氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中40 種農(nóng)藥殘留

董浩云，賈彩霞，李 建

（常州檢驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證研究院，江蘇常州 213000）

近年來(lái)，食品安全已經(jīng)成了人們關(guān)注的重要話題。其中，蔬菜因其種類繁多、營(yíng)養(yǎng)豐富、口感鮮爽而備受追捧，是人們餐桌上必不可少的佳肴。然而，在蔬菜的種植過(guò)程中，為了防治病蟲害，保證蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，使用農(nóng)藥是一種必要手段[1]。但是，若長(zhǎng)期過(guò)量使用農(nóng)藥，會(huì)導(dǎo)致蔬菜中農(nóng)藥的殘留量超標(biāo)，其對(duì)食品的安全性和人們的身體健康會(huì)造成嚴(yán)重影響，因此，國(guó)家出臺(tái)了《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021），對(duì)蔬菜中各類農(nóng)藥的殘留限量進(jìn)行了規(guī)定限制[2]。

目前，常見的農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)包括分光光度法、酶抑制法、氣相色譜法、高效液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等[3]。氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的靈敏度較高，離子對(duì)選擇好，可以滿足日常的農(nóng)殘檢測(cè)。但是，隨著進(jìn)樣的增加，樣品基質(zhì)會(huì)對(duì)進(jìn)樣口和離子源造成污染，影響儀器的靈敏度和準(zhǔn)確度。雖然可以通過(guò)更換襯管、切割色譜柱、清洗離子源等方法來(lái)維護(hù)儀器，但這些方法無(wú)疑會(huì)增加檢測(cè)成本，因此，前處理過(guò)程中需要對(duì)樣品進(jìn)行凈化[4]。在《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）中，選擇QuEChERs 前處理法，萃取包中的無(wú)水硫酸鎂脫水效率高，可提升農(nóng)藥提取率，PSA 能有效消除脂肪、有機(jī)酸等雜質(zhì)，凈化效果顯著[5]。通過(guò)參考不同蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，對(duì)黃瓜基質(zhì)中多種農(nóng)藥分析的線性、定量限、精密度等進(jìn)行了驗(yàn)證分析。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

QuEChERs 萃取包（安捷倫）：4 g 硫酸鎂，1 g 氯化鈉，1 g 檸檬酸鈉，0.5 g 檸檬酸氫二鈉；QuEChERs凈化管（安捷倫）：900 mg 硫酸鎂，150 mg PSA；壇墨農(nóng)藥混標(biāo)（100 μg·mL-1）和壇墨外環(huán)氧七氯B 內(nèi)標(biāo)（100 μg·mL-1）；乙腈（色譜純，CNW）。

1.2 儀器與設(shè)備

GCMS-TQ 8040 NX氣相色譜儀-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（Shimadzu 島津）；AOC 20i Plus 自動(dòng)進(jìn)樣器（Shimadzu 島津）；TGL21 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司）；KQ-400KDE 數(shù)控超聲波清洗儀（昆山超聲儀器有限公司）；MS-3 渦旋振蕩器（德國(guó)IKA）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

（1）內(nèi)標(biāo)使用液。準(zhǔn)確移取外環(huán)氧七氯B 內(nèi)標(biāo)溶液（100 μg·mL-1），乙腈稀釋定容為質(zhì)量濃度10 mg·L-1的內(nèi)標(biāo)使用液。

（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確移取農(nóng)藥混標(biāo)（100 μg·mL-1）1 mL，用乙腈稀釋配制成質(zhì)量濃度為10.0 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液備用，然后分別吸取適量10.0 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，用空白基質(zhì)逐級(jí)稀釋配制成質(zhì)量濃度為0.005 mg·L-1、0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.100 mg·L-1、0.200 mg·L-1、0.500 mg·L-1的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，在進(jìn)樣小瓶中各加入20 μL 內(nèi)標(biāo)使用液，分別加入1 mL 上述各濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，渦旋混勻后待上機(jī)測(cè)定。

