混合染色法在對(duì)患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用觀察

任莉 孫暉 郝旭

(西安市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 西安 710002)

貧血為臨床常見(jiàn)癥狀,可通過(guò)測(cè)定血液指標(biāo)診斷疾病。臨床在診斷貧血時(shí)常采用血液檢查,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)多項(xiàng)指標(biāo)不僅可以確診疾病,還可鑒別疾病種類(lèi)。然而,有研究[1]指出,應(yīng)用血液檢驗(yàn)診斷貧血患者病因存在一定局限性,使用骨髓細(xì)胞診斷具有顯著效果,可促進(jìn)疾病的治療,對(duì)患者具有重要意義。近年來(lái),骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)一直是專(zhuān)家及社會(huì)各界關(guān)注的焦點(diǎn),如今尚未找到一種特別高效的儀器用于骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn),所以只能人工檢驗(yàn)[2]。做骨髓細(xì)胞學(xué)檢查,可以判斷患者體內(nèi)骨髓細(xì)胞狀況,判定是否有失血性貧血、溶血性貧血、缺鐵性貧血等疾病,從而能及早地治療患者,使患者健康盡快康復(fù)[3]。本文旨在探究混合染色法在對(duì)患者進(jìn)行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月至2022年1月我院進(jìn)行骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的患者80例,其中男36例,女44例;年齡20～79歲,平均(36.54±3.17)歲。本研究經(jīng)倫理委員會(huì)(批準(zhǔn)號(hào)IRB-2020-019)進(jìn)行審查通過(guò)。

1.2方法 首先要收集骨髓液,確保為新鮮的骨髓液,大多數(shù)情況下采集的骨髓液來(lái)源于胸骨和肋骨等位置,最佳的為胸骨部位的骨髓液,在抽取骨髓液時(shí),患者會(huì)感到輕微的痛感,骨髓液內(nèi)見(jiàn)到油珠,這才說(shuō)明所采集的骨髓液為合格的。之后是染色問(wèn)題,在對(duì)骨髓細(xì)胞學(xué)進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí),分別使用瑞氏染色法、姬氏染液法和混合染色法對(duì)骨髓涂片進(jìn)行染色,混合染色法主要的操作為將存放超過(guò)3個(gè)月的配好的瑞氏染色液將姬氏染色液稀釋,直到將其稀釋為十倍左右,然后滴在骨髓的膜上,確保整個(gè)骨髓的膜都被覆蓋住,進(jìn)行均勻染色,保證質(zhì)量,染色時(shí)間越長(zhǎng),濃度越低,染色的效果越好,在進(jìn)行涂片時(shí),要注意均勻涂色,不要留下空隙,快速進(jìn)行涂片。

1.3觀察指標(biāo) 顯微鏡下觀察的指標(biāo)主要有細(xì)胞內(nèi)部的核膜及核仁、細(xì)胞漿的情況是否清晰,細(xì)胞著色情況是否良好。染色結(jié)束后5 min、10 min、20 min、30 min、1 h、1.5 h、2 h分別用顯微鏡觀察涂片。把染色效果差、不能有效分辨細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞輪廓比較模糊的涂片定為0分;把染色效果好、細(xì)胞結(jié)構(gòu)清楚、細(xì)胞漿和細(xì)胞核區(qū)別明顯的涂片定為10分,評(píng)分越高表明染色效果越好。

2 結(jié) 果

通過(guò)開(kāi)展采用混合染色法染色骨髓液涂片顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)采用混合染色法處理骨髓液涂片后,細(xì)胞有著非常鮮艷的色彩,而且細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)染色情況表現(xiàn)得比較清晰,在細(xì)胞漿這一區(qū)域,主要色彩為藍(lán)色,觀察細(xì)胞內(nèi)核仁和核膜,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)情況同樣非常清楚。混合染色法在各個(gè)時(shí)間段的染色效果評(píng)分上顯著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 染色效果數(shù)字法評(píng)分分,n=80]

