球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽對斜紋夜蛾的協(xié)同作用及制劑研究

李佳穎 肖志鵬 張慎 蔡海林 滕凱 曾維愛 伍紹龍 周向平

摘 要： 菌藥復(fù)配可彌補各自的不足，為害蟲防治提供了新的思路。為明確球孢白僵菌SCAUJH19與甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）的相容性及其聯(lián)合毒力和復(fù)配制劑，本文測定了不同濃度甲維鹽和球孢白僵菌SCAUJH19混合后對菌株孢子萌發(fā)和菌落生長的影響，測定了球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽聯(lián)合使用對斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力，并根據(jù)最優(yōu)菌藥組合對復(fù)配制劑進行了研究。結(jié)果表明：球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽有較好的相容性；0.5～20 mg/L甲維鹽處理的球孢白僵菌SCAUJH19在第3天時孢子萌發(fā)率為96.11%～98.01%；在第7天時0.5 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L甲維鹽處理球孢白僵菌SCAUJH19的菌落直徑分別為42.95 mm、44.50 mm、41.98 mm，與空白對照差異不顯著。 球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽組合1×108孢子/mL+1.5 mg/L、 1×108孢子/mL+0.5 mg/L和1×107孢子/mL+1.0 mg/L第7天時對斜紋夜蛾2齡幼蟲校正死亡率分別為100%、95%和95%，高于其他菌藥組合和菌藥單劑，3種組合致死中時（LT50）也比單用球孢白僵菌SCAUJH19短。復(fù)配劑油懸浮劑第3天時對斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲的致死率最高均為100%。復(fù)配劑可濕性粉劑第3天時對斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲的致死率最高分別為96.39%、94.58%、83.33%、100%。復(fù)配劑油懸浮劑和可濕性粉劑對斜紋夜蛾幼蟲有明顯毒殺作用，油懸浮劑對高齡斜紋夜蛾幼蟲的致死力要優(yōu)于可濕性粉劑。

關(guān)鍵詞： 斜紋夜蛾；真菌；殺蟲劑；毒力測定；相容性

中圖分類號：S476.12

文獻標識碼：A

文章編號：1008－0457（2023）02－0008－09

國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.002

斜紋夜蛾 Spodoptera litura 是一種雜食性的世界性農(nóng)業(yè)害蟲，在全國各地均有分布［1］。目前斜紋夜蛾的防治主要依賴于化學(xué)農(nóng)藥，由于近年來化學(xué)農(nóng)藥的大量、頻繁及不合理施用，斜紋夜蛾對防治藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性［2］。大量使用化學(xué)農(nóng)藥不僅造成害蟲抗藥性，也給生態(tài)環(huán)境造成了嚴重的污染，因此尋找一種高效、安全、可持續(xù)的生物防治措施勢在必行。利用蟲生真菌進行害蟲防治是生物防治的一種重要手段，具有環(huán)境友好、種類多、分布廣等優(yōu)勢［3］。球孢白僵菌寄主范圍廣泛，能夠感染超過700種宿主［4］，在重要農(nóng)林害蟲防治中取得了較為明顯的效果［5-6］。周立等［7］研究發(fā)現(xiàn)從田間煙草土壤中分離的球孢白僵菌SCAUYZ16和SCAUJH19孢子懸浮液濃度為1×108孢子/mL時對斜紋夜蛾2齡致死率分別為70.71%和57.84%。郭亞力等［8］發(fā)現(xiàn)從田間菜青蟲 Hexian area 分離出的球孢白僵菌MZ050724在不同濃度的孢子懸浮液下對斜紋夜蛾2齡和3齡幼蟲的最高死亡率分別為87.46%和80.56%。但是與化學(xué)藥劑相比，白僵菌存在通過分生孢子等侵染體侵染害蟲，作用過程緩慢［9］、野外環(huán)境復(fù)雜多樣，防治效果不穩(wěn)定［10］、白僵菌不同施菌方法和方式對害蟲的致死效果影響較大［11］等不足。

