支氣管哮喘患者外周血NLR、EOS 表達(dá)及臨床意義

尚鳳蘭

（河南省濮陽(yáng)市第三人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 濮陽(yáng) 457000）

支氣管哮喘是一種臨床較為常見(jiàn)的慢性氣道疾病，以發(fā)作性伴有哮鳴音的呼氣性呼吸困難為主要特征，患者常伴有反復(fù)發(fā)作的氣急、胸悶、喘息等癥狀[1]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，炎癥因子在支氣管哮喘的發(fā)病與發(fā)展中扮演重要角色，但不局限于單純的氣道炎癥反應(yīng)，而屬于全身性系統(tǒng)性的炎癥狀態(tài)[2]。因此，積極尋找一種或多種能夠反映支氣管哮喘患者炎癥反應(yīng)的指標(biāo)對(duì)評(píng)估病情進(jìn)展、制訂診療方案具有重要意義。中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）是一種臨床預(yù)測(cè)免疫狀態(tài)與慢性炎癥反應(yīng)的相關(guān)指標(biāo)，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）、慢性腎衰竭等炎癥相關(guān)疾病中均有異常升高趨勢(shì)[3]。嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）是白細(xì)胞的重要組成部分，具有殺傷細(xì)菌、寄生蟲(chóng)的功效，也是免疫與超敏反應(yīng)過(guò)程中的重要細(xì)胞之一，其釋放的顆粒中可引起組織損傷，并促進(jìn)炎癥的進(jìn)展。國(guó)內(nèi)外已有多項(xiàng)研究表明[4～5]，EOS 在支氣管哮喘患者中有明顯升高的趨勢(shì)。本研究觀察外周血NLR、EOS 在支氣管哮喘患者中的表達(dá)情況，并分析與肺功能、氣道炎癥反應(yīng)的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2021 年6 月至2022 年6 月河南省濮陽(yáng)市第三人民醫(yī)院接診的支氣管哮喘患者68 例作為支氣管哮喘組，男45 例，女23 例；年齡25～78 歲，平均年齡（47.63±8.32）歲；病程5～15 年，平均（8.25±1.32）年；吸煙史24 例，過(guò)敏史30 例。另選同期健康體檢者68 例作為健康對(duì)照組，男42 例，女26 例；年齡24～76 歲，平均年齡（46.72±7.21）歲。兩組性別、年齡等資料均衡性良好（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批號(hào)：河南省濮陽(yáng)市第三人民醫(yī)院倫理字2020000061 號(hào)）。

1.2 入組標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《支氣管哮喘防治指南（2016 年版）》[6]中支氣管哮喘的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，即反復(fù)發(fā)作的喘息、氣急，伴或不伴有胸悶或咳嗽，以夜間與晨間多發(fā)，且與接觸變異原、冷空氣刺激及上呼吸道感染等有關(guān)；發(fā)作時(shí)雙肺散在或彌漫性哮鳴音，呼氣相對(duì)延長(zhǎng)；上述癥狀與體征可經(jīng)治療或自行緩解。（2）年齡≥18 歲；（3）凝血功能與血小板功能正常；（4）簽署知情同意書(shū)，依從性較好。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠期或哺乳期；（2）其他因素導(dǎo)致胸悶、氣急等臨床癥狀表現(xiàn)；（3）近期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療或輸注血液制品；（4）精神功能障礙無(wú)法配合本研究。

1.3 研究方法

1.3.1 NLR、EOS 檢測(cè) 兩組均在就診當(dāng)天抽取空腹靜脈血8 ml，其中4 ml 置于抗凝管中送檢，采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)量中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞（EOS），并計(jì)算中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）。

1.3.2 肺功能 采用肺功能檢測(cè)儀檢測(cè)兩組第1 秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC）水平。

1.3.3 炎癥反應(yīng)指標(biāo) 將剩余4 ml 空腹靜脈血以3 000 r/min 離心處理10 min 后取血清置于冰箱中保存待檢，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、干擾素-γ（IFN-γ）水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 軟件分析處理數(shù)據(jù)。NLR、EOS、肺功能、氣道炎癥反應(yīng)指標(biāo)等計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)；外周血NLR、EOS 與支氣管哮喘患者肺功能、氣道炎癥反應(yīng)相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析NLR、EOS 對(duì)支氣管哮喘發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值，曲線下面積（AUC）評(píng)價(jià)：AUC≤0.50 視為無(wú)預(yù)測(cè)價(jià)值；0.50＜AUC≤0.70 視為預(yù)測(cè)價(jià)值較低；0.70＜AUC≤0.90 視為預(yù)測(cè)價(jià)值中等；AUC＞0.90 視為預(yù)測(cè)價(jià)值較高。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組NLR、EOS、肺功能、氣道炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較 支氣管哮喘組EOS、NLR、TNF-α 及IFN-γ 水平均較健康對(duì)照組高，F(xiàn)EV1、FVC 水平均較健康對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組NLR、EOS、肺功能、氣管炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較（）

表1 兩組NLR、EOS、肺功能、氣管炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較（）

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2.2 NLR、EOS 與肺功能、 氣道炎癥反應(yīng)指標(biāo)的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，NLR、EOS 與TNF-α、IFN-γ 水平呈正相關(guān)（r＞0，P＜0.05），與FEV1、FVC 呈負(fù)相關(guān)（r＜0，P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 NLR、EOS 與肺功能、氣管炎癥反應(yīng)指標(biāo)的相關(guān)性分析[r（P）]

