宮頸癌患者血清TAGLN2和AIF1表達(dá)及臨床診斷價(jià)值

王淑芳 閆玉偉 王秀艷 娜日蘇

宮頸癌是我國(guó)女性第二大常見(jiàn)的惡性腫瘤,每年新發(fā)病例數(shù)約9.9萬(wàn)例,占全球總發(fā)病例數(shù)的18.6%,死亡病例達(dá)3.1萬(wàn)例,嚴(yán)重威脅我國(guó)女性生命健康[1]。宮頸癌患者發(fā)現(xiàn)時(shí)多為中晚期,生存預(yù)后不佳[2]。肌動(dòng)蛋白凝膠蛋白2(transgelin 2,TAGLN2)作為一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,可誘導(dǎo)肌動(dòng)蛋白收縮并調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架[3]。近年來(lái)學(xué)者發(fā)現(xiàn),TAGLN2作為一種促癌基因,并作為細(xì)胞外金屬硫蛋白 2 的受體,促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移[4]。同種異體移植炎性因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)是一種結(jié)合肌動(dòng)蛋白和鈣的蛋白質(zhì),由細(xì)胞因子和干擾素誘導(dǎo)產(chǎn)生,可促進(jìn)巨噬細(xì)胞活化和血管平滑肌細(xì)胞和 T 淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)[5]。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),AIF-1在肝細(xì)胞肝癌等惡性腫瘤中表達(dá)升高,其通過(guò)促進(jìn)腫瘤的增殖和遷移,促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展,是新的腫瘤早期診斷標(biāo)志物[6]。TAGLN2、AIF-1作為分泌型蛋白,能夠分泌到血清中得以檢測(cè),可能是新的宮頸癌血清腫瘤標(biāo)志物。本研究分析宮頸癌患者血清TAGLN2、AIF-1表達(dá)及兩者對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年3月至2020年3月我院收治的94例宮頸癌患者作為宮頸癌組,以同期我院診治的80例宮頸良性病變的患者作為良性病變組。宮頸癌組患者年齡33～72歲,平均年齡(46.1±7.3)歲;體重指數(shù)(BMI):23.96±4.23;絕經(jīng)史:有21例,無(wú)73例;宮頸鱗癌74例,宮頸腺癌20例;高中分化51例,低分化43例;FIGO分期Ⅰ期60例,Ⅱ期34例;浸潤(rùn)深度:淺肌層57例,深肌層37例;伴淋巴轉(zhuǎn)移43例,不伴淋巴轉(zhuǎn)移51例。良性病變組患者年齡31～71歲,平均年齡(44.5±6.8)歲;BMI:24.17±4.02;絕經(jīng)史:有17例,無(wú)63例;宮頸管良性贅生物46例,宮頸炎性增生組織34例。2組在年齡、BMI指數(shù)及絕經(jīng)史之間差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 宮頸癌組患者入組標(biāo)準(zhǔn):(1)于我院首次診治,經(jīng)病理組織學(xué)檢查明確診斷為宮頸癌。(2)術(shù)前接受經(jīng)陰道彩色多普勒超聲檢查。(3)臨床資料等完整,家屬對(duì)本研究知情同意并簽字。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)既往或合并其他器官惡性腫瘤。(2)伴有感染性疾病或自身免疫性疾病。(3)近3個(gè)月無(wú)心腦血管疾病病史或手術(shù)史。

1.3 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清TAGLN2、AIF-1 留取宮頸癌組和良性病變組所有研究對(duì)象清晨空腹靜脈血約5 ml,以2 500 min速度離心5 min,離心半徑10 cm,取上層血清保存-80℃冰箱中。人TAGLN2 ELISA試劑盒購(gòu)自上海信裕生物科技有限公司,人AIF-1 ELISA試劑盒購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司。檢測(cè)血清中TAGLN2、AIF-1水平,實(shí)驗(yàn)步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。以不同稀釋倍數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為橫坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品450 nm處的OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。將檢測(cè)樣品OD值,帶入曲線(xiàn),計(jì)算對(duì)應(yīng)的樣品濃度得到樣品實(shí)際濃度。

