用,更容易通過(guò)腸道屏障,從而在體內(nèi)發(fā)揮抗氧化活性[24]。根據(jù)前期研究結(jié)果,SCP-H 分子質(zhì)量在2 000 u 以下的肽段含量為98.39%(〈1 000 u 的部分占90.12%),而SCP-L 的為87.89%(〈1 000 u的部分占68.13%)。另外,生物活性肽中的一些氨基酸如極性氨基酸(半胱氨酸、組氨酸和酪氨酸)和疏水性氨基酸(蛋氨酸和色氨酸)可以作為氫供體或受體以形成不同強(qiáng)度的氫鍵,發(fā)揮一定的抗氧化活性[25]。酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸和組氨酸等氨基酸可作為氫供體;天冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸能螯合金屬離子;丙氨酸、纈氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸和亮氨酸等疏水氨基酸可能有助于改善肽在脂質(zhì)相的溶解度,促進(jìn)肽與脂質(zhì)自由基的相互作用,從而提高抗氧化活性[26]。研究發(fā)現(xiàn)在與抗氧化相關(guān)的氨基酸組成上,兩者是沒(méi)有任何區(qū)別的(SCP-L 的極性氨基酸和疏水性氨基酸為60.42%,SCP-H 的極性氨基酸和疏水性氨基酸為60.46%)。因此,SCP-H 的體外抗氧化效果優(yōu)于SCP-L,可能是由于其分子質(zhì)量不同導(dǎo)致的。

    2.1.2 不同環(huán)境條件對(duì)海參肽抗氧化穩(wěn)定性的影響 由圖2a 可知,在20~100 ℃范圍內(nèi),加熱1 h后SCP-L 和SCP-H 的羥自由基清除率幾乎沒(méi)有變化,這與姚秩俊等[27]的研究結(jié)果相反。姚秩俊等[27]研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)溫度超過(guò)60 ℃時(shí),菜籽肽的DPPH 自由基清除率急劇下降,溫度為100 ℃時(shí),其亞鐵離子螯合能力僅有30%左右(室溫時(shí)為85%左右)。然而,吳興美等[28]的研究結(jié)果與本研究類似,他們發(fā)現(xiàn)蠶絲素蛋白肽在90 ℃下放置2 h后,仍然具有較高的抗氧化活性(保留原來(lái)的90%~93%)。綜合以上研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)海參肽具有良好的熱穩(wěn)定性。

    圖2 溫度、pH、食品配料、金屬離子和胃腸消化對(duì)海參肽抗氧化穩(wěn)定性的影響Fig.2 Effect of temperature,pH,food ingredients,and metal ions on the antioxidant stability of SCP-L and SCP-H

    由圖2b 可知,與正常條件下的海參肽溶液的清除率相比,在pH 值為5 時(shí),SCP-L 和SCP-H 的羥自由基清除率也無(wú)明顯變化,pH 值為3 和7時(shí),自由基清除率SCP-L 分別下降了34.67%,18.69%,SCP-H 分別下降了17.65%,6.86%。在堿性條件下(pH 值為9 和12),SCP-L 和SCP-H 的羥自由基清除能力均完全喪失。出現(xiàn)這種情況可能有兩方面的原因,一方面可能是由于強(qiáng)堿環(huán)境使得肽分子結(jié)構(gòu)發(fā)生消旋作用,肽鏈構(gòu)象發(fā)生了改變,從而影響了其生物活性的表達(dá)[29],另外一方面可能是因?yàn)樵趬A性環(huán)境下作為肽清除自由基的氫供體上的氫被消耗,從而導(dǎo)致其抗氧化活性降低[30]。綜合以上研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)海參肽適用于制造偏酸性的產(chǎn)品,應(yīng)盡量避免在堿性強(qiáng)的環(huán)境下加工使用。

    由圖2c 可知,分別在SCP-L 和SCP-H 中添加5%的不同食品配料,發(fā)現(xiàn)葡萄糖、淀粉、乳糖和蔗糖對(duì)其羥自由基清除能力均無(wú)明顯變化,而添加氯化鈉后,其羥自由基清除率顯著降低了13.02%和12.12%,這與劉丹[31]的研究結(jié)果相一致。綜合以上研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)海參肽應(yīng)盡量避免在含有氯化鈉的環(huán)境下。

