含庫(kù)拉索蘆薈成分的曬后皮膚用凝膠產(chǎn)品的臨床功效研究

饒治 應(yīng)亭良

探討一款含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠對(duì)曬后皮膚的修護(hù)、舒緩、保濕功效，使用日光模擬儀進(jìn)行紫外線誘導(dǎo)，在31 名志愿者背部形成曬后皮膚模型后使用該凝膠，通過測(cè)試皮膚角質(zhì)層水分含量、經(jīng)皮水分流失量、皮膚紅斑指數(shù)EI 值，同時(shí)結(jié)合專家評(píng)估（ 皮膚泛紅、皮膚光澤度、皮膚干燥），進(jìn)行人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)，驗(yàn)證該凝膠對(duì)曬后皮膚具有修護(hù)、舒緩、保濕等功效。

關(guān)鍵詞：庫(kù)拉索蘆薈；凝膠；曬后皮膚；臨床功效

皮膚是人體最大的器官，作為人體抵御外界侵害的第一道防線，具有保護(hù)、調(diào)節(jié)、分泌、保濕、屏障等功能。

皮膚易受各種物理、化學(xué)等外源性刺激影響，造成皮膚損傷。紫外線是最主要的外源性刺激之一。紫外線屬于太陽光中的不可見光，根據(jù)波長(zhǎng)分為UVA（320 ～ 400 nm）、UVB（280 ～ 320nm） 和UVC（200 ～ 280nm），UVC 被臭氧層與大氣層完全吸收，因此實(shí)際到達(dá)地球表面的是UVA（ 約占95%） 和UVB（ 約占5%）。當(dāng)人體皮膚受到超過耐受量的UVA 和UVB 照射后，會(huì)促使細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致真皮毛細(xì)血管擴(kuò)張充血、皮下組織水腫并激發(fā)炎癥，出現(xiàn)刺痛、紅斑、脫屑等不適癥狀[1-3]。紫外線波長(zhǎng)為290 ～ 320nm，對(duì)皮膚照射后，會(huì)引起皮膚發(fā)紅[4]，曬后幾分鐘到2 ～ 6h 開始出現(xiàn)曬傷反應(yīng)，16 ～24h 達(dá)到高峰，3 ～ 5d 逐漸消退，紅斑慢慢變成暗紅色，消退后皮膚脫屑并留下褐色的色素斑[5]。另外研究表明，紫外線輻射等因素可引起表皮屏障功能障礙，使表皮屏障變得更易滲透，經(jīng)皮水流失量增加[6-7]。在陽光的強(qiáng)烈照射下，即使做了防曬措施也無法完全避免紫外線的傷害，所以有必要使用針對(duì)曬后皮膚的護(hù)膚品，及時(shí)補(bǔ)充皮膚水分，緩解皮膚泛紅、干燥，修護(hù)皮膚屏障功能等。

蘆薈是一種多年生百合科蘆薈屬肉質(zhì)的草本植物，最早起源于南非，作為天然藥用植物，蘆薈已有幾千年的藥用歷史。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前世界范圍內(nèi)的蘆薈大約有500 多個(gè)品種[8]，我國(guó)《已使用化妝品原料目錄（2021 年版）》中共收錄蘆薈類原料26 項(xiàng)，主要包括的蘆薈品種有5 種，分別為庫(kù)拉索蘆薈（Aloe barbadensis）、安東蘆薈（Aloeandongensis）、東非蘆薈（Aloe perryi）、好望角蘆薈（Aloeferox）、木立蘆薈（Aloe arborescens），使用部位涵蓋葉和花。其中庫(kù)拉索蘆薈因其葉肉肥厚、營(yíng)養(yǎng)豐富、有效成分含量高且各項(xiàng)有效成分較為均衡而得到廣泛開發(fā)和應(yīng)用[9]。

