蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃發(fā)酵、瘤胃菌群結(jié)構(gòu)及抗氧化性能的影響

熊程坤,張道亮,楊 悅,丁紅研,趙 杰,李 玉,王希春,馮士彬,趙 暢,湯繼順,吳金節(jié)*

(1.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,合肥 230061;2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,合肥 230031)

隨著羊養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模化的迅速發(fā)展,保障母羊健康,提高母羊繁殖效率是羊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重點(diǎn)。在母羊整個(gè)繁殖期中,圍產(chǎn)期是非常重要的階段。在圍產(chǎn)期間,由于胎兒生長(zhǎng)、泌乳啟動(dòng)和乳汁生產(chǎn)等諸多因素,母畜對(duì)能量的需求急劇增加,與此同時(shí),母畜的采食量卻急劇下降,不能滿足機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求,使母畜出現(xiàn)能量負(fù)平衡(negative energy balance, NEB),其諸多機(jī)能出現(xiàn)了變化,如瘤胃功能、營(yíng)養(yǎng)的代謝和免疫力等[1]。除此之外,當(dāng)圍產(chǎn)期母畜處于NEB時(shí),為維持自身及胎兒生長(zhǎng)等生理需求,機(jī)體代謝增強(qiáng),母畜體內(nèi)生成大量活性氧(reactive oxygen species, ROS)和脂質(zhì)過氧化物,而母畜機(jī)體抗氧化能力有限,過量的ROS和脂質(zhì)過氧化物在體內(nèi)蓄積,會(huì)令母畜處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。因此,維持圍產(chǎn)期母羊正常的瘤胃功能,提高免疫力,對(duì)于保障圍產(chǎn)期母羊機(jī)體健康,實(shí)現(xiàn)母羊高效繁殖至關(guān)重要。

蘆丁(rutin)是一種黃酮苷,廣泛存在于植物中,也可被稱為維生素P、蕓香苷[2-3]。蘆丁在動(dòng)物生產(chǎn)應(yīng)用中已成為一種潛在的綠色飼料添加劑[4]。現(xiàn)有研究表明,蘆丁不僅在清除O2-·自由基中起到重要作用,通過干擾還原型煙酰胺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox 4)和活性氧簇(ROS)敏感的NLRP3炎癥小體來保護(hù)內(nèi)皮功能障礙;抑制枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的生長(zhǎng)過程等[5-7]。朱安南等[8]發(fā)現(xiàn),飼料中添加蘆丁在增加蛋殼厚度的同時(shí),提高了蛋清凝膠的膠性、回復(fù)性以及起泡性等特性。陳密等[9]發(fā)現(xiàn),蘆丁使草魚粗蛋白含量增加,在降低肝丙二醛(MDA)含量的同時(shí),提高了過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、堿性磷酸酶(AKP)、胰蛋白酶(PRS)與腸道淀粉酶(AMS)的活性。此外,奶牛飼喂含有蘆丁的飼糧能夠降低瘤胃液中氨態(tài)氮(NH3-N)以及原蟲蛋白濃度,提高揮發(fā)性脂肪酸(VFA)的含量與菌體蛋白的濃度,改善泌乳性能[10]。

目前,蘆丁在羊圍產(chǎn)期生產(chǎn)中的應(yīng)用尚未報(bào)道,本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃發(fā)酵、瘤胃菌群結(jié)構(gòu)及抗氧化性能的影響,為蘆丁在羊圍產(chǎn)期生產(chǎn)中的應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)于馬鞍山市金農(nóng)牧業(yè)有限公司進(jìn)行。選擇30只圍產(chǎn)期相近、體重[(62.90±2.80) kg]相似的24月齡圍產(chǎn)期湖羊,隨機(jī)分為3組,每組10個(gè)重復(fù),分2欄飼養(yǎng)。CON組飼喂基礎(chǔ)飼糧,Ⅰ組與Ⅱ組分別在基礎(chǔ)日糧中按照50 mg·kg-1BW和100 mg·kg-1BW添加蘆丁。精料每日每只母羊300 g,完全采食完畢,粗料每日每只母羊2～2.5 kg,精料和粗料營(yíng)養(yǎng)水平見表1。將蘆丁與精料混勻后,于晨飼先喂,然后再喂粗料。預(yù)試期7 d,正式試驗(yàn)期56 d,為產(chǎn)前28 d至產(chǎn)后28 d。試驗(yàn)期間,自由采食、飲水。其他飼養(yǎng)管理按照養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)定進(jìn)行。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of the diet %

