某地區(qū)孕婦B族鏈球菌熒光PCR檢測結(jié)果分析

劉強 劉小容 羅小平 唐曉雨 李會蘭 詹成林 廖凌燕 稅開毅

【摘要】目的：探討某地區(qū)孕婦B族鏈球菌（group B streptococcus，GBS）定植率及其對妊娠結(jié)果與新生兒健康的影響。方法：選取2022年1月—2022年6月某地區(qū)（四縣一區(qū)）到醫(yī)院產(chǎn)檢的1596例孕婦作為研究對象，分別取肛門拭子和陰道拭子進行熒光PCR檢測，統(tǒng)計分析GBS定植率，并比較GBS陽性組與GBS陰性組妊娠結(jié)果與新生兒健康情況的差異。結(jié)果：某地區(qū)產(chǎn)檢孕婦GBS綜合定植率為19.4%，陰道拭子與肛門拭子定植率分別為15.2%與16.2%；GBS陽性組與GBS陰性組孕婦的宮內(nèi)感染的發(fā)生率分別為19.4%與4.4%，組間差異比較有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；GBS陽性組與GBS陰性組新生兒感染發(fā)生率分別為37.7%與5.8%，組間差異比較有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；GBS陽性組與GBS陰性組新生兒缺氧發(fā)生率分別為41.6%與4.0%，組間差異比較有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論：該地區(qū)GBS定植率整體高于國內(nèi)平均水平，GBS陽性孕婦的宮內(nèi)感染發(fā)生概率更高，新生兒感染及新生兒缺氧發(fā)生率更高，提示產(chǎn)科醫(yī)生對GBS陽性孕婦及其新生兒需格外關(guān)注。

【關(guān)鍵詞】B族鏈球菌；聚合酶鏈式反應；定植率；妊娠結(jié)果；新生兒

基金項目：宜賓市科技局2021年度科技項目《基于核酸檢測（PCR—熒光探針法）對宜賓地區(qū)圍產(chǎn)期孕婦B族鏈球菌（GBS）感染狀況的調(diào)查研究》（2021SF005）的階段性成果

Analysis of fluorescent PCR detection results of group Bstreptococcus in pregnant women in some area

LIU Qiang1， LIU Xiaorong1， LUO Xiaoping1， TANG Xiaoyu1， LI Huilan1， ZHAN Chenglin1， LIAO Lingyan1， SHUI Kaiyi2 1.Changning County Peoples Hospital， Changning， Sichuan 644300， China； 2.Yibin Fifth Peoples Hospital， Nanxi， Sichuan 644100， China

【Abstract】Objective：To investigate the colonization rate of group B streptococcus （GBS） in pregnant women in a certain area and its impact on pregnancy outcomes and neonatal health.Methods：From January 2022 to June 2022，1596 pregnant women who went to a hospital for prenatal examination in a certain area （four counties and one district） were selected as the research subjects.Anal swabs and vaginal swabs were taken for fluorescent PCR detection，and the GBS colonization rate was statistically analyzed.The differences in pregnancy outcomes and newborn health status between the GBS positive group and the GBS negative group were compared.Results：The comprehensive colonization rate of GBS in pregnant women undergoing prenatal examination in a certain area was 19.4%，and the colonization rates of vaginal swabs and anal swabs were 15.2% and 16.2%，respectively；The incidence of intrauterine infections in pregnant women in the GBS positive group and the GBS negative group was 19.4% and 4.4%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）；The incidence of neonatal infection in the GBS positive group and the GBS negative group was 37.7% and 5.8%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）；The incidence of neonatal hypoxia in the GBS positive group and the GBS negative group was 41.6% and 4.0%，respectively，with a statistically significant difference between the groups（P<0.05）.Conclusion：The overall GBS colonization rate in this region is higher than that in the domestic average level.The incidence of intrauterine infection among GBS positive pregnant women is higher，and the incidence of neonatal infection and neonatal hypoxia is higher. This suggests that obstetricians should pay special attention to GBS positive pregnant women and their newborns.

