酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊血清生化指標(biāo)、瘤胃發(fā)酵及瘤胃細(xì)菌結(jié)構(gòu)與組成的影響

武奧林， 蔡大亮，， 彭清潔， 周 迪，謝綠綠，， 張 彥，， 戴晉軍，

（1.農(nóng)業(yè)微生物資源發(fā)掘與利用全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北宜昌 443003；2.酵母功能湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北宜昌 443003）

酵母源物質(zhì)已被證實(shí)對(duì)反芻動(dòng)物具有積極作用， 成為替代抗生素的優(yōu)選添加劑（Mezzetti 等，2022；Brewer 等，2014）。 酵母源物質(zhì)主要包括酵母菌、 酵母培養(yǎng)物、 酵母水解物和酵母微量元素等，隨著研究的深入，很多研究開(kāi)始聚焦于酵母源物質(zhì)對(duì)瘤胃的發(fā)酵特性、 菌群結(jié)構(gòu)（Centeno 等，2023；Ferraretto 等，2012） 以及組學(xué)關(guān)聯(lián)性等（Wang 等，2023）。 研究表明， 酵母源物質(zhì)可以對(duì)纖維分解菌 （Pinloche 等，2013）、 淀粉利用菌（Jiang 等，2017）和乳酸鹽利用菌（Rossi 等，2004）等瘤胃細(xì)菌產(chǎn)生影響（Rossi 等，2004），且不同的添加劑量會(huì)導(dǎo)致不同的菌群結(jié)構(gòu)， 進(jìn)而產(chǎn)生不同效果（Jiang 等，2017）。

反芻動(dòng)物的生長(zhǎng)依賴宿主與瘤胃微生物的共生作用， 微生物可以為宿主提供能量、 蛋白質(zhì)、維生素等多種營(yíng)養(yǎng)。 高達(dá)90%到達(dá)小腸的蛋白質(zhì)和50%的宿主能量需求是由網(wǎng)狀瘤胃微生物細(xì)胞提供的（Boyd 等，1991）。 在日糧中，添加一些酵母菌或酵母培養(yǎng)物， 可以通過(guò)增加飼料攝入量和飼料消化率來(lái)提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能（何文娟等，2023；饒時(shí)庭等，2020）。 在某些條件下，它們還可能改變瘤胃發(fā)酵模式，降低乙酸/丙酸比例， 提高氨態(tài)氮和TVFA 含量 （Wang 等，2023； 任勝男等，2020）， 提高血液抗氧化能力（王曉芳等，2022；Jia 等，2018）， 增加纖維分解菌、淀粉利用菌和乳酸鹽利用菌的總活菌數(shù)，且不同的添加劑量會(huì)導(dǎo)致不同的菌群結(jié)構(gòu)， 進(jìn)而產(chǎn)生不同效果（Jiang 等，2017；Pinloche 等，2013；Rossi 等，2004）。 本試驗(yàn)旨在研究酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊血清生化指標(biāo)瘤胃發(fā)酵及瘤胃細(xì)菌結(jié)構(gòu)與組成的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選取遺傳背景一致，體重相近[（25±2.5）kg]的湖羊公羔72 只，隨機(jī)分為3 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6 只羊，每組分別飼喂3個(gè)不同配比的日糧，即對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧，CON），酵母培養(yǎng)物A 組 （基礎(chǔ)日糧+1%酵母培養(yǎng)物A，YCA）；酵母培養(yǎng)物B 組（基礎(chǔ)日糧+1%酵母培養(yǎng)物A+1.0×109CFU/g 活性酵母，YCB）。 預(yù)飼期10 d，正飼期60 d，正飼期后每組隨機(jī)選取6 只羊進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。日糧配制根據(jù)肉羊營(yíng)養(yǎng)需要量（NYT816-2021）配制，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

酵母培養(yǎng)物A 與活性酵母均購(gòu)自湖北安琪酵母股份有限公司， 酵母培養(yǎng)物A： 粗蛋白質(zhì)≥15%，甘露聚糖≥2%，粗灰分≤10%，水分≤10%；活性干酵母：活菌含量≥2×1010CFU/g。

