復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清生化指標的影響

楊 鵬，李 銳，2*，查紅剛，葉志祥，史慶超，張志勇

（ 1. 內(nèi)江師范學院，四川 內(nèi)江 641100 ；2. 長江上游魚類資源保護與利用四川省重點實驗室，四川 內(nèi)江 641100 ；3. 內(nèi)江農(nóng)業(yè)科技園區(qū)管理委員會，四川 內(nèi)江 641201 ； 4. 內(nèi)江市水產(chǎn)技術推廣站，四川 內(nèi)江 641100 ）

澳洲淡水龍蝦原產(chǎn)自澳洲，具有營養(yǎng)價值高、肉質(zhì)鮮美、產(chǎn)肉率高、易養(yǎng)殖等特點，目前已成為我國重要的經(jīng)濟蝦養(yǎng)殖品種之一[1]。隨著澳洲淡水龍蝦在我國的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，病害發(fā)生率逐年攀升，給澳洲淡水龍蝦養(yǎng)殖戶帶來嚴重的經(jīng)濟損失。與其他經(jīng)濟蝦類相同，抗生素類藥物成為澳洲淡水龍蝦養(yǎng)殖過程中預防和治療疾病的首選，然而抗生素濫用會導致一系列問題，如藥物殘留、腸道菌群紊亂、二次污染等。因此，開發(fā)綠色、環(huán)保的新型飼料添加劑已成為近年來的研究重點，而植物多糖因其安全、綠色、高效、無殘留等特性備受關注。

無花果（Ficus caricaLinn.）是?？啤㈤艑僦参?，具有健脾開胃、清熱潤腸、潤肺止咳、消腫解毒、抗腫瘤、降壓、輕瀉、助消化等多種功能[2]。五倍子也是一種傳統(tǒng)中藥材，五倍子多糖具有斂肺降火、澀腸止瀉、斂汗止血、收濕斂瘡以及抗腫瘤等功效[3]。有研究表明，餌料中添加無花果多糖或五倍子多糖能夠提高魚類生長性能，增強機體免疫力[4-6]。然而關于上述多糖在澳洲淡水龍蝦養(yǎng)殖中的報道較少，尤其兩種多糖復合應用的研究更加匱乏?；诖耍驹囼炛荚谔接?zhàn)D料中添加復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血液生化指標的影響，以期為復合植物多糖在澳洲淡水龍蝦產(chǎn)業(yè)健康養(yǎng)殖中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗餌料

復合植物多糖由五倍子多糖和無花果多糖兩種多糖組成，均按照水提法獲得[7]。原料五倍子和無花果均購自當?shù)剞r(nóng)貿(mào)市場。根據(jù)澳洲淡水龍蝦的營養(yǎng)需求，以魚粉、豆粕、花生麩和啤酒酵母、魚油、豆油、大豆卵磷脂等原料配制兩組澳洲淡水龍蝦餌料。對照組龍蝦投喂基礎餌料，試驗組使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕?；A餌料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎餌料組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎）Tab.1 Base diet composition and nutrient level(dry matter basis) 單位：%

1.2 試驗設計及飼養(yǎng)管理

試驗動物澳洲淡水龍蝦購自重慶市榮昌區(qū)澳洲淡水龍蝦良種繁育場。試驗開始前，將澳洲淡水龍蝦置于室外池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)14 d以適應環(huán)境，暫養(yǎng)期間投喂常規(guī)澳洲淡水龍蝦配合餌料。正式試驗開始后，將180尾澳洲淡水龍蝦隨機分為對照組和試驗組，每組3個網(wǎng)箱（每個網(wǎng)箱即一個重復），每個網(wǎng)箱30尾蝦。對照組龍蝦投喂基礎餌料，試驗組使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕。試驗期8周。

養(yǎng)殖試驗期間采用少量多次飽食投喂方式，投喂量為蝦體重的5%～10%。養(yǎng)殖采用池塘流水養(yǎng)殖，水體持續(xù)曝氣，水溫為22～28 ℃，pH值7.0～8.0，溶氧量為5～8 mg/L，氨氮含量≤0.2 mg/L，亞硝酸鹽≤0.1 mg/L。試驗期間定期監(jiān)測池塘水溫、溶解氧、氨氮和亞硝酸鹽等含量的變化。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 樣品采集

養(yǎng)殖試驗結束后，試驗蝦禁食24 h，每個網(wǎng)箱中隨機抽取8尾蝦，適量丁香酚麻醉后采血，采集血液置于1.5 mL離心管中，3 500 r/min 離心10 min，取上清分裝并保存于-80 ℃冰箱中，用于血液生化指標分析。

1.3.2 血清生化指標

谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）與谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）采用賴式法測定；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）采用比色法測定；總膽固醇（TC）和甘油三酯（TG）采用單試劑GPOPAP法測定；高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）采用雙試劑直接法測定；上述指標均采用試劑盒（南京建成生物工程研究所）進行測定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0 軟件進行獨立樣本t檢驗。結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響（見表2）

表2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響Tab.2 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum immune indexes of Cherax quadriarinatus 單位：g/L

由表2 可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清TP、ALB、GLB含量均顯著升高（P＜0.05）。

2.2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響（見表3）

表3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響Tab.3 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum lipid indexes of Cherax quadriarinatus 單位：mmol/L

由表3可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清TC、TG、LDL-C 含量均顯著降低（P＜0.05），HDL-C 含量顯著升高（P＜0.05）。

