術(shù)前血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平與胃癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系*

高 瑞,楊艷婷,宋漢歌

空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科,陜西西安 710032

胃癌已成為消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的一種腫瘤類(lèi)型,我國(guó)是胃癌的高發(fā)地區(qū),每年的死亡病例數(shù)約占世界總數(shù)的45%,每年新增病例超過(guò)100萬(wàn),死亡人數(shù)約35萬(wàn)[1]。近年來(lái),由于新醫(yī)療技術(shù)的采用,化療藥物及靶向藥物的進(jìn)步,胃癌患者的預(yù)后得到顯著改善,但局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的生存率仍較低。因此,盡早了解患者病情變化及預(yù)后狀況,對(duì)降低患者病死率至關(guān)重要。巨噬細(xì)胞抑制因子-1(MIC-1)是由巨噬細(xì)胞響應(yīng)激活而產(chǎn)生,并在機(jī)體炎癥反應(yīng)及損傷過(guò)程中急劇升高。既往研究研究發(fā)現(xiàn),MIC-1參與細(xì)胞增殖、遷移,并對(duì)診斷肺癌的發(fā)生有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值[2]。二氫嘧啶樣酶3(DPYSL3)作為一種特異性的細(xì)胞黏附分子,它在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,特別是在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用[3]。整合素β6(ITGβ6)作為細(xì)胞表面的關(guān)鍵黏附分子之一,上調(diào)ITGβ6表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲[4]。本課題組通過(guò)檢測(cè)MIC-1、DPYSL3、ITGβ6在胃癌患者血清中表達(dá),探討MIC-1、DPYSL3、ITGβ6血清水平與胃癌患者不同病理特征相關(guān)性,并分析其與患者預(yù)后的影響,旨在尋找潛在的胃癌標(biāo)志物。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2017年1月至2018年12月本院收治的胃癌患者150例納入研究作為胃癌組,男性90例,女性60例;年齡36～78歲,平均(55.29±8.11)歲;TNM分期:Ⅰ～Ⅱ期82例,Ⅲ期68例;分化程度:高-中分化63例,低分化87例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:有轉(zhuǎn)移97例,無(wú)轉(zhuǎn)移53例;腫瘤最大徑:≤5 cm 80例,>5 cm 70例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)均經(jīng)腫瘤組織病理診斷為胃癌,且接受手術(shù)治療;(2)均為首次確診,入院前未行靶向治療、放化療等治療。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)既往存在癌癥者;(2)有腦血管意外及血液病史者;(3)肝功能及腎功能?chē)?yán)重障礙者;(4)精神疾病,患者依從性差者。另選擇同期體檢健康者100例作為對(duì)照組,男50例,女50例;年齡32～75歲,平均(53.11±7.64)歲。兩組受試者年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1MIC-1、DPYSL3、ITGβ6檢測(cè) 所有胃癌患者在入院12 h內(nèi)、對(duì)照組研究者于體檢時(shí),均空腹抽取靜脈血4.0 mL,3.0×103r/min離心20 min,并將離心后的血清置入-70 ℃冰箱中。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)MIC-1、DPYSL3、ITGβ6血清水平,MIC-1試劑盒購(gòu)自深圳健竹科技有限公司,DPYSL3試劑盒上海優(yōu)利科生命科學(xué)有限公司,ITGβ6試劑盒購(gòu)自天津卡梅德生物科技有限公司。Synergy H1型酶標(biāo)儀由美國(guó)伯騰儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2.2胃癌臨床病理指標(biāo)的觀察 收集患者TNM分期、組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤最大徑等資料。術(shù)后對(duì)患者進(jìn)行隨訪3年,記錄隨訪期間患者生存或死亡情況,并分析影響胃癌死亡的危險(xiǎn)因素。

1.2.3胃癌預(yù)后的觀察 以門(mén)診和電話方式,術(shù)后對(duì)所有患者進(jìn)行為期3年隨訪,隨訪截至2021年12月。根據(jù)患者是否死亡,分為存活組和死亡組。