蘆薈葉片中大約99.5% 為水分，其余主要為蒽醌類、多糖類、酶類、維生素等多種潛在的活性化合物。在對(duì)蘆薈功效的研究中，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗菌、抗炎以及促進(jìn)創(chuàng)面愈合等方面的研究居多[10]。庫(kù)拉索蘆薈發(fā)揮功能的主要物質(zhì)基礎(chǔ)是蘆薈多糖，大分子蘆薈多糖成膜性好，可在人體皮膚表面形成一層均勻的薄膜以減少水分蒸發(fā)并達(dá)到潤(rùn)膚的作用[11，12]，董銀卯等人使用蘆薈原汁制成一系列化妝品，并通過測(cè)量失水率的方法研究了蘆薈的保濕性，結(jié)果表明蘆薈具有較好的保濕性[13]；張浩等人采用斑馬魚切尾造模，觀察其炎癥細(xì)胞反向遷移及切尾再生情況，研究了庫(kù)拉索蘆薈大分子凝膠粉的修復(fù)功效，結(jié)果表明其在低濃度下能有效促進(jìn)炎癥細(xì)胞反向遷移及促進(jìn)斑馬魚斷尾再生，即具有出色的修復(fù)功效[14]。另外，庫(kù)拉索蘆薈凝膠能夠有效抑制透明質(zhì)酸酶作用，也能使角質(zhì)形成細(xì)胞在經(jīng)過UVB 照射后有效減少炎性細(xì)胞因子IL-1α、IL-8 的分泌。因此，庫(kù)拉索蘆薈凝膠能夠有效修復(fù)角質(zhì)形成細(xì)胞受UVB 照射形成的損傷，具備曬后修復(fù)功效[15]。

本研究中筆者開發(fā)了一款含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品，通過日光模擬儀在測(cè)試志愿者背部進(jìn)行紫外線誘導(dǎo)照射，形成曬后皮膚模型，在相應(yīng)區(qū)域使用該蘆薈凝膠后，通過測(cè)試皮膚角質(zhì)層水分含量、經(jīng)皮水分流失量、皮膚紅斑指數(shù)EI 值，同時(shí)結(jié)合專家評(píng)估（ 皮膚泛紅、皮膚光澤度、皮膚干燥），進(jìn)行人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)，驗(yàn)證該凝膠對(duì)曬后皮膚具有修護(hù)、舒緩、保濕等功效。

01 試驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠，主要由庫(kù)拉索蘆薈葉汁成分、甘油、泛醇和其他多種輔料構(gòu)成。按照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》第4 章的理化檢驗(yàn)方法對(duì)該配方進(jìn)行測(cè)試。

按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T 2874《護(hù)膚啫喱》“表1 感官、理化指標(biāo)” 的要求進(jìn)行穩(wěn)定性測(cè)試。按照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的要求通過了微生物、重金屬、二噁烷、苯酚等檢測(cè)，配方各成分經(jīng)過嚴(yán)格的安全評(píng)估。紫外日光模擬儀，型號(hào)601-300，美國(guó)Solarlight 公司；角質(zhì)層水分含量測(cè)試探頭Corneometer CM825、皮膚表面水分流失測(cè)試探頭Tewameter TM Hex、皮膚黑色素和血紅素測(cè)試探頭Mexameter MX18，德國(guó)Courage+Khazaka（CK） 公司。

1.2 受試者要求

本研究開展前已在檢測(cè)機(jī)構(gòu)功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室通過了內(nèi)部倫理審查，確保整個(gè)研究遵守倫理學(xué)原則要求，進(jìn)行試驗(yàn)之前完成了必要的產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)，確保整個(gè)測(cè)試流程在正常、可預(yù)見的情況下開展，保證受試者安全。同時(shí)本研究嚴(yán)格遵循《赫爾辛基宣言》，所有受試者了解整個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮瓦^程，并簽署知情同意書。

按照自愿原則選擇了31 例18 歲～ 60 歲健康受試者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：男女均可；既往無光感性疾病史，近期內(nèi)未使用影響光感性的藥物；受試者皮膚類型為I、II、III 型，即對(duì)日光或紫外線照射反應(yīng)敏感，照射后易出現(xiàn)曬傷而不易出現(xiàn)色素沉著者；同一受試者參加SPF 試驗(yàn)的間隔時(shí)間不應(yīng)短于兩個(gè)月；無過敏性疾病，無化妝品或其他外用制劑過敏史；受試部位的皮膚應(yīng)無胎記、色素沉著、炎癥、瘢痕、色素痣、多毛等現(xiàn)象。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠或哺乳期婦女，或近期有備孕計(jì)劃者；患有銀屑病、濕疹、異位性皮炎、嚴(yán)重痤瘡等皮膚病史者，或患有其他慢性系統(tǒng)性疾病者；近1 個(gè)月內(nèi)口服或外用過皮質(zhì)類固醇激素等抗炎藥物者；體質(zhì)高度敏感者；近2 個(gè)月內(nèi)參加過其他藥品/ 化妝品人體臨床試驗(yàn)者。