表2 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊采食量的影響Table 2 Effect of rutin on perinatal feed intake of Hu sheep kg·(d·只)-1

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用蘆丁購(gòu)自青島泰東制藥有限公司,純度≥95%;MDA含量、T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px活性酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒均購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 平均采食量 每次飼喂前,統(tǒng)計(jì)各組當(dāng)日飼喂粗料量和前日剩余粗料量,計(jì)算各組每只羊的日粗飼糧采食量。在飼糧營(yíng)養(yǎng)水平測(cè)定后,依據(jù)干物質(zhì)和中性洗滌纖維含量計(jì)算每只羊的日干物質(zhì)采食量和日中性洗滌纖維采食量。

1.3.2 生長(zhǎng)性能 正式試驗(yàn)期開始、結(jié)束及產(chǎn)羔后對(duì)圍產(chǎn)期湖羊進(jìn)行稱重,計(jì)算圍產(chǎn)期湖羊從生產(chǎn)日至正試期結(jié)束這一時(shí)期的總增重(TWG)、平均日增重(ADG)。產(chǎn)羔時(shí)統(tǒng)計(jì)產(chǎn)羔數(shù)量及羔羊體重。

1.3.3 瘤胃組織形態(tài) 于產(chǎn)后28 d晨飼前,每組隨機(jī)選取5只羊進(jìn)行屠宰采樣。屠宰后立即分離出瘤胃,用滅菌剪刀剪開瘤胃,取2 cm2左右瘤胃背囊組織,放置于10%福爾馬林溶液中保存。24 h后,通過石蠟包埋切片(8 μm)、染色、封片,使用數(shù)字切片掃描儀對(duì)瘤胃背囊組織切片進(jìn)行掃描,使用CaseViewer軟件測(cè)量瘤胃乳頭的長(zhǎng)度、寬度和瘤胃肌層的厚度。

1.3.4 抗氧化指標(biāo) 瘤胃液過濾后按照3 000×g離心10 min,取出上清液在-20 ℃中儲(chǔ)存。瘤胃液中的MDA含量、SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT活性按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。

1.3.5 瘤胃發(fā)酵參數(shù) 隨機(jī)選取3個(gè)位點(diǎn)抽取300 mL瘤胃液,置恒溫盒內(nèi)保存,混合均勻后取100 mL,立即用pH-200數(shù)顯筆式酸度計(jì)直接測(cè)定瘤胃液的pH。

過濾瘤胃液后準(zhǔn)確量取30 mL,添加10 mL 20%的偏磷酸,-20 ℃保存。通過苯酚-次氯酸鈉比色法測(cè)定瘤胃液氨態(tài)氮(NH3-N)濃度[11]。

準(zhǔn)確量取過濾后的瘤胃液40 mL,封蓋,冷凍保存。用三氯醋酸(TCA)沉淀蛋白法測(cè)定瘤胃液微生物蛋白濃度[12]。

過濾后的瘤胃液量取40 mL,加入0.5 mL 3.6 mol·L-1的H2SO4溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用),封蓋,搖勻,-20 ℃保存。采用氣相色譜法測(cè)定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度[13]。

1.3.6 瘤胃菌群結(jié)構(gòu) 采集50 mL瘤胃液,用于瘤胃菌群的測(cè)定。將瘤胃液送至蘇州帕諾米克生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行基因組測(cè)序;利用Agilent Bioanalyzer進(jìn)行數(shù)據(jù)質(zhì)量檢測(cè),利用DADA2方法進(jìn)行序列去噪,利用QIIME2軟件進(jìn)行菌群分類,并進(jìn)行豐度估算。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均使用Excel軟件進(jìn)行初步整理,使用SPSS 19.0軟件對(duì)整理后的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,Duncan’s法進(jìn)行多重比較,數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)”的形式表現(xiàn),P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著,P>0.05表示差異不顯著。

