復(fù)方中草藥和植物精油替代抗生素對(duì)肉仔兔生長(zhǎng)性能、腹瀉、死亡率及養(yǎng)分表觀消化率的影響

鄧 卉， 郭升嵐， 余 淼， 黃明亞， 余 丹， 呂繼蓉 ， 郭春華

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院，四川成都 610066；2.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川成都 610041；3.四川省動(dòng)物采食調(diào)控工程技術(shù)研究中心，四川成都 611130；4.動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610066）

自2020 年飼料生產(chǎn)企業(yè)停止生產(chǎn)含有促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑（中草藥除外）的商品飼料以來，依賴抗生素日糧降低腹瀉、死亡率的養(yǎng)兔業(yè)面臨巨大挑戰(zhàn)，因此研發(fā)安全高效、綠色環(huán)保的新型飼料添加劑替代抗生素成為現(xiàn)下養(yǎng)兔業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì)。

我國(guó)中草藥資源豐富，因其含有蛋白質(zhì)、維生素、微量元素、揮發(fā)油、多糖類、黃酮類、生物堿類、皂苷類等有益成分，具有增強(qiáng)免疫功能、抗炎、抗菌等功效，并且低毒無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性，因此被行業(yè)廣泛關(guān)注（金爾光等，2017）。植物精油同中草藥的功效特點(diǎn)相似，含有多種生物活性成分，可抗炎、抗菌、提高機(jī)體免疫力，安全有效，因此也是行業(yè)研究熱點(diǎn)之一。 目前中草藥和植物精油在豬、雞動(dòng)物日糧上的研究較多，但應(yīng)用在兔上的研究報(bào)道較少，結(jié)果不盡相同，且缺乏深度。鑒于此，本研究以新西蘭肉仔兔為研究對(duì)象， 在我國(guó)飼料全面禁抗的現(xiàn)實(shí)背景下， 以復(fù)方中草藥和植物精油作為抗生素替代品評(píng)價(jià)其對(duì)肉仔兔生長(zhǎng)性能、腹瀉、死亡率以及養(yǎng)分表觀消化率的影響，為養(yǎng)兔業(yè)優(yōu)質(zhì)替抗添加劑應(yīng)用提供重要的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)替抗添加劑選用復(fù)方中草藥1 個(gè)，復(fù)合植物精油2 個(gè)（由成都大帝漢克生物科技有限公司提供）。 各添加劑組成：復(fù)方中草藥由蒼術(shù)20%、厚樸10%、陳皮10%、山楂10%、甘草5%等組成； 復(fù)合精油1 主要成分為肉桂醛（≥5%）、香芹酚（≥10%）、少量甜橙油等；復(fù)合精油2 主要成分為肉桂醛 （≥10%）、 香芹酚（≥5%）、少量甜橙油等。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì) 采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取體重相近、健康、32 日齡左右、體重為（693.98±119.57）g 新西蘭肉仔兔48 只，公母各半，隨機(jī)分為4 個(gè)處理組（分別記為抗生素組、精油1 組、精油2 組、中草藥組），每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)2 只兔。 預(yù)試期7 d，正試期28 d。 試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)日糧參照NRC（1977）和de Blas（2008）推薦的家兔營(yíng)養(yǎng)水平，并結(jié)合本地飼料資源配合成全價(jià)顆粒料， 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)兔集中于同一兔舍飼養(yǎng)，重疊式三層籠養(yǎng)，每籠2 只。試驗(yàn)期間人工喂料，分早中晚日喂3 次，自由采食和飲水，各處理組衛(wèi)生條件和管理相同。 試驗(yàn)前對(duì)兔舍進(jìn)行清洗和嚴(yán)格消毒。供試肉兔均進(jìn)行體內(nèi)外寄生蟲的驅(qū)除和注射兔瘟、兔巴氏桿菌和魏氏梭菌疫苗，按常規(guī)程序免疫。

1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo) 對(duì)試驗(yàn)兔開食前稱重，為試驗(yàn)初始重。試驗(yàn)期間每日準(zhǔn)確計(jì)量并記錄飼料消耗量，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)計(jì)算平均日采食量（ADFI），在第15天和第29 天早晨空腹稱重， 計(jì)算平均日增重（ADG）。 根據(jù)ADFI 和ADG 計(jì)算料重比（F/G）。

ADFI=耗料重量/試驗(yàn)天數(shù)；

ADG=（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)；

F/G=耗料重量/增重重量。

1.5.2 腹瀉、 死亡指標(biāo) 試驗(yàn)期間每日觀察并記錄試驗(yàn)兔發(fā)病、腹瀉和死亡等情況。測(cè)定指標(biāo)及計(jì)算公式如下：

腹瀉指數(shù)=糞便評(píng)分之和/供試兔總數(shù) （糞便評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表3）；