1.3 測(cè)試方法

測(cè)試環(huán)境為溫度20.5° C～21.2° C，濕度44.1%～55.4%RH。

受試者應(yīng)在試驗(yàn)環(huán)境中至少適應(yīng) 30 min。

具體試驗(yàn)流程如下：

（1）D0（ 正式測(cè)試前一天）。照射前，在背部選擇一測(cè)試區(qū)域，進(jìn)行基線數(shù)據(jù)采集和主觀評(píng)估。

（2）D0。MED 值（ 最小紅斑量） 測(cè)定在背部測(cè)試區(qū)域內(nèi)，用日光模擬儀取不同劑量的紫外線照射，16～24h 后觀察結(jié)果。

（3）D1（正式測(cè)試第一天）。誘導(dǎo)照射：根據(jù)觀察結(jié)果，確定受試者正常皮膚的MED 值。使用定位膜在受試者背部標(biāo)記3 個(gè)測(cè)試區(qū)域（ 試驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白組），區(qū)域大小均為3cm×3cm?？瞻捉M不做任何處理，在其他2個(gè)誘導(dǎo)區(qū)域內(nèi)按照1.5 倍MED 劑量進(jìn)行誘導(dǎo)照射。

（4）D1：使用樣品。在照射后，研究人員按照隨機(jī)表，分別于照射后即時(shí)、照射后4h（4h 數(shù)據(jù)采集后）、照射后24h（24h數(shù)據(jù)采集后）在受試者測(cè)試區(qū)域涂抹相應(yīng)受試物，用量為2.00±0.05mg/cm2。

（5） 樣品使用后數(shù)據(jù)采集。分別在第一次使用樣品后4h、6h、24h、48h，研究人員對(duì)受試者測(cè)試區(qū)域進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和主觀評(píng)估。

（6） 本次試驗(yàn)結(jié)束。

在整個(gè)測(cè)試期間測(cè)試區(qū)域不能清洗、不能沾水、不能涂抹其他產(chǎn)品或藥品，不能進(jìn)行跑步等引起出汗的劇烈運(yùn)動(dòng)或其他行為。

1.4 測(cè)量指標(biāo)

1.4.1 角質(zhì)層水分含量

角質(zhì)層水分含量通過電容法測(cè)定， 電容值越高，皮膚含水量越高，可反映產(chǎn)品的保濕功效[16]。使用角質(zhì)層水分含量測(cè)試探頭，每個(gè)區(qū)域測(cè)試6 次取平均值。

1.4.2 皮膚紅斑指數(shù)EI 值

皮膚的紅斑指數(shù)反映了皮膚毛細(xì)血管的狀況，直觀體現(xiàn)炎癥程度。皮膚紅斑指數(shù)越低，產(chǎn)品修護(hù)或者舒緩肌膚、改善皮膚紅斑反應(yīng)的效果越好[17，18]。使用皮膚黑色素和血紅素測(cè)試探頭，每個(gè)區(qū)域測(cè)試3 次取平均值。

1.4.3 經(jīng)皮水分流失量

經(jīng)皮水分流失（TEWL） 值反映水分從皮膚表面蒸發(fā)的量的大小，是評(píng)價(jià)皮膚屏障功能的生理參數(shù)之一[19]。

TEWL 值越低，說明經(jīng)皮水分流失越少，皮膚屏障功能越完善，反映產(chǎn)品修護(hù)肌膚的效果越好。使用皮膚表面水分流失測(cè)試探頭，每個(gè)區(qū)域測(cè)試3 次取平均值。

1.4.4 主觀評(píng)估

主觀評(píng)估是由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)人員進(jìn)行評(píng)估的，在實(shí)驗(yàn)室恒定光照（ 色溫5500～6500K 的日光燈管） 燈箱中進(jìn)行觀察。按照0～3 分分別對(duì)皮膚光澤度、泛紅、干燥進(jìn)行評(píng)分，分值越高，說明皮膚的光澤度越高，皮膚泛紅程度越嚴(yán)重，皮膚干燥程度越嚴(yán)重。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對(duì)測(cè)量參數(shù)進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)，包括數(shù)量、均值、標(biāo)準(zhǔn)差、最小值、中位值和最大值等，各采樣區(qū)域可單獨(dú)統(tǒng)計(jì)。計(jì)算測(cè)量參數(shù)的初始值/ 空白值與其他測(cè)量時(shí)間點(diǎn)/ 其他組間的數(shù)值，使用專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。如測(cè)試數(shù)據(jù)為正態(tài)分布，則采用t 檢驗(yàn)或方差分析方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；如測(cè)試數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布，則采用秩和檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