    由圖2d 可知,分別在SCP-L 和SCP-H 中添加500 μg/mL 的 金屬離子發(fā) 現(xiàn),K+、Ca2+、Mg2+對(duì)SCP-L 和SCP-H 的羥自由基清除率無(wú)明顯影響。當(dāng)添加Cu2+后,羥自由基清除率分別下降了7.32%和11.64%。同樣地,Zn2+的加入也使得羥自由基清除率下降了28.12%和29.86%,表明海參肽對(duì)Cu2+和Zn2+較敏感,這兩種金屬離子可能與海參肽之間存在特殊的化學(xué)力作用,進(jìn)而使得其抗氧化活性降低,這與裴云成等[32]的研究結(jié)果一致。綜合以上研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)海參肽應(yīng)盡量避免在含有Cu2+和Zn2+的環(huán)境。

    由圖2e 可知,經(jīng)模擬胃液消化后的SCP-L和SCP-H 對(duì)羥自由基清除活性分別降低了4.58%和5.340%,而經(jīng)過(guò)模擬胃腸液消化后的清除率分別顯著增加了41.88%和31.80%。這可能是由于海參肽在經(jīng)過(guò)胃蛋白的作用后,使得原來(lái)具有抗氧化活性的部分肽段水解成了單個(gè)的氨基酸殘基,進(jìn)而導(dǎo)致其抗氧化能力喪失。但經(jīng)過(guò)胰蛋白的作用后又使得具有抗氧化活性的基團(tuán)被釋放出來(lái)。因此,海參肽在模擬胃腸液消化條件下的抗氧化穩(wěn)定性大于模擬胃液,可適用于制成口服的功能性食品中。

    2.2 海參肽對(duì)H2O2 誘導(dǎo)L929 細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用

    2.2.1 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞的毒性作用及其對(duì)H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用 基于體外的化學(xué)評(píng)價(jià)方法得知SCP-L 和SCP-H 均具有較強(qiáng)的清除自由基能力。而氧化應(yīng)激是由于過(guò)量的自由基積累而導(dǎo)致的一種應(yīng)激反應(yīng),它會(huì)使得健康的細(xì)胞發(fā)生損傷和凋亡。因此,接下來(lái)測(cè)定了細(xì)胞水平上的抗氧化活性。為了確定海參肽作用于L929細(xì)胞的安全濃度范圍,將不同濃度的SCP-L 和SCP-H 分別加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,培養(yǎng)24 h 來(lái)檢測(cè)其對(duì)L929 細(xì)胞存活率的影響。由圖3a 可知,與正常組相比,無(wú)論是SCP-L 還是SCP-H,在0.2~0.8 mg/mL 時(shí)能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖,SCP-L 細(xì)胞存活率分別達(dá)到了102.31%,116.57%,103.25%,SCP-H 細(xì)胞存活率達(dá)到了113.47%,128.60%,111.12%。當(dāng)質(zhì)量濃度為1.6 mg/mL 時(shí),抑制了細(xì)胞的增殖,存活率分別為90.88%和96.84%,表明海參肽質(zhì)量濃度為1.6 mg/mL 時(shí),顯示出對(duì)L929細(xì)胞的毒性作用。結(jié)果表明,0.2~0.8 mg/mL 的SCP-L 和SCP-H 對(duì)L929 細(xì)胞均無(wú)毒性,且SCPH 的效果優(yōu)于SCP-L。因此,選取0.2~0.8 mg/mL的兩種海參肽進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

    圖3 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞存活率的影響Fig.3 Effect of SCP-L and SCP-H on the viability of L929 cells

    由圖3b 可知,與模型組相比,在0.2~0.8 mg/mL 質(zhì)量濃度范圍內(nèi)的SCP-L 均能顯著提高細(xì)胞存活率;與模型組相比,0.6 mg/mL 時(shí)的兩種海參肽組的細(xì)胞存活率提高了52.10%(P 〈 0.001);SCP-H 與SCP-L 對(duì)細(xì)胞的氧化損傷的保護(hù)作用的結(jié)果相似,然而當(dāng)質(zhì)量濃度為0.4 mg/mL 時(shí),對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用最顯著(顯著提高了75.32%)。綜合以上結(jié)果表明SCP-L 和SCP-H 質(zhì)量濃度為0.2~0.6 mg/mL 時(shí),對(duì)L929 細(xì)胞的氧化損傷的保護(hù)作用均較好,且SCP-H 的效果優(yōu)于SCP-L,因此選取0.2,0.4,0.6 mg/mL 的兩種海參肽進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

