TGF-β1、IL-5、IL-10 在過敏性鼻炎中的意義

李元慶，付亞寧，張麗娟，王 瑛

（1.昌邑市人民醫(yī)院耳鼻喉科，山東 昌邑 261300；2.昌邑市人民醫(yī)院口腔修復(fù)科，山東 昌邑 261300；3.昌邑市人民醫(yī)院查體中心，山東 昌邑 261300；4.陸軍第八十集團(tuán)軍醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，山東 濰坊 261041）

過敏性鼻炎（allergic rhinitis）又稱為變應(yīng)性鼻炎，是耳鼻喉科常見的疾病。過敏性鼻炎臨床表現(xiàn)主要為鼻腔阻塞、阻礙呼吸，病情遷延，且容易反復(fù)發(fā)作。過敏性鼻炎常與哮喘密切相關(guān)，患者可出現(xiàn)嗅覺減弱、食欲減弱、睡眠紊亂等，影響其生活質(zhì)量[1，2]。作為一種慢性炎癥性疾病，炎性因子的介入?yún)⑴c了過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展[3]。尋求新的用于指導(dǎo)預(yù)防和診斷過敏性鼻炎的生物標(biāo)記物對于過敏性鼻炎的基礎(chǔ)研究和臨床預(yù)防、治療至關(guān)重要。對于過敏性反應(yīng)，機體會通過免疫調(diào)節(jié)使影響病情的發(fā)生，這個過程與機體產(chǎn)生的多種炎性因子有關(guān)[4]。研究指出[5，6]，自身免疫系統(tǒng)的紊亂在過敏性鼻炎發(fā)生發(fā)展過程中有重要的作用。轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth facatou-β1，TGF-β1）是TGF-β 三種亞型中最重要的一種，可由多種細(xì)胞分泌，主要參與調(diào)節(jié)損傷的愈合過程，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、免疫以及促進(jìn)纖維化等[7-9]。正常情況下，T 細(xì)胞中的Th1、Th2細(xì)胞處于平衡狀態(tài)，維持正常的細(xì)胞、體液免疫功能[10-12]。當(dāng)出現(xiàn)異常的免疫應(yīng)答時，該平衡被破壞，細(xì)胞因子的含量會發(fā)生改變。IL-5、IL-10 介導(dǎo)體液免疫，是參與維持體內(nèi)免疫平衡的重要細(xì)胞因子[13]。目前，有研究報道TGF-β1 在兒童哮喘、過敏性鼻炎等過敏性疾病中發(fā)揮作用[14-16]，但TGF-β1 聯(lián)合IL-5、IL-10 檢測在過敏性鼻炎中的作用報道甚少。為此，本研究主要探討過敏性鼻炎中TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)水平的變化及其與常見臨床指標(biāo)的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年1 月-2022 年4 月在昌邑市人民醫(yī)院耳鼻喉就診的過敏性鼻炎患者30 例作為觀察組，另選取同期30 例在查體中心體檢的正常人群作為對照組。觀察組男16 例，女14 例；年齡21～60 歲，平均年齡（44.87±10.71）歲；收縮壓92～120 mmHg，平均收縮壓（104.30±9.97）mmHg；舒張壓60～88 mmHg，平均舒張壓（69.67±6.15）mmHg。對照組男18 例，女12 例；年齡20～58 歲，平均年齡（43.00±10.88）歲；收縮壓90～125 mmHg，平均收縮壓（102.50±10.22）mmHg；舒張壓62～85 mmHg，平均舒張壓（68.83±6.39）mmHg。兩組性別、年齡、血壓比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究經(jīng)昌邑市人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)通過，所有受試者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 入選標(biāo)準(zhǔn)：①鼻中隔未見明顯偏曲，無鼻息肉、鼻外傷、鼻腫瘤史等；②無血液系統(tǒng)疾?。虎蹮o高血壓病、糖尿病、遺傳性疾?。虎軣o酒精及藥物依賴。排除標(biāo)準(zhǔn)：①進(jìn)入研究前4 周內(nèi)使用過全身或者吸入性糖皮質(zhì)激素治療者；②合并其他免疫系統(tǒng)疾病；③合并其他良惡性腫瘤者。

