胺鮮脂對(duì)箱根草組培快繁的影響

摘??? 要：為解決箱根草組培苗增殖和生根效率低難以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)的問題，將胺鮮脂與6-BA、NAA和IBA復(fù)配使用，進(jìn)行了箱根草芽增殖和生根培養(yǎng)的試驗(yàn)研究。結(jié)果表明：當(dāng)添加4.0 mg·L-1胺鮮脂時(shí)，芽增殖可達(dá)11.3倍，株高達(dá)到2.5 cm以上的苗占比69.0%，表現(xiàn)效果最佳；添加1.0 mg·L-1胺鮮脂時(shí)，促進(jìn)生根效果最佳，生根率達(dá)到100%，培養(yǎng)25 d時(shí)具有10條及以上根數(shù)的苗占比達(dá)73.3%。將6-BA、NAA和IBA與胺鮮脂復(fù)配使用后，有效促進(jìn)了其效能發(fā)揮，使箱根草不定芽增殖倍數(shù)由6.7增加到11.3，增殖培養(yǎng)后符合生根標(biāo)準(zhǔn)的苗增加134.2%，生根率提高達(dá)45.6%，使箱根草的增殖、生長(zhǎng)和生根效果更好，大幅提高了生產(chǎn)效率和苗的質(zhì)量，使生產(chǎn)成本降低66.5%。上述研究成功建立箱根草組培快繁技術(shù)體系，實(shí)現(xiàn)了低成本生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗。

關(guān)鍵詞：胺鮮脂；益培靈；箱根草；芽增殖；生根培養(yǎng)

中圖分類號(hào)： Q943.1?????? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A?????? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006－6500.2023.08.001

Effect of Diethyl Aminoethyl Hexanoate on Tissue Culture and Rapid Propagation of Hakonechloa macra 'Aureola'

WEI Jinli

（Beijing Florascape Company Limited， Beijing 100093， China）

Abstract：In order to solve the problem of low proliferation and rooting efficiency in tissue culture seedlings of Hakonechloa macra 'Aureola'， which is difficult to achieve large-scale production， a combination of 6-BA， NAA， and IBA with DA-6 was used to conduct experimental studies on bud proliferation and rooting culture. The results showed that when 4.0 mg·L-1 DA-6 was added， the proliferation of buds could reach 11.3 times， and 69.0% of seedlings with a height of over 2.5 cm accounted for the best performance; When 1.0 mg·L-1 DA-6 was added， the best effect was to promote rooting， with a rooting rate of 100%. After 25 days of cultivation， the proportion of seedlings with 10 or more roots reached 73.3%. After the combination of 6-BA， NAA， and IBA with DA-6， their efficiency was effectively promoted， resulting in an increase in the proliferation rate of adventitious buds from 6.7 to 11.3. After proliferation and cultivation， the number of seedlings that meet the rooting standards increased by 134.2%， and the rooting rate increased by 45.6%. This improved the proliferation， growth， and rooting effects of Hakonechloa macra 'Aureola'， significantly improving production efficiency and seedling quality， and reducing production costs by 66.5%. This study successfully establishes a tissue culture and rapid propagation technology system for Hakonechloa macra 'Aureola'， achieving low-cost production of high-quality seedlings.

Key words：DA-6; yipeiling; Hakonechloamacra 'Aureola'; bud proliferation; rooting

箱根草（Hakonechloa macra 'Aureola'）是原產(chǎn)于日本箱根地區(qū)的一種禾本科多年生植物。葉片有金色和綠色相間的條紋，具有很高的觀賞價(jià)值，近年來(lái)備受愛好者和園藝工作者們的青睞，廣泛應(yīng)用于花境、庭院造景和盆栽家庭園藝中。因其自然不結(jié)實(shí)而沒有種子，一般只能采取分株的常規(guī)方式來(lái)繁殖，又因其生長(zhǎng)很慢繁殖效率低而使得市場(chǎng)上一物難求，價(jià)格昂貴，故而采用組培技術(shù)實(shí)現(xiàn)快速繁殖勢(shì)在必行。箱根草雖為禾本科的一種觀賞草，因其莖稈纖細(xì)且木質(zhì)化程度高，在組培繁殖過程中生長(zhǎng)和增殖緩慢，尤其是根系形成緩慢且少，甚至不生根，生產(chǎn)繁殖效率低，成本高昂，實(shí)現(xiàn)規(guī)模化量產(chǎn)已成為亟待解決的難題。