表3 糞便評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

腹瀉頻率=∑（腹瀉兔數(shù)×兔腹瀉天數(shù)）/（試驗(yàn)兔數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100%；

死亡率=試驗(yàn)結(jié)束死兔數(shù)/試驗(yàn)開始活兔數(shù)。

1.5.3 飼糧養(yǎng)分表觀消化率 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前6 d，每個(gè)組隨機(jī)抽取5 只試驗(yàn)兔單籠飼養(yǎng)，飼喂對(duì)應(yīng)日糧，自由采食，自由飲水。 預(yù)試期3 d，正試期3 d。正試期間采用全收糞法收集每只兔每日的全部糞便，記錄試驗(yàn)兔每日的采食量和排糞量。鮮糞稱重后，取50%作為樣品，并按重量的10%加入10%鹽酸固氮，混勻，4 ℃保存。 連續(xù)收集3 d 后，將同只兔的全部糞樣混勻， 于65 ℃烘箱中烘72 h 測(cè)定初水分， 粉碎后過1.0 mm 篩，-20 ℃保存待測(cè)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。

測(cè)定指標(biāo)：飼料、糞樣的總能（GE）、干物質(zhì)（DM）、粗纖維（CF）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗脂肪（EE）、粗灰分（Ash）、鈣（Ca）、磷（P）。

測(cè)定方法：總能參照IKA 量熱儀C6000 儀器方法，干物質(zhì)參照GB/T 6435-2014《飼料中水分的測(cè)定》，粗纖維參照GB/T 6434-2006《飼料中粗纖維的含量測(cè)定》， 粗蛋白質(zhì)參照GB/T 6432-1994《飼料中粗蛋白質(zhì)測(cè)定方法》，粗脂肪參照GB/T 6433-2006《飼料中粗脂肪的測(cè)定》，粗灰分參照GB/T 6438-2007 《飼料中粗灰分的測(cè)定》， 鈣參照GB/T 6436-2002 《飼料中鈣的測(cè)定》，磷參照GB/T 6437-2002《飼料中總磷的測(cè)定分光光度法》。 飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率計(jì)算公式如下：

飼糧某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率/%=（飼糧進(jìn)食量×飼糧某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量-日排糞量×糞便某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量）/（飼糧進(jìn)食量×飼糧某營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量）×100。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel（2010）辦公軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理后， 運(yùn)用SPSS 17.0 軟件的一般線性模型（GLM）進(jìn)行單因素方差分析和LSD 法多重比較，并對(duì)腹瀉頻率和死亡率指標(biāo)進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以P ＜0.05 作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，以P ＜0.01 作為差異極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)， 以0.05≤P ＜0.10 作為有差異顯著趨勢(shì)的判斷標(biāo)準(zhǔn)， 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔生長(zhǎng)性能的影響 由表4 可知，試驗(yàn)前期（1 ～14 d），各組ADFI、ADG、F/G 無顯著差異 （P ＞0.05）；試驗(yàn)后期（15 ～28 d）各組ADFI 有顯著差異的趨勢(shì)（0.05≤P ＜0.10）， 其中精油2 組ADFI 顯著低于抗生素組（P ＜0.05），各組ADG、F/G 無顯著差異（P ＞0.05）， 其中中草藥組較抗生素組ADG 提高了5.30%，F(xiàn)/G 降低了1.90%；試驗(yàn)全期（1 ～28 d）各組ADFI、ADG、F/G 無顯著差異 （P ＞0.05），其中中草藥組較抗生素組F/G 降低了4.44%。

表4 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔生長(zhǎng)性能的影響

2.2 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔腹瀉的影響 由表5 可知，試驗(yàn)前期（1 ～14 d）各組腹瀉指數(shù)無顯著差異（P ＞0.05），腹瀉頻率差異顯著（P ＜0.05）；試驗(yàn)后期（15 ～28 d）各組腹瀉指數(shù)無顯著差異（P ＞0.05），中草藥組腹瀉指數(shù)較抗生素組降低了56.39%，腹瀉頻率有顯著差異的趨勢(shì)（0.05≤P ＜0.10），中草藥組腹瀉頻率較抗生素組降低了55.60%；試驗(yàn)全期（1 ～28 d）各組腹瀉指數(shù)、腹瀉頻率無顯著差異（P ＞0.05）。

表5 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔腹瀉指數(shù)和腹瀉頻率的影響

2.3 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔死亡率的影響 由表6 可知，試驗(yàn)前期（1 ～14 d）各組死亡率無顯著差異（P ＞0.05），其中精油2 組與抗生素的死亡率相同，均為8.33%；試驗(yàn)后期（15 ～28 d）各組死亡率無顯著差異（P ＞0.05），其中抗生素組死亡率為16.67%， 而精油1 組和中草藥組死亡率為0.00%；試驗(yàn)全期（1 ～28 d）各組死亡率無顯著差異（P ＞0.05），其中精油1 組與抗生素組的死亡率相同，中草藥組較抗生素組降低了33.32%。

