非典型豬瘟病毒及防控現(xiàn)狀

文│張永明（山東省濟(jì)南市鋼城區(qū)艾山街道辦事處畜牧獸醫(yī)站）

2015年，通過測序技術(shù)在豬血清樣本中首次鑒定出豬非典型豬瘟病毒。起初認(rèn)為該病毒感染后沒有臨床表現(xiàn)，后發(fā)現(xiàn)該病毒與新生仔豬先天性震顫（congenital tremor）和肢外展綜合征（splay leg syndrome）的發(fā)生有關(guān)。仔豬感染非典型豬瘟病毒后初乳攝入不足，導(dǎo)致嚴(yán)重的生長遲緩，嚴(yán)重可能餓死或因太過瘦小而被擠死。豬非典型豬瘟病毒能夠誘發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如仔豬先天性震顫（主要是II型），增加斷奶前仔豬的死亡率，降低母豬的繁殖性能。非典型豬瘟病毒感染造成仔豬先天性震顫的暴發(fā)一般發(fā)生在1周到2個月大的仔豬。當(dāng)前非典型豬瘟病毒感染對豬群造成的經(jīng)濟(jì)損失有待確定，因?yàn)槲┮灰阎嘘P(guān)聯(lián)的病癥是仔豬先天性震顫，其他負(fù)面影響都是間接的，難以預(yù)估，但母豬繁殖性能據(jù)估計下降10%。非典型豬瘟病毒與其他病原體的協(xié)同感染也增加了仔豬死亡率，如豬捷申病毒（porcine teschovirus）。

一、病因?qū)W

病毒顆粒為球形，直徑約為60 nm，病毒基因組為單鏈正義RNA，基因組大小約為11～11.6 kb?；蚪M包括一個5’-非編碼區(qū)、一個3’-非編碼區(qū)和一個單一的開放閱讀框區(qū)域，編碼一個含有3635個氨基酸的多聚蛋白。該多聚蛋白被加工成12種蛋白，包括C（衣殼蛋白）、Erns、E1、E2（包膜蛋白）和非結(jié)構(gòu)蛋白Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B。對來自野豬和商業(yè)農(nóng)場的豬在不同國家和年份檢測到的病毒毒株的完整或部分基因組的系統(tǒng)發(fā)育分析，非典型豬瘟病毒顯示出高度的遺傳變異性。已觀察到五個不同的組群，組群I主要出現(xiàn)在北美（主要是美國）和亞洲（主要是中國），組群II主要分布在歐洲（主要是德國和奧地利）和亞洲（主要是中國和韓國），組群III主要在北美（主要是美國）和歐洲（主要是德國），組群IV和V集中在亞洲（主要是中國）。不同的毒株可以同時出現(xiàn)在同一個農(nóng)場中，也可以出現(xiàn)在不同的時間。

Pestivirus屬包括11種病毒，為Pestivirus A（牛病毒性腹瀉病毒1）、Pestivirus B（牛病毒性腹瀉病毒2）、Pestivirus C（典型豬瘟病毒）、Pestivirus D（牛病毒性腹瀉病毒）、Pestivirus E（叉角羚瘟病毒）、Pestivirus F（豬瘟病毒）、Pestivirus G（長頸鹿瘟病毒）、Pestivirus H（HoBi-like瘟病毒）、Pestivirus I（Aydin-like瘟病毒）、Pestivirus J（鼠瘟病毒）和Pestivirus K（非典型豬瘟病毒）。非典型豬瘟病毒基因組序列與豬瘟病毒、牛病毒性腹瀉病毒和牛病毒性腹瀉病毒1等較熟知的Pestivirus屬病毒同源性較低，為25%～28%。