2.3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響（見表4）

表4 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響Tab.4 Effect of compound plant-derived polysaccharides on serum liver function indexes of Cherax quadriarinatus 單位：U/mL

由表4 可知，與對照組相比，試驗組龍蝦血清AST 活性顯著降低（P＜0.05），而ALT活性差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清免疫指標的影響

血液生化指標檢測具有重要的應用價值，可在一定程度上反映水生動物的生理健康情況[8]。ALB是機體一種重要的免疫蛋白，主要由肝臟實質(zhì)性細胞合成，可用于機體的組織修補和能量供給，也是血液膠體滲透壓的主要組成部分[9]。GLB 是由機體免疫器官制造的一種免疫蛋白，主要在肝臟以外生成，與ALB 共同反映機體對環(huán)境的抵抗力[10]。ALB和GLB共同組成TP，當血清中ALB和GLB含量在正常范圍內(nèi)升高時，可在一定程度上表明機體的免疫力提高[11]。方珍珍等[12]研究發(fā)現(xiàn)，投喂含1 200 mg/kg枸杞多糖的餌料后，黃顙魚免疫力顯著增加。吳旋[13]研究表明，在黃顙魚餌料中添加1 200 mg/kg 的黃芪多糖可提高其血清TP和ALB含量。

本試驗結果顯示，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕能夠顯著提高澳洲淡水龍蝦血清TP、ALB、GLB的含量，表明復合植物多糖可提高澳洲淡水龍蝦免疫力，結果與前人研究結論相似。

3.2 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清血脂指標的影響

血清中TC 和TG 是機體脂類代謝水平的重要指標之一，TG 是脂類代謝的主要產(chǎn)物，其合成場所主要是肝臟[14]。TC在血液中通常存在于脂蛋白，HDL-C和LDL-C是其主要存在形式。血清中HDL-C 和LDL-C 含量主要反映脂類在機體內(nèi)的分解與轉(zhuǎn)運的情況[15]。高密度脂蛋白可將血液中多余的膽固醇運送到肝臟，處理分解為膽酸鹽后排出，防止膽固醇在機體中沉積，進而導致機體膽固醇含量過高。而低密度脂蛋白的作用與高密度脂蛋白的作用相反，主要是將肝臟內(nèi)的膽固醇轉(zhuǎn)運到周圍組織加以利用[16]。本試驗中，試驗組龍蝦血清TC和TG含量顯著低于對照組，表明蝦體的脂肪分解代謝能力增強[17]；而HDLC含量提高和LDL-C含量降低，則表明使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕能夠提高澳洲淡水龍蝦對脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運利用，降低血脂水平，有利于機體健康。

有研究發(fā)現(xiàn)，草魚攝食金針菇菇頭后，血清中TG 和TC 含量均顯著下降[18]。此外，譚連杰等[4]研究也表明，餌料中添加0.2%黃芪多糖的降血脂作用很明顯，主要表現(xiàn)為卵形鯧鲹血清TC、TG和LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著升高。前人研究表明，植物多糖具有很好的降低血糖血脂的效用，其作用機制主要是通過促進機體胰島素分泌，調(diào)節(jié)己糖激酶活性，抑制糖異生，抑制脂肪酶的活性、改善脂肪代謝等發(fā)揮其降血糖血脂的作用[19]。由此推測，本研究中的復合植物多糖可能也通過上述機制發(fā)揮降血脂作用，但有待進一步研究驗證。

3.3 復合植物多糖對澳洲淡水龍蝦血清肝臟功能指標的影響

血清生化指標中，ALT 和AST 是兩個重要的指標，其活性高低主要反映機體肝臟的健康狀況[11]。ALT 和AST主要存在于肝細胞中，其中ALT 主要存在于肝細胞胞質(zhì)，而AST則主要存在于肝細胞的線粒體，檢測兩種酶活性是檢驗肝細胞受損情況的靈敏指標之一[9]。正常情況下，血清中ALT 和AST 的活性并不高，但當魚體肝臟功能異常時，肝細胞破裂，肝細胞中的ALT 和AST 釋放到血液中，導致血清中ALT 和AST 活性升高。因此，當魚類血清中ALT和AST的活性升高時，可在一定程度上表明魚體的肝臟功能出現(xiàn)異常[20]。

本試驗結果顯示，與對照組相比，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%豆粕的試驗組龍蝦血清AST活性顯著降低，表明在澳洲淡水龍蝦餌料中使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕對肝臟健康有利。白東清等[21]研究發(fā)現(xiàn)，在金絲魚餌料中添加600～800 mg/L靈芝多糖可顯著降低金絲魚血清AST 活性，結果與本研究結論一致。此外，盧文麒等[22]研究也發(fā)現(xiàn)，在歐洲鰻鱺餌料中添加480 mg/kg的香菇多糖可顯著降低其血液AST活性。而楊琳霖等[18]對草魚的研究中發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，金針菇菇頭組草魚血清AST 活性顯著升高，與本研究結果相反，原因可能由于魚種類、餌料加工工藝、養(yǎng)殖環(huán)境、管理條件等差異導致，具體原因有待進一步分析。

4 結論

本研究結果表明，使用復合植物多糖替代基礎餌料中1%的豆粕可顯著提高澳洲淡水龍蝦的血清免疫功能，降低血脂指標，且對龍蝦的肝臟功能具有一定的保護作用。