1.2 試驗(yàn)樣品采集與處理 晨飼后2 h， 通過(guò)湖羊口腔采集瘤胃液，4 層紗布過(guò)濾并分裝至5 mL離心管中，置于-80 ℃凍存?zhèn)溆谩?通過(guò)比色法測(cè)定瘤胃液氨態(tài)氮含量（馮宗慈等，2013），采用氣相色譜法（Yue 等，2009）測(cè)定總揮發(fā)性脂肪酸和各揮發(fā)性脂肪酸含量。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 血清生化指標(biāo)和生殖激素 試驗(yàn)結(jié)束后，湖羊頸靜脈采血，3500 r/min 離心10 min 取上清， 采用全自動(dòng)血清生化分析儀測(cè)定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（T-CHO）含量。

1.3.2 瘤胃細(xì)菌測(cè)序 提取樣品總DNA 后，根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)得到引物，在引物末端加上測(cè)序接頭，進(jìn)行PCR 擴(kuò)增并對(duì)其產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量和均一化形成測(cè)序文庫(kù)，建好的文庫(kù)先進(jìn)行文庫(kù)質(zhì)檢，質(zhì)檢合格的文庫(kù)用Illumina NovaSeq 6000 進(jìn)行測(cè)序。 高通量測(cè)序（如Illumina NovaSeq 測(cè)序平臺(tái)）得到原始圖像數(shù)據(jù)文件，經(jīng)堿基識(shí)別（Base Calling）分析轉(zhuǎn)化為原始測(cè)序序列（SequencedReads），其中包含測(cè)序序列（Reads）的序列信息以及其對(duì)應(yīng)的測(cè)序質(zhì)量信息。 首先使用Trimmomatic v0.33軟件，對(duì)測(cè)序得到的Raw Reads 進(jìn)行過(guò)濾；然后使用cutadapt 1.9.1 軟件進(jìn)行引物序列的識(shí)別與去除，得到不包含引物序列的Clean Reads，其次使用QIIME2 中的dada2 方法進(jìn)行去噪， 雙端序列拼接并去除嵌合體序列，97%聚類后獲得操作分類單元（OTUs）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 用Excel 2010 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，采用Minitab 21.3.1.0 統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析對(duì)所測(cè)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 利用百邁客云平臺(tái)和origin 對(duì)瘤胃微生物多樣性、 物種組成及豐富度、 物種差異以及主成分進(jìn)行分析及作圖。用P ≤0.05 表示差異顯著，P ≤0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊瘤胃揮發(fā)酸指標(biāo)的影響 由表2 可見(jiàn)， 與對(duì)照組相比，YCB組瘤胃戊酸比例極顯著升高（P ＜0.01），氨態(tài)氮濃度顯著升高（P ＜0.05），其余瘤胃揮發(fā)酸含量各組間差異不顯著（P ＞0.05）。

表2 酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊瘤胃揮發(fā)酸指標(biāo)的影響

2.2 酵母培養(yǎng)物對(duì)湖羊血清生化指標(biāo)的影響由表3 可見(jiàn)， 各組間血清生化指標(biāo)差異均不顯著（P ＞0.05）。

表3 酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊血清生化指標(biāo)的影響

2.3 酵母培養(yǎng)物對(duì)湖羊瘤胃微生物區(qū)系的影響

2.3.1 測(cè)序結(jié)果及合理性 基于OTU 的Venn 圖可統(tǒng)計(jì)多組或多個(gè)樣本中所共有和獨(dú)有的物種數(shù)目。 如圖1 所示，以97%的一致性原則將序列聚類成OTU，共得到1996 個(gè)OTU，其中對(duì)照組OTU數(shù)為1471 個(gè)，YCA 組1350 個(gè)，YCB 組1467 個(gè)，共享823 個(gè)OTU，占總OTU 數(shù)的41.23%。

圖1 Veen 圖（基于OTU）

2.3.2 稀釋曲線 瘤胃細(xì)菌稀釋曲線如圖2，稀釋曲線呈現(xiàn)大幅度上升后趨于平緩， 說(shuō)明深度覆蓋到樣本中的所有物種， 足以代表樣本中的物種豐富度。