除非典型豬瘟病毒外，還在豬身上發(fā)現(xiàn)了另外兩種非典型Pestivirus病毒，Bungowannah病毒（引起心肌炎）和Linda病毒（引起站立橫向搖晃）。非典型豬瘟病毒已被證實(shí)是新生仔豬先天性震顫II型的主要原因，但非典型豬瘟病毒感染引起新生仔豬先天性震顫II型的確切機(jī)制尚不清楚。少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子2（Olig 2）在發(fā)生新生仔豬先天性震顫II型的仔豬中的表達(dá)增加被認(rèn)為有利于該病的發(fā)生。各種研究中，新生仔豬先天性震顫II型所造成的仔豬死亡率并不一致，中國曾報道出60%的高死亡率，加拿大和巴西曾報告了24.6%和30%的死亡率。

二、傳播

出現(xiàn)臨床癥狀的豬，在幾乎所有組織中能檢測到非典型豬瘟病毒。頜下淋巴結(jié)中非典型豬瘟病毒載體最高，在外周淋巴器官（脾、扁桃體和腹股溝淋巴結(jié)）中發(fā)現(xiàn)高的RNA水平，而在神經(jīng)系統(tǒng)（腦干、大腦和小腦）、腦脊液、消化系統(tǒng)（十二指腸）、血清、鼻拭子和直腸拭子中發(fā)現(xiàn)中等RNA水平。在淋巴器官中發(fā)現(xiàn)了大量的非典型豬瘟病毒RNA，這提供了病毒復(fù)制的主要位置信息，也表明非典型豬瘟病毒可能對宿主免疫系統(tǒng)起到抑制作用。而在小腦的內(nèi)顆粒細(xì)胞層中檢測到中等水平的非典型豬瘟病毒RNA，這提供了病毒可以感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)的直接證據(jù)，這也解釋了為什么這種病毒會導(dǎo)致神經(jīng)癥狀。

豬精液被認(rèn)為是非典型豬瘟病毒傳播的媒介，在15%的公豬的包皮液和精液中檢測到非典型豬瘟病毒，這表明該病可能通過性傳播，這增加了養(yǎng)豬場預(yù)防非典型豬瘟病毒感染的復(fù)雜性。在美國和歐洲，精液是從沒有新生仔豬先天性震顫臨床病史的公豬采集的，但許多精液中仍報告了非典型豬瘟病毒感染，這表明短暫感染或持續(xù)隱性感染的公豬在精液中攜帶非典型豬瘟病毒。

在豬唾液腺、十二指腸、胰腺和結(jié)腸的樣本中發(fā)現(xiàn)了非典型豬瘟病毒基因組，表明糞口傳播可能是病毒傳播的另一種傳播途徑。

目前還不清楚豬群中非典型豬瘟病毒的傳播和持續(xù)感染，14周的小豬沒有表現(xiàn)出任何新生仔豬先天性震顫II型癥狀，但血液中檢測出非典型豬瘟病毒RNA。持續(xù)感染的豬可以在沒有任何臨床癥狀的情況下正常生長發(fā)育，但病毒會通過它們的唾液和精液排毒。1%的犢牛感染牛病毒性腹瀉病毒后便可以持續(xù)維持牛群中的病毒存在，在沒有明顯病癥的情況下，非典型豬瘟病毒持續(xù)感染的豬很可能在傳播中發(fā)揮著重要作用。

在越來越多的地區(qū)野豬中檢測到非典型豬瘟病毒，隨著野豬數(shù)量和分布范圍的不斷擴(kuò)大，對非典型豬瘟病毒的維持和傳播的影響巨大，就像在歐洲傳播廣泛的典型豬瘟病毒一樣。

三、 病變

新生仔豬先天性震顫II型的組織學(xué)特征性病變是小腦白質(zhì)空泡化，進(jìn)一步的超微結(jié)構(gòu)檢查發(fā)現(xiàn)，患新生仔豬先天性震顫II型的豬不僅脊髓存在髓鞘形成不足，小腦白質(zhì)也存在髓鞘破壞。這些變化與典型豬瘟病毒感染仔豬和牛病毒性腹瀉病毒感染犢牛的病變不同。