胺鮮脂（diethyl aminoethyl hexanoate，簡(jiǎn)稱：DA-6）是美國(guó)科學(xué)家在20世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)的一種具有廣譜性和突破性效果的高效能植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。它作用于植物時(shí)，能提高過氧化物酶和硝酸還原酶的活性，提高葉綠素的含量加快光合速度，調(diào)節(jié)體內(nèi)養(yǎng)分的平衡，促進(jìn)植物細(xì)胞的分裂和伸長(zhǎng)，促進(jìn)植物地上部分和根系的發(fā)育，因其獨(dú)特的多功能作用，在農(nóng)業(yè)上得到廣泛應(yīng)用。如王晨霞等[1]用生物活性物質(zhì)提高玉米種子萌發(fā)及抗鹽能力試驗(yàn)結(jié)果表明，胺鮮脂對(duì)胚根的促生長(zhǎng)作用最佳；鮑榮粉等[2]用胺鮮脂噴施毛桃幼苗，胺鮮脂能夠提高毛桃的抗逆性，從而促進(jìn)生長(zhǎng)。另外，將胺鮮脂和農(nóng)藥以及一些植物激素一起復(fù)配施用，可用于解藥害[3-4]、提高化肥利用率[5]、果品儲(chǔ)藏表皮處理[6]、調(diào)控育苗質(zhì)量[7]、促進(jìn)種子萌發(fā)[8-9]、改善土壤細(xì)菌群落[10]、增產(chǎn)[11-12]等各個(gè)方面，均有促進(jìn)作用，取得了良好效果。但是，截至目前，胺鮮脂在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用，在國(guó)內(nèi)僅有1次報(bào)道[13]。

本研究擬將胺鮮脂應(yīng)用于箱根草的組培繁殖中，與6-BA、NAA和IBA復(fù)配使用，以促進(jìn)苗的增殖、生根和生長(zhǎng)，提高箱根草的組培快繁效率，實(shí)現(xiàn)低成本規(guī)模化量產(chǎn)。研究結(jié)果可為胺鮮脂在更多植物的組培生產(chǎn)和更多領(lǐng)域的應(yīng)用提供參考，也可作為一些植物組織培養(yǎng)規(guī)?；a(chǎn)過程中提質(zhì)增效降本的借鑒方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

植物材料：箱根草的組培瓶苗。

藥物試劑：純度為98%的胺鮮脂。

培養(yǎng)基：以前期篩選出的最佳增殖培養(yǎng)基（MS添加適宜濃度的6-BA和NAA）為基礎(chǔ)增殖培養(yǎng)基；以前期篩選出的最佳生根培養(yǎng)基（1/2MS添加適宜濃度的IBA和NAA）為基礎(chǔ)生根培養(yǎng)基。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 不同濃度胺鮮脂對(duì)芽增殖的影響 以箱根草的增殖苗為材料，在基礎(chǔ)增殖培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，分別添加1.0、2.0、4.0、6.0 mg·L-1不同濃度的胺鮮脂（胺鮮脂添加量下同），與6-BA和NAA復(fù)配使用進(jìn)行增殖培養(yǎng)，以不添加胺鮮脂的基礎(chǔ)增殖培養(yǎng)基為對(duì)照，每個(gè)處理5瓶，每瓶接種7株，重復(fù)3次，培養(yǎng)45 d將苗進(jìn)行切分轉(zhuǎn)接，轉(zhuǎn)接后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)結(jié)果。