1.3.2 樣品前處理

稱取10.00 g 樣品于50 mL 塑料離心管中，加入10 mL 乙腈、QuEChERs 萃取鹽包（內(nèi)含4 g 硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉）及1 顆陶瓷均質(zhì)子，振蕩1 min，6 000 r·min-1離心5 min。吸取5 mL 上清液至QuEChERs 凈化管（內(nèi)含900 mg 硫酸鎂及150 mg PSA）中，渦旋1 min，6 000 r·min-1離心10 min，上清液過(guò)0.22 μm 有機(jī)濾膜后，吸取1 mL 于2 mL 進(jìn)樣小瓶中，加入20 μL的內(nèi)標(biāo)使用液，渦旋混勻，待上機(jī)測(cè)定。

1.3.3 儀器條件

（1）氣相色譜條件。色譜柱：Agilent DB-5ms（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純氦氣；載氣流速：1 mL·min-1；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；進(jìn)樣量：1 μL；程序升溫：初始柱溫80 ℃，保持1 min，以40 ℃·min-1升溫至120 ℃，再以6 ℃·min-1升溫到280 ℃，再以12 ℃·min-1升溫到300℃，保持3 min。

（2）質(zhì)譜條件。電子轟擊源：80 eV；離子源溫度：280 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；溶劑延遲：3 min；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，參考《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018），每種化合物選擇一對(duì)定性離子對(duì)和一對(duì)定量離子對(duì)，每組所需要檢測(cè)離子對(duì)按出峰順序，分時(shí)段分別檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法優(yōu)化

乙腈是強(qiáng)極性的溶劑，穿透性強(qiáng)，能有效提取樣品中的農(nóng)殘，且不會(huì)像丙酮等試劑溶解過(guò)多的雜質(zhì)，因此本方法選擇乙腈作為最終溶劑。同時(shí)，省略了氮吹后乙酸乙酯復(fù)溶的過(guò)程，可避免氮吹和復(fù)溶過(guò)程中造成的農(nóng)殘損失，也使得前處理更簡(jiǎn)單快速。通過(guò)分析40 種農(nóng)殘的出峰時(shí)間，以6 ℃·min-1升溫到280 ℃可保證一些菊酯類農(nóng)殘的分離度，而300 ℃保持3 min 可以對(duì)檢測(cè)器高溫烘烤，保證一些高沸點(diǎn)雜質(zhì)快速流出色譜柱。此升溫程序分離效果理想，比GB 23200.113—2018 中縮短10 min 的分析時(shí)間。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量限

按1.3.1 配制的多種農(nóng)藥混合基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線上機(jī)檢測(cè)，最終結(jié)果表明，40 種農(nóng)藥殘留在0.005 ～0.500 mg·L-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2在0.990 0 ～0.999 9，同時(shí)，以S/N≥10 確定方法定量限均低于GB 23200.113—2018 中10 μg·kg-1的要求，具備檢測(cè)可行性。為檢測(cè)中篩選方便，所以統(tǒng)一將定量限定為10 μg·kg-1。詳細(xì)結(jié)果見表1。

表1 40 種農(nóng)藥的線性方程、相關(guān)系數(shù)、定量限

2.3 精密度和回收率

本方法用內(nèi)標(biāo)法定量，以黃瓜為空白基質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，添加水平分別為0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1，每 個(gè) 質(zhì) 量 分 數(shù) 水 平 均以相同方法處理6 份，以其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD）驗(yàn)證方法精密度，以平均回收率驗(yàn)證方法準(zhǔn)確度，回收率見表2。3 個(gè)水平加標(biāo)回收率范圍在60%～130%，精密度RSD 均小于15%，添加水平較低時(shí)，農(nóng)殘易受基質(zhì)影響，回收率跟精密度也會(huì)相對(duì)偏高，需單獨(dú)優(yōu)化方法[2]。

表2 40 種農(nóng)藥殘留加標(biāo)回收率及精密度表

3 結(jié)論

本文采用QuEChERs 前處理法，結(jié)合GC-MS/MS 對(duì)黃瓜基質(zhì)中40 種農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析，優(yōu)化了國(guó)標(biāo)中現(xiàn)有方法和儀器條件，從線性、回收率、精密度等方面展開驗(yàn)證，證實(shí)了本方法在日常農(nóng)殘檢測(cè)中的可行性。該方法具有前處理簡(jiǎn)單快速，分析準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，通過(guò)PSA 凈化樣品，可減少儀器污染，節(jié)約儀器維護(hù)成本。但是，各種農(nóng)藥性質(zhì)存在差異，仍需在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中不斷調(diào)整優(yōu)化。