甲維鹽是在阿維菌素基礎(chǔ)上添加其他基團合成的一種新型高效綠色殺蟲劑，對鱗翅目昆蟲的致死效果高于阿維菌素［12-13］。高聰芬等［14］報道無論是用浸葉法還是噴霧法測定，甲維鹽對斜紋夜蛾均表現(xiàn)出較高的毒力。將白僵菌與殺蟲劑組合使用，既彌補了白僵菌作用效果慢的缺點，又可以降低殺蟲劑的使用量，發(fā)揮殺蟲劑的速效作用，兩者相輔相成［15］，但殺蟲劑會對白僵菌孢子萌發(fā)率、生長發(fā)育、產(chǎn)孢量等方面產(chǎn)生影響，白僵菌與殺蟲劑的相容性是其組合應(yīng)用的前提［16］。Yadav等［17］基于白僵菌孢子形成、萌發(fā)和營養(yǎng)生長評估了甲維鹽與白僵菌的的相互作用，發(fā)現(xiàn)甲維鹽與白僵菌高度相容。曹偉平等［18］研究得出5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽常規(guī)濃度5倍稀釋液對白僵菌HFW-05孢子萌發(fā)沒有顯著的抑制作用，對菌絲生長和產(chǎn)孢量有一定的抑制作用，并明確了在此濃度下與白僵菌HFW-05 1×106孢子/mL孢懸液聯(lián)合使用時對小菜蛾 Plutella xylostella 幼蟲表現(xiàn)出比單用白僵菌菌株更高的殺蟲效果。

可濕性粉劑具有加工簡單、易使用、有效成分含量高，成本低等特點，在真菌藥劑生產(chǎn)及推廣中具有極大優(yōu)勢［19-20］，王海鴻等［21］通過對菌株的純化復(fù)壯、液-固雙相發(fā)酵的條件優(yōu)化和發(fā)酵工藝研究配方和劑型研發(fā)等多個環(huán)節(jié)生產(chǎn)出了150億孢子/g球孢白僵菌可濕性粉劑，用于西花薊馬 Frankliniella occidentalis 高效防治。將真菌做成油懸浮劑有利于孢子貯存、孢子侵染蟲體和提高孢子的抗逆能力，從而達到提高防治效果的作用［22-23］，在LUBILOSA項目中將高效防蝗菌株金龜子綠僵菌IMI330189在大米或小米表面培養(yǎng)獲得孢子粉，在使用時將孢子粉配置成油懸浮劑［24］?？蓾裥苑蹌┖陀蛻腋┦蔷帍?fù)配加工較為理想的劑型。

本研究以前期篩選出對斜紋夜蛾2齡幼蟲高毒力菌株SCAUJH19為材料，研究球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽的相容性及協(xié)同增效作用，同時將球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽以最優(yōu)組合配制成復(fù)配劑型可濕性粉劑和油懸浮劑，評價了其對不同齡期斜紋夜蛾幼蟲的室內(nèi)毒力，以期研制出菌藥組合的最優(yōu)復(fù)配制劑。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗材料

1.1.1 ?供試蟲源

斜紋夜蛾蟲卵及人工飼料購于河南省濟源白云實業(yè)有限公司，于RXZ-500C型智能人工氣候箱（寧波江南儀器廠）中用人工飼料繼代培養(yǎng)。飼養(yǎng)條件為溫度27±1 ℃，光周期L14∶ D10，相對濕度（75±5）%。選取飼養(yǎng)三代后生長一致的斜紋夜蛾不同齡期幼蟲進行試驗。

1.1.2 ?供試藥劑

76%甲維鹽原藥購于江西仁恒藥業(yè)有限公司。

1.1.3 ?供試菌株

前期從湖南省永州市煙區(qū)土壤中分離，對斜紋夜蛾具高毒力球孢白僵菌SCAUJH19［25］，保存于華南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物防治教育部工程研究中心。

1.2 ?甲維鹽對球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率的影響

將供試菌株轉(zhuǎn)接到Potato Dextrose Agar medium（PDA）平板后在26±1 ℃培養(yǎng)10 d，待產(chǎn)生分生孢子后用0.05％吐溫-80無菌水洗脫孢子，配制成1.0×106 孢子/mL的孢子懸浮液備用。 將2 mL 1×104 孢子/mL 孢子懸浮液加入到甲維鹽終濃度為0.5 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L的SDA液體培養(yǎng)基中，置于搖床180 rpm 25 ℃ 振蕩培養(yǎng)。分別在24 h、48 h和72 h用移液器取樣，在血球計數(shù)板上鏡檢各處理的孢子萌發(fā)情況，統(tǒng)計孢子萌發(fā)率。每處理重復(fù)3次，以加入0.05％吐溫-80無菌水的液體培養(yǎng)基作為空白對照。

