EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分預(yù)測(cè)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的可行性

李文杰 王亮 馬慶林

慢性鼻竇炎伴鼻息肉（Chronic sinusitis with nasal polyps，CRSwNP）是以鼻塞、嗅覺障礙、頭痛等為主要癥狀的一種鼻腔、鼻竇黏膜炎癥性疾?。?］。對(duì)于藥物治療無(wú)效的CRSwNP 患者多采用鼻內(nèi)鏡手術(shù)，雖具有一定療效，但術(shù)后炎癥轉(zhuǎn)歸時(shí)間較長(zhǎng)，準(zhǔn)確預(yù)測(cè)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)率，對(duì)評(píng)估其預(yù)后具有重要意義［2］。研究發(fā)現(xiàn)，CRSwNP患者病變組織中長(zhǎng)伴有嗜酸性粒細(xì)胞（Eosino?phils，EOS），CRSwNP 發(fā)病后會(huì)大量釋放EOS 并浸潤(rùn)至鼻黏膜上皮，其在血清中的含量是評(píng)估CRSwNP 病情的重要指標(biāo)之一［3］。白細(xì)胞介素?5（Interleukin?5，IL?5）是由活化的Th2 細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，IL?5及其受體白介素5 受體α（Interleukin 5 receptorα，IL?5Rα）在EOS 生長(zhǎng)及分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用［4］。鼻竇CT 評(píng)分是臨床診斷鼻竇炎分型的重要依據(jù)，亦是評(píng)估鼻竇炎病情的重要手段之一。目前鮮少研究探討鼻息肉組織中的EOS、IL?5、IL?5Rα及鼻竇CT 評(píng)分在預(yù)測(cè)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)方面的作用。為此，本研究進(jìn)行了相關(guān)探究，報(bào)道內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年12 月至2021 年10 月安陽(yáng)市人民醫(yī)院收治的102 例經(jīng)鼻內(nèi)鏡手術(shù)治療的CRSwNP患者進(jìn)行分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合CRSwNP 相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；②年齡20～65 歲，病程>6 個(gè)月，且經(jīng)保守治療效果不佳，癥狀加重需手術(shù)治療者；③病例資料齊全，首次接受鼻內(nèi)鏡治療鼻息肉；④患者自愿參與本研究，且簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在放療、化療等治療病史；②伴鼻咽部惡性腫瘤者；③伴精神異常、認(rèn)知功能障礙等；④近期內(nèi)有心臟病、腦血管疾病等病史。根據(jù)患者術(shù)后是否復(fù)發(fā)進(jìn)行分組，其中術(shù)后12 個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)患者36 例（復(fù)發(fā)組），未復(fù)發(fā)患者66 例（未復(fù)發(fā)組）。復(fù)發(fā)組男20例，女16 例，年齡20～65 歲，平均（45.16±8.12）歲。未復(fù)發(fā)組男47 例，女19 例，年齡20～64 歲，平均（44.54±7.56）歲。兩組資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。

1.2 方法

1.2.1 資料收集

收集兩組病程、體重指數(shù)、吸煙史、合并癥等基線臨床資料。

1.2.2 EOS、IL?5、IL?5Rα檢測(cè)

于術(shù)中取患者鼻息肉組織分為兩等份，一份固定于4%甲醛溶液中石蠟包埋，并切成5 μm 的石蠟薄片行HE 染色。在×400 高倍視野下，任意讀取黏膜固有層細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域中10 個(gè)HPF，計(jì)算EOS。另一份鼻息肉組織進(jìn)行充分研磨后加入Trizol 裂解液充分裂解細(xì)胞，置于EP 管中，加入200 μL 氯仿震蕩20 s，取上層置于另一EP 管中，加入300 μL 異丙醇后以3 500 r/min 離心20 min，隨后留取沉淀，用乙醇洗滌干燥，利用15 μL DEPC 水溶解RNA。采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，RT?PCR 技術(shù)檢測(cè)IL?5、IL?5Rα。IL?5引物序列：上游：5′?ATGCTTCTGCATTTGAGT?3′，下游：5′?ATTCTAGTTGTGGTTTGT?3′，IL?5Rα引物序列：上游：5′?CTGTAGCCAAACAAGGCACA?3′，下 游：5′?ACTCCCAACAACCAAACTGC? 3′ 。PCR 反應(yīng)條件：94℃45 s，55℃30 s，70℃25 s，連續(xù)36 個(gè)循環(huán)，每個(gè)樣本均設(shè)置3 個(gè)反應(yīng)復(fù)孔。凝膠電泳PCR 反應(yīng)產(chǎn)物后，采用圖像分析軟件分析IL?5、IL?5Rα表達(dá)。