2.3.3 α-多樣性 coverage 表示各樣品文庫(kù)的覆蓋率，各組樣品覆蓋率均為99%以上。 如表4 所示，Chao、Ace、Shannon 和Simpson 指數(shù)均無(wú)顯著的組間差異（P ＞0.05）。

表4 酵母培養(yǎng)物對(duì)湖羊α-多樣性指數(shù)的影響（OTU 水平）

2.3.4 β-多樣性 分別在OTU 和屬水平進(jìn)行PCA 分析。 如圖3 所示，在OTU 水平，PC1 和PC2對(duì)樣品差異的貢獻(xiàn)率分別為20.00%和16.92%。在屬水平，PC1 和PC2 對(duì)樣本差異的貢獻(xiàn)率分別為41.60%和19.25%。 對(duì)照組、YCA 組和YCB 組瘤胃細(xì)菌在OTU 和屬水平均聚類于不同的坐標(biāo)位置，具有顯著的組間差異。

圖3 PCA 分析（OTU 和屬水平

2.3.5 物種組成及豐富度

2.3.5.1 門水平 分析三組瘤胃細(xì)菌菌群在門水平的區(qū)別，共檢測(cè)到相對(duì)豐度大于0.1%的細(xì)菌菌門11 個(gè)。由表5 可知，在門水平上，湖羊瘤胃優(yōu)勢(shì)細(xì)菌菌門（豐度＞1%）主要分布在擬桿菌門、厚壁菌門和變形菌門。

表5 酵母培養(yǎng)物對(duì)湖羊瘤胃細(xì)菌組成的影響（門水平＞1%） %

2.3.5.2 屬水平 分析三組瘤胃細(xì)菌菌群在屬水平的區(qū)別， 共檢測(cè)到相對(duì)豐度大于0.1%的細(xì)菌菌屬66 個(gè)。 由表6 可知，在屬水平上，共有優(yōu)勢(shì)菌屬為普雷沃氏菌屬，其余占比前10 的菌屬分別為未分類的普雷沃氏菌科、 未分類的月形單細(xì)胞菌科、瘤胃球菌屬、理研菌科RC9 群、未分類瘤胃細(xì)菌、解琥珀酸菌屬、未分類的擬桿菌科RF16 群和普雷沃氏菌科UGG_003 群。 與對(duì)照組相比，YCA 和YCB 組的解琥珀酸菌屬相對(duì)豐度顯著降低（P ＜0.05）。

表6 酵母培養(yǎng)物對(duì)湖羊瘤胃細(xì)菌組成的影響（屬水平TOP10） %

2.3.6 瘤胃細(xì)菌組成與發(fā)酵參數(shù)及血清指標(biāo)相關(guān)性分析 圖4 展示了湖羊瘤胃細(xì)菌屬水平相對(duì)豐度（排名前10 的菌屬）與瘤胃發(fā)酵參數(shù)及血清生化指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系。 其中普雷沃氏菌屬相對(duì)豐度與血清總蛋白 （R=-0.502，P ≤0.05）、 總膽固醇（R=-0.568，P ≤0.05）、戊酸（R=-0.519，P ≤0.05）濃度呈顯著負(fù)相關(guān)， 未分類的月形單細(xì)胞菌科與血清總蛋白（R=0.506，P ≤0.05）濃度呈顯著正相關(guān)，與血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（R=0.604，P ≤0.01）濃度呈極顯著正相關(guān)， 瘤胃球菌屬與血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（R=0.540，P ≤0.05）呈顯著正相關(guān)，未分類的擬桿菌科RF16 群與血清總蛋白 （R=-0.479，P ≤0.05）呈顯著負(fù)相關(guān)。