表6 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔死亡率的影響 %

2.4 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表7 可知， 與抗生素組相比，中草藥組的EE 表觀消化率顯著提高（P ＜0.05）；各組CF 表觀消化率有顯著差異的趨勢(shì)（0.05≤P ＜0.10），其中精油2 組的CF 表觀消化率較抗生素組顯著降低（P ＜0.05）；各組GE、DM、CP、Ash、Ca、P表觀消化率均無顯著差異（P ＞0.05），其中中草藥組GE 表觀消化率較抗生素組提高了8.78%。

表7 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔養(yǎng)分表觀消化率的影響 %

3 討論

3.1 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔生長(zhǎng)性能的影響 中草藥和植物精油通過自身含有的多種生物活性成分， 可增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫功能和抗應(yīng)激、調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力，從而改善飼料利用率，提高生長(zhǎng)性能。

前人研究中草藥添加劑對(duì)家兔生長(zhǎng)性能影響的結(jié)果多數(shù)顯示存在正面作用，在替代抗生素上有一定可行性，但也有少量研究結(jié)果存在差異。 許騰（2013）選用體重相近的30 日齡斷奶獺兔80 只，隨機(jī)分為4 組， 日糧分別添加0.1%喹乙醇預(yù)混劑和1.0%、1.5%、2.0%中草藥，研究結(jié)果表明，添加中草藥添加劑與添加西藥喹乙醇預(yù)混劑相比，能提高斷奶獺兔的日增重、降低飼料報(bào)酬，以1.5%添加量效果最好。 王多伽（2013）對(duì)吉戎獺兔的研究表明，日糧中添加中草藥提取物綠原酸對(duì)吉戎兔生長(zhǎng)性能的促進(jìn)作用與抗生素相當(dāng)，并且隨著飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)，促生長(zhǎng)作用更加明顯。 與上述研究結(jié)果不盡一致的是，趙泮峰（2011）發(fā)現(xiàn)，中草藥添加劑對(duì)35 日齡斷奶幼兔試驗(yàn)前30 d 的平均日增重及料重比影響不顯著，并降低了斷奶幼兔平均日采食量。 王彩先等（2019）選用3 種不同中草藥組方日糧飼喂幼仔兔， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)中草藥I 組和III 組試驗(yàn)兔平均日增重與對(duì)照組差異不顯著， 中草藥II 組試驗(yàn)兔的平均日增重極顯著低于對(duì)照組、 中草藥I 組和III組，說明中草藥組方不同，效果也不盡相同。

目前關(guān)于植物精油單獨(dú)用于兔上探討生長(zhǎng)性能的研究很少，孫海濤等（2019）選用30 日齡新西蘭肉兔120 只， 隨機(jī)分為3 組， 分別為空白對(duì)照組、100 mg/kg 和200 mg/kg “有機(jī)酸+精油組”，結(jié)果發(fā)現(xiàn)“有機(jī)酸+精油”能顯著提高肉兔平均日增重，一定程度降低料重比。 該試驗(yàn)顯示“有機(jī)酸+精油”組合能改善肉兔的生長(zhǎng)性能，但未研究精油單獨(dú)的應(yīng)用效果。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示， 肉仔兔飼糧中添加復(fù)方中草藥和不同植物精油組平均日采食量、 平均日增重、料重比與抗生素組無顯著差異，中草藥組優(yōu)于2 個(gè)精油組，這與前人多數(shù)研究結(jié)果基本一致，中草藥和植物精油作為抗生素替代品的應(yīng)用價(jià)值得到進(jìn)一步證實(shí)。此外，本試驗(yàn)條件下中草藥和植物精油在影響動(dòng)物生長(zhǎng)性能上存在的差異， 提示了中草藥和精油中的活性成分組成及含量的不同會(huì)密切影響其在動(dòng)物機(jī)體的作用效果。

3.2 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔腹瀉、死亡率的影響 規(guī)?；B(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展導(dǎo)致斷奶仔兔的腹瀉呈上升趨勢(shì)，而據(jù)報(bào)道，在平均20%死亡兔群中，有70%以上系腹瀉病所致（董亞芳，1997），斷奶仔兔腹瀉死亡給生產(chǎn)者帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。導(dǎo)致幼兔腹瀉的病原微生物有細(xì)菌、病毒、寄生蟲、真菌及其毒素等，它們會(huì)影響胃腸結(jié)構(gòu)和功能。 禁抗前生產(chǎn)中多采用抗生素日糧預(yù)防腹瀉。