1.2.2 不同濃度胺鮮脂對(duì)生根的影響 以箱根草大小適宜生根培養(yǎng)的苗為材料，在基礎(chǔ)生根培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加不同濃度水平的胺鮮脂，將胺鮮脂與基礎(chǔ)生根培養(yǎng)基中添加的生根劑NAA和IBA復(fù)配使用進(jìn)行生根培養(yǎng)，以不添加胺鮮脂的基礎(chǔ)生根培養(yǎng)基為對(duì)照，每個(gè)處理5瓶，每瓶接種15株，重復(fù)3次，分別于培養(yǎng)15、25 d時(shí)觀察統(tǒng)計(jì)生根結(jié)果。

1.2.3 不同濃度胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)的影響 將生根培養(yǎng)30 d的苗，從培養(yǎng)瓶中取出后，目測(cè)法測(cè)量根數(shù)和根長(zhǎng)，尤其是平均根長(zhǎng)的測(cè)量是以目測(cè)絕大多數(shù)的根所達(dá)到的長(zhǎng)度為準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)量記錄數(shù)據(jù)，根長(zhǎng)精確到1 mm。然后用衛(wèi)生紙包住苗的根基部，稍微用力擠壓，使衛(wèi)生紙充分接觸苗根基部，反復(fù)更換3～4次新紙，吸干苗根基部帶有的培養(yǎng)基和水分，就進(jìn)行鮮質(zhì)量的稱量，稱量工具為范圍220 g可讀性0.1 mg的電子分析天平，稱量數(shù)值讀取到0.1 mg，下同。鮮質(zhì)量稱完后，將用報(bào)紙包起來(lái)的苗放入80 ℃的干燥箱中烘干12 h，在干燥箱中冷卻8 h后取出，進(jìn)行干質(zhì)量的稱量，1次取出1個(gè)處理的5個(gè)重復(fù)稱量完后，再取出稱量下一個(gè)處理。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 18.0和Excel 2010軟件工具對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、統(tǒng)計(jì)和分析，并對(duì)差異顯著指標(biāo)進(jìn)行 Duncan 檢驗(yàn)和比較，不同處理間采用單因素比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度胺鮮脂對(duì)芽增殖的影響

在添加不同濃度胺鮮脂的增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)45 d后，將苗進(jìn)行切分轉(zhuǎn)接。轉(zhuǎn)接時(shí)，將高度達(dá)到2.5 cm以上并且葉片數(shù)及大小規(guī)格符合生根標(biāo)準(zhǔn)的苗接入生根培養(yǎng)基，將不符合生根標(biāo)準(zhǔn)的小芽苗接入增殖培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)接后，經(jīng)過數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析得出，在增殖培養(yǎng)基中添加胺鮮脂后，對(duì)箱根草的芽增殖和生長(zhǎng)都有明顯地促進(jìn)作用，隨著胺鮮脂添加濃度由低到高的遞增，苗的增殖倍數(shù)也隨之增高，尤其是濃度由1.0 mg·L-1增加到2.0 mg·L-1時(shí)芽的增殖倍數(shù)顯著增加；當(dāng)濃度由 2.0 mg·L-1增加到4.0 mg·L-1時(shí)芽的增殖數(shù)量達(dá)到最高值；當(dāng)濃度繼續(xù)增加到6.0 mg·L-1時(shí)，芽的增殖數(shù)量出現(xiàn)了減少的現(xiàn)象，說(shuō)明芽的增殖受到了抑制，但差異不顯著。由轉(zhuǎn)接出的增殖苗和生根苗的數(shù)量可以得出，隨著胺鮮脂添加濃度的增加，可接種生根的大苗數(shù)量和占比在逐漸增加，小苗的占比正好相反，體現(xiàn)出胺鮮脂的濃度越高越有利于促進(jìn)苗的生長(zhǎng)（表1）。