2 結(jié) 果

2.1 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊采食量的影響

各組圍產(chǎn)期湖羊精料均完全采食完畢。如表1所示,各組圍產(chǎn)期湖羊日粗飼料采食量無(wú)顯著差異(P>0.05),日干物質(zhì)采食量和日中性洗滌纖維采食量差異也均不顯著(P>0.05)。飼糧中添加蘆丁未顯著性改變圍產(chǎn)期湖羊的采食量。

2.2 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊生長(zhǎng)性能的影響

如表3所示,試驗(yàn)開始時(shí)各組圍產(chǎn)期湖羊體重?zé)o顯著差異(P>0.05);在數(shù)值上,2個(gè)試驗(yàn)組的產(chǎn)后體重、末體重(final body weight, FBW)和ADG均高于CON組,但差異不顯著(P>0.05)。各組圍產(chǎn)期湖羊的產(chǎn)羔數(shù)量及羔羊體重?zé)o顯著性變化(P>0.05)。飼糧中添加蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊生長(zhǎng)性能無(wú)顯著性影響。

2.3 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃組織形態(tài)的影響

如表4和圖1所示,Ⅱ組瘤胃乳頭長(zhǎng)度較CON組顯著增加(P<0.05),乳頭寬度和肌層厚度較CON組無(wú)顯著差異(P>0.05);相比于Ⅰ組,CON組和Ⅱ組各指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

圖1 不同蘆丁添加量下圍產(chǎn)期湖羊瘤胃乳頭結(jié)構(gòu)的顯微變化(32×)Fig.1 Microscopic changes in the structure of rumen papillae in periparturient Hu sheep at different rutin addition levels(32×)

表4 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃組織形態(tài)的影響Table 4 Effect of rutin on rumen histomorphology in perinatal Hu sheep μm

2.4 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊抗氧化性能的影響

由表5可知,與CON組相比,Ⅰ組圍產(chǎn)期湖羊瘤胃液中GSH-Px和CAT活性升高(P<0.05),其他抗氧化指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05);與Ⅱ組相比,Ⅰ組瘤胃液中MDA含量顯著降低(P<0.05),SOD、CAT活性和T-AOC水平均升高,且差異顯著(P<0.05),GSH-Px活性極顯著升高(P<0.01);CON組和Ⅰ組之間各抗氧化指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表5 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊抗氧化性能的影響Table 5 Effect of rutin on antioxidant performance of perinatal Hu sheep

2.5 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃發(fā)酵的影響

從表6可知,與CON組相比,Ⅱ組圍產(chǎn)期湖羊瘤胃液中NH3-N濃度顯著降低(P<0.05),微生物蛋白濃度極顯著升高(P<0.01),微生物蛋白中的原蟲蛋白和菌體蛋白濃度均顯著升高(P<0.05),瘤胃液中乙酸、丙酸、戊酸和TVFA濃度均顯著升高(P<0.05);與Ⅰ組相比,Ⅱ組瘤胃液中微生物蛋白濃度顯著升高(P<0.05),其中原蟲蛋白濃度較高(P<0.05),細(xì)菌蛋白濃度無(wú)顯著差異(P>0.05)。CON組與Ⅰ組之間各指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

2.6 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃菌群結(jié)構(gòu)的影響

2.6.1 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌門水平結(jié)構(gòu)分析 由表7和圖2可知,CON組和Ⅰ組圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌第一優(yōu)勢(shì)菌門為厚壁菌門(Firmicutes),第二優(yōu)勢(shì)菌門為擬桿菌門(Bacteroidetes);Ⅱ組第一優(yōu)勢(shì)菌門為擬桿菌門,第二優(yōu)勢(shì)菌門為厚壁菌門。Ⅱ組厚壁菌門相對(duì)豐度顯著低于CON組和Ⅰ組(P<0.05);Ⅱ組擬桿菌門相對(duì)豐度顯著高于CON組和Ⅰ組(P<0.05);Ⅱ組螺旋體門(Spirochaetes)相對(duì)豐度顯著低于CON組(P<0.05)。

