血清SCC M-CSF Chemerin水平對(duì)宮頸上皮內(nèi)瘤變患者診斷評(píng)估價(jià)值

孫 莉, 宋玉榮, 胡 頻, 傅柳陶

(安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院, 安徽 合肥 230001)

宮頸上皮內(nèi)瘤變(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是宮頸癌的癌前病變,高危型HPV感染是引起本病的重要因素之一。多數(shù)CIN患者無特異表現(xiàn),部分患者可出現(xiàn)白帶異常、宮頸糜爛等癥狀和體征[1]。陰道鏡、病理學(xué)檢查是臨床診斷CIN的主要方法,但陰道鏡檢查受到操作人員的主觀因素影響較大,可能出現(xiàn)誤診或漏診。病理檢查客觀性強(qiáng),但獲取標(biāo)本時(shí)屬于有創(chuàng)操作,患者的依從性較差。而血清實(shí)驗(yàn)室檢查具有標(biāo)本獲取簡便、創(chuàng)傷小、結(jié)果較客觀等優(yōu)點(diǎn),在CIN的診斷中具有重要價(jià)值,但目前對(duì)于最佳血清學(xué)診斷指標(biāo)尚無統(tǒng)一認(rèn)識(shí)[2]。鱗狀細(xì)胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCC)是鱗狀上皮細(xì)胞膜產(chǎn)生的特異性腫瘤抗原,在宮頸癌前病變期即出現(xiàn)異常表達(dá)[3]。巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)具有多種生物學(xué)功能,參與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[4]。趨化素(Chemokinin; diagnosis,Chemrin)是一種脂肪因子,可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長、增殖[5]。本研究探討CIN患者血清SCC、M-CSF、Chemrin的變化及其對(duì)CIN的診斷價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院2019年4月至2022年4月經(jīng)病理學(xué)檢查確診的101例宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)患者作為CIN組、同期經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)為早期宮頸癌患者50例作為宮頸癌組,兩組患者的基線資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有較好的均衡性和可比性,詳見表1。納入標(biāo)準(zhǔn):①本研究診斷的早期宮頸癌患者、CIN患者診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《宮頸癌及癌前病變規(guī)范化診療指南(試行)》[6]中的標(biāo)準(zhǔn);②年齡19～59歲;③CIN患者及早期宮頸癌患者均經(jīng)過取宮頸組織進(jìn)行病理學(xué)活檢證實(shí),宮頸癌均為原位癌,病理學(xué)類型為鱗癌或腺癌;④本研究相關(guān)檢查實(shí)施前獲得研究對(duì)象的知情同意并簽署相關(guān)協(xié)議書,保護(hù)研究對(duì)象的隱私。排除標(biāo)準(zhǔn):①近3個(gè)月使用免疫抑制劑;②放化療病史;③宮頸環(huán)切手術(shù)病史;④合并其他類型惡性腫瘤患者;⑤伴有生殖系統(tǒng)及泌尿系統(tǒng)其他病毒感染;⑥HIV感染。

表1 兩組研究對(duì)象的基線資料情況

1.2血清指標(biāo)檢測(cè):在手術(shù)前、手術(shù)后3個(gè)月時(shí)抽取患者空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血標(biāo)本3mL,室溫靜置0.5h后離心處理。離心機(jī)參數(shù):轉(zhuǎn)速4000r/min,離心半徑6cm,離心時(shí)長10min。取血清采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清SCC、M-CSF、Chemerin水平,試劑盒為美國雅培公司產(chǎn)品。檢測(cè)儀器:羅氏E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.3HR-HPV病毒載量檢測(cè):于患者入院時(shí)采用專用細(xì)胞采集器采樣,將配套刷子置于宮頸口,均勻用力旋轉(zhuǎn)5周,取樣后置于試管中,采用第二代雜交捕獲技術(shù)定量檢測(cè)HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型等13種HPV-DNA病毒載量。檢測(cè)儀器:美國Digene公司DML2000基因雜交信號(hào)擴(kuò)大儀。標(biāo)準(zhǔn)陽性對(duì)照臨界值(CO)的比值(RLU/CO)表示樣本中HPV-DNA含量,檢測(cè)值≥1為陽性。

1.4手術(shù)方法:CIN患者于月經(jīng)干凈后3～7d后接受利普刀手術(shù)治療,術(shù)前至少7d禁止性生活,囑患者術(shù)前排空膀胱,向?qū)m頸周圍注射2%利多卡因行宮頸周圍局部麻醉?；颊呷“螂捉厥?常規(guī)消毒鋪巾,置入陰道鏡至宮頸,鏡下觀察病灶。采用碘染宮頸,宮頸部位涂抹碘伏,棕色為正常區(qū)域,芥末黃色或不著色為病變區(qū)域。置入利普刀,設(shè)置功率30～40W。對(duì)病變部位外緣3～5mm由內(nèi)向外行逆時(shí)針椎切,椎切深度為15～20mm,創(chuàng)面電凝止血。切除組織送病理檢查。

2 結(jié) 果

2.1CIN組和宮頸癌組患者的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值比較:宮頸癌組患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值顯著高于CIN組患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 CIN組和宮頸癌組患者的SCC M-CSF Chemerin測(cè)定值比較

2.2SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的價(jià)值:以病理學(xué)結(jié)果作為診斷金標(biāo)準(zhǔn),以患者病理學(xué)結(jié)果是否CIN作為狀態(tài)變量(否=0、是=1)血清SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值繪制ROC曲線,SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線下面積分別為0.906、0.846、0.791,見圖1、表3。