1.3 方法 TGF-β1、IL-5、IL-10 的表達(dá)檢測 抽取空腹外周靜脈血6 ml，以3000 r/min 的轉(zhuǎn)速，離心10 min 后留血清并標(biāo)記，存放在-80 ℃冰箱。檢測血清TGF-β1、IL-5、IL-10 的表達(dá)水平時，由冰箱內(nèi)取出血清，于冰上解凍，離心機離心15 min，2000 r/min，留取上清液，然后嚴(yán)格按照試劑盒說明書使用雙抗體夾心ABC-ELISA 法檢測，試劑盒購買自武漢賽培生物科技有限公司。通過美國全自動酶聯(lián)檢測儀設(shè)置450 nm 讀取OD 值，將所得OD 值代入試劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和標(biāo)準(zhǔn)公式計算出相對應(yīng)的樣品濃度。

1.4 分組標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)血清TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)水平和常用臨床指標(biāo)，將觀察組患者分為TGF-β1低表達(dá)組（≤35 pg/L）10 例，TGF-β1 高表達(dá)組（＞35 pg/L）20 例；有睡眠障礙13 例，無睡眠障礙17例；伴打鼾患者14 例，無打鼾患者16 例；病程持續(xù)時間≥1 年者12 例，＜1 年者18 例；血清IL-5 低表達(dá)組（≤60 pg/ml）8 例，IL-5 高表達(dá)組（＞60 pg/ml）22 例；IL-10 低表達(dá)組（≤50 pg/ml）9 例，IL-10 高表達(dá)組（＞50 pg/ml）21 例。睡眠質(zhì)量采用匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)（PSQI）評分進(jìn)行評價，分別于患者進(jìn)入隊列的第0 周、第4 周、第8 周各采集1 次，取3 次評分的平均值作為最終評分，分為睡眠障礙（PSQI 評分≥7 分）和無睡眠障礙（PSQI 評分＜7 分）。病程持續(xù)時間及是否打鼾采用問卷調(diào)查方式獲得。入睡后呼吸聲比正常人粗重界定為伴有打鼾癥狀。

1.5 觀察指標(biāo) ①比較過敏性鼻炎患者與正常健康人群血清TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)水平；②分析TGF-β1、IL-5、IL-10 與常用臨床指標(biāo)：病情持續(xù)時間、是否有睡眠障礙及是否伴打鼾的關(guān)系；③探討TGF-β1 與IL-5、IL-10 的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS 18.0 對本研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料用（±s）表示，行t檢驗；計數(shù)資料以（n）表示，行χ2檢驗；TGF-β1 與IL-5、IL-10 之間的關(guān)系采用Pearson 相關(guān)性分析，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組TGF-β1、IL-5、IL-10 比較 觀察組血清TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)水平高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)比較（±s）

表1 兩組TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)比較（±s）

2.2 觀察組血清TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)與常用臨床參數(shù)的關(guān)系 觀察組血清TGF-β1、IL-5、IL-10 表達(dá)水平與病情持續(xù)時間、是否有睡眠障礙及是否伴打鼾均無關(guān)（P＞0.05），見表2。

表2 觀察組血清TGF-β1、IL-5、IL-10 與臨床指標(biāo)的關(guān)系（n）

2.3 觀察組血清TGF-β1 與IL-5、IL-10 的關(guān)系 觀察組血清TGF-β1 與IL-5、IL-10 均呈正相關(guān)，見圖1。

圖1 觀察組血清TGF-β1 與IL-5、IL-10 的關(guān)系

3 討論

過敏性鼻炎是一種常見的耳鼻喉科疾病，是由IgE 誘導(dǎo)的一種變態(tài)反應(yīng)性疾病，可有多種炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子參與[17，18]。過敏性鼻炎需要長時間輔助藥物治療，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[17，18]。研究指出[19，20]，細(xì)胞因子及炎細(xì)胞分泌白介素水平參與了過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展。因此，尋求新的有助于預(yù)防和指導(dǎo)臨床治療的標(biāo)記物對于過敏性鼻炎的研究至關(guān)重要。

