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    腦性癱瘓兒童循環(huán)lncRNA NEAT1水平在語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練療效中的評(píng)估價(jià)值

    2023-11-30 03:34:24張敏唐亮戴燕瓊
    河北醫(yī)藥 2023年22期
    關(guān)鍵詞:腦性康復(fù)訓(xùn)練患兒

    張敏 唐亮 戴燕瓊

    腦性癱瘓(cerebral palsy,CP)是一種非進(jìn)行性腦損傷,在小兒出生前或出生后1個(gè)月內(nèi)發(fā)病率較高,主要臨床癥狀表現(xiàn)為,中樞性運(yùn)動(dòng)和姿勢(shì)控制功能異常,智力和語(yǔ)言行為障礙[1]。腦性癱瘓是一種復(fù)雜的多因素中樞神經(jīng)障礙綜合征,其主要病因除缺氧缺血性腦損傷外,還包括患兒的早產(chǎn)及超低體重等[2]。多數(shù)腦性癱瘓患兒發(fā)病于腦部,使患兒四肢受到損害,嚴(yán)重者造成癲癇、精神障礙乃至智力缺陷。腦部超聲可作為腦性癱瘓的預(yù)測(cè)因子,其準(zhǔn)確率可達(dá)86%,但靈敏度卻只有29%[3]。有效的早期診斷可以在神經(jīng)系統(tǒng)最具可塑性的狀態(tài)下,提供一個(gè)治療窗口。因此,鑒別靈敏且準(zhǔn)確的診斷分子標(biāo)志物可以有效地提高腦性癱瘓的早期診斷效率,利于患兒的治療及康復(fù)。之前研究挖掘了大量功能性的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNAs),尤其是異常表達(dá)的lncRNAs,與腦性癱瘓的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。例如,lncRNA MALAT1在腦性癱瘓中下調(diào)表達(dá),其能夠調(diào)控腦性癱瘓過(guò)程中的神經(jīng)元凋亡,同時(shí)介導(dǎo)維生素B1與B2的神經(jīng)保護(hù)作用[4]。之前研究證明了lncRNA NEAT1對(duì)腦缺血造成的腦損傷及蛛網(wǎng)膜下腔出血造成的認(rèn)知功能障礙具有重要的調(diào)控作用,但其在腦性癱瘓的臨床意義尚不明確[5-7]。腦性癱瘓兒童多伴有語(yǔ)言力認(rèn)知功能障礙,且定向能力、語(yǔ)言表達(dá)能力及記憶力表現(xiàn)較差[8]。臨床上通常采用語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練干預(yù)腦性癱瘓患兒的治療,且已有大量研究證明,語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練能夠顯著提升腦性癱瘓患兒的語(yǔ)言認(rèn)知能力[9]。有效的腦性癱瘓生物標(biāo)志物,具有評(píng)估語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦性癱瘓患兒的治療效果的巨大潛能。因此,本研究旨在評(píng)估lncRNA NEAT1在腦性腦癱患兒中的診斷作用,以及其對(duì)語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練療效的評(píng)估效果。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 本研究于2018至2020年納入上海市兒童醫(yī)院收治的腦性癱瘓患兒63例,男33例,女30例;月齡8~33個(gè)月,平均(26.32±4.79)月。且入院前未接受康復(fù)訓(xùn)練。此外,另納入同時(shí)期于我院進(jìn)行常規(guī)體檢的健康兒童50例為對(duì)照組,男26例,女24例;月齡8~33月,平均(26.76±5.31)月。2組兒童一般資料無(wú)顯著差異(P>0.05)。參與兒童監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。收集所有參與者的血清樣本,并保存于-80℃下,供后續(xù)分析使用。

    1.2 方法 所有患兒在接受常規(guī)康復(fù)訓(xùn)練治療(肢體運(yùn)動(dòng)、姿勢(shì)矯正、安全防護(hù)及相應(yīng)護(hù)理措施)的基礎(chǔ)上,增加語(yǔ)言認(rèn)知功能訓(xùn)練,訓(xùn)練周期為8周:語(yǔ)言認(rèn)知功能訓(xùn)練涵蓋口腔運(yùn)動(dòng)功能訓(xùn)練、呼吸訓(xùn)練、發(fā)音訓(xùn)練、閱讀訓(xùn)練及認(rèn)知訓(xùn)練??谇贿\(yùn)動(dòng)功能訓(xùn)練主要通過(guò)指導(dǎo)患兒進(jìn)行噘嘴、圓唇、咬齒等口腔運(yùn)動(dòng),訓(xùn)練兒童牙齒、舌頭及嘴唇等的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力,同時(shí)通過(guò)進(jìn)食訓(xùn)練其咀嚼與吞咽能力。呼吸訓(xùn)練則通過(guò)臥姿到坐姿的調(diào)整,指導(dǎo)患兒使用鼻子進(jìn)行呼吸,增加患兒肺活量,同時(shí)延長(zhǎng)其呼吸時(shí)間。發(fā)音及閱讀訓(xùn)練遵循由簡(jiǎn)到難的原則,先從簡(jiǎn)單的音節(jié)發(fā)音訓(xùn)練開(kāi)始,逐步到日常對(duì)話、閱讀練習(xí)及書寫訓(xùn)練。認(rèn)知訓(xùn)練則通過(guò)游戲等方式,強(qiáng)化和鞏固患兒的記憶力、注意力及思維能力,使患兒的認(rèn)知水平得到整體提升。