1.2.3 鼻竇CT 評(píng)分

兩組患者均于術(shù)前行鼻竇CT 檢查，按Lund?Mackay［6］評(píng)估方法對(duì)術(shù)前鼻竇CT 進(jìn)行分級(jí)。評(píng)估范圍包括上頜竇、前組篩竇、后組篩竇、蝶竇、額竇及竇口鼻道復(fù)合體，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：鼻竇無(wú)異常為0，部分渾濁為1，全部渾濁為2；竇口鼻竇復(fù)合體無(wú)阻塞為0，阻塞為2。每側(cè)12 分，共計(jì)24 分。CT 評(píng)分由同一名影像科技師獨(dú)立完成，得分越高表示嚴(yán)重程度越高。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）描述，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，組間對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)；多因素Logistic回歸分析影響CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素；ROC 曲線分析EOS、IL?5、IL?5Rα及鼻竇CT 評(píng)分對(duì)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值；以P<0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分比較

復(fù)發(fā)組鼻息肉組織中EOS、IL?5、IL?5Rα水平及鼻竇CT 評(píng)分均高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分比較（）Table 1 Comparison of EOS，IL?5，IL?5Rα And sinus CT score between the two groups（）

表1 兩組EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分比較（）Table 1 Comparison of EOS，IL?5，IL?5Rα And sinus CT score between the two groups（）

2.2 兩組患者臨床資料比較

復(fù)發(fā)組前期鼻竇炎手術(shù)史患者占比明顯高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組在年齡、體重指數(shù)、病程、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、性別、吸煙史、合并高血壓、糖尿病及激素類藥物服用史方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

表2 兩組患者臨床資料比較［（），n（%）］Table 2 Comparison of clinical data between the two groups［（），n（%）］

表2 兩組患者臨床資料比較［（），n（%）］Table 2 Comparison of clinical data between the two groups［（），n（%）］

2.3 Logistic 回歸分析影響CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素

以CRSw NP 術(shù)后復(fù)發(fā)（未復(fù)發(fā)組=0，復(fù)發(fā)組=1）作為因變量，將上述有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的因素EOS、IL?5、IL?5Rα水平、鼻竇CT 評(píng)分及前期鼻竇炎手術(shù)史（0=無(wú)，1=有）作為自變量，納入Logistic 回歸分析模型。Logistic 回歸分析結(jié)果顯示，EOS、IL?5、IL?5Rα水平、鼻竇CT 評(píng)分及前期鼻竇炎手術(shù)史均是影響CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的確定性因素（P<0.05）。見表3。

表3 影響CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素分析Table 3 Multivariate analysis of factors influencing postoperative recurrence of CRSw NP patients

2.4 EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分對(duì)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 結(jié)果顯示，EOS、IL?5、IL?5Rα及鼻竇CT評(píng)分單項(xiàng)檢測(cè)曲線下面積（AUC）分別為0.785、0.808、0.813、0.821，均明顯低于四者聯(lián)合預(yù)測(cè)（EOS+IL?5+IL?5Rα+鼻竇CT 評(píng)分）的0.826。見表4、圖1。

圖1 ROC 曲線圖Figure 1 ROC curve

表4 EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分對(duì)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 The predictive value of EOS，IL?5，IL?5Rα and nasal sinus CT score on postoperative recurrence in patients with CRSw NP