圖4 相關(guān)性分析

3 討論

3.1 飼喂酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 瘤胃發(fā)酵參數(shù)是影響瘤胃消化的重要因素， 其代表了瘤胃的微生物生長(zhǎng)狀況及瘤胃消化能力。 研究表明，酵母源物質(zhì)可以影響瘤胃發(fā)酵參數(shù)， 提高丙酸的表達(dá)量， 降低乙丙比（張雷雷等，2023； 任勝男等，2020；Chaucheyras等；1996；Mutsvangwa 等，1992），這是由于酵母菌和乳酸菌等可競(jìng)爭(zhēng)性利用發(fā)酵液中的糖類，刺激埃氏巨型球菌的生長(zhǎng)， 后者可將乳酸降解為丙酸和丁酸（Amin 等，2021）。 但Desnoyers 等（2009）研究發(fā)現(xiàn)，活性酵母可以提高瘤胃揮發(fā)性脂肪酸濃度（平均+2.17 mM）并降低瘤胃乳酸濃度（平均-0.9 mM），對(duì)乙丙比沒(méi)有影響。 在本研究中，1%酵母培養(yǎng)物與1.0×109CFU/g 活性酵母不會(huì)顯著影響丙酸比例， 但添加后丙酸比例有升高趨勢(shì)，乙丙比有降低趨勢(shì)。 只添加酵母培養(yǎng)物不會(huì)顯著影響戊酸比例， 同時(shí)添加酵母培養(yǎng)物和活性酵母，戊酸比例出現(xiàn)了顯著增加，這與Opsi（2012）等研究一致。 Liu 等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，在育肥牛日糧中添加4 g/頭·d 活性酵母，可以顯著提高瘤胃中丙酸比例， 但對(duì)乙酸比例及乙丙比無(wú)顯著影響。 曾鈺等（2020）也發(fā)現(xiàn)，在舍飼牦牛日糧中添加1%和1.5%的酵母培養(yǎng)物，可以顯著提高瘤胃丙酸比例，降低乙丙比。 與活性酵母相比，酵母培養(yǎng)物中的活菌含量低，并不依賴活的酵母細(xì)胞起作用（Poppy 等，2012），酵母培養(yǎng)物中的有機(jī)酸、酶、小肽等均會(huì)對(duì)瘤胃發(fā)酵參數(shù)產(chǎn)生影響（姜奧宇等，2022；王小虎，2017；Vyas 等，2015； 馬寧等，2009；Castillo 等，2004），而活性酵母更依賴于酵母菌的呼吸作用（Newbold 等，1996）。說(shuō)明酵母培養(yǎng)物和活性酵母均可在一定程度上提高瘤胃丙酸比例， 降低乙酸比例，但功能性物質(zhì)不同，可能需要更多的酵母培養(yǎng)物有效成分或更多的有效酵母活菌數(shù)才能達(dá)到乙酸和丙酸比例的顯著改變。

瘤胃內(nèi)氨態(tài)氮濃度通常與飼料蛋白的降解及微生物蛋白的合成有關(guān)， 還與瘤胃的尿素循環(huán)有關(guān)，6 ～30 g/dL 的氨態(tài)氮濃度不會(huì)產(chǎn)生不良的影響（Firkins 等，2007）。 在本研究中，瘤胃氨態(tài)氮濃度在此范圍內(nèi)， 添加1%的酵母培養(yǎng)物和1.0×109CFU/g 的活性酵母會(huì)顯著提高瘤胃氨態(tài)氮濃度，只添加1%的酵母培養(yǎng)物氨態(tài)氮濃度有升高趨勢(shì)， 說(shuō)明酵母培養(yǎng)物會(huì)在一定程度促進(jìn)瘤胃氨態(tài)氮生成， 活性酵母會(huì)進(jìn)一步增加瘤胃氨態(tài)氮的生成能力，這與蔡大亮等（2022）的研究結(jié)果一致。此外，當(dāng)瘤胃中氨態(tài)氮濃度偏低時(shí)，會(huì)有大量在循環(huán)尿素進(jìn)入瘤胃，進(jìn)而降低血清BUN 濃度，但在本研究中，YCA 組與YCB 組的血清BUN 濃度均有升高趨勢(shì)， 說(shuō)明酵母培養(yǎng)物和活性酵母可以改變瘤胃內(nèi)環(huán)境， 促進(jìn)微生物蛋白的合成與蛋白飼料的利用。