2.3 NLR、EOS 對(duì)支氣管哮喘發(fā)生的價(jià)值分析 將NLR、EOS 作為檢驗(yàn)變量，將支氣管哮喘發(fā)生狀況作為狀態(tài)變量（1=發(fā)生，0=未發(fā)生），繪制ROC 曲線。結(jié)果顯示，NLR、EOS 及聯(lián)合預(yù)測(cè)支氣管哮喘發(fā)生的 AUC 分別為 0.816（0.739～0.893）、0.807（0.739～0.893）、0.840（0.792～0.926），具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。見(jiàn)表3、圖1。

圖1 NLR、EOS 對(duì)支氣管哮喘發(fā)生的價(jià)值分析

表3 NLR、EOS 對(duì)支氣管哮喘發(fā)生的價(jià)值分析

3 討論

支氣管哮喘是由EOS、中性粒細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞、氣道上皮等細(xì)胞及細(xì)胞組分共同參與的一種氣道慢性炎癥疾病。臨床以反復(fù)發(fā)作喘息、胸悶、氣急等癥狀為主要表現(xiàn)，大部分患者可自行緩解或經(jīng)治療后緩解，但隨著病程時(shí)間的延長(zhǎng)，可導(dǎo)致一系列氣道結(jié)構(gòu)的改變（氣道重塑），嚴(yán)重降低生活質(zhì)量[7]。隨著近年來(lái)臨床對(duì)支氣管哮喘的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，支氣管哮喘是一種異質(zhì)性疾病，但由于哮喘的病因、發(fā)病機(jī)制及病理特征與其他炎癥有所差異，常見(jiàn)的C 反應(yīng)蛋白、降鈣素原等指標(biāo)無(wú)法成為反映病情的首選標(biāo)志物[8]。

臨床研究表明，NLR、EOS 與臨床諸多炎癥相關(guān)疾病的嚴(yán)重程度存在一定關(guān)系，可反映疾病炎癥反應(yīng)水平及病情嚴(yán)重程度[9]。其中NLR 是臨床常用的反映外周血中炎癥的指標(biāo)，且對(duì)多種慢性炎癥型疾病的預(yù)后具有重要意義。中性粒細(xì)胞能夠分泌多種細(xì)胞因子，對(duì)上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多細(xì)胞功能起到調(diào)節(jié)作用[10]。淋巴細(xì)胞屬于白細(xì)胞的一種，在機(jī)體的抗感染、抗腫瘤等免疫過(guò)程中發(fā)揮重要作用。NLR結(jié)合上述兩者在炎癥方面的優(yōu)點(diǎn)，并能夠減少或避免因年齡、應(yīng)激反應(yīng)等其他因素的影響，提高單一檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值[11]。EOS 多存在于機(jī)體的血液、組織液中，其可參與Th2 細(xì)胞的免疫應(yīng)答，并在細(xì)胞因子的作用下可產(chǎn)生促炎因子與免疫調(diào)節(jié)因子[12]。本研究結(jié)果顯示，支氣管哮喘組EOS、NLR、TNF-α 及IFN-γ 水平均較健康對(duì)照組高，F(xiàn)EV1、FVC 水平均較健康對(duì)照組低，提示支氣管哮喘患者的EOS、NLR、TNF-α 及IFN-γ 表達(dá)異常升高，而FEV1、FVC 降低。分析原因可能是由于IFN-γ 為巨噬細(xì)胞激活因子，可對(duì)病原體起到破壞作用，從而參加哮喘的發(fā)生與發(fā)展；TNF-α 可促進(jìn)細(xì)胞的分化與生長(zhǎng)，并對(duì)急性期蛋白的合成起到有利作用，從而誘導(dǎo)氣道高反應(yīng)性；FVC 與FEV1是臨床常用評(píng)估肺功能的指標(biāo)，F(xiàn)VC可反應(yīng)最大呼氣量，F(xiàn)EV1是判定哮喘與COPD 的常用指標(biāo)，該指標(biāo)降低主要是因哮喘呼氣性呼吸困難所致[13]。經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析顯示，NLR、EOS 與TNF-α、IFN-γ 水平呈正相關(guān)，與FEV1、FVC 呈負(fù)相關(guān)。表明支氣管哮喘患者NLR、EOS 水平越高，肺功能越差，且炎癥反應(yīng)越嚴(yán)重。支氣管哮喘患者多會(huì)受到負(fù)性心理因素的影響導(dǎo)致抗原細(xì)胞功能降低，B細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體減少會(huì)降低機(jī)體的免疫功能，從而增加支氣管哮喘的發(fā)作風(fēng)險(xiǎn)[14]。劉紅紅等[15]對(duì)支氣管哮喘患者氣道炎癥與EOS 的PI3K/Akt 信號(hào)通路活化程度關(guān)系研究中發(fā)現(xiàn)，支氣管哮喘EOS 的PI3K/Akt 信號(hào)通路處于活化狀態(tài)，且與氣道炎癥呈正相關(guān)，均說(shuō)明EOS 與氣道炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。進(jìn)一步繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，NLR、EOS 及聯(lián)合預(yù)測(cè)支氣管哮喘發(fā)生的 AUC 分別為 0.816（0.739～0.893）、0.807（0.739～0.893）、0.840（0.792～0.926），具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。因此，臨床可對(duì)監(jiān)測(cè)NLR、EOS相關(guān)指標(biāo)水平的表達(dá)，針對(duì)表達(dá)異常者及時(shí)制訂防治措施，以降低支氣管哮喘發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，外周血NLR、EOS 與支氣管哮喘患者肺功能、氣道炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)能夠提高對(duì)支氣管哮喘患者的預(yù)測(cè)價(jià)值。