2 結(jié)果

2.1 2組血清TAGLN2、AIF-1表達(dá)比較 宮頸癌組血清TAGLN2、AIF-1分別為(55.52±7.15)ng/ml、(742.28±67.34)pg/ml,顯著高于良性病變組(21.13±3.58)ng/ml、(420.84±50.13)pg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=39.045、35.190,均P<0.05)。

2.2血清TAGLN2、AIF-1表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 宮頸癌組血清中TAGLN2、AIF-1表達(dá)與腫瘤FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān),FIGO分期Ⅱ期、伴淋巴轉(zhuǎn)移患者血清中TAGLN2、AIF-1水平分別顯著高于FIGO分期Ⅰ期、無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移患者(P均<0.05)。不同年齡、病理類(lèi)型、腫瘤分化程度及浸潤(rùn)深度患者血清中TAGLN2、AIF-1差異不明顯(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 血清TAGLN2、AIF-1表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 多因素Logistic回歸分析影響宮頸癌發(fā)生的因素 以是否發(fā)生宮頸癌為因變量(賦值:有=1,無(wú)=0),以年齡、BMI、絕經(jīng)史(1=有,0=無(wú))、血清TAGLN2、AIF-1為自變量,進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)血清TAGLN2、AIF-1升高是影響宮頸癌發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。分別把年齡、BMI、絕經(jīng)史帶入模型校正后,結(jié)果TAGLN2、AIF-1升高仍然是影響宮頸癌發(fā)生的獨(dú)立因素。見(jiàn)表2。

表2 多因素Logistic回歸分析影響宮頸癌發(fā)生的因素

2.4 ROC曲線(xiàn)分析血清TAGLN2、AIF-1及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值 TAGLN2、AIF-1及聯(lián)合檢測(cè)的AUC 分別為 0.735、0.756,聯(lián)合診斷的 AUC 為0.851,明顯高于單個(gè)指標(biāo)的 AUC(Z=3.915、3.389,P=0.000、0.000)。敏感度分別為80.125%、80.242%和78.337%。見(jiàn)表3,圖 1。

表3 血清TAGLN2、AIF-1及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸癌的診斷價(jià)值

圖1 血清TAGLN2、AIF-1及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸癌診斷的ROC曲線(xiàn)

3 討論

宮頸癌是起源于子宮頸上皮的惡性病變,是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤。早期宮頸癌患者臨床癥狀和體征不明顯,發(fā)現(xiàn)就診時(shí)較晚,多為中晚期,喪失早期治療價(jià)值,因而早期發(fā)現(xiàn)和診斷具有重要的臨床意義[7]。陰道鏡檢查聯(lián)合宮頸刮片細(xì)胞學(xué)檢查及活檢是宮頸癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn),該檢查雖具有較高的診斷準(zhǔn)確性,但檢查操作復(fù)雜且有創(chuàng)傷性,術(shù)后患者常伴有疼痛、出血及感染等,無(wú)法用于大規(guī)模人群的早期篩查診斷[8]。因此,尋找簡(jiǎn)單易于操作的早期篩查診斷宮頸癌的方案,進(jìn)而早期治療,對(duì)于提高患者的預(yù)后,意義較大。

