■ 崔海燕
(1.駐馬店幼兒師范高等??茖W(xué)校,河南駐馬店 463000;2.河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河南新鄉(xiāng) 453000)
γ-氨基丁酸,別名4-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,簡稱GABA),化學(xué)式是C?H?NO?,在脊椎動(dòng)物、植物和微生物中廣泛存在[1]。GABA 作為一種抑制性神經(jīng)遞質(zhì),有著非常多的生理效應(yīng),主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),能夠改善肝臟功能、腎臟功能,調(diào)節(jié)食欲等多種生理活性,GABA 很早就應(yīng)用在醫(yī)藥和保健食品中[2]。GABA 對(duì)動(dòng)物有很好的抗熱應(yīng)激效果,還能提高動(dòng)物的生長速度,它是一種新型飼料添加劑[3],GABA 在畜禽上已經(jīng)廣泛應(yīng)用。除此之外,GABA 能增加采食量、改善牲畜的生長性能,還能降低料重比。在熱應(yīng)激過程中,通過GABA 的加入,可以顯著地減少熱應(yīng)激仔雞的呼吸頻率,顯著提高肉雞的日增重,改善料重比[4]。但GABA 對(duì)肉羊的作用研究相對(duì)較少。羔羊在斷奶后的應(yīng)激較為嚴(yán)重,本試驗(yàn)旨在研究斷奶后過渡階段肉羊基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的GABA, 通過對(duì)生長數(shù)據(jù)指標(biāo)、血清生化、抗氧化、免疫指標(biāo)測定,為GABA的使用提供依據(jù)。
GABA購買自山東某企業(yè)。
試驗(yàn)地點(diǎn)在河南駐馬店某養(yǎng)殖場,選擇相同月齡的杜寒雜交綿羊120只,隨機(jī)分為4組,每組共30只,每組分成6欄,每欄5只羊。對(duì)照組不添加GABA,試驗(yàn)1組添加60 mg/kg GABA,試驗(yàn)2組添加100 mg/kg GABA,試驗(yàn)3組添加140 mg/kg GABA。基礎(chǔ)日糧原料組成及營養(yǎng)水平見表1。預(yù)試期3 d,正試期30 d。試驗(yàn)期內(nèi)按養(yǎng)殖場要求進(jìn)行日常管理,早、晚各飼喂一次。
表1 試驗(yàn)日糧配方及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.3.1 生長數(shù)據(jù)檢測
分別在開始和結(jié)束時(shí)間段,對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行稱重,稱重前空腹處理,記錄每天的吃料量,通過以上數(shù)據(jù)計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比。
平均日增重(g)=(末重-初重)/試驗(yàn)天數(shù)
平均日采食量(kg)=(投料量-剩料量)/試驗(yàn)天數(shù)
料重比=平均日采食量/平均日增重
1.3.2 血清生化指標(biāo)檢測
試驗(yàn)最后一天,采集血液10.0 mL 并分離血清。使用上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司的試劑盒檢測總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)含量以及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性。血清試劑盒購買自上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司。
1.3.3 抗氧化指標(biāo)檢測
使用上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司的試劑盒檢測總抗氧化能力,使用Fe3+還原法檢測T-AOC 能力、使用黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性、使用比色法檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、使用鉑酸鉸法檢測過氧化氫酶(CAT)活性、使用硫代巴比妥酸法檢測丙二醛(MDA)含量。
1.3.4 免疫指標(biāo)檢測
使用上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司的試劑盒檢測血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量。
采用SAS 9.3 進(jìn)行單因素方差分析,使用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較。以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”標(biāo)識(shí)數(shù)據(jù)。P<0.05表示差異顯著,P>0.05表示差異不顯著。
由表2可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)2、3組的平均日增重、平均日采食量顯著升高,料重比顯著降低(P<0.05)。
表2 GABA對(duì)肉羊生長性能的影響