TGF-β 是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長分化及代謝的超家族。TGF-β1 是TGF-β 亞型中最重要的一型，具有廣泛的生物學(xué)活性，參與細(xì)胞生長、代謝、損傷修復(fù)等多種生理病理過程。有研究證實[14，16]，TGF-β1 參與影響細(xì)胞因子的分泌，從而影響過敏性哮喘、慢性鼻竇炎、鼻息肉的發(fā)生。TGF-β1 對于維持機體正常的免疫、代謝過程起著一定的作用。本研究結(jié)果表明，TGF-β1 在過敏性鼻炎患者血清中的表達(dá)高于對照組，印證了TGF-β1 的表達(dá)異常參與了過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展這一結(jié)論。

T 淋巴細(xì)胞是調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞群，成熟T 細(xì)胞可以分為CD4+T 和CD8+T 細(xì)胞，而CD4+T 細(xì)胞根據(jù)分泌的細(xì)胞因子的不同又分為Th0、Th1、Th2 三種亞型。其中Th1 細(xì)胞參與細(xì)胞免疫，主要分泌TNF-α、interleukin 2（IL-2）、interferon-γ 等；Th2 細(xì)胞參與體液免疫，主要分泌interleukin 4（IL-4）、interleukin 5（IL-5）、interleukin 9（IL-9）、interleukin 10（IL-10）等[10-12]。正常情況下，機體Th1、Th2 細(xì)胞處于平衡狀態(tài)，維持正常的細(xì)胞、體液免疫功能，保持免疫功能的正常[10]。當(dāng)出現(xiàn)異常的免疫應(yīng)答時，Th1、Th2 細(xì)胞分布及功能平衡被破壞，細(xì)胞因子的含量會發(fā)生相應(yīng)的改變。IL-5、IL-10 介導(dǎo)體液免疫，是參與維持體內(nèi)免疫平衡的重要細(xì)胞因子[13]。前期試驗報道[13，17]，IL-5、IL-10 在過敏性鼻炎、支氣管哮喘等過敏性疾病中出現(xiàn)異常的表達(dá)。本研究在前述研究結(jié)果的前提下，進(jìn)一步探討了在過敏性鼻炎患者血清中TGF-β1、IL-5、IL-10 的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在過敏性鼻炎患者血清中TGF-β1、IL-5、IL-10 的表達(dá)高于對照組，說明TGF-β1、IL-5、IL-10 參與了過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展，推測過敏性鼻炎機體受某種因素影響后導(dǎo)致機體血清TGF-β1 水平升高，從而影響了T 細(xì)胞的作用，導(dǎo)致Th1、Th2 維持的免疫平衡被打亂，引起IL-5、IL-10 表達(dá)升高。

本研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β1、IL-5、IL-10 的異常表達(dá)與過敏性鼻炎患者病情持續(xù)時間、是否有睡眠障礙及是否伴打鼾無關(guān)。TGF-β1 的高表達(dá)與IL-5、IL-10的表達(dá)變化有關(guān)，并且TGF-β1 與IL-5、IL-10 的表達(dá)呈正相關(guān)，說明TGF-β1 的表達(dá)升高影響了Th1、Th2 介導(dǎo)的免疫平衡，同時這3 種細(xì)胞因子之間存在相同趨勢的變化，可能與過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程有關(guān)。

綜上所述，過敏性鼻炎患者血清中TGF-β1、IL-5、IL-10 的表達(dá)高于健康人群，且其TGF-β1 的表達(dá)與IL-5、IL-10 的表達(dá)呈正相關(guān)。TGF-β1、IL-5、IL-10 參與了過敏性鼻炎的發(fā)生發(fā)展。