腎小管上皮細(xì)胞與NGAL聯(lián)合檢測在腎小管損傷早期診斷中的價值

裘洪梅，盧發(fā)強

（1.大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116622；2.大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院，遼寧 大連 116600）

急性腎損傷（AKI）是全球性的公共衛(wèi)生問題，大量的臨床和實驗研究證實，AKI 能夠轉(zhuǎn)變?yōu)槁阅I臟疾?。–KD），可以將AKI 和CKD 看作是一個連續(xù)的疾病過程。有研究表明，腎小管損傷在CKD 和AKI 的腎功能惡化中起著重要作用[1]。以往對于糖尿病、高血壓等疾病引起的腎臟疾病的研究主要集中在腎小球病變方面，近年來隨著相關(guān)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)腎小管功能異常是腎臟疾病的重要評估指標(biāo)，早期腎損傷中，腎小管病變先于腎小球功能變化出現(xiàn)[2]。早期的腎臟損傷是可逆的，一旦進(jìn)入中晚期則不可逆轉(zhuǎn)。尋找高靈敏度、高特異度的腎損傷標(biāo)志物，有利于及時診斷、治療腎臟疾病，這會在一定程度上延緩其進(jìn)展。近幾年，源于腎小管的腎損傷標(biāo)志物的相關(guān)研究越來越多[3]，如β2- 微球蛋白、N- 乙酰-P-D- 葡萄糖苷酶、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂 蛋 白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）等。NGAL 是AKI 的早期診斷標(biāo)志物，是評估腎小管損傷的新型糖蛋白，也是反映腎小管損傷的新型生物標(biāo)志物[4]。NGAL 的升高要快于血肌酐（serum creatinine，SCr），較其他指標(biāo)更早出現(xiàn)，能夠準(zhǔn)確判斷患者的腎功能及預(yù)后[5]。腎小管上皮細(xì)胞（tubular epithelial cells，TEC）是腎單位重要的結(jié)構(gòu)組成之一，對維持腎臟正常生理功能具有重要作用[6]，同時也是尿沉渣中可以直接反映腎小管損傷的一項指標(biāo)，是腎損傷的一個窗口[1]。本研究通過觀察分析尿液NGAL與TEC 聯(lián)合檢測在腎小管損傷早期診斷中的價值，為早期腎損害的臨床診斷提供一定的客觀依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2020 年1 月至10 月大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院收治的腎臟病患者110 例納入病例組，選取同期健康體檢者100 例納入對照組。病例組患者的病情符合腎臟病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)相關(guān)檢查確診。對照組患者無糖尿病、原發(fā)性高血壓、慢性腎炎、AKI 等病史。

1.2 方法

收取研究對象的晨起第一次中段尿10 mL，置于塑料離心試劑管中混勻，按照希森美康UF-5000 全自動尿液有形成分分析儀的操作說明檢測TEC，然后以1500 r/min 的轉(zhuǎn)速將尿液標(biāo)本離心5 min，取上清液用于尿NGAL 的檢測，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）并按照試劑說明書測定尿NGAL 水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察并比較兩組尿液中的TEC 數(shù)量及尿NGAL水平。統(tǒng)計并比較TEC、NGAL 單獨及聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Spearman 相關(guān)性分析法分析TEC、NGAL 與腎小管損傷的相關(guān)性，通過靈敏度、特異度分析評價兩種生物學(xué)標(biāo)志物單獨及聯(lián)合檢測對腎小管損傷的診斷價值，以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組尿液中TEC 數(shù)量及尿NGAL 水平的對比

病例組尿液中的TEC 數(shù)量為（17.45±3.02）個/HP，尿NGAL 水平為（2.78±0.8）μg/L ；對照組尿液中的TEC 數(shù) 量 為（2.79±2.67）個/HP，尿NGAL 水平為（1.06±0.09）μg/L。病例組尿液中的TEC 數(shù)量及NGAL 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析顯示，尿液中的TEC 數(shù)量與尿NGAL 水平呈正相關(guān)（r=0.773，P＜0.05），當(dāng)尿液中TEC 數(shù)量增多時，尿NGAL 水平也相應(yīng)增高。

表1 兩組尿液中TEC 數(shù)量及尿NGAL 水平的對比（± s）

表1 兩組尿液中TEC 數(shù)量及尿NGAL 水平的對比（± s）

注：a 與對照組比較，P ＜0.05。

組別 TEC（個/HP）NGAL（μg/L）對照組（n=100）2.79±2.67 1.06±0.09病例組（n=110）17.45±3.02a 2.78±0.86a

2.2 TEC、NGAL 單獨及聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度

NGAL 單獨檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度分別為80.1%、83.4%，TEC 單獨檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度分別為71.4%、72.1%，TEC與NGAL 聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度分別為86.4%、89.6%。NGAL、TEC 單獨檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。TEC 與NGAL 聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度均高于二者單獨檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 TEC、NGAL 單獨及聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度（%）

3 討論

腎損傷標(biāo)志物在腎臟疾病的早期診治中發(fā)揮著重要作用。通常情況下，腎損傷患者首先出現(xiàn)腎小管功能的變化，其次是腎小球損傷[7]。SCr 是目前臨床常用的腎功能評估指標(biāo)，但其變化滯后，只有當(dāng)腎實質(zhì)損傷超過10% 時，SCr 才會升高[8]，易錯過最佳治療時機。近年來，腎小管損傷指標(biāo)在診斷腎損傷的特異性、敏感性方面已得到臨床證實。NGAL 是lipocalin超家族成員，是中性粒細(xì)胞中的一種脂質(zhì)運載蛋白，主要反映腎小球濾過屏障及近端腎小管重吸收功能，受外界因素的影響較少。生理情況下，NGAL 在人類許多組織（如腎臟、肺）中均呈低表達(dá)狀態(tài)，當(dāng)腎小管重吸收功能受損時，TEC 會產(chǎn)生大量的NGAL，血液中的NGAL 快速升高，同時尿液中的NGAL 也會顯著增加。研究證實，NGAL 用于診斷早期AKI，能夠準(zhǔn)確反映患者的腎功能及預(yù)后[9]。尿沉渣中的TEC 是診斷AKI 的重要指標(biāo)之一。健康人的尿液中極少出現(xiàn)TEC，當(dāng)腎小管間質(zhì)損傷引起TEC 損傷壞死時，會導(dǎo)致TEC 脫落，因此在尿液中尋找脫落的TEC 對于腎小管損傷的診斷具有重要的臨床意義[10]。

本研究結(jié)果顯示，病例組尿液中的TEC 數(shù)量及尿NGAL 水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析顯示，尿液中的TEC 數(shù)量與尿NGAL 水平呈正相關(guān)（r=0.773，P＜0.05）；TEC 與NGAL 聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的敏感度、特異度均高于二者單獨檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。可見，TEC、NGAL 是反映腎小管損傷的敏感指標(biāo)，兩項指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷腎小管損傷的效能優(yōu)于二者單獨檢測，對識別早期腎小管損傷具有一定的意義。