3 討 論

隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展,骨髓檢查內(nèi)容日益豐富,技術(shù)手段不斷增加,現(xiàn)代骨髓檢查已經(jīng)由早期的單純形態(tài)學(xué)檢查發(fā)展為涉及細(xì)胞化學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)、超微結(jié)構(gòu)分析多方面的檢查,常規(guī)形態(tài)學(xué)檢查逐漸走向規(guī)范化。將混合染色法用于骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn),具有重要研究?jī)r(jià)值,該染色法操作比較簡(jiǎn)單,能清楚地顯示檢驗(yàn)結(jié)果,是骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)的一種較為先進(jìn)的方法[4]。有研究[5]表明,髓液涂片染色效果將直接影響檢驗(yàn)人員觀察其血細(xì)胞形態(tài)。而實(shí)際工作中,由于受各種因素的影響,使得髓液涂片在染色過(guò)程中存在諸多問(wèn)題,從而造成檢測(cè)結(jié)果不真實(shí)或出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象。這些問(wèn)題嚴(yán)重影響了臨床診斷和治療方案的制定。研究[6]證明,只需滿(mǎn)足“長(zhǎng)時(shí)間和低濃度”染色要求即可保證涂片染色效果層次感清晰,獲得理想染色效果。

本文結(jié)果顯示,采用混合染色法,骨髓涂片經(jīng)顯微鏡染色,骨髓液涂片細(xì)胞色澤艷麗,染色狀況較清晰,胞漿以藍(lán)色為主,能明顯看到細(xì)胞內(nèi)核膜及核仁?；旌先旧ㄔ诟鱾€(gè)時(shí)間段的染色效果評(píng)分上顯著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05),這說(shuō)明骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)采用混合染色法有優(yōu)良的效果,利于觀察細(xì)胞形態(tài),能清楚地顯示細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)和水平,具有染色充分的優(yōu)勢(shì),誤診率較低,對(duì)骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)有很好的推廣價(jià)值。瑞氏染色法細(xì)胞核染色反應(yīng)較好,而細(xì)胞質(zhì)染色反應(yīng)比較差;姬氏染色法和瑞氏染色法則相反?；旌先旧▽?duì)骨髓涂片有較好的染色效果,而瑞氏染色法和姬氏染液法均不能達(dá)到滿(mǎn)意的涂片及染色效果。在實(shí)際的骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)用混合染色法可以很好地顯示出細(xì)胞內(nèi)部層次,降低誤診率,提高骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床疾病的診斷提供了可靠基礎(chǔ)。盡管這種人工操作方式比較簡(jiǎn)單,但在具體操作中,仍存在許多需要特別注意的問(wèn)題。因骨髓細(xì)胞學(xué)檢查過(guò)程中目前只能人工操作,所以醫(yī)生及做檢查的有關(guān)人員應(yīng)著重從以下兩方面培養(yǎng):(1)培養(yǎng)職業(yè)責(zé)任感:顯微鏡下看骨髓染色、提取、制片過(guò)程,認(rèn)真負(fù)責(zé),認(rèn)真細(xì)致,嚴(yán)格遵守規(guī)范制度,絕不敷衍了事;另外,還要注重自身素質(zhì)的提升。(2)培養(yǎng)醫(yī)生及有關(guān)檢驗(yàn)人員業(yè)務(wù)素質(zhì)能力:相關(guān)人員要有發(fā)展眼光,用發(fā)展眼光看問(wèn)題,不斷地豐富自己,學(xué)習(xí)當(dāng)今技術(shù)與知識(shí),與時(shí)俱進(jìn),要有獨(dú)立執(zhí)行各種任務(wù),避免工作失誤,盡力把誤診率降到最低,盡可能做到不發(fā)生影響患者治療和康復(fù)。

綜上所述,在采用混合染色法進(jìn)行骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)過(guò)程中,可以達(dá)到針對(duì)某些形態(tài)結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單的細(xì)胞學(xué),將其內(nèi)部結(jié)構(gòu)展現(xiàn)出來(lái),顯著提高細(xì)胞學(xué)檢測(cè)準(zhǔn)確度,可以更好地表達(dá)細(xì)胞結(jié)構(gòu),在臨床上有重要應(yīng)用價(jià)值。