中草藥可激發(fā)調(diào)動(dòng)動(dòng)物機(jī)體內(nèi)在的抗菌因子，增強(qiáng)機(jī)體組織器官的抗菌能力來達(dá)到抑菌效果（Orban 等，1997）， 還可通過活性成分阻斷病毒復(fù)制中的核酸合成，起到抑制病毒復(fù)制的作用（傅文棟，2006），另外，中草藥中含有的驅(qū)蟲活性成分和酶還能驅(qū)除畜禽體內(nèi)的寄生蟲。植物精油含有的酚類、萜類物質(zhì)具有抗菌作用，可改變細(xì)菌細(xì)胞膜通透性而使細(xì)菌死亡，Gislene 等（2000）發(fā)現(xiàn)植物精油比抗生素有更好的抑制抗藥性細(xì)菌的效果。另據(jù)報(bào)道，植物精油還具有抗真菌作用，其機(jī)理主要是破壞真菌生命活動(dòng)中必不可少的巰基 （張高明，2015）。Giannenas 等（2012）發(fā)現(xiàn)日糧中添加植物精油后飼喂被球蟲感染的肉雞顯著優(yōu)于飼喂未添加植物精油的感染組。 因此，中草藥和植物精油在降低仔兔腹瀉死亡上存在重要的研究?jī)r(jià)值。

已有研究結(jié)果表明， 中草藥在一定程度上可改善仔兔的腹瀉死亡狀況， 可達(dá)到與抗生素使用效果相當(dāng)?shù)乃?。王慧等?017）的研究結(jié)果顯示，中草藥組和抗生素組斷奶幼兔的腹瀉率分別為6.7%和13.3%， 可見中草藥組斷奶幼兔腹瀉率顯著低于抗生素組， 在死亡率上中草藥組與抗生素組無顯著差異。 王彩仙等（2017）設(shè)計(jì)3 個(gè)不同中草藥組方用于獺仔兔日糧，結(jié)果發(fā)現(xiàn)中草藥II 組軟糞率顯著高于抗生素組， 中草藥I 組、III 組與抗生素組之間軟糞率差異不顯著； 抗生素組死亡率與各中草藥組之間差異不顯著， 但以中草藥II組最低。孫海濤等（2019）的研究表明，日糧中添加“有機(jī)酸+精油” 能降低肉兔的腹瀉率和死淘率；馮志華等（2007）在獺兔日糧中添加牛至油的結(jié)果顯示， 牛至油組和抗生素組腹瀉頻率較空白對(duì)照組分別降低33.33%和40.67%。 上述結(jié)果提示植物精油對(duì)家兔的腹瀉死亡有一定正面影響。 本試驗(yàn)結(jié)果顯示， 肉仔兔飼糧中添加復(fù)方中草藥和不同植物精油腹瀉指數(shù)、 腹瀉頻率和死亡率與抗生素組無顯著差異，中草藥組優(yōu)于2 個(gè)精油組。這與上述研究結(jié)果相似， 說明中草藥和植物精油在替代抗生素控制仔兔腹瀉死亡上存在正面作用。

3.3 復(fù)方中草藥和植物精油替抗對(duì)肉仔兔養(yǎng)分表觀消化率的影響 本試驗(yàn)條件下， 中草藥組和2 個(gè)精油組總能、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗灰分、鈣、磷表觀消化率與抗生素組均無顯著差異， 中草藥組的粗脂肪表觀消化率顯著高于抗生素組， 說明復(fù)方中草藥和植物精油替代抗生素在影響肉仔兔對(duì)養(yǎng)分的消化吸收上程度不同， 這與前人多數(shù)研究報(bào)道相似。左曉磊等（2015）發(fā)現(xiàn)，中草藥制劑組可提高生長(zhǎng)獺兔的粗蛋白質(zhì)、 粗脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，與化藥組效果相當(dāng)。王靜等（2015）分別在斷奶獺兔基礎(chǔ)日糧中添加1%、2%、3%、4%、5%復(fù)方中草藥， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)獺兔粗灰分表觀消化率無顯著影響，而對(duì)干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)的表觀消化率有顯著影響， 其中2%組干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)表觀消化率均顯著高于抗生素組。 馮志華等（2007）在斷奶獺兔日糧中添加牛至油發(fā)現(xiàn)， 除粗蛋白質(zhì)表觀消化率外，干物質(zhì)、粗纖維表觀消化率均較抗生素組有不同程度的提高。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下， 復(fù)方中草藥和植物精油在影響肉仔兔生長(zhǎng)性能、腹瀉、死亡率和養(yǎng)分表觀消化率方面均與抗生素效果相當(dāng)，提示在飼料禁抗后，這兩種添加劑在維持和提高肉兔產(chǎn)業(yè)養(yǎng)殖效益上具有重要的應(yīng)用價(jià)值。