CXCL5基因多態(tài)性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響*

劉啟波,麥東媚△,譚俊青,李曉君,蔡棟昊

廣東省第二中醫(yī)院:1.檢驗科;2.感染管理科,廣東廣州 510095

醫(yī)院獲得性肺炎是臨床中的常見病癥,是發(fā)生在肺泡、終末氣道或肺間質(zhì)的炎性病變[1]。由于社會老齡人口增多、病原體診斷難度增大等因素,醫(yī)院獲得性肺炎的患病群體及肺炎相關(guān)死亡人數(shù)呈持續(xù)增長趨勢[2]。鮑曼不動桿菌廣泛存在于自然環(huán)境與醫(yī)院環(huán)境中,生存要求極低,可定植于人體的呼吸道、消化道或皮膚表層等,對常規(guī)消毒制劑或紫外線抵抗力較強(qiáng),是國內(nèi)醫(yī)院感染最常見的致病菌之一[3]。既往研究發(fā)現(xiàn),鮑曼不動桿菌以多重耐藥鮑曼不動桿菌較為多見,其耐藥譜持續(xù)擴(kuò)大、感染率及耐藥率逐年升高[4-5]。有研究報道,多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者發(fā)病率為1.3%～3.4%,病死率為33.1%,患者住院時間較長,治療費(fèi)用高,如何預(yù)防和減少其發(fā)生是世界性的公共衛(wèi)生問題。對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者的病情嚴(yán)重程度及預(yù)后進(jìn)行有效評估一直是急需解決的難題。CXC類趨化因子配體5(CXCL5)與其受體CXC類趨化因子受體2(CXCR2)結(jié)合可以對嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞發(fā)揮趨化作用,促進(jìn)炎癥反應(yīng)的啟動和進(jìn)展[7]。本研究旨在探討CXCL5基因多態(tài)性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響,為多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的臨床治療及預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2020年7月至2022年7月于本院被明確診斷為多重耐藥鮑曼不動桿菌感染肺炎的121例患者納入研究作為患者組,年齡(56.38±17.15)歲,男65例、女56例。納入標(biāo)準(zhǔn):痰培養(yǎng)連續(xù)2次以上為多重耐藥鮑曼不動桿菌陽性且影像學(xué)結(jié)果表現(xiàn)異常,根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會醫(yī)院獲得性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),確診為醫(yī)院獲得性多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)入院24 h內(nèi)死亡或自動出院;(2)伴嚴(yán)重軀體性疾病;(3)合并其他精神疾病或有嚴(yán)重自殺傾向。根據(jù)臨床醫(yī)生對患者病情的診斷,將患者又分為輕癥組(36例)、中癥組(66例)、重癥組(19例)。另外將同期121例體檢健康者作為對照組,年齡(57.15±18.11)歲,男70例、女51例。各組年齡、性別比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。所有納入研究者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。本研究已獲得本院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1單核苷酸多態(tài)性位點(SNP)基因分型 在HapMap數(shù)據(jù)庫中選取中國漢族人群的SNP中的CXCL5基因相關(guān)位點,即rs352046和rs425535。提取患者DNA,通過毛細(xì)管電泳(采用ABI 3730XL測序儀進(jìn)行,上海興曼生物科技有限公司)及SNaPshot片段分析技術(shù)(MG-012型SNaPshot法基因型儀,天津邁基生物科技有限公司)對2個SNP位點進(jìn)行基因分型。

1.2.2藥敏試驗及炎癥指標(biāo)的檢測 對納入研究患者的痰液標(biāo)本進(jìn)行痰液分離菌株的菌種鑒定,應(yīng)用梅里埃公司生產(chǎn)的VITEK2-Compact全自動微生物分析儀進(jìn)行檢測,根據(jù)2019版CLSI標(biāo)準(zhǔn)評估藥敏試驗結(jié)果。炎癥指標(biāo)使用邁瑞7500血細(xì)胞分析儀與雅培I2000微粒子化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測。