【Key Words】GBS； PCR； Colonization rate； Pregnancy outcomes； Newborn

B族鏈球菌是健康女性腸道和陰道生理菌群的一部分，母體定植是GBS傳播的主要途徑。目前，已識別的血清型多達10個[1]，不會因懷孕而降低感染率，在新生兒感染后可能導致嚴重的后遺癥，早發(fā)性GBS感染會導致更高概率的新生兒發(fā)病和死亡[2]。在新生兒中，大多數(shù)早發(fā)性GBS疾病是由于母親通過上升感染或在陰道分娩過程中傳播而發(fā)生的，部分出現(xiàn)新生兒早產(chǎn)、產(chǎn)后出血及嚴重的宮內(nèi)感染等情況。近年來，我國GBS感染定植率呈現(xiàn)逐年上升趨勢，國內(nèi)不同地方孕婦GBS定植率存在較大差異，其受社會經(jīng)濟水平、種族、地區(qū)、檢測方法等諸多因素的影響，其中檢測方法的差異是導致最終定植率的差異的主要原因之一[3]。本研究采用熒光聚合酶鏈式反應（PCR）法調(diào)查某地區(qū)1596例孕婦GBS感染情況，旨在探討某地區(qū)孕婦GBS定植率及其對妊娠結(jié)果與新生兒健康的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取某地區(qū)（四縣一區(qū)）2022年1月—2022年6月到醫(yī)院產(chǎn)檢的1596例孕婦作為研究對象，孕婦近2周內(nèi)未使用抗菌藥物、無性生活，簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 采樣方法：使用無菌鹽水擦拭清洗外陰，在孕婦陰道下1/3處用無菌棉拭子輕輕旋轉(zhuǎn)1圈取分泌物，放入無菌試管，即為陰道拭子。將另一根無菌棉拭子輕輕插入孕婦的肛門直腸2 ～ 3cm處輕輕旋轉(zhuǎn)1圈，放入無菌試管，即為肛門拭子。取同一根拭子，按上述方法先進行陰道分泌物取樣，再將該拭子進行肛門取樣，即為陰道肛門混合拭子[4]。

1.2.2 檢測方法：采用熒光PCR法檢測樣本中的GBS：在陰道拭子和肛拭子樣本中加入1mL緩沖液后離心，并將沉淀物重懸，加入核酸提取劑反應15min后離心10min，取上清液進行熒光PCR檢測。熒光定量PCR試劑盒由博爾誠（北京）科技有限公司提供，具體反應程序為：95℃/3min預變性，95℃/5s變性，60℃/30s退火，72℃/30s延伸，共計40個循環(huán)。專業(yè)人員利用熒光PCR儀及其軟件進行自動分析檢測，反應CT值≤38.0為陽性，CT值>38且<40的樣本重新上機檢測，重測結(jié)果CT值<40為陽性，其余結(jié)果為陰性。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同標本類型GBS檢出情況與影響因素

1596例孕婦中檢測出GBS陽性310例，定植率為19.4%。肛門拭子單獨檢出陽性數(shù)為258例，定植率16.2%；陰道拭子單獨檢出陽性數(shù)為242例，定植率15.2%；陰道肛門混合拭子檢出陽性190例，定植率為11.9%。其他如孕婦年齡、孕周及妊娠次數(shù)等因素對定植率也會產(chǎn)生一定的影響。見表1。

2.2 GBS陽性組與GBS陰性組妊娠情況比較

GBS陽性組孕婦的宮內(nèi)感染發(fā)生率明顯高于GBS陰性組（P<0.05）。GBS陰性組與GBS陽性組孕婦在產(chǎn)后出血及剖宮產(chǎn)發(fā)生率方面比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。見表2。

