血清Kisspeptin-1對甲狀腺癌診斷和預(yù)后的臨床意義

李玲 劉莉

調(diào)查顯示,全球甲狀腺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢,已成為業(yè)界備受關(guān)注的腫瘤之一[1]。甲狀腺癌病理類型呈多樣性特征,且生物學(xué)特性多變,惡性程度高低不同,有些甲狀腺癌發(fā)病隱匿,其診斷、治療及預(yù)后均由不同[2]。因此,探討甲狀腺癌的臨床生物學(xué)特性和特異性診斷預(yù)后指標,對提高早期診斷的準確性、改善患者生存預(yù)后具有重要臨床意義。已有研究證實,人吻合素-1(kisspeptin-1,KISS-1)廣泛存在于機體組織中,在一些腫瘤細胞中發(fā)現(xiàn)KISS-1是一種抑癌基因,有望成為新的生物學(xué)標志物和治療靶點[3]?；诖?本研究對我院收治的105例甲狀腺癌患者臨床資料進行回顧性分析,并對血清Kisspeptin-1水平進行檢測,探討在甲狀腺癌診斷及判斷預(yù)后的價值,報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究經(jīng)我院倫理委員會審批并備案,回顧性分析2019年2月至2021年2月我院內(nèi)分泌科住院并接受甲狀腺癌手術(shù)治療105例患者作為研究對象(甲狀腺癌組),男26例,女79例;年齡23～76歲,平均年齡(49.03±15.27)歲。另選取同期在內(nèi)分泌科治療的70例甲狀腺良性病變者作為甲狀腺良性病變組和醫(yī)院體檢中心體檢的82例健康志愿者作為健康對照組。甲狀腺良性病變組男25例,女20例;年齡22～75歲,平均年齡(45.37±7.18)歲;健康對照組男24例,女28例;年齡20～72歲,平均年齡(40.85±6.08)歲;健康對照組排除惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、肝腎功能異常等疾患。3組研究對象一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準[4]:①術(shù)后經(jīng)病理學(xué)明確為甲狀腺癌;②既往未接受手術(shù)、放化療或其他抗癌治療;③患者臨床資料完整,術(shù)后均對患者進行隨訪5年且記錄完整;④告知研究方案,簽署知情同意書。

1.2.2 排除標準:①合并自身免疫系統(tǒng)疾病;②預(yù)計生存期≤6個月;③合并其他部位惡性腫瘤或遠處轉(zhuǎn)移;④伴有嚴重心腦血管疾病;⑤中途自行退出或預(yù)計無法正常隨訪。

1.3 方法

1.3.1 血清KISS-1檢測:采集3組受試者空腹肘靜脈血5 ml,甲狀腺癌組和甲狀腺良性病變組患者于入院后次日清晨,對照組于體檢當日。分別將血液標本放入促凝劑試管中靜置10 min,以1 500 r/min離心30 min(離心半徑800×g)獲得血清,置于-70℃冰箱內(nèi)保存,待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)檢測血清KISS-1水平,試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司,檢測操作參考試劑盒說明書。

1.3.2 資料收集:調(diào)閱甲狀腺癌患者電子病歷,收集性別、年齡、病理類型、腫瘤體積、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、TNM腫瘤分期等臨床資料,分析血清KISS-1與臨床資料的關(guān)系。再以腫瘤中位生存期作為觀察指標,分析甲狀腺癌患者生存預(yù)后的危險影響因素。

1.3.3 隨訪:對105例甲狀腺癌患者進行為期5年隨訪,隨訪至2021年2月,隨訪以門診復(fù)查、微信群、電話回訪等方式,初始日期以術(shù)后第2天計算,截止時間為患者失訪或死亡時間。記錄患者5年生存率及中位生存期。

2 結(jié)果

2.1 甲狀腺癌組、甲狀腺良性病變組和健康對照組血清KISS-1水平比較 甲狀腺癌組、甲狀腺良性病變組和健康對照組血清KISS-1水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=5.917,P<0.05)。兩兩比較顯示,甲狀腺癌組血清KISS-1水平高于甲狀腺良性病變組和健康對照組(t=13.358,5.297,P<0.001)。見表1。

表1 3組血清KISS-1水平比較 pg/ml,

2.2 血清KISS-1水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 按照甲狀腺癌患者血清KISS-1水平中位數(shù)1.29 pg/ml,分為血清KISS-1高水平組52例和低水平組53例。血清KISS-1表達水平與頸部淋巴轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑、腫瘤TNM分期、腫瘤分化程度有關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);血清KISS-1水平與患者性別比、年齡、病理類型等無關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 甲狀腺癌血清KISS-1與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 例(%)

2.3 血清KISS-1水平對甲狀腺癌的診斷價值 ROC曲線分析結(jié)果,血清KISS-診斷甲狀腺癌的AUC為0.908(95%CI 0.864～0.953,Z=17.978,P<0.05),根據(jù)最大約登指數(shù)0.734確定最佳截斷值1.79 pg/ml,敏感性和特異性為90.48%和82.93%;血清KISS-1甲狀腺良性病變者AUC為0.732(95%CI 0.652～0.811, Z=5.714,P<0.05),根據(jù)最大約登指數(shù)0.405確定最佳截斷值2.22 pg/ml,敏感性和特異性為85.71%和54.88%。見圖1。