圖2 不同蘆丁添加量下圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌在門水平上的分布圖Fig.2 Distribution of rumen bacteria at the phylum level in perinatal Hu sheep with different rutin additions

表7 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌門水平的影響Table 7 Effect of rutin on rumen bacterial phylum levels in perinatal Hu sheep %

2.6.2 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌屬水平結(jié)構(gòu)分析 由表8和圖3可知,各組圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌的優(yōu)勢(shì)菌屬為普雷沃菌屬(Prevotella);Ⅱ組普雷沃菌屬相對(duì)豐度極顯著高于其他兩組(P<0.01);Ⅰ組普雷沃菌屬相對(duì)豐度顯著高于CON組(P<0.05);Ⅱ組密螺旋體屬(Treponema)相對(duì)豐度顯著低于CON組(P<0.05);Ⅱ組解琥珀酸菌屬(Succiniclasticum)相對(duì)豐度顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。

圖3 不同蘆丁添加量下圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌在屬水平上的分布圖Fig.3 Distribution of rumen bacteria at the genus level in perinatal Hu sheep with different rutin additions

表8 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃細(xì)菌屬水平的影響Table 8 Effect of rutin on rumen bacterial genus levels in perinatal Hu sheep %

3 討 論

3.1 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊采食量和生長(zhǎng)性能的影響

母羊在圍產(chǎn)期內(nèi)對(duì)能量的需求增加,機(jī)體多機(jī)能發(fā)生變化,因此保障圍產(chǎn)期母羊健康生長(zhǎng)至關(guān)重要,也是保障圍產(chǎn)期母羊高效繁殖的前提。研究表明,黃酮類物質(zhì)不僅具有抗炎和抗氧化的能力,還能夠改善消化[14]。楊仕群等[15]研究發(fā)現(xiàn),竹葉黃酮能夠促進(jìn)藍(lán)孔雀的消化吸收能力,提高飼料轉(zhuǎn)化率,提高孔雀的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)條件下,Ⅰ組圍產(chǎn)期湖羊采食量低于CON組和Ⅱ組,但各組圍產(chǎn)期湖羊采食量和生長(zhǎng)性能均無(wú)顯著性差異,推測(cè)是個(gè)體差異引起的采食量變化。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加蘆丁不影響圍產(chǎn)期湖羊的采食量,能夠維持圍產(chǎn)期湖羊健康的生長(zhǎng)性能。

3.2 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃組織形態(tài)的影響

瘤胃發(fā)育程度可以通過瘤胃乳頭的長(zhǎng)度、寬度以及肌層厚度進(jìn)行評(píng)估[16]。瘤胃乳頭在瘤胃壁上致密分布,增大了瘤胃壁與內(nèi)容物的接觸面積,進(jìn)而在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收中發(fā)揮了促進(jìn)作用。此外,瘤胃乳頭有利于瘤胃上皮吸收養(yǎng)分及離子轉(zhuǎn)運(yùn)[17]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加100 mg·kg-1BW蘆丁能顯著提高圍產(chǎn)期湖羊瘤胃乳頭長(zhǎng)度,提示日糧中添加蘆丁能夠改善圍產(chǎn)期湖羊瘤胃乳頭形態(tài)。研究表明,蘆丁可提高奶牛瘤胃乙酸和丙酸濃度[10]。沙蔥黃酮類化合物可顯著提高綿羊瘤胃VFA濃度[18]。有機(jī)酸能夠刺激瘤胃乳頭發(fā)育,尤其是VFA,乙酸、丙酸和丁酸對(duì)其刺激強(qiáng)度依次增強(qiáng),這與VFA在瘤胃壁組織內(nèi)的代謝保持一致[19]。以上結(jié)果表明日糧中添加蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃組織形態(tài)有改善作用。