2 結(jié) 果

2.1CXCL5基因位點的基因型及等位基因比較 將對照組和患者組患者CXCL5基因的rs352046及rs425535位點進(jìn)行比較,rs352046位點的基因型及等位基因分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),rs425535位點的基因型及等位基因分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對照組,G等位基因、GG基因型比例低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1、2。

表1 對照組和患者組間CXCL5基因rs352046位點的等位基因、基因型分布比較(n)

表2 對照組和患者組間CXCL5基因rs425535位點的等位基因、基因型分布比較(n)

2.2CXCL5基因rs352046、rs425535位點的基因型與炎癥指標(biāo)的關(guān)系 rs352046位點的基因型與患者的白細(xì)胞計數(shù)無關(guān)(P>0.05),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白、降鈣素原水平有關(guān)(P<0.05),GG基因型的患者上述4項指標(biāo)水平明顯低于GC及CC基因型的患者。rs425535位點的基因型與患者白細(xì)胞計數(shù)無關(guān)(P>0.05),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平有關(guān)(P<0.05),GG基因型的患者上述4項指標(biāo)水平明顯低于GA及AA基因型的患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 CXCL5基因rs352046、rs425535位點基因型與炎癥指標(biāo)的關(guān)系

2.3CXCL5基因rs352046、rs425535位點等位基因和基因型分布與肺炎嚴(yán)重程度的關(guān)系 CXCL5基因rs352046位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度無關(guān)(P>0.05),而CXCL5基因rs425535位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度有關(guān)(P<0.05),見表4、5。

表4 不同嚴(yán)重程度肺炎患者CXCL5基因rs352046位點的基因型與等位基因分布比較(n)

表5 不同嚴(yán)重程度肺炎患者CXCL5基因rs425535位點的基因型與等位基因分布比較(n)

2.4CXCL5基因多態(tài)性與碳青霉烯類藥物敏感性的關(guān)系 121例多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者中,102例患者對耐碳青霉烯類藥物的敏感性較高(敏感組),19例對這類藥物不敏感(不敏感組)。兩組CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表6。

表6 CXCL5基因位點的基因型與等位基因(n)

3 討 論

醫(yī)院獲得性肺炎占醫(yī)院感染的29.6%～32.7%,病死率為22.3%～33.2%[8],發(fā)病率約為9%[9]。醫(yī)院獲得性肺炎的病原菌中,多重耐藥鮑曼不動桿菌感染率居首位。若患者的免疫系統(tǒng)紊亂或臟器功能受損,多重耐藥鮑曼不動桿菌的易感性明顯增加,易誘發(fā)肺炎、手術(shù)切口部位感染、泌尿系統(tǒng)感染、導(dǎo)管相關(guān)感染等各種醫(yī)院感染。廣譜抗菌藥物的廣泛使用導(dǎo)致多重耐藥鮑曼不動桿菌對目前臨床常用的抗菌藥物的敏感性明顯降低[10-11]。一項對國內(nèi)16家醫(yī)院的細(xì)菌耐藥性通過細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)進(jìn)行監(jiān)測結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 120株鮑曼不動桿菌菌株中多重耐藥鮑曼不動桿菌的比例高達(dá)89.2%,多重耐藥鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率可達(dá)36.4%～2.8%[12]?？梢?多重耐藥鮑曼不動桿菌相關(guān)肺炎仍是公共衛(wèi)生事件中棘手的問題。趨化因子在炎癥細(xì)胞向炎癥組織部位轉(zhuǎn)運(yùn)的過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,CXCL5作為關(guān)鍵的趨化因子之一,可以誘導(dǎo)、維持、擴(kuò)大炎癥反應(yīng)或免疫反應(yīng)以促進(jìn)炎癥進(jìn)展[13]。因此,探究CXCL5基因與肺炎多重耐藥鮑曼不動桿菌感染及碳青霉烯類藥物敏感性之間的關(guān)系具有重要意義。