2.3 GBS陽性組與GBS陰性組新生兒健康情況比較

GBS陽性組新生兒死亡率為0.0%，新生兒感染發(fā)生率為37.7%，新生兒缺氧發(fā)生率為41.6%，早產(chǎn)率為1.3%；GBS陰性組新生兒死亡率為0.0%，新生兒感染發(fā)生率為5.8%，新生兒缺氧發(fā)生率為4.0%，早產(chǎn)率為3.2%。GBS陽性組新生兒感染率與新生兒缺氧率更高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

GBS是造成新生兒以及孕婦嚴重感染的重要原因之一，GBS定植在胃腸道和生殖泌尿系統(tǒng)，導致孕產(chǎn)婦發(fā)病率顯著升高，分娩期間由母體通過上升途徑傳播，造成新生兒出現(xiàn)嚴重的侵襲性疾病。通過產(chǎn)前GBS的篩查極大程度降低新生兒GBS感染的風險[5]。國內(nèi)不同地區(qū)孕婦的GBS帶菌存在不同，各地需結(jié)合當?shù)鼐唧w情況具體分析，制定措施。

GBS定植率側(cè)面反應地區(qū)醫(yī)療水平高低，全球孕婦GBS定植率在10%～35%之間，總體定植率為18%，發(fā)達地區(qū)普遍較低[6]。但也有部分地區(qū)，如加勒比地區(qū)和非洲孕婦的定植率偏高，在20%～35%之間，而南亞和東亞孕婦GBS的感染率較低，分別為12.5%和11%，其中國內(nèi)孕婦GBS的定植率約為11%[7]，而本文研究的該地區(qū)GBS定植率明顯高于國內(nèi)平均水平，進一步說明該地區(qū)GBS定植率水平仍有較大的治理空間。

采用陰道拭子和肛門拭子分別對同一孕婦進行檢測，陰道拭子或肛門拭子任意一項檢查為陽性即認定為GBS陽性，從而更好地避免GBS漏檢。GBS定植可導致產(chǎn)婦及新生兒出現(xiàn)各種不同類型及程度的感染，如造成孕婦的早產(chǎn)、膀胱炎、膜腔感染、菌血癥等，新生兒窒息死亡、各種炎癥及后遺癥。本研究中，產(chǎn)婦出現(xiàn)的不良結(jié)局包括產(chǎn)后出血、宮內(nèi)感染、剖宮產(chǎn)、產(chǎn)褥感染等。

根據(jù)國內(nèi)外篩查報道，不同地區(qū)GBS攜帶率差異非常大，而篩查方法是造成這種差異的主要因素之一。雖然培養(yǎng)法為美國疾控中心推薦的檢測GBS的“金標準”，但是相關(guān)文獻研究結(jié)果表明，PCR已被證明可以與培養(yǎng)法相媲美，建議孕婦在分娩開始時對GBS感染進行PCR檢測。雖然通過PCR檢測普遍獲得GBS篩查將導致醫(yī)療機構(gòu)的額外費用，但它將識別出真正需要在分娩時進行抗生素預防的女性，通過減少對婦女的不必要治療、減少抗藥性、避免不必要的新生兒監(jiān)測和干預以及在關(guān)鍵的結(jié)合期將嬰兒與母親不必要地分開，可以進一步證明增加的支出是科學合理的。另有研究表明，PCR檢測的靈敏度為86.28%～100%，特異度為91.26%～99.70%，對所有足月胎膜長期破裂的臨產(chǎn)婦女和妊娠35～36周的臨產(chǎn)婦女進行PCR檢測取得滿意效果[8]。本文研究表明，PCR檢測準確率達到94.2%，與相關(guān)文獻數(shù)據(jù)基本吻合。

綜上所述，該地區(qū)GBS定植率整體高于國內(nèi)平均水平，GBS陽性孕婦的宮內(nèi)感染發(fā)生概率更高，新生兒感染及新生兒缺氧發(fā)生率更高，提示產(chǎn)科醫(yī)生對GBS陽性孕婦及其新生兒需格外關(guān)注。

參考文獻

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