    2.2.2 海參肽對(duì)L929 細(xì)胞損傷的抗氧化能力的影響 LDH 廣泛存在于各個(gè)組織的胞漿內(nèi),當(dāng)細(xì)胞受損時(shí)便會(huì)由細(xì)胞內(nèi)滲透至細(xì)胞外[33]。由圖4a可知,與模型組相比,SCP-L 的質(zhì)量濃度為0.2~0.6 mg/mL 時(shí),LDH 活力分別減少了6.19%,17.87%,20.67%(P 〈 0.05);同樣地,SCP-H 的LDH 活力相應(yīng)減少了13.22%,22.61%,25.91%(P〈0.01)。當(dāng)機(jī)體處于臭氧、氮氧化物、高氧等環(huán)境時(shí),可能會(huì)促使生物膜的多不飽和脂肪酸脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化,進(jìn)而促進(jìn)MDA 等脂質(zhì)過(guò)氧化物的產(chǎn)生[34]。由圖4b 可知,0.2,0.4,0.6 mg/mL 的SCP-L使得細(xì)胞內(nèi)的MDA 含量降低0.24%,16.37%(P〈0.05)和26.39%(P 〈 0.01),同時(shí),SCP-H 使得MDA 含量分別降低了21.65%(P 〈 0.01),41.14%和44.36%(P〈0.001)。

    圖4 海參肽對(duì)H2O2 誘導(dǎo)L929 細(xì)胞抗氧化活性的影響Fig.4 Effect of SCP-L and SCP-H on the antioxidant activity in L929 cells induced by H2O2

    SOD 作為各種器官組織中自由基的“頭號(hào)殺手”,能夠?qū)⒊踝杂苫D(zhuǎn)化為H2O2。GSH-Px 能夠使有毒的過(guò)氧化物還原為無(wú)毒的羥基化合物,同時(shí)促進(jìn)H2O2分解成H2O 和O2,保護(hù)細(xì)胞形態(tài)[35]。由圖4c 可知,與模型組相比,SCP-L 質(zhì)量濃度為0.2,0.4,0.6 mg/mL 時(shí),SOD 活力分別提高了30.62%,73.86%,89.63%(P〈0.01);同時(shí)SCP-H使得SOD 活力分別顯著提高了65.02%,122.58%(P〈0.01)和130.17%(P〈0.001)。類似地,SCP-L的GSH-Px 活力相應(yīng)提高了10.37%,35.37%(P〈0.05)和26.22%,SCP-H 的GSH-Px 活力也相應(yīng)提高了23.76%,41.94%,40.14%(P〈0.05)。

    綜合以上試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)SCP-L 和SCP-H 均可以通過(guò)降低細(xì)胞膜的通透性和細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化程度,以及提高細(xì)胞的抗氧化酶活力,在一定程度上減弱H2O2誘導(dǎo)的L929 細(xì)胞氧化損傷,且SCP-H 的效果優(yōu)于SCP-L。

    3 結(jié)論

    抗氧化穩(wěn)定性研究表明SCP-L 和SCP-H 均具有良好的熱穩(wěn)定性,當(dāng)在海參肽中添加葡萄糖、淀粉、蔗糖、乳糖、K+、Ca2+、Mg2+對(duì)其抗氧化活性均無(wú)顯著影響;當(dāng)添加氯化鈉、Cu2+、Zn2+以及在堿性環(huán)境下顯著降低了其抗氧化穩(wěn)定性;模擬胃液會(huì)降低其抗氧化活性,而模擬胃腸液則明顯提高了其抗氧化活性。因此,海參肽在儲(chǔ)存過(guò)程中應(yīng)盡量避免與強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、含氯化鈉、Cu2+和Zn2+等環(huán)境因素接觸。海參肽對(duì)H2O2誘導(dǎo)L929 細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用結(jié)果表明,SCP-L 和SCP-H 通過(guò)降低上清液中LDH 活力、細(xì)胞內(nèi)MDA 含量以及提高SOD 和GSH-Px 活力,實(shí)現(xiàn)對(duì)氧化應(yīng)激損傷L929細(xì)胞起到良好的保護(hù)作用,且SCP-H 的效果優(yōu)于SCP-L。本研究可為海參肽在后期的實(shí)際應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)。

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