本研究將兩組患者CXCL5基因的rs352046、rs425535位點進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,兩組CXCL5基因的rs352046位點的基因型及等位基因分布比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);兩組CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對照組,G等位基因、GG基因型低于對照組,表明CXCL5基因rs425535位點的多態(tài)性與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發(fā)生風(fēng)險相關(guān)。既往有研究報道CXCL5基因多態(tài)性與肺炎鏈球菌感染的發(fā)生緊密相關(guān)[14]。趨化因子是一種低相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì),在炎癥反應(yīng)與免疫應(yīng)答的初期與靶細(xì)胞膜上特異性受體相互作用,促使白細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞等在炎癥部位聚集,對人體的炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、組織修復(fù)和造血中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[15]。

本研究將CXCL5基因rs352046、rs425535位點基因型分布與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者炎癥指標(biāo)的關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,rs352046位點的基因型和等位基因分布與患者白細(xì)胞計數(shù)無關(guān),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平有關(guān),GG基因型患者上述4項指標(biāo)水平明顯低于GC及CC基因型患者。CXCL5基因rs425535位點基因型分布與患者白細(xì)胞計數(shù)無關(guān),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原有關(guān),GG基因型患者上述4項指標(biāo)水平明顯低于GA及AA基因型。趨化因子CXCL5多態(tài)性位點基因型的改變導(dǎo)致中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平的升高。在既往探究CXCL5基因多態(tài)性與感染性疾病之間的關(guān)系的研究中,CXCL5-156的基因型及等位基因與巨細(xì)胞病毒感染具有相關(guān)性,而且CXCL5-156 C等位基因的增加使得患兒血清中CXCL5的水平升高,巨細(xì)胞病毒感染及新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的相關(guān)炎癥反應(yīng)加重,患兒相關(guān)死亡風(fēng)險顯著升高[16]。

本研究分析了CXCL5基因rs352046、rs425535位點分布情況與肺炎患者嚴(yán)重程度之間的相關(guān)性。結(jié)果顯示,CXCL5基因rs425535位點基因型及等位基因分布情況與患者組患者的多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的嚴(yán)重程度有關(guān),表明CXCL5基因多態(tài)性可以在一定程度上影響患者肺炎的病情。陸秀娟等[17]研究結(jié)果表示,CXCL9基因多態(tài)性與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生風(fēng)險顯著相關(guān),而且類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生風(fēng)險隨CXCL9水平的升高而增加。雖然本研究結(jié)果顯示,CXCL5基因rs352046位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度無關(guān),但并不意味著CXCL5基因rs352046位點的多態(tài)性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發(fā)生或疾病進(jìn)程不產(chǎn)生影響,未來還需進(jìn)行深入研究。

本研究結(jié)果顯示,CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布在碳青霉烯類藥物敏感和不敏感患者間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),表明CXCL5基因rs425535位點多態(tài)性的改變與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者對碳青霉烯類藥物的敏感性有關(guān)。有研究報道,CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因與青霉素敏感性有關(guān)[14]。本研究結(jié)果中,CXCL5基因rs352046位點的基因型及等位基因分布與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者碳青霉烯類藥物敏感性無關(guān),并不意味著CXCL5基因rs352046位點的多態(tài)性對碳青霉烯類藥物敏感性不產(chǎn)生影響,未來還需更多研究來進(jìn)行深入探討。

綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)CXCL5基因多態(tài)性與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發(fā)生風(fēng)險、嚴(yán)重程度及碳青霉烯類藥物敏感性有關(guān),但本研究也存在樣本量較小的不足,還需要開展多中心、大樣本的研究,并且考慮其他基因及環(huán)境因素產(chǎn)生的影響,以深入探討CXCL5基因多態(tài)性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響。