3.3 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊抗氧化性能的影響

動(dòng)物機(jī)體的健康與其抗氧化性能密切相關(guān),當(dāng)機(jī)體氧化還原狀態(tài)失衡,將使細(xì)胞過度氧化,從而導(dǎo)致細(xì)胞代謝及功能障礙[20]。MDA是評(píng)價(jià)動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)氧化損傷程度的重要指標(biāo)[21]。SOD是動(dòng)物體內(nèi)一種重要的抗氧化物金屬酶,在氧化平衡系統(tǒng)上起著關(guān)鍵的作用,可以有效地清除機(jī)體內(nèi)的超氧陰離子,避免細(xì)胞損傷[22]。機(jī)體內(nèi)的自由基清除依賴于GSH-Px與SOD相互協(xié)調(diào)。SOD在清除氧離子鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中生成CAT,能夠有效維持機(jī)體內(nèi)的氧化平衡[23-24]。T-AOC能夠綜合反映機(jī)體的抗氧化能力[25]。越來越多的證據(jù)證實(shí),源自蔬菜、水果和藥用植物的黃酮類通過自由基清除活性影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化及其功能,對(duì)人們的健康、防病治病起著重要作用[26]。蘆丁因其結(jié)構(gòu)含有豐富的酚羥基,能夠產(chǎn)生較穩(wěn)定的苯氧自由基,進(jìn)而中止鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。此外,機(jī)體內(nèi)自由基結(jié)合活潑氫,清除機(jī)體內(nèi)過多的ROS,這可能是其提高抗氧化功能,保護(hù)機(jī)體避免氧化損傷的重要原因之一[27-28]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧中添加50 mg·kg-1BW的蘆丁能夠顯著提高圍產(chǎn)期湖羊瘤胃內(nèi)GSH-Px和CAT活性,與此同時(shí),在對(duì)圍產(chǎn)期湖羊血清中抗氧化酶活性的研究中也發(fā)現(xiàn),飼糧中添加50、100 mg·kg-1BW的蘆丁能夠降低圍產(chǎn)期湖羊血清中過氧化氫(H2O2)和MDA水平,提高血清中CAT、GSH-Px、SOD和T-AOC活性[29]。提示飼糧中添加蘆丁能夠提高圍產(chǎn)期湖羊瘤胃抗氧化性能。

3.4 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃發(fā)酵的影響

大量研究表明,反芻動(dòng)物體內(nèi)最主要的消化器官是瘤胃,在整個(gè)生長(zhǎng)過程中起到了積極作用[30]。瘤胃液pH是反應(yīng)瘤胃內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)及衡量瘤胃發(fā)酵的一個(gè)重要指標(biāo),當(dāng)瘤胃液pH處于6.2～7.0時(shí),能夠維持瘤胃的正常發(fā)酵[31-32]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,各組之間圍產(chǎn)期湖羊的瘤胃液pH無(wú)顯著差異,均在6.2～7.0內(nèi),能夠?yàn)榱鑫肝⑸锾峁┻m宜的生長(zhǎng)環(huán)境。Oskoueian等[33]研究表明,高達(dá)4.5%添加水平的黃酮也不會(huì)對(duì)瘤胃pH產(chǎn)生顯著性影響,與本試驗(yàn)結(jié)果相似。反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)微生物能夠產(chǎn)生VFA和微生物蛋白,機(jī)體所需能量部分來自于此[34]。包玲玲等[18]發(fā)現(xiàn),沙蔥黃酮可以顯著降低綿羊瘤胃NH3-N的濃度。郭旭東[10]研究表明,蘆丁可降低奶牛瘤胃中NH3-N的濃度,增加乙酸、丙酸和TVFA的濃度。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧中添加100 mg·kg-1BW蘆丁能夠降低圍產(chǎn)期湖羊瘤胃液中NH3-N的濃度,提高微生物蛋白的濃度,可能是蘆丁刺激瘤胃微生物菌群攝取NH3-N并合成蛋白質(zhì)引起的;飼糧中添加100 mg·kg-1BW蘆丁還能提高乙酸、丙酸、戊酸和TVFA的濃度,在后續(xù)的研究中可知添加100 mg·kg-1BW蘆丁可促進(jìn)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃內(nèi)乙酸、丙酸生成菌的生長(zhǎng),有助于其對(duì)飼糧中碳水化合物的發(fā)酵與分解;并且蘆丁并沒有改變圍產(chǎn)期湖羊的發(fā)酵類型,仍然是乙酸型發(fā)酵,甚至提高了乙酸的生成量。綜上所述,飼糧中添加適量的蘆丁能夠改善圍產(chǎn)期湖羊的瘤胃發(fā)酵狀況。

