血清HBV-DNA 聯(lián)合免疫球蛋白檢測對慢性乙型肝炎診斷的臨床價值

許 婷，李媛媛

（宜春市中醫(yī)院檢驗科，江西 宜春 336000）

慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B）是我國常見傳染性病之一。該病由乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染所致，其病情復(fù)雜、傳染性強(qiáng)，不僅可引發(fā)肝功能持續(xù)性損傷，導(dǎo)致肝硬化等不良結(jié)局，對公共衛(wèi)生安全亦存在較大威脅，其早期診斷具有重要意義[1，2]。近年來，乙肝病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）一直為HBV 復(fù)制與傳染的直接標(biāo)記物，其血清含量可有效反映體內(nèi)HBV 的感染與復(fù)制狀態(tài)，在乙肝診斷及其病情評估中可發(fā)揮重要作用[3，4]。此外，有研究顯示[5，6]，慢性肝炎與機(jī)體體液免疫功能存在密切相關(guān)，而HBV 感染可引發(fā)體液免疫功能亢進(jìn)，導(dǎo)致免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）異常表達(dá)?；诖?，血清免疫球蛋白檢測可一定程度上反映乙肝疾病的發(fā)生與發(fā)展?fàn)顟B(tài)，對該病診斷具有重要意義?，F(xiàn)階段，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白檢測在慢性乙肝診斷中獲得廣泛應(yīng)用，但關(guān)于二者聯(lián)合診斷的應(yīng)用報道相對較少。對此，本研究結(jié)合2022年3 月-2023 年3 月宜春市中醫(yī)院收治的70 例慢性乙肝患者及70 例同期體檢健康者，分析血清HBVDNA 聯(lián)合免疫球蛋白檢測對慢性乙型肝炎的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2022 年3 月-2023 年3 宜春市中醫(yī)院收治的70 例慢性乙肝患者為研究對象，設(shè)為乙肝組。該組男38 例，女32 例；年齡24～65 歲，平均年齡（49.15±5.63）歲；病情嚴(yán)重程度：輕度32 例，中度27 例，重度11 例。另選取70 例同期體檢健康者，設(shè)為健康組。該組男36 例，女34 例；年齡25～68歲，平均年齡（49.30±5.71）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），可對比。所有研究對象知情且自愿參加，簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 乙肝組 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；②病歷資料完整；③近期未接受抗乙肝治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①急性肝炎、肝癌等其他肝病患者；②合并其他炎癥性疾病者；③免疫系統(tǒng)疾病及血液系統(tǒng)疾病者；④妊娠及哺乳期患者。

1.2.2 健康組 納入標(biāo)準(zhǔn)：①體檢資料完整；②肝功能指標(biāo)正常；③近期未服用免疫抑制劑藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠及哺乳期女性；②內(nèi)分泌系統(tǒng)異常者。

1.3 方法

1.3.1 血清HBV-DNA 檢測 抽取空腹外周血2 ml，行堿裂解法對HBV-DNA 進(jìn)行提取，隨后采用熒光定量PCR 儀（美國伯樂，Bio-Rad CFX96 型）進(jìn)行檢測，程序：50 ℃變性2 min、94 ℃變性5 min、93 ℃復(fù)性30 s、60 ℃延伸1 min，共40 個循環(huán)，反應(yīng)結(jié)束后，計算HBV-DNA 病毒載量。診斷標(biāo)準(zhǔn)：HBV-DNA＜1×103copies/ml 為陰性，HBV-DNA≥1×103copies/ml 為陽性。

1.3.2 血清免疫球蛋白檢測 抽取空腹靜脈血4 ml，離心（3000 r/min，15 min）后，分離血清，通過全自動生化分析儀（日本日立，HITACHI 7600 型）與相關(guān)試劑，采用免疫比濁法對免疫球蛋白IgG、IgA、IgM指標(biāo)進(jìn)行檢測。診斷標(biāo)準(zhǔn)：IgG 水平7～16.6 g/L 為陰 性，IgA 水 平0.71～3.85g/L 為 陰 性，IgM 水 平0.4～3.45g/L 為陰性，超過以上范圍評定為陽性。

1.4 觀察指標(biāo) ①比較乙肝組與健康組的血清HBVDNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平；②比較血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯(lián)合檢測對乙肝的陽性檢出率；③比較不同病情程度患者的血清HBVDNA 與免疫球蛋白水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（±s）表示，組間比較行t檢驗，計數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗，P＜0.05 表明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝組與健康組的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較 乙肝組血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平均高于健康組（P＜0.05），見表1。