3 討論

CRSw NP 是臨床耳鼻咽喉科較為常見的疾病，若不及時(shí)治療可導(dǎo)致患者下呼吸道感染，影響肺通氣功能，病情嚴(yán)重者可危及生命安全［7］。鼻內(nèi)鏡下鼻竇開放手術(shù)是臨床目前治療CRSw NP 患者常見的微創(chuàng)手術(shù)，經(jīng)置入鼻內(nèi)鏡，術(shù)者可直視鼻竇與鼻腔結(jié)構(gòu)，有效避免了傳統(tǒng)開放性手術(shù)對(duì)鼻竇、鼻腔造成的損傷，且更有助于鼻粘膜重建［8?9］。鼻內(nèi)鏡微創(chuàng)手術(shù)具有創(chuàng)傷小、患者術(shù)后易恢復(fù)等優(yōu)勢(shì)，但無(wú)法直接治愈疾病，且術(shù)后創(chuàng)傷愈合時(shí)間較長(zhǎng)，患者復(fù)發(fā)率仍高居不下［10］。故準(zhǔn)確預(yù)測(cè)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)情況，對(duì)于患者預(yù)后評(píng)估及疾病進(jìn)一步的治療尤其重要。

CRSw NP 發(fā)生與慢性病原微生物感染、慢性骨質(zhì)炎癥等存在緊密聯(lián)系，但有關(guān)其發(fā)病機(jī)制尚未明確。近年來(lái)相關(guān)報(bào)道發(fā)現(xiàn)，CRSw NP 發(fā)生與EOS 浸潤(rùn)密切相關(guān)。EOS 是白細(xì)胞的重要成分，可釋放多種細(xì)胞內(nèi)容物，具有殺傷細(xì)菌、寄生蟲的作用［11?12］。在CRSw NP 中EOS 可因炎癥反應(yīng)而大量釋放，損傷鼻黏膜，誘發(fā)鼻黏膜上皮增厚及鱗狀上皮化生，導(dǎo)致CRSw NP 復(fù)發(fā)［13］。何騰等［14］指出，T 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)與CRSw NP 發(fā)病、進(jìn)展關(guān)系密切。IL?5是由T2 細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，IL?5Rα是IL?5受體的重要亞型之一，IL?5可通過(guò)與EOS 表面IL?5Rα受體結(jié)合而參與EOS 生長(zhǎng)、分化過(guò)程，與EOS 參與Th2 細(xì)胞免疫存在一定關(guān)系。鼻竇CT Land?Mackay 評(píng)分法是在鼻竇CT 檢查的基礎(chǔ)上，通過(guò)對(duì)上頜竇、前組篩竇、后組篩竇及竇口鼻道復(fù)合體等各部位的CT 顯像進(jìn)行量化評(píng)分，從而評(píng)估鼻竇病情嚴(yán)重程度，其在多種疾病鼻竇的診療過(guò)程中均具有著明確的診斷價(jià)值。一般認(rèn)為鼻竇CT 總分代表了疾病的嚴(yán)重程度，評(píng)分越高，病情越重，鼻息肉術(shù)后復(fù)發(fā)的比例亦越高。最近報(bào)道發(fā)現(xiàn)，鼻竇CT 評(píng)分總分>15 分時(shí)，預(yù)測(cè)CRSw NP 復(fù)發(fā)的特異性可高達(dá)87.25%［15］。本研究中，與未復(fù)發(fā)組比較，復(fù)發(fā)組鼻息肉組織中EOS、IL?5、IL?5Rα水平及鼻竇CT 評(píng)分更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且經(jīng)Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)上述指標(biāo)均是影響CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。究其原因可能是，EOS 會(huì)經(jīng)Th2 細(xì)胞所產(chǎn)生的IL?5趨化而活化遷徙到炎性組織，導(dǎo)致患者炎癥程度增加，誘發(fā)CRSw NP 在術(shù)后復(fù)發(fā)；同時(shí)活化后的EOS 會(huì)進(jìn)一步釋放IL?5、IL?5Rα 等因子，趨化更多以EOS 為主的炎性因子浸潤(rùn)，使患者在術(shù)后仍存在一定復(fù)發(fā)傾向。此外，本研究經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，EOS、IL?5、IL?5Rα及鼻竇CT 評(píng)分對(duì)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，且上述指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的AUC 更高，提示EOS、IL?5、IL?5Rα 及鼻竇CT 評(píng)分可作為CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)，且聯(lián)合檢測(cè)效能更佳。

綜上所述，EOS、IL?5、IL?5Rα及鼻竇CT 評(píng)分是引發(fā)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)因素，可作為預(yù)測(cè)CRSw NP 患者術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)可靠指標(biāo)。