3.2 飼喂酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)不僅反映了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的體內(nèi)代謝情況， 還是衡量機(jī)體健康程度的重要標(biāo)準(zhǔn)。 血清TP 和ALB 可以反映日糧中蛋白質(zhì)的消化吸收情況，而B(niǎo)UN 是蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物，TP和BUN 的不足均會(huì)導(dǎo)致機(jī)體抵抗力降低，過(guò)多則會(huì)導(dǎo)致氮的浪費(fèi) （張學(xué)峰等，2016）， 綿羊的TP、ALB 和BUN 參考范圍分別為53 ～89 g/L、21 ～46 g/L 和2.86 ～ 14.28 mmol/L （Uyanik，2001；Pernthaner 等，1993；Kaneko，1980）。 在本研究中，TP、ALB 和BUN 均在參考范圍內(nèi)，且各組間無(wú)顯著差異，這與Hassan 等（2016）研究一致。 血清TG、T-CHO 與脂質(zhì)代謝密切相關(guān)，T-CHO 是指血液中所有脂蛋白所含有的膽固醇含量， 包括游離膽固醇和膽固醇酯，AST 與ALT 代表了肝臟的代謝情況。 本研究表明， 添加1%的酵母培養(yǎng)物和1.0×109CFU/g 的活性酵母不會(huì)影響脂質(zhì)代謝及肝臟代謝。

3.3 飼喂酵母培養(yǎng)物和活性酵母對(duì)湖羊瘤胃細(xì)菌菌群的影響 本研究結(jié)果顯示，CON 組的OTU數(shù)最多，其次為YCB 組和YCA 組，總體差別不大。 樣本覆蓋率高于99%，可以真實(shí)反映湖羊瘤胃細(xì)菌的結(jié)構(gòu)和多樣性。 α-多樣性中Ace、Chao和Shannon 指數(shù)越大，多樣性越高，Simpson 指數(shù)越小，多樣性越高，在本研究中，各指數(shù)均無(wú)顯著差異， 說(shuō)明添加1%的酵母培養(yǎng)物與1.0×109CFU/g 的活性酵母不會(huì)影響瘤胃菌群多樣性，這與Wang 等（2023）研究一致。 主成分分析結(jié)果表明，在OTU 水平，與對(duì)照組相比，YCA 組和YCB組的瘤胃細(xì)菌的菌群多樣性有逐漸升高趨勢(shì)，添加活性酵母后OTU 水平的瘤胃細(xì)菌菌群多樣性更高；在屬水平，第一主成分和第二主成分對(duì)樣品的貢獻(xiàn)值更高，CON 組與YCA 組的細(xì)菌菌群組成更接近，YCA 組與YCB 組的置信橢圓面積更大， 說(shuō)明添加酵母培養(yǎng)物與活性酵母均可增加并改變屬水平瘤胃細(xì)菌菌群多樣性。 總而言之，添加1%的酵母培養(yǎng)物與1.0*10^9 的活性酵母均可增加并改變湖羊瘤胃細(xì)菌多樣性，且在添加酵母培養(yǎng)物的基礎(chǔ)上添加活性酵母，瘤胃細(xì)菌菌群的變異度更大。

瘤胃細(xì)菌的優(yōu)勢(shì)菌門通常為擬桿菌門和厚壁菌門（Auffret 等，2017；Klevenhusen 等，2017），在本研究中，瘤胃的優(yōu)勢(shì)菌門為擬桿菌門、厚壁菌門，這與前人研究結(jié)果一致。 Gao 等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，在肉牛日糧中添加0.8 g/頭·d 的活性酵母顯著降低了瘤胃中變形菌門的相對(duì)豐度，但添加50 g/頭·d 的酵母培養(yǎng)物對(duì)變形菌門相對(duì)豐度沒(méi)有影響。 在本研究中，添加1%的酵母培養(yǎng)物和1.0×109CFU/g 的活性酵母不會(huì)對(duì)變形菌門相對(duì)豐度產(chǎn)生顯著影響， 但與對(duì)照組相比有降低趨勢(shì)， 這可能與酵母培養(yǎng)物和活性酵母的添加量較低有關(guān)。 郝凌魁等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，在羯羊日糧中添加13.37%的酵母培養(yǎng)物后，擬桿菌門的相對(duì)豐度增加， 厚壁菌門的相對(duì)豐度降低，但與對(duì)照組無(wú)顯著差異，這與本研究趨勢(shì)正好相反，由于各組間擬桿菌門并無(wú)顯著差異，本文不做進(jìn)一步討論。