    1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 訓(xùn)練結(jié)束后,通過(guò)評(píng)分方式對(duì)語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練效果進(jìn)行評(píng)價(jià),其中患兒認(rèn)知功能通過(guò)綜合評(píng)估患兒的記憶力、注意力、智力發(fā)育等評(píng)分,得分越高認(rèn)知功能越好。通過(guò)GESELL發(fā)育量表對(duì)康復(fù)訓(xùn)練效果進(jìn)行評(píng)價(jià),評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn):顯效:運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)步及DQ進(jìn)步得分均>20分;有效:運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)步及DQ進(jìn)步得分均為10~20分;無(wú)效:運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)步<5分,DQ進(jìn)步的粉<10分。有效率 = (顯效人數(shù)+有效人數(shù))/總?cè)藬?shù)×100%。

    1.4 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)血清中NEAT1的表達(dá)水平 使用Trizol試劑提取血清樣本中的總RNA,并通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA。通過(guò)SYBR試劑盒及7900HT實(shí)時(shí)PCR系統(tǒng)分析樣本中NEAT1的表達(dá),運(yùn)用2-ΔΔCt方法,以GADPH為內(nèi)參,計(jì)算其相對(duì)表達(dá)量。

    2 結(jié)果

    2.1 lncRNA NEAT1在腦性癱瘓兒童中的表達(dá)及其診斷價(jià)值 腦性癱瘓患兒在接受康復(fù)訓(xùn)練前,認(rèn)知功能及生活能力評(píng)分均表現(xiàn)有顯著障礙(P< 0.001)。與對(duì)照組比較,NEAT1在腦性癱瘓兒童血清中的表達(dá)水平相對(duì)較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。另外,ROC結(jié)果顯示,NEAT1具有顯著的診斷意義,其能夠區(qū)分腦性癱瘓患者與健康對(duì)照,且靈敏度(0.921)與特異性(0.680)較高(AU 0.867)。見(jiàn)表1、2,圖1。

    圖1 NEAT1在腦性癱瘓患兒及健康對(duì)照中的表達(dá)水平(A)及其診斷價(jià)值(B)

    表1 健康與腦性癱瘓兒童認(rèn)知功能及生活能力評(píng)分情況 分,

    表2 lncRNA NEAT1在健康與腦性癱瘓兒童血清中的表達(dá)水平

    2.2 語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦性癱瘓兒童的治療效果 腦性癱瘓兒童接受語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練后,定向能力、記憶力、注意力、語(yǔ)言能力、運(yùn)動(dòng)發(fā)育及智力發(fā)育評(píng)分均顯著提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)。通過(guò)GESELL評(píng)估得到,語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練的有效率為96.8%。見(jiàn)表3。

    表3 腦性癱瘓兒童接受語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練前后認(rèn)知功能及生活能力評(píng)分情況 n=63,分,

    2.3 lncRNA NEAT1對(duì)語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練效果的評(píng)估價(jià)值 與接受康復(fù)訓(xùn)練前比較,腦性癱瘓患兒血清中的NEAT1表達(dá)水平顯著升高(P<0.01)。以NEAT1在接受康復(fù)訓(xùn)練治療后,腦性癱瘓患兒血清中的平均表達(dá)量為臨界值,將患兒分為低NEAT1表達(dá)組(n=29)及高NEAT1表達(dá)組(n=34)。接受語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練后,高NEAT1表達(dá)組患兒的認(rèn)知功能及生活能力水平更高。高NEAT1表達(dá)與患兒接受康復(fù)訓(xùn)練后提升的定向能力、記憶力、注意力、語(yǔ)言能力、運(yùn)動(dòng)發(fā)育及智力發(fā)育均具有顯著的相關(guān)性(P<0.05)。見(jiàn)表4、5。

    表4 訓(xùn)練前后腦性癱瘓患兒血清lncRNA NEAT1的表達(dá)水平 n=63,

    表5 lncRNA NEAT1與語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練效果的相關(guān)性 例