2 結(jié) 果

2.1胃癌組與對(duì)照組血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平比較 胃癌組血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 胃癌患者血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平變化

2.2不同臨床病理特征患者血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平比較 血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平與胃癌患者TNM分期、腫瘤組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平與腫瘤最大徑無(wú)關(guān)(P>0.05),見(jiàn)表2。

表2 胃癌患者不同臨床病理的血清MIC-1、DPYSL3、ITG β6水平

2.3患者3年生存預(yù)后與血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平的關(guān)系 隨訪期間胃癌患者死亡32例,生存118例。死亡組血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平明顯高于生存組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 患者3年生存預(yù)后與血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平的關(guān)系

2.4影響胃癌患者死亡的危險(xiǎn)因素分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,TNM分期Ⅲ期、低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6升高是增加胃癌患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,見(jiàn)表4。

表4 增加胃癌患者死亡的危險(xiǎn)因素分析

2.5血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6對(duì)胃癌患者死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線結(jié)果顯示,血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6預(yù)測(cè)胃癌患者死亡的AUC分別為0.796(95%CI:0.686～0.904,P<0.001)、0.785(95%CI:0.671～0.899,P<0.001)、0.812(95%CI:0.714～0.910,P<0.001),靈敏度分別為0.778、0.810、0.714,特異度分別為0.667、0.630、0.705,見(jiàn)圖1。

圖1 血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6對(duì)胃癌患者死亡預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

胃癌作為臨床常見(jiàn)癌癥,其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,與年齡、吸煙等因素有關(guān),具有高發(fā)病率、高病死率和預(yù)后差等特點(diǎn)。隨著社會(huì)快速發(fā)展人們飲食結(jié)構(gòu)改變和老年人口增多,胃癌的發(fā)病率明顯升高,若不能快速診斷及治療,將嚴(yán)重威脅著人們生命安全。雖然靶向藥物及化療藥物的不斷進(jìn)步,降低了患者的病死率,但患者預(yù)后仍較差,晚期胃癌患者的5年生存率僅20%[5]。因此,尋找評(píng)估胃癌患者臨床結(jié)局的生物標(biāo)記物,對(duì)提升患者臨床預(yù)后至關(guān)重要。

MIC-1是一種分泌型二聚體蛋白,可參與調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞增殖、凋亡、血管生成及免疫炎癥反應(yīng),并與腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。MIC-1可通過(guò)以自分泌方式直接刺激癌細(xì)胞并通過(guò)激活腫瘤微環(huán)境中癌細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞間的促癌相互作用來(lái)促進(jìn)腫瘤發(fā)展[6];其還可通過(guò)ErbB2受體酪氨酸激酶的激活參與過(guò)度表達(dá)ErbB2的癌細(xì)胞的惡性進(jìn)展或通過(guò)激活P53通路或磷脂酰肌醇3-激酶/絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶和糖原合酶3β信號(hào)通路及上調(diào)uPA系統(tǒng)增強(qiáng)癌細(xì)胞的侵襲性或轉(zhuǎn)移[7],從而促進(jìn)患者病情進(jìn)一步發(fā)展。LEE等[8]報(bào)道,黑色素瘤細(xì)胞產(chǎn)生的MIC-1可通過(guò)增強(qiáng)腫瘤血管化促進(jìn)黑色素瘤腫瘤在體內(nèi)的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。研究表明,惡性腫瘤(如結(jié)直腸癌[9]、非小細(xì)胞肺癌[10]等)患者血清MIC-1水平明顯上升,MIC-1表達(dá)上調(diào)與惡性腫瘤患者的預(yù)后不良有關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,胃癌組血清MIC-1水平明顯升高,說(shuō)明腫瘤患者長(zhǎng)期存在慢性炎癥反應(yīng)或免疫功能失衡,致使巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量MIC-1并釋放入血,致使MIC-1血清值明顯上升,提示MIC-1血清水平可用于胃癌的早期診斷,與既往報(bào)道結(jié)果相似[11]。本研究發(fā)現(xiàn),胃癌患者血清MIC-1水平明顯升高,并且水平與TNM分期、腫瘤組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。另外本研究發(fā)現(xiàn),胃癌患者血清MIC-1預(yù)測(cè)胃癌患者死亡的AUC分別為0.796,靈敏度和特異度分別為0.778、0.667,提示MIC-1可能成為胃癌的生物標(biāo)志物,對(duì)生存預(yù)后的評(píng)價(jià)有重要價(jià)值。

