基于高效液相色譜法的即食食品中山梨酸含量測定

食品添加劑是現(xiàn)代食品工業(yè)的重視組成部分，在合理范圍內(nèi)使用食品添加劑不會對人體健康造成影響，但過量或超范圍使用食品添加劑就會適得其反。針對市場上的即食食品進行質(zhì)量安全檢驗時發(fā)現(xiàn)，山梨酸、脫氫乙酸等是使用較多的食品添加劑，其中山梨酸能夠較好地抑制細(xì)菌、霉菌的生長與繁殖。我國已發(fā)布了相關(guān)法律法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)，用于規(guī)定與約束即食食品中添加劑的含量，但部分食品生產(chǎn)與加工單位為了提高食物的保質(zhì)期，或使食品具有更好的品相，仍存在違規(guī)使用食品添加劑的行為。

針對這一問題，食品安全衛(wèi)生監(jiān)督管理部門采取了對地方企業(yè)抽查、對市場產(chǎn)品集中調(diào)查的方式，來檢測即食食品中添加劑的含量與種類。不過，使用現(xiàn)有的技術(shù)開展檢測工作，不僅無法滿足對于大量樣品的快速檢測需求，還會對即食食品合作銷售點的產(chǎn)品營銷造成一定的困擾，因此有必要研制一種可以快速高效地檢測即食食品中添加劑的方法。本研究引進高效液相色譜法，設(shè)計出針對即食食品中山梨酸含量的測定方法，旨在提高市場上即食食品的安全性，為消費者購買即食食品提供全面的保障，也便于監(jiān)管部門對即食食品安全問題進行處理與集中整治。

一、材料與儀器

為實現(xiàn)對即食食品中添加劑含量的精準(zhǔn)測定，在開展相關(guān)研究之前，應(yīng)根據(jù)此次測定試驗的需求設(shè)計試驗樣品與材料，如表1所示。然后根據(jù)此次試驗的需求，選擇相應(yīng)的試驗儀器和設(shè)備，如表2所示。

二、實驗與方法

1.樣品的預(yù)處理。（1）用電子天平稱取即食食品樣品4.5g，放置到50mL的離心管中，再加入濃度為5mol/L-6mol/L的鹽酸試劑0.75mL，然后使用高速離心機離心攪拌樣本，加蓋渦旋20-40s，使樣品快速酸化。（2）在裝置中加入乙醚溶液18-22mL，加蓋渦旋15-25s，再將其放置在高速離心機中，以8000r/min的速度離心處理2-4min。（3）使用滴管采集乙醚層溶液，將其放置在圓底的燒瓶中，使用水渦旋轉(zhuǎn)處理，當(dāng)樣品處于均勻混合的狀態(tài)后，在其中加入甲醇溶液1-2mL，混合處理樣本溶液后在其中加入水7-10mL，渦旋混勻。

2.樣品的制備。（1）先用滴管將上述樣本溶液吸取到固相萃取小柱中，再用濃度為0.5mol/L的鹽酸溶液2.5-3.5m L淋洗處理樣本，以此凈化試驗樣品。（2）使用至少5mL的甲醇溶液對樣本進行洗脫處理，再使用氮吹管對樣本清洗脫液。（3）按照甲醇∶水=3∶7的比例，配備定容溶液1-2mL，再將樣品放置在指定容器中，使用直徑為0.45μm的濾膜過濾處理樣品，將其作為待測樣品。

3.樣品的酸化處理。（1）用滴管吸取少量的混合樣本（吸取量控制在2.5-4.5g）并置于離心管中，在其中加入濃度為0.05mol/L-0.15mol/L的NAOH溶液40-60mL，再在室溫條件下振蕩處理至少1min，然后靜置樣本材料1min。（2）在樣本中加入乙醚溶液25-35mL，確保材料靜置出現(xiàn)分層后，使用鹽酸試劑對樣本進行酸化處理。（3）用酸堿度檢測試紙檢測當(dāng)前狀態(tài)下溶液的酸堿度，當(dāng)酸堿度控制在1-2時，收集樣本材料中的有機相，以供后續(xù)即食食品中山梨酸含量的測定分析。