宮頸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,涉及大量癌基因的突變及抑癌基因,腫瘤細(xì)胞能夠分泌產(chǎn)生大量因子,重塑腫瘤微環(huán)境中間質(zhì)細(xì)胞及免疫細(xì)胞的構(gòu)成,影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[9]。TAGLN2位于人體染色體1q21-q25,是一種壓力應(yīng)激相關(guān)蛋白,可穩(wěn)定肌動(dòng)蛋白絲。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),TAGLN2在多種惡性腫瘤中,均參與癌細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移,TAGLN2通過(guò)激活核因子kB信號(hào)通路,參與癌癥發(fā)生發(fā)展的過(guò)程[10]。目前TAGLN2在宮頸癌中的生物學(xué)功能尚不清楚。本研究中,宮頸癌患者血清中TAGLN2的表達(dá)顯著升高。目前宮頸癌中TAGLN2表達(dá)升高的機(jī)制尚不清楚,可能與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控異常有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),微小RNA-613能夠結(jié)合TAGLN2 mRNA,降低其穩(wěn)定性,抑制TAGLN2的表達(dá)和分泌,腫瘤發(fā)生時(shí),微小RNA-613表達(dá)下調(diào),導(dǎo)致TAGLN2 mRNA穩(wěn)定性增加,進(jìn)而促進(jìn)TAGLN2的分泌表達(dá)[11]。我們進(jìn)一步分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),血清TAGLN2高表達(dá)與較高的腫瘤FIGO分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),表明宮頸癌中TAGLN2表達(dá)升高參與促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。Jin等[12]發(fā)現(xiàn),腫瘤細(xì)胞分泌產(chǎn)生的TAGLN2能夠促進(jìn)腫瘤的血管新生及腫瘤浸潤(rùn),進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的惡性進(jìn)展。尚有研究發(fā)現(xiàn),腫瘤中TAGLN2的表達(dá)升高能夠促進(jìn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和激活轉(zhuǎn)錄因子,促進(jìn)腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá),增強(qiáng)腫瘤的遷移和轉(zhuǎn)移能力[13]。因此,宮頸癌中TAGLN2可能作為一種促癌基因,促進(jìn)宮頸癌的惡性進(jìn)展。

AIF-1 是一種分子量為17kDa的炎性介質(zhì),,主要由循環(huán)單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,能夠與鈣結(jié)合性支架蛋白結(jié)合,參與調(diào)節(jié)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性性皮膚病和系統(tǒng)性硬化癥等炎性反應(yīng)[14]。近年來(lái)研究表明,AIF-1 乳腺癌及膠質(zhì)瘤中表達(dá)升高,在體外參與促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖和遷移,參與促進(jìn)惡性腫瘤的進(jìn)展[15,16]。本研究中,宮頸癌患者血清AIF-1表達(dá)顯著上調(diào),提示AIF-1可能參與宮頸癌的腫瘤發(fā)生。研究表明,腫瘤中胰島素樣生長(zhǎng)因子能夠通過(guò)結(jié)合其表面受體,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞AIF-1的表達(dá)上調(diào),進(jìn)而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的過(guò)度增殖[17]。此外,本研究中AIF-1的表達(dá)與腫瘤FIGO分期及淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān),表明AIF-1的表達(dá)升高參與促進(jìn)宮頸癌的疾病進(jìn)展。研究發(fā)現(xiàn),AIF-1能夠通過(guò)上調(diào)腫瘤細(xì)胞中腫瘤壞死因子α,促進(jìn)絲裂原活化蛋白激酶表達(dá),進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的無(wú)線(xiàn)增殖[18]。此外,近年來(lái)發(fā)現(xiàn)AIF-1參與腫瘤微環(huán)境的調(diào)節(jié),AIF-1的表達(dá)升高能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞由M1型向M2型表型轉(zhuǎn)化,促進(jìn)腫瘤處于免疫抑制的微環(huán)境,導(dǎo)致腫瘤的免疫逃逸,促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展[19]。我們進(jìn)一步利用ROC曲線(xiàn)發(fā)現(xiàn),TAGLN2及AIF-1聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸癌較高的診斷價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能高于單一指標(biāo)檢測(cè),表明血清TAGLN2及AIF-1是早期診斷宮頸癌的有效血清學(xué)指標(biāo)。

綜上所述,宮頸癌患者血清TAGLN2、AIF-1表達(dá)水平升高,并且與腫瘤FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。聯(lián)合血清TAGLN2、AIF-1對(duì)于診斷宮頸癌具有較高的價(jià)值。臨床上,醫(yī)生可根據(jù)血清TAGLN2、AIF-1水平對(duì)宮頸癌的疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行初步評(píng)估,值得臨床深入探索。但由于本研究受到樣本量的限制,并且未檢測(cè)人乳頭瘤病毒感染狀態(tài)與血清學(xué)指標(biāo)的關(guān)系,因此,有待大樣本、多學(xué)科進(jìn)行深入研究。