2.2 不同濃度胺鮮脂對(duì)生根的影響

從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，適當(dāng)濃度的胺鮮脂時(shí)對(duì)箱根草根的形成與生長(zhǎng)促進(jìn)作用顯著。當(dāng)濃度過高時(shí)抑制作用明顯。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，高濃度的胺鮮脂對(duì)根形成和生長(zhǎng)的抑制作用逐漸減輕，并且最初添加的胺鮮脂濃度越大，生根率及根的數(shù)量和長(zhǎng)度的變化越大，對(duì)根的形成與生長(zhǎng)的促進(jìn)作用表現(xiàn)越明顯，根的長(zhǎng)度也越長(zhǎng)。

由表2可知，培養(yǎng)15、25 d時(shí)，處理A的生根率均達(dá)到100%，具有10條及以上根數(shù)苗的占比均高于其他各處理，效果最佳；處理B的生根率也達(dá)到100%，但具有10條及以上根數(shù)苗的占比略低于處理A， 效果次之；處理C培養(yǎng)15 d時(shí)的生根率為86.7%，顯著低于處理B，具有10條及以上根數(shù)苗的占比也顯著低于B；處理D的生根率均明顯高于CK，但在培養(yǎng)15 d時(shí)，具有10條及以上根數(shù)苗的占比相較CK低很多，25 d時(shí)明顯增多，但仍低于CK，表現(xiàn)出了胺鮮脂濃度過高時(shí)對(duì)根系生長(zhǎng)的抑制性，但隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)抑制性逐漸減弱。

由表3可知，培養(yǎng)15 d時(shí)，處理A的平均根長(zhǎng)最長(zhǎng)，顯著長(zhǎng)于其他處理，效果最佳；從處理B到C和D逐漸變短，對(duì)根生長(zhǎng)的促進(jìn)作用逐漸減弱，但相較CK來(lái)說(shuō)仍表現(xiàn)出了明顯促進(jìn)作用。培養(yǎng)25 d時(shí)，各處理的平均根長(zhǎng)整體有所增長(zhǎng)，均長(zhǎng)于15 d，此時(shí)處理D的平均根長(zhǎng)為最長(zhǎng)，效果最佳；處理A的平均根長(zhǎng)長(zhǎng)于對(duì)照和處理B。不論培養(yǎng)時(shí)間是15 d還是25 d，添加了胺鮮脂的各處理苗的根均長(zhǎng)于對(duì)照，表現(xiàn)出明顯的促進(jìn)根生長(zhǎng)的作用，并且培養(yǎng)時(shí)間從15 d到25 d之間根長(zhǎng)隨著胺鮮脂濃度越高變化越大。

2.3 不同濃度胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)及物質(zhì)的積累有著良好的促進(jìn)作用。并且，隨著胺鮮脂濃度的增加，對(duì)苗生長(zhǎng)及物質(zhì)積累的促進(jìn)作用也越顯著。

由表4可知，添加了胺鮮脂的處理，苗生長(zhǎng)的物質(zhì)積累均高于對(duì)照。干質(zhì)量從處理A到B、C和D逐步增高，隨著胺鮮脂添加濃度的增加呈逐漸上升趨勢(shì)，且濃度越高變化越大，干物質(zhì)積累越多。鮮質(zhì)量從處理A到B有明顯的增加，處理C有所降低，除略微高于CK之外低于其他各處理，處理D為最大，顯著高于其他處理。