圖1 SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線

表3 SCC M-CSF Chemerin鑒別診斷CIN的診斷價(jià)值

2.3不同分期的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值比較:經(jīng)病理學(xué)檢查,101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,隨著CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐漸增高,各組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);表4。

表4 不同CIN分期的CIN患者SCC M-CSF Chemerin測(cè)定值比較

2.4不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值比較:HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF測(cè)定值高于陰性組患者,各組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HR-HPV DNA陽性與陰性患者的Chemerin水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表5。

表5 不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC M-CSF Chemerin測(cè)定值比較

2.5CIN患者手術(shù)前后的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值比較:在手術(shù)后3個(gè)月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值均降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表6。

表6 CIN患者手術(shù)前后的SCC M-CSF Chemerin測(cè)定值比較

3 討 論

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一,世界衛(wèi)生組織的調(diào)查發(fā)現(xiàn),每年約有宮頸癌新增病例53萬,中國的新發(fā)病例數(shù)約占全球總數(shù)的29%[7]。HPV感染是引起宮頸上皮內(nèi)瘤變的危險(xiǎn)因素,其中以HPV16、18最為常見,被稱之為高危型HPV感染。HPV感染后首先累及復(fù)層鱗狀上皮中的基底細(xì)胞,逐漸累及上層細(xì)胞而致感染到達(dá)基底層,引起復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞異常分化而致惡變[8]。基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),宮頸癌的發(fā)生歷經(jīng)癌前病變、早期浸潤、浸潤癌等三個(gè)階段。在癌前病變階段早期診斷和治療可有效控制或逆轉(zhuǎn)病情,避免進(jìn)展至宮頸浸潤癌[9]。目前臨床仍在不斷探索CIN的早期診斷方法。

血清學(xué)檢查取樣方便,結(jié)果相對(duì)客觀,還能避免因視野局限或取樣位置不準(zhǔn)確等造成的漏診或誤診。因此血清學(xué)檢測(cè)已成為臨床診斷CIN的新的研究熱點(diǎn)[10]。SCC是存在于子宮、肺、頭頸部等部位鱗狀上皮細(xì)胞的一種糖蛋白,在上述部位的鱗狀上皮細(xì)胞發(fā)生惡變后,SCC大量釋放至血中,因此血清SCC水平可作為鱗狀細(xì)胞癌的特異性診斷指標(biāo)之一[11]。M-CSF具有多種生理功能,低水平時(shí)能抑制腫瘤細(xì)胞生長,高水平時(shí)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移[12]。Chemerin可活化G蛋白耦聯(lián)受體,誘導(dǎo)免疫細(xì)胞向腫瘤區(qū)域遷移,參與腫瘤細(xì)胞免疫反應(yīng)以及腫瘤細(xì)胞增殖過程,可反映腫瘤細(xì)胞增殖情況。

本研究發(fā)現(xiàn),宮頸癌組患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值顯著高于CIN組患者。SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線下面積分別為0.906、0.846、0.791。上述結(jié)果提示,與宮頸癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值更低,可將上述指標(biāo)作為CIN的鑒別診斷指標(biāo)。這是由于宮頸癌患者鱗狀上皮細(xì)胞的破壞程度大于CIN,因此宮頸癌患者血中SCC水平相對(duì)更高。HPV除了會(huì)直接引起宮頸癌細(xì)胞增生外,還會(huì)激活體內(nèi)M-CSF,共建一個(gè)自分泌環(huán),促使CIN向?qū)m頸癌進(jìn)展,因此M-CSF高表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。宮頸癌患者病灶局部應(yīng)激性免疫反應(yīng)增強(qiáng),Chemerin被異常激活而在局部組織和血中高表達(dá)。

根據(jù)細(xì)胞非典型增生程度可將CIN分為3級(jí),Ⅰ期患者病情相對(duì)較輕,并可能自愈。Ⅱ期-Ⅲ期患者病情相對(duì)較嚴(yán)重[13]。本研究發(fā)現(xiàn),101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,隨著CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐漸增高。HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF測(cè)定值高于陰性組患者。該結(jié)果提示,CIN分級(jí)較高者血清SCC、M-CSF、Chemerin水平更高;HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF水平更高。這是由于CIN分期較高者異型細(xì)胞所占比例較大,核分裂相增多。HR-HPV DNA陽性者屬于高危感染,以HPV-16、18最常見,鱗狀上皮細(xì)胞惡變程度以及局部腫瘤細(xì)胞免疫反應(yīng)更加嚴(yán)重。

利普刀手術(shù)是臨床處理CIN的常用方法,本研究發(fā)現(xiàn),在手術(shù)后3個(gè)月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值均降低。該結(jié)果提示,利普刀對(duì)CIN具有良好的治療效果。手術(shù)后鱗狀上皮細(xì)胞惡變的組織被切除,局部病毒載量下降,腫瘤細(xì)胞免疫反應(yīng)減輕,因此SCC、M-CSF、Chemerin水平會(huì)顯著降低。

綜上所述,與宮頸癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測(cè)定值更低,但是隨著CIN分級(jí)增高、HR-HPV DNA陽性表達(dá)患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平更高,檢查SCC、M-CSF、Chemerin水平能鑒別診斷CIN與宮頸癌。