    3 討論

    CP是一種以肌張力、運(yùn)動(dòng)及運(yùn)動(dòng)技能異常為特征的神經(jīng)發(fā)育障礙,是兒童時(shí)期最為常見(jiàn)的身體殘疾[10]。臨床上認(rèn)為,CP多是由于發(fā)育過(guò)程中,大腦受到非進(jìn)行性損傷而造成運(yùn)動(dòng)及語(yǔ)言功能障礙,事實(shí)上,CP還可能表現(xiàn)為精神及身體功能障礙,認(rèn)知及知覺(jué)障礙[8]。據(jù)最新數(shù)據(jù)報(bào)道,每1 000名新生兒中,有2~3名CP患兒[10]。越來(lái)越多的專業(yè)治療團(tuán)隊(duì)也逐步成立,以期為CP患兒提供更新的治療護(hù)理計(jì)劃。CP的運(yùn)動(dòng)障礙會(huì)引發(fā)多種繼發(fā)性問(wèn)題,如平衡問(wèn)題,手部功能問(wèn)題等。此外,CP患兒也會(huì)遭遇諸多與運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)的問(wèn)題,如認(rèn)知功能障礙、骨質(zhì)疏松,以及一些言語(yǔ)或智力問(wèn)題等。

    語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練能夠改善患兒的認(rèn)知能力,促進(jìn)語(yǔ)言功能的恢復(fù),同時(shí)對(duì)患兒的運(yùn)動(dòng)功能及智力發(fā)育也有一定的輔助作用[9]。之前的研究中,語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練能夠顯著改善失語(yǔ)癥患者的語(yǔ)言功能,對(duì)腦損傷引起的失語(yǔ)性并發(fā)癥也具有顯著的貢獻(xiàn)[11,12]。近期研究證明,語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練干預(yù)有益于原發(fā)性進(jìn)行性失語(yǔ)癥患者的康復(fù),且能夠延長(zhǎng)治療效果的保持時(shí)間[13]。在中風(fēng)后失語(yǔ)癥的治療中,語(yǔ)言康復(fù)訓(xùn)練能夠顯著提高患者的注意力及認(rèn)知功能,但并非所有患者均適用高強(qiáng)度的訓(xùn)練治療[14]。本研究結(jié)果證明,語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練顯著提高了患兒的語(yǔ)言認(rèn)知功能,且有效率可達(dá)96.80%,與之前報(bào)道[15]一致。此外,值得注意的是,由于患兒病情的不同,統(tǒng)一的語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練對(duì)患兒的治療效果也會(huì)不同。之前研究證明,定向能力及判斷能力訓(xùn)練對(duì)認(rèn)知功能較差的患兒治療效果更好,感知訓(xùn)練及記憶力訓(xùn)練則對(duì)情況改善后的患兒效果更為顯著,對(duì)于語(yǔ)言功能較差的患兒,溝通交流的方式對(duì)患兒的康復(fù)更具有價(jià)值[16]。因此,應(yīng)根據(jù)患兒的病情,確定不同的訓(xùn)練重點(diǎn)。

    近年來(lái),分子生物標(biāo)志物的研究熱度逐年升高,對(duì)疾病的早期診斷及病情進(jìn)展的預(yù)測(cè)具有重要意義[17]。NEAT1在多種疾病進(jìn)展中的調(diào)控作用及臨床意義已被廣泛報(bào)道,其中包括乳腺癌、結(jié)腸癌、肝癌以及多發(fā)性骨髓瘤在內(nèi)的多種腫瘤的惡性進(jìn)展過(guò)程,此外,NEAT1對(duì)乳腺癌的早期診斷及卵巢癌的預(yù)后預(yù)測(cè)中也具有重要意義[18-23]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),NEAT1在腦性癱瘓患兒中顯著下調(diào)表達(dá),且可作為腦性癱瘓的有效診斷標(biāo)志物,對(duì)腦性癱瘓與健康兒童具有較高的分辨度。此外,NEAT1語(yǔ)言認(rèn)知功能康復(fù)訓(xùn)練的治療效果的評(píng)估也具有重要意義?;純涸诮邮苷Z(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練后,血清中NEAT1的表達(dá)水平顯著升高,且NEAT1升高的表達(dá)水平與患兒康復(fù)訓(xùn)練后提高的定向能力、記憶力、注意力、語(yǔ)言能力、運(yùn)動(dòng)功能及智力發(fā)育密切相關(guān)。因此,NEAT1可作為腦性癱瘓兒童語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練治療效果評(píng)估的分子標(biāo)志物。

    本研究對(duì)患兒接受語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練后的治療效果進(jìn)行了評(píng)估,但對(duì)于治療的持續(xù)性效果及是否存在病情反復(fù)等缺少追蹤性研究。因此,必要的隨訪研究能夠更全面地評(píng)估語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦性癱瘓兒童治療效果,為其患兒的治療策略提供臨床指導(dǎo)。

    綜上所述,語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練能夠顯著提升患兒的定向能力、記憶力及注意力,促進(jìn)患兒的語(yǔ)言功能恢復(fù)及運(yùn)動(dòng)與智力發(fā)育。NEAT1可作為腦性癱瘓的早期診斷生物標(biāo)志物,且能夠有效地評(píng)估語(yǔ)言認(rèn)知康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦性癱瘓患兒地治療效果。

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