三、結(jié)果與結(jié)論

1.山梨酸含量測定結(jié)果分析。使用固相萃取小柱獲取凈化前與凈化后的試驗樣品，根據(jù)即食食品中山梨酸具有吸光性的特點，展開即食食品樣品中山梨酸含量的測定。測定過程中，將凈化前的試驗樣品標(biāo)注為樣品①，將凈化后的試驗樣品標(biāo)注為樣品②，色譜測定結(jié)果如圖1與圖2所示。

使用高效液相色譜法，可以掌握樣本材料在指定條件下的吸光度，從而精準(zhǔn)測定即食食品樣品中山梨酸的含量。深入分析圖1與圖2色譜圖中曲線的走向時可以發(fā)現(xiàn)，樣品②的色譜圖中只有一條色譜柱，對應(yīng)即食食品樣品中山梨酸物質(zhì)的吸光度；樣品①的色譜圖中含有多條色譜柱，其中第四條色譜柱對應(yīng)即食食品樣品中山梨酸物質(zhì)的吸光度，其他三條色譜柱對應(yīng)即食食品樣品中其他物質(zhì)的含量。

盡管本研究設(shè)計的實驗方法可以實現(xiàn)對即食食品樣品中山梨酸含量的測定，但未經(jīng)過凈化處理的樣品①的測定結(jié)果中存在干擾條件，即多條色譜柱，說明未經(jīng)過處理的樣品①的測定結(jié)果極易受到外界條件或其他因素的影響而出現(xiàn)偏差。因此，可得到如下結(jié)論：基于高效液相色譜法可以實現(xiàn)對即食食品中山梨酸含量的精準(zhǔn)測定，但為了滿足測定結(jié)果的排除干擾需求，應(yīng)在測定過程中根據(jù)相關(guān)工作的具體需求，做好對樣品前處理的凈化處理工作，避免或降低外部干擾條件對即食食品中山梨酸含量測定結(jié)果的影響。

2.回收率與測定結(jié)果精準(zhǔn)度分析。完成對本研究提出方法的可行性校驗后，設(shè)計加標(biāo)試驗，檢驗該方法在實際應(yīng)用中測定結(jié)果的準(zhǔn)確率與回收率。在測定過程中，選擇若干個空白樣品作為對照樣品，向空白樣品中加入一定量的山梨酸（5-50μg），然后統(tǒng)計測定結(jié)果的準(zhǔn)確率與回收率，結(jié)果如表3所示。

（1）精準(zhǔn)度。從表3可以看出，在使用高效液相色譜法測定即食食品中山梨酸物質(zhì)的含量時，測定結(jié)果的精準(zhǔn)度較高，即山梨酸添加量與山梨酸實測量之間的偏差較小，基本可以在測定中將結(jié)果偏差控制在2.0μg以內(nèi)，進一步證明了高效液相色譜法在實驗中的可行性。

（2）回收率。從表3的回收率統(tǒng)計結(jié)果可以看出，在不同的山梨酸添加量下，高效液相色譜法都可以保證試驗樣品的回收率在95%以上，說明高效液相色譜法可以在實驗中降低對樣本或?qū)嶒炘牧系睦速M。

綜上所述，在現(xiàn)代食品加工過程中，適量添加甜味劑、防腐劑等食品添加劑是改善風(fēng)味、預(yù)防腐爛、延長保質(zhì)期的重要手段之一，但是如果超出標(biāo)準(zhǔn)的劑量范圍，就會對人體造成危害。所以，對食品中的食品添加劑進行定性和定量分析，對于保障食品安全具有重要意義?；诖?，本研究引進高效液相色譜法，以某供應(yīng)商提供的即食食品為例，通過準(zhǔn)備試驗儀器和樣品、樣本前處理、制備試驗樣品等方式，設(shè)計針對此食品中山梨酸含量的全新測定方法。試驗證明，該方法在實際應(yīng)用中不僅可以降低測定結(jié)果的偏差，還可以保證試驗樣品的回收率保持在95%以上。在后續(xù)的研究中，應(yīng)根據(jù)食品安全相關(guān)工作的具體需求，嘗試將此次設(shè)計的方法投入市場使用，充分發(fā)揮該方法在實際應(yīng)用中的效能，更好地保障食品的安全性與可靠性。

作者簡介：趙小花（1981-），女，漢族，江蘇興化人，助理工程師，大學(xué)本科，研究方向為食品、紡織品檢測。