四、免疫

豬對非典型豬瘟病毒感染的免疫仍是謎，如果母豬在第一胎產(chǎn)下一窩患新生仔豬先天性震顫II型的仔豬，那么同一頭母豬的下一窩仔豬將不會出現(xiàn)該病。淋巴器官中非典型豬瘟病毒RNA高載量的存在表明病毒可能作用于宿主免疫系統(tǒng)。因此，需要進(jìn)一步研究來闡明對這種病毒的先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。

五、診斷

多種診斷技術(shù)可用于診斷豬非典型豬瘟病毒感染。由于實(shí)用性、速度、靈敏度和特異性，分子技術(shù)是最常用的，其中RT-PCR和qRT PCR是研究中最常應(yīng)用的?？梢詫Σ煌呐R床樣本進(jìn)行病毒檢測，在出現(xiàn)臨床癥狀的動物中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)和淋巴器官是首選樣本，因?yàn)樵谶@些組織中發(fā)現(xiàn)了較高的病毒載量，尤其是小腦和淋巴結(jié)。另一種可用的技術(shù)是下一代測序（next-generation sequencing，NGS），該技術(shù)2015年首次被用于診斷病毒。此外，NGS提供了關(guān)于可能的共感染的數(shù)據(jù)，并能獲得病毒基因組更大的片段，這有助于毒株的系統(tǒng)發(fā)育研究。

石蠟固定組織進(jìn)行的組織學(xué)診斷具有重要意義，因?yàn)槟軌蚩梢暬堑湫拓i瘟病毒引起的損傷。Luxol Fast Blue染色有助于觀察中樞神經(jīng)系統(tǒng)（主要位于小腦和脊髓）中非典型豬瘟病毒引起的髓鞘破壞。組織病理學(xué)、免疫組織化學(xué)技術(shù)和原位雜交技術(shù)均能檢測病變部位的病毒（蛋白質(zhì)或核酸）。

用于協(xié)助診斷的重要方法是血清學(xué)檢測。針對非典型豬瘟病毒感染所述的檢測技術(shù)包括免疫熒光、病毒中和與針對NS3、E2和Erns蛋白的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。這些技術(shù)有許多重要的應(yīng)用，可用于流行病學(xué)研究和感染監(jiān)測，這些血清學(xué)檢測技術(shù)還具有易于執(zhí)行和低成本的優(yōu)勢。

六、 防控

迄今為止還沒有有效的藥物或疫苗可用于治療或預(yù)防非典型豬瘟病毒感染。Zhang等人構(gòu)建了非典型豬瘟病毒糖蛋白E2的重組病毒，在小鼠中誘導(dǎo)了強(qiáng)大的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，然而還需要進(jìn)一步的研究來證明其能夠引起有效的免疫反應(yīng)。

由于第一胎母豬受非典型豬瘟病毒感染的影響最大，因此在豬群中引入未生產(chǎn)過的母豬很可能是該疾病流行中的一個重要因素，有必要采取預(yù)防措施來解決這一問題。需要對豬群進(jìn)行分子技術(shù)診斷，識別出持續(xù)感染的豬只并從豬群中移除，因?yàn)樗鼈兛赡芡ㄟ^精液、糞便和口水傳播病毒。另一個需要監(jiān)測的是人工授精使用的商品豬精液，一種可能的措施是對這些公豬及其精液進(jìn)行的分子技術(shù)診斷。

生物安全措施不容忽視，引入新豬只應(yīng)在進(jìn)入養(yǎng)殖場之前進(jìn)行隔離和檢疫。在設(shè)施中執(zhí)行適當(dāng)?shù)那鍧嵑拖境绦?，對養(yǎng)殖場人員和車輛的消毒和行動限制。對野生動物、嚙齒動物和昆蟲的控制也有助于豬群健康。