3.5 蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃菌群結(jié)構(gòu)的影響

瘤胃是反芻動(dòng)物消化養(yǎng)分的重要器官,而瘤胃菌群在消化過程中扮演著重要角色。厚壁菌門和擬桿菌門是反芻動(dòng)物瘤胃菌群的兩大優(yōu)勢(shì)菌群[35]。纖維物質(zhì)與非纖維物質(zhì)經(jīng)瘤胃降解后分別產(chǎn)生乙酸和丙酸,厚壁菌門和擬桿菌門分別在降解中發(fā)揮著重要作用[36]。擬桿菌門內(nèi)含量最多的是普雷沃菌屬,普雷沃菌屬在降解蛋白質(zhì)和纖維素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方面發(fā)揮著重要作用[37]。瘤胃球菌屬、解琥珀酸菌屬和密螺旋體屬都屬于厚壁菌門,均參與纖維素的降解[38]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧中添加100 mg·kg-1BW蘆丁能夠顯著增加圍產(chǎn)期湖羊瘤胃內(nèi)擬桿菌門相對(duì)豐度、普雷沃菌屬相對(duì)豐度,與Ⅱ組瘤胃中微生物蛋白、乙酸和丙酸含量顯著高于CON組的試驗(yàn)結(jié)果相吻合。與CON組相比,Ⅱ組瘤胃內(nèi)參與纖維素降解和揮發(fā)性脂肪酸形成的厚壁菌門和密螺旋體屬相對(duì)豐度顯著降低,卻并未阻礙Ⅱ組瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的形成,這可能是因?yàn)閮山M瘤胃厚壁菌門中瘤胃球菌屬和解琥珀酸菌屬等主要纖維素降解菌相對(duì)豐度并未發(fā)生顯著性變化,以及普雷沃菌屬相對(duì)豐度的增加,提高半纖維素被分解的效率,這與龐凱悅等[39]研究發(fā)現(xiàn)相似。與此同時(shí),蘆丁的添加水平改變了瘤胃優(yōu)勢(shì)菌的組成。現(xiàn)有研究結(jié)果表明,槲皮素不僅能夠增加斷奶仔豬糞便菌群普雷沃菌屬數(shù)量[40],還能夠抑制多種病原菌的生長(zhǎng)[41]?？梢婇纹に刈鳛樘J丁的主要代謝產(chǎn)物,在蘆丁對(duì)瘤胃菌群結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)過程中起著關(guān)鍵作用。綜上所述,飼糧中添加蘆丁能夠加快擬桿菌門細(xì)菌以及普雷沃菌屬細(xì)菌的增殖并定植優(yōu)勢(shì)生態(tài)位,改善圍產(chǎn)期湖羊瘤胃菌群結(jié)構(gòu)。

4 結(jié) 論

飼糧中添加蘆丁對(duì)圍產(chǎn)期湖羊瘤胃組織形態(tài)有改善作用,能夠提高圍產(chǎn)期湖羊瘤胃的抗氧化性能,并改善圍產(chǎn)期湖羊的瘤胃菌群結(jié)構(gòu)和發(fā)酵功能。在本試驗(yàn)條件下,蘆丁在圍產(chǎn)期湖羊飼糧中的最適添加量為100 mg·kg-1BW。