統(tǒng)計(jì)方法均采用雙尾檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水平α =0.05。

02 結(jié)果與討論

2.1 建模結(jié)果

在背部測(cè)試區(qū)域內(nèi)，用日光模擬儀取不同劑量的紫外線照射，16～24h 后觀察結(jié)果；以皮膚出現(xiàn)紅斑的最低照射劑量或最短照射時(shí)間為該受試者正常皮膚的MED。技術(shù)人員根據(jù)觀察結(jié)果，確定受試者正常皮膚的MED 值，然后根據(jù)隨機(jī)表對(duì)受試者試驗(yàn)組和陰性對(duì)照組測(cè)試區(qū)域進(jìn)行紫外線誘導(dǎo)照射，使用定位膜在受試者背部標(biāo)記3 個(gè)測(cè)試區(qū)域（試驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白組），區(qū)域大小均為3cm×3cm。空白組不做任何處理，在其他2 個(gè)誘導(dǎo)區(qū)域內(nèi)按照1.5 倍MED 劑量進(jìn)行誘導(dǎo)照射。

根據(jù)陰性對(duì)照組結(jié)果表明，使用紫外線誘導(dǎo)后24h內(nèi)，皮膚紅斑指數(shù)EI 值呈持續(xù)上升的趨勢(shì)，在照射后24h 達(dá)到高峰，照射后48h 開始下降，這與劉瑋[5] 的研究結(jié)果基本一致，可以證明建模達(dá)到預(yù)期效果。

2.2 皮膚角質(zhì)層含水量測(cè)試

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h、6h、24h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部角質(zhì)層水分含量顯著性分別升高21.82%、34.93%、10.67%、21.29%（P <0.001），陰性對(duì)照組背部角質(zhì)層水分含量顯著性分別降低15.95%、12.89%、9. 38%、7. 51%（P <0.001），空白組背部角質(zhì)層水分含量無明顯變化；各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)的組間相比，試驗(yàn)組顯著高于陰性對(duì)照組和空白組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著低于空白組（P <0.05）。結(jié)果表明，皮膚經(jīng)過紫外線照射，角質(zhì)層皮膚水分含量顯著下降，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品能夠有效提高皮膚水分含量，對(duì)曬后皮膚具有良好的保濕作用。

不同測(cè)試點(diǎn)組間角質(zhì)層水分含量測(cè)試結(jié)果變化如圖1 所示。

2.3 經(jīng)皮水分流失量測(cè)試

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h，6h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部經(jīng)皮水分流失量顯著性降低4.08%（P <0.01）、8.38%（P <0.001）、5.27%（P <0.001）， 陰性對(duì)照組背部經(jīng)皮水分流失量顯著性升高21.14%、16.79%、9.17%（P <0.001），空白組背部經(jīng)皮水分流失量無明顯變化；各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)的組間相比，在4h，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組（P <0.05），試驗(yàn)組和空白組無顯著性差異，陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。在6h、48h，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組和空白組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。首次使用測(cè)試樣品后24h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部經(jīng)皮水分流失量無明顯變化，陰性對(duì)照組背部經(jīng)皮水分流失量顯著性升高11.55% （P <0.001），空白組背部經(jīng)皮水分流失量無明顯變化；在24h，組間相比，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組（P <0.05），試驗(yàn)組和空白組無顯著性差異，陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。

結(jié)果表明，紫外線照射破壞皮膚屏障結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，導(dǎo)致經(jīng)皮水分流失量明顯上升，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品能夠有效降低經(jīng)皮水分流失量，有助于維護(hù)皮膚正常屏障功能，對(duì)曬后皮膚具有良好的修護(hù)效果。

不同測(cè)試點(diǎn)組間經(jīng)皮水分流失量測(cè)試結(jié)果變化如圖2 所示。

2.4 皮膚紅斑指數(shù)EI 值測(cè)試

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h、6h、24h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部皮膚紅斑指數(shù)EI 值顯著性分別升高39.14%、34.77%、45.32%、29.30%（P <0.001），陰性對(duì)照組背部皮膚紅斑指數(shù)EI 值顯著性分別升高52.95%、60.76%、74.85%、65.57% （P <0.001），空白組背部皮膚紅斑指數(shù)EI 值無明顯變化；各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)的組間相比，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組（P <0.05），試驗(yàn)組顯著高于空白組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。