DPYSL3也稱為Collapsin反應(yīng)介質(zhì)蛋白4(CRMP4),是DPL基因家族成員,既往被發(fā)現(xiàn)與乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換有關(guān)[12]。也有研究表明,DPYSL3可參與肺癌和肝細(xì)胞癌進(jìn)展,其高表達(dá)與患者不良生存預(yù)后有關(guān)[13-14]。KANDA等[15]檢測(cè)了癌患者血清DPYSL3水平,發(fā)現(xiàn)DPYSL3與腫瘤浸潤(rùn)深度、血管侵犯及TNM分期有關(guān)。本研究同樣發(fā)現(xiàn),胃癌患者血清DPYSL3表達(dá)水平明顯升高,并且表達(dá)水平與TNM分期、腫瘤組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。與本研究結(jié)果類(lèi)似的是,ZHONG等[16]發(fā)現(xiàn),與健康對(duì)照組相比,胃癌患者血清DPYSL3水平明顯上升,血清DPYSL3值變化與腫瘤TNM分期、分化程度等密切相關(guān)。另外,ROC曲線分析顯示,血清DPYSL3預(yù)測(cè)胃癌患者死亡的AUC分別為0.785,靈敏度為0.810,特異度為0.630。提示DPYSL3可參與胃癌進(jìn)展,檢測(cè)其血清表達(dá)水平有助于預(yù)測(cè)不良生存預(yù)后。

ITGβ6是整合素αvβ6的關(guān)鍵亞單體,其僅在上皮細(xì)胞表面表達(dá),并在EMT期間上調(diào),且參與傷口愈合、纖維化、上皮修復(fù)及腫瘤生長(zhǎng)等病理生理過(guò)程。ITGβ6的沉默可通過(guò)調(diào)節(jié)JAK/STAT3信號(hào)通路來(lái)抑制癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,并誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡[17]。研究表明,ITGβ6在癌組織中顯著上調(diào),并通過(guò)ERK-ETS通路促進(jìn)惡性細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移,也是胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌早期診斷和預(yù)后的新型血清生物標(biāo)志物[18]。BENGS等[19]報(bào)道,結(jié)直腸癌患者血清ITGβ6水平明顯升高,ITGβ6血清水平與腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,胃癌組血清ITGβ6水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明ITGβ6參與胃癌的發(fā)生過(guò)程,與既往報(bào)道[20]相似。另外,本研究還發(fā)現(xiàn)血清ITGβ6高表達(dá)水平可以預(yù)測(cè)胃癌患者的不良生存預(yù)后,靈敏度和特異度分別為0.714、0.705。對(duì)于入院時(shí)ITGβ6血清水平升高的患者,應(yīng)該及時(shí)調(diào)整治療方案,以防止患者不良預(yù)后出現(xiàn)。

本研究也存在一些局限性,例如未檢測(cè)胃癌患者術(shù)后血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平;未驗(yàn)證MIC-1、DPYSL3、ITGβ6三者之間的調(diào)控關(guān)系及作用機(jī)制。未來(lái)需要開(kāi)展臨床和基礎(chǔ)研究,進(jìn)一步分析MIC-1、DPYSL3、ITGβ6在胃癌中的作用機(jī)制及臨床意義。

綜上所述,胃癌患者的血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6水平明顯上升,并與腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分化程度有關(guān)。血清MIC-1、DPYSL3、ITGβ6均對(duì)胃癌生存預(yù)后的評(píng)估有一定價(jià)值。