普雷沃氏菌屬是瘤胃中最多的擬桿菌門菌屬，主要參與淀粉、木聚糖等能量物質(zhì)的降解。本研究結(jié)果顯示，在屬水平上，各處理組的瘤胃優(yōu)勢(shì)菌群均為普雷沃氏菌屬， 且各組間無(wú)顯著差異，這與前人研究結(jié)果一致（孫美杰等，2022；曾鈺等，2020）。 郭婷等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，在圍產(chǎn)前期奶牛日糧中添加120 g/d 酵母培養(yǎng)物，瘤胃細(xì)菌中解琥珀酸菌屬及月形單胞菌屬的相對(duì)豐度極顯著降低。Jiang 等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛日糧中添加5.7×107CFU/頭·d 的活性酵母可以提高纖維分解菌瘤胃球菌、 瘤胃桿菌和反芻獸新月單胞菌的濃度， 而添加6.8×108 CFU/頭·d的活性酵母則可以提高瘤胃桿菌和反芻獸新月單胞菌的濃度， 可見(jiàn)不同的活性酵母添加劑量會(huì)對(duì)瘤胃屬水平細(xì)菌菌群產(chǎn)生不同影響。 在本研究中，添加1%的酵母培養(yǎng)物和1.0×109CFU/g的活性酵母會(huì)顯著降低接琥珀酸菌屬的濃度，解琥珀酸菌屬可將琥珀酸代謝生成丙酸鹽，進(jìn)而分解為丙酸，由此可以解釋TVFA 中丙酸比例的上升原因。

瘤胃菌群通常與瘤胃揮發(fā)酸和血清生化指標(biāo)密切相關(guān)， 微生物通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生揮發(fā)酸等小分子物質(zhì)被瘤胃吸收， 并進(jìn)入血液供機(jī)體生長(zhǎng)代謝（郭延儉，2015）。 本研究發(fā)現(xiàn)，未分類的月形單胞菌科與血清AST 濃度呈極顯著正相關(guān)，而瘤胃球菌屬也與AST 濃度有顯著正相關(guān)性。AST 主要分布在肝臟等組織中， 當(dāng)組織細(xì)胞受損，AST 就會(huì)釋放入血， 而肝臟還可以吸收氨合成尿素（馮仰廉，2004），進(jìn)而參與瘤胃的尿素循環(huán)，因此，瘤胃球菌屬和未分類的月形單胞菌科與AST 的相關(guān)性，可能與瘤胃的尿素循環(huán)有關(guān)。金紅巖等（2020）在牦牛日糧中添加主成分為酵母菌的微生態(tài)制劑后， 也發(fā)現(xiàn)血清中AST 濃度有增加趨勢(shì)， 且月形單胞菌屬與瘤胃球菌屬也有增加趨勢(shì)，本研究與其一致。 普雷沃氏菌屬的發(fā)酵產(chǎn)物主要包括乙酸、琥珀酸和丙酸，而棲瘤胃普雷沃氏菌是瘤胃中主要的蛋白降解菌之一（馮仰廉，2004），在本研究中，普雷沃氏菌屬與血清TP 和CHOL 具有顯著負(fù)相關(guān)性，與戊酸具有顯著正相關(guān)，但與乙酸和丙酸無(wú)顯著相關(guān)性，這可能由于普雷沃氏菌參與了蛋白的降解，但酵母培養(yǎng)物和酵母菌的添加量不足， 導(dǎo)致普雷沃氏菌屬與乙酸和丙酸無(wú)相關(guān)性。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果表明，1%的酵母培養(yǎng)物可在一定程度上提高瘤胃細(xì)菌多樣性，改變瘤胃菌群組成，降低瘤胃解琥珀酸菌屬比例。1%的酵母培養(yǎng)物和1.0×109CFU/g 的活性酵母可以增強(qiáng)酵母培養(yǎng)物的效果，進(jìn)一步改善瘤胃發(fā)酵，提高瘤胃戊酸比例和氨態(tài)氮濃度。