結(jié)果表明，紫外線照射，皮膚紅斑反應(yīng)程度明顯增強(qiáng)，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品能夠顯著降低皮膚紅斑指數(shù)，對(duì)曬后皮膚具有良好的舒緩效果。

不同測(cè)試點(diǎn)組間皮膚紅斑指數(shù)測(cè)試結(jié)果均值如圖3所示。

2.5 主觀評(píng)估

2.5.1 皮膚泛紅評(píng)分

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h、6h、24h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部皮膚泛紅評(píng)分顯著性升高（P <0.001），陰性對(duì)照組背部皮膚泛紅評(píng)分顯著性升高（P <0. 001），空白組背部皮膚泛紅評(píng)分（ 主觀評(píng)估） 無明顯變化；各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)的組間相比，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組（P <0.05），試驗(yàn)組顯著高于空白組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。結(jié)果表明，紫外照射過后，皮膚明顯泛紅，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品能夠緩解皮膚 泛紅的情況，對(duì)曬后皮膚具有良好的舒緩效果。

不同測(cè)試點(diǎn)組間主觀評(píng)估（泛紅） 測(cè)試結(jié)果均值如圖4 所示。

2.5.2 皮膚干燥評(píng)分

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h、6h、24h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部皮膚干燥評(píng)分無明顯變化，陰性對(duì)照組背部皮膚干燥評(píng)分顯著性升高（P <0.001），空白組背部皮膚干燥評(píng)分無明顯變化；各測(cè)試時(shí)間點(diǎn)的組間相比，試驗(yàn)組顯著低于陰性對(duì)照組（P <0.05），試驗(yàn)組與空白組無顯著性差異，陰性對(duì)照組顯著高于空白組（P <0.05）。結(jié)果表明，紫外照射過后，皮膚水分含量降低，明顯變得干燥，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品能夠緩解皮膚干燥的情況，對(duì)曬后皮膚具有良好的舒緩效果。

不同測(cè)試點(diǎn)組間主觀評(píng)估（干燥） 測(cè)試結(jié)果均值如圖5 所示。

2.5.3 皮膚光澤度評(píng)分

首次使用測(cè)試產(chǎn)品后4h、6h、24h、48h，與使用前相比，試驗(yàn)組背部皮膚光澤度評(píng)分顯著性降低（P <0.001），陰性對(duì)照組背部皮膚光澤度評(píng)分顯著性降低（P <0.001），空白組背部皮膚光澤度評(píng)分無明顯變化；在24h、48h，組間相比，試驗(yàn)組顯著低于空白組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著低于實(shí)驗(yàn)組（P <0.05），陰性對(duì)照組顯著低于空白組（p <0.05）。

結(jié)果表明，紫外照射過后，皮膚的光澤度下降，變得暗沉。

即便如此，使用含庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)組，光澤度評(píng)分還是顯著高于陰性對(duì)照組，說明該凝膠產(chǎn)品能夠提升皮膚的光澤度，改善曬后皮膚的暗沉，對(duì)曬后皮膚具有良好的修護(hù)效果。

不同測(cè)試點(diǎn)組間主觀評(píng)估（光澤） 測(cè)試結(jié)果均值如圖6 所示。

03 結(jié)論

紫外線損傷，是由于皮膚在紫外線特別是UVB 的照射下，局部出現(xiàn)的紅斑、角質(zhì)層破壞等微觀損傷，也是皮膚眾多微觀炎癥和損傷中較為常見的微觀損傷。蘆薈作為一種具有漫長(zhǎng)種植史的草本植物，在很多地方被當(dāng)?shù)厝擞米鞅窈托迯?fù)方面的藥材。本研究探討了含有庫(kù)拉索蘆薈成分的凝膠對(duì)于曬后皮膚的修護(hù)、舒緩、保濕等功效，開展了人體功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)。結(jié)果表明：該凝膠產(chǎn)品針對(duì)曬后皮膚普遍存在的干燥、泛紅、暗沉以及屏障受損的情況，具有顯著的改善效果，有助于保持皮膚水分含量，改善皮膚刺激狀態(tài)，減少水分流失，維護(hù)皮膚正常的屏障功能。

今后將庫(kù)拉索蘆薈作為功效成分添加到曬后修復(fù)化妝品中，具有廣闊的應(yīng)用前景。