3 討論與結(jié)論

3.1 胺鮮脂對(duì)苗增殖和生根的影響

由不同濃度胺鮮脂對(duì)箱根草的增殖和生根影響的試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在苗增殖階段，胺鮮脂的促進(jìn)作用趨勢(shì)隨著胺鮮脂濃度的增加，呈先上升后下降趨勢(shì)，在胺鮮脂濃度為4.0 mg·L-1時(shí)增殖效果最佳，而苗的高度隨著胺鮮脂的濃度增加呈上升趨勢(shì)，這與劉松年等[7]在不同濃度胺鮮脂對(duì)辣椒幼苗生長(zhǎng)的影響結(jié)果一致；生根階段，胺鮮脂的作用濃度與增殖階段有所不同，在胺鮮脂濃度為1.0 mg·L-1時(shí)生根效果達(dá)到最佳，之后呈下降趨勢(shì)。另外，在一定時(shí)間內(nèi)，當(dāng)胺鮮脂的濃度達(dá)到一定值時(shí)，對(duì)苗生長(zhǎng)及生根的促進(jìn)作用達(dá)到最佳效果；而當(dāng)胺鮮脂的濃度超過這個(gè)臨界值后，就會(huì)對(duì)芽的形成和根生長(zhǎng)促進(jìn)作用減弱，呈下降趨勢(shì)甚至?xí)鸬揭种谱饔?；隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，這種抑制現(xiàn)象會(huì)逐漸減輕至消失，并且表現(xiàn)出隨著胺鮮脂濃度越高促進(jìn)作用變化越顯著，充分體現(xiàn)出胺鮮脂對(duì)植株和根系生長(zhǎng)的促進(jìn)作用。

3.2 胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)物質(zhì)積累的促進(jìn)

由胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，隨著胺鮮脂添加量逐漸增加，苗生長(zhǎng)物質(zhì)的積累呈逐步上升趨勢(shì)。從整體上來(lái)說(shuō)，胺鮮脂對(duì)苗生長(zhǎng)尤其是干物質(zhì)的積累增加有著明顯的促進(jìn)作用，這一結(jié)果與王蘭英等[14]將胺鮮脂應(yīng)用于麥冬的塊根膨大促進(jìn)效應(yīng)中取得顯著的促進(jìn)效果相一致。

3.3 添加胺鮮脂對(duì)生產(chǎn)成本的影響

在培養(yǎng)基中添加了胺鮮脂后，苗芽增多的同時(shí)也較以前變粗壯了[15]，苗的高度達(dá)到接種生根規(guī)格需求的生長(zhǎng)時(shí)間也有所變短，生根培養(yǎng)15～20 d就能生根出苗，較之前培養(yǎng)生根的時(shí)間縮短10～15 d，并且只要高度達(dá)到要求，即使苗是叢生的狀態(tài)生根效果也很好，完全改變了以前帶有叢生芽時(shí)生根很困難或者不生根的狀態(tài)，充分體現(xiàn)出胺鮮脂對(duì)生根的促進(jìn)作用。這一點(diǎn)驗(yàn)證了齊德強(qiáng)等[16]將胺鮮脂用于水稻機(jī)插秧根系形態(tài)及抗性生理的影響試驗(yàn)中所取得的結(jié)果。另外，添加胺鮮脂后，在有效促進(jìn)苗增殖、生根和生長(zhǎng)的同時(shí)，對(duì)箱根草的花葉性狀沒有任何影響。這些綜合的利好因素，使箱根草增殖效率提高達(dá)69.7%，生根率提高達(dá)45.6%，增殖和生根效果更好；添加胺鮮脂后，增殖培養(yǎng)后符合生根標(biāo)準(zhǔn)的苗增加134.2%，大幅提高了苗的質(zhì)量和生產(chǎn)效率，生產(chǎn)成本降低66.5%，實(shí)現(xiàn)了高效低成本規(guī)?；慨a(chǎn)。

在將研究驗(yàn)結(jié)果推廣應(yīng)用到其他植物種類中時(shí)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胺鮮脂的最佳作用濃度因植物種類不同而不同。另外，胺鮮脂對(duì)植物生根以及生長(zhǎng)的促進(jìn)作用與6-BA、NAA、IBA這樣的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑之間是否存在著相同與不同之處，還有待進(jìn)一步研究探討。

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收稿日期：2023-06-15

作者簡(jiǎn)介：魏進(jìn)莉（1975—），女，寧夏固原人，高級(jí)工程師，主要從事植物組織培養(yǎng)以及脫毒技術(shù)和工廠化生產(chǎn)技術(shù)研究。