表1 乙肝組與健康組患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

表1 乙肝組與健康組患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

2.2 血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯(lián)合檢測對乙肝的陽性檢出率比較 血清HBV-DNA 與免疫球蛋白聯(lián)合檢測的乙肝陽性檢出率高于其單獨(dú)檢測（P＜0.05），見表2。

表2 血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯(lián)合檢測對乙肝的陽性檢出率比較[n（%）]

2.3 不同病情分級患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較 不同病情分級患者的血清HBVDNA 與免疫球蛋白水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平由高至低依次為重度＞中度＞輕度，見表3。

表3 不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

表3 不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

3 討論

HBV 屬于嗜肝DNA 病毒，其HBV-DNA 數(shù)量可以有效反映體內(nèi)的HBV 攜帶狀態(tài)，是評價機(jī)體HBV 感染程度的最直接指標(biāo)，具有特異性高、靈敏性強(qiáng)等特點(diǎn)，對乙肝疾病活動程度及病毒傳染性均具有良好評估作用；但HBV-DNA 檢測儀器昂貴，實驗室要求較高，基層推廣較困難，應(yīng)用局限性較大[8，9]。研究認(rèn)為[10，11]，HBV 感染可引起機(jī)體免疫性病理損害，而免疫球蛋白作為體內(nèi)免疫反應(yīng)的重要參與物，其表達(dá)水平與HBV 感染引起的肝臟炎性損傷存在密切關(guān)聯(lián)，可一定程度反映體內(nèi)HBV 的復(fù)制能力，對慢性乙肝等疾病具有積極檢測價值。目前，IgG、IgA、IgM 為人體常見免疫球蛋白類型。其中，IgG 血清含量最高，其親和力高、分布廣泛，是機(jī)體再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體[12，13]。IgA 血清含量僅次于IgG，可與Fc 受體相互作用，影響免疫效應(yīng)細(xì)胞的表達(dá)[14]。IgM 則是體內(nèi)血清含量最少的免疫球蛋白，屬于親細(xì)胞抗體，是引發(fā)起Ⅰ型超敏反應(yīng)的重要參與物[15]。以上指標(biāo)水平與機(jī)體肝細(xì)胞受損程度密切相關(guān)，對乙肝等疾病的發(fā)生、發(fā)展具有積極檢測價值。

本研究結(jié)果顯示，乙肝組血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平均高于健康組（P＜0.05），該結(jié)果表明，慢性乙肝患者的血清HBVDNA 含量較健康者明顯增多，其免疫球蛋白水平呈異常增高表達(dá)。由此可見，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）對該病篩查具有確切檢測價值。血清HBV-DNA 與免疫球蛋白聯(lián)合檢測的乙肝陽性檢出率高于其單獨(dú)檢測（P＜0.05），表明血清HBV-DNA 聯(lián)合免疫球蛋白檢測可有效提高慢性乙肝的陽性檢出率。究其原因為，血清HBV-DNA定量檢測僅可精確到一個數(shù)量級上，準(zhǔn)確性較差，且易受到藥物治療及病毒變異等因素的影響，整體檢出作用有限[16，17]。而免疫球蛋白檢測則可間接顯示機(jī)體體液與細(xì)胞免疫功能的發(fā)展變化，有利于肝功能損傷的動態(tài)評估，可為肝病的檢出診斷提供可靠實驗室依據(jù)[18，19]?；诖?，將血清HBV-DNA 結(jié)果與免疫球蛋白指標(biāo)進(jìn)行綜合評判，可顯著提高慢性乙肝的陽性檢出效果。此外，不同病情分級患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平由高至低依次為重度＞中度＞輕度，提示不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平存在顯著差異。分析原因為，HBV-DNA 是反映HBV 病毒數(shù)量的直接指標(biāo)，其血清含量越高，提示病毒復(fù)制能力越強(qiáng)，與患者病情的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[20]。與此同時，慢性乙肝患者多伴有B 細(xì)胞功能異常、抗原遞呈能力受損及特異性T 細(xì)胞功能缺陷等狀況，由此可導(dǎo)致特異性免疫應(yīng)答減弱，致使機(jī)體清除病毒的同時，引發(fā)肝臟炎性損傷，導(dǎo)致病情加重[21，22]。因此，機(jī)體免疫球蛋白水平的升高與其肝損傷程度具有重要關(guān)聯(lián)，可一定程度上反映患者的病情嚴(yán)重程度，對其疾病發(fā)展及預(yù)后判斷具有積極評估價值。

綜上所述，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白檢測在慢性乙肝診斷中具有確切應(yīng)用價值，二者聯(lián)合檢測可提高乙肝陽性檢出率，對其病情嚴(yán)重程度具有一定評估作用。