由表3可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)2、3組肉羊血清TP、ALB 指標(biāo)顯著提高(P<0.05),AST、ALT 活性以及BUN含量顯著降低(P<0.05)。
表3 GABA對(duì)肉羊血清生化指標(biāo)的影響
由表4可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)1、2、3組血清TAOC顯著提高(P<0.05),MDA含量顯著降低(P<0.05)。試驗(yàn)2、3組SOD、GSH-Px活性顯著提高(P<0.05)。
表4 GABA對(duì)肉羊血清抗氧化指標(biāo)的影響
表5 GABA對(duì)肉羊血清免疫指標(biāo)的影響
由表5可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)2、3組血清IgA、IgG、IL-2 含量顯著升高(P<0.05);Ig(M)和TNF-α 試驗(yàn)組和對(duì)照組無顯著差異(P>0.05)。
動(dòng)物的采食量是影響生長的關(guān)鍵因素,受到中樞系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)會(huì)受到體液因素的影響,例如胃腸道功能、自身代謝的變化和其他因素會(huì)對(duì)中樞系統(tǒng)產(chǎn)生影響從而影響采食量[5]。GABA 也可以引起神經(jīng)肽 Y 在血液中的濃度,可使采食中樞興奮,提高動(dòng)物采食意愿[6-7]。GABA 對(duì)葡萄糖磷酸化酯酶活性有積極影響,提高腦細(xì)胞興奮度,增加乙酰膽堿的含量,從而有效提高動(dòng)物采食量[8]。GABA 能夠提升動(dòng)物體內(nèi)褪黑素及5-羥基色胺的分泌量,顯著提升動(dòng)物體內(nèi)促甲狀腺激素水平 ,從而有效的解決各種應(yīng)激問題。GABA 能降低機(jī)體CCK 分泌,提高NPY 分泌,抑制α-MSH 分泌,從而提高CAMP 的濃度,加快動(dòng)物生長速度[9]。
血清中TP、ALB 和尿酸或尿素的含量是衡量機(jī)體營養(yǎng)情況的重要指標(biāo)[10]。機(jī)體肝臟出現(xiàn)問題時(shí),AST 及ALT 指標(biāo)會(huì)明顯提高,所以肝臟健康的動(dòng)物血清中的AST 及ALT 指標(biāo)在合理范圍內(nèi)會(huì)保持較低的水平。未出現(xiàn)病變或損傷,肝臟解毒等功能越強(qiáng)[11]。血清中BUN 的含量越低代表蛋白質(zhì)合成效率越高。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,添加100、140 mg/kg GABA 的試驗(yàn)2、3 組肉羊血清TP 和ALB 含量顯著提高(P<0.05),ALT、AST活性和BUN含量顯著降低。
根據(jù)動(dòng)物代謝規(guī)律,動(dòng)物機(jī)體氧化反應(yīng)終產(chǎn)物是丙二醛(MDA),含量的高低直接反映了氧化反應(yīng)強(qiáng)度,MDA 含量越高,說明動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞的損傷程度越大[12]。動(dòng)物機(jī)體抗氧化過程中,SOD、GSH-Px 發(fā)揮了主要作用,而T-AOC 體現(xiàn)抗氧化酶促系統(tǒng)對(duì)動(dòng)物機(jī)體損傷的抵抗能力,T-AOC、SOD、GSH-Px 活性越高,說明抗氧化能力越強(qiáng)[13]。GABA能夠改善機(jī)體的氧化與還原的動(dòng)態(tài)平衡,提高反芻動(dòng)物消除自由基的能力,從而改善抗氧化功能。本研究中,肉羊日糧中添加100、140 mg/kg GABA 能夠顯著提升T-AOC、SOD、GSH-Px 活性, MDA含量則會(huì)顯著下降。
IgG 可以激活補(bǔ)體和中和多種毒素,在免疫應(yīng)答中起重要的作用[14-15]。IgA 抗體可以中和感染因子,在身體的黏膜表面發(fā)揮作用,由淋巴結(jié)中漿細(xì)胞和脾臟合成,這三種抗體含量反映了體液免疫的強(qiáng)度[16]。IL-2 主要由活化T 細(xì)胞產(chǎn)生,具有多源性和多向性,來自于趨化因子家族,對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用[17]。TNF-α主要是來自單核巨噬細(xì)胞,是重要的生物活性細(xì)胞因子。GABA 是一種非常重要的神經(jīng)遞質(zhì),對(duì)免疫系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用,它是通過與免疫細(xì)胞上相應(yīng)受體結(jié)合起作用[18],從而對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響。本研究對(duì)肉羊血清中各種免疫指標(biāo)進(jìn)行了檢測,結(jié)果表明添加了GABA 的試驗(yàn)2、3 組IgA、IgG、IL-2 含量顯著升高,說明GABA 在調(diào)節(jié)肉羊體液免疫與細(xì)胞免疫方面均具有明顯的積極作用。
在本試驗(yàn)條件下,肉羊日糧中添加100、140 mg/kg的GABA 能夠提升斷奶后過渡階段肉羊的生長指標(biāo),改善血清中相關(guān)生化指標(biāo)、 抗氧化指標(biāo),提升肉羊的免疫水平??紤]生長性能指標(biāo)及生產(chǎn)成本因素,GABA在肉羊中的經(jīng)濟(jì)添加量為100 mg/kg。