圖1 血清KISS-1水平對甲狀腺癌和甲狀腺腺瘤良性病變的診斷效能

2.4 血清KISS-1與甲腺癌患者生存率的關(guān)系 105例甲狀腺癌患者均獲得5～60個月隨訪血清KISS-1低水平組和高水平組5年生存率分別為69.8%和86.5%,低水平組5年生存率明顯低于高水平組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.293,P=0.038)。見圖2。

圖2 不同血清KISS-1水平的甲狀腺癌患者的生存曲線分析

2.5 甲狀腺癌患者預(yù)后生存期單因素分析 血清KISS-1、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤TNM分期、腫瘤分化程度與甲狀腺癌患者預(yù)后顯著相關(guān)(均P<0.05)。見表3。

表3 甲狀腺癌患者預(yù)后生存期Cox單因素回歸分析

2.6 甲狀腺癌患者預(yù)后生存期Cox多因素回歸分析 將單因素Cox回歸分析中有統(tǒng)計學(xué)意義的指標引入多因素Cox回歸方程,結(jié)果顯示血清KISS-1降低(<1.29 pg/ml)、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度是甲狀腺癌不良預(yù)后的獨立預(yù)后因素(P<0.05)。見表4。

表4 甲狀腺癌患者預(yù)后生存期Cox多因素回歸分析結(jié)果

3 討論

甲狀腺癌不同組織學(xué)分級、不同病理類型的生物學(xué)行為具有較大差異性,對于不同類型的甲狀腺癌、良惡性程度的鑒別存在不足[5]。因此研究甲狀腺癌的臨床生物學(xué)特性,對提高早期診斷的準確性,改善患者預(yù)后及延長生存期具有重要臨床意義。隨著分子生物學(xué)的研究進步,惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機制得到探索。腫瘤基因是通過染色體的缺失、易位、重排、突變及基因擴增等途徑激活,使正常細胞轉(zhuǎn)化為惡性細胞。腫瘤的轉(zhuǎn)移與腫瘤基因激活或轉(zhuǎn)移抑制基因失活相關(guān),是多種因素綜合作用的結(jié)果[6]。國外報道稱不同組織變型的甲狀腺癌惡性分化程度、轉(zhuǎn)移侵襲能力呈梯狀分布[7],因此掌握甲狀癌的轉(zhuǎn)移、侵襲的生物機制對選擇治療方案、評價患者預(yù)后具有重要的臨床意義。

KISS-1基因定位染色體1q32-1q41,受體為G蛋白偶聯(lián)54,最初從黑色素瘤中分離出來并證實是一種抑癌基因。研究證實KISS-1廣泛存在于肝臟、胎盤、胰腺、骨骼肌等正常組織中,在機體代謝平衡發(fā)揮重要作用[8]。國內(nèi)外研究表明KISS-1低表達或缺失與結(jié)直腸癌、胰腺癌、食管癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移相關(guān),故認為KISS-1為抑癌基因[9]。邢家亮等[10]發(fā)現(xiàn)甲狀腺瘤KISS-1mRNA表達水平顯著高于正常組織,但低于甲狀腺癌組織,說明KISS-1可能在甲狀腺癌早期病變中發(fā)揮作用。張瓊珍等[11]將外源性KISS-1傳導(dǎo)至甲狀腺癌細胞株中,結(jié)果顯示大部分細胞停滯在Ⅰ～Ⅱ期,提示KISS-1可能通過抑制腫瘤細胞的細胞周期發(fā)揮抑癌作用。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測甲狀腺癌患者、良性病變者和健康對照組的血清KISS-1表達水平,結(jié)果顯示甲狀腺癌患者血清KISS-1水平顯著低于甲狀腺良性病變者和健康人群,提示甲狀腺癌發(fā)生可能與KISS-1表達缺失相關(guān),具有調(diào)控甲狀腺癌生物學(xué)行為作用。國外一項研究顯示對比早期胰腺癌細胞和晚期胰腺癌細胞株,發(fā)現(xiàn)晚期細胞株中KISS-1表達更低[12],表明胰腺癌進展可能與KISS-1基因表達缺失有關(guān)。本研究結(jié)果顯示隨著分化程度增加、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生血清KISS-1水平明顯較低,說明KISS-1可作為甲狀腺癌早期篩查及判斷預(yù)后的生物學(xué)指標。王文輝等[13]稱KISS-1延生肽激活G蛋白偶聯(lián)受體GPR54表達,達到干擾腫瘤細胞轉(zhuǎn)移和侵襲作用。故KISS-1/ GPR54信號傳導(dǎo)通路有望成為抗腫瘤治療的靶點。

對甲狀腺癌預(yù)后影響因素分析顯示,血清KISS-1降低、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化程度是甲狀腺癌不良預(yù)后的獨立預(yù)后因素,說明血清KISS-1高表達是甲狀腺癌預(yù)后的保護因素,可以作為甲狀腺癌預(yù)后評估的指標。生存曲線分析顯示,血清KISS-1>1.29 pg/ml的患者生存時間明顯優(yōu)于血清KISS-1≤1.29 pg/ml的患者,這表明血清KISS-1可作為甲狀腺癌預(yù)后評估指標之一。姜海斌等[14]對KISS-1表達降低,對腫瘤細胞的抑制作用明顯減退,導(dǎo)致惡性腫瘤細胞增殖,最終影響患者預(yù)后。

綜上所述,血清KISS-1水平在甲狀腺癌患者血清中顯著降低,低KISS-1水平是患者不良預(yù)后的獨立危險因素,血清KISS-1水平可作為甲狀腺癌早期診斷和預(yù)后評估的潛在指標之一。