1.3 ?甲維鹽對球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長的影響

將球孢白僵菌SCAUJH19菌株轉(zhuǎn)接到PDA培養(yǎng)基上26±1 ℃培養(yǎng)10 d作為供試菌，用直徑5 mm的打孔器打菌餅，將菌餅置于含藥PDA平板進行接種，于26±1 ℃光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。用十字交叉法，分別于第3天、5天和7天測定菌落直徑，單位為mm。每個處理5個重復(fù)，以加入無菌水的PDA培養(yǎng)基作為對照。

1.4 ?菌株SCAUJH19和甲維鹽組合對斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測定

按照表1對球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽進行不同組合復(fù)配，用毛筆將2齡幼蟲挑入不同濃度菌藥組合液中浸漬5 s，放入直徑12 cm培養(yǎng)皿中，用保鮮膜封口并刺孔通氣后置于智能培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)，連續(xù)7天逐日定時觀察記錄。用已滅菌的0.1%的吐溫-80水作對照，每個處理3次重復(fù)，每次處理20頭幼蟲。逐日檢查斜紋夜蛾的死亡情況并記錄死亡數(shù)，計算幼蟲的校正死亡率：校正死亡率＝［（處理組死亡率-對照組死亡率）/（1-對照組死亡率）］×100%。

1.5 ?菌株SCAUJH19與甲維鹽復(fù)配進行可濕性粉劑的制備

復(fù)配劑型制備參考Sivasundaram等［26］的方法。將25 mL的球孢白僵菌孢子懸浮液（1×107 孢子/mL）加入到發(fā)酵培養(yǎng)基（復(fù)配制劑總重5 mL蜜糖、2.5 g蛋白胨、2.5 g酵母、215 mL無菌水）中，在25 ℃、180 r/min條件下振蕩培養(yǎng)72 h，接著取制劑總重的10 mL 吐溫-80、5 g纖維素、5 g分散劑NNO、2 g甲維鹽以及球孢白僵菌發(fā)酵液加入728 g滑石粉中，經(jīng)攪拌器充分攪拌均勻，干燥72 h后，放入4 ℃恒溫冰箱保存。

1.6 ?菌株SCAUJH19與甲維鹽復(fù)配進行油懸浮劑的制備

復(fù)配劑型制備參考Kim等［27］的方法。將20 mL ?1×107 孢子/mL球孢白僵菌孢子懸浮液接入 200 mL Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract（SDY） 液體培養(yǎng)基中，25 ℃、120 r/min振蕩培養(yǎng)72 h。1000 g大米拌入5 mL豆油和1 g硝酸鉀后放入保鮮袋中濕熱滅菌，與上述培養(yǎng)菌液充分混合后25 ℃、12 L∶ 12 D光周期條件下培養(yǎng)10 d。將發(fā)酵物料置于32 ℃鼓風(fēng)干燥機下干燥5 d，用振動篩粉機收獲孢子粉。5 g孢子粉添加到68 mL玉米油中使用磁力攪拌器攪拌30 min。乙氧基化蓖麻油和脫水山梨醇單油酸酯按7∶ 3（v/v）的比例配制10 mL乳化劑，添加到基于玉米油的孢子粉懸浮液中攪拌30 min。孢子粉懸浮液中加入2 g甲維鹽原藥、5 mL TDE-3和10 g海藻酸鈉鹽攪拌30 min后放入4 ℃恒溫冰箱保存。

1.7 ?不同劑型對斜紋夜蛾幼蟲的毒力測定

參照上述配方制得的可濕性粉劑和油懸浮劑分別稀釋50倍、 100倍、250倍、500倍、1000倍后對斜紋夜蛾2至5齡幼蟲進行室內(nèi)毒力測定。毒力測定方法參照1.4。毒力測定數(shù)據(jù)采用Probit方法分析，求出毒力回歸方程，計算LT50。并計算幼蟲的死亡率（死亡率＝試蟲死亡率/試蟲數(shù)×100%）。

1.8 ?數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

利用SPSS19.0軟件進行試驗數(shù)據(jù)處理分析，采用單因素方差分析對斜紋夜蛾幼蟲死亡率進行結(jié)果分析，并運用Tukey檢驗差異顯著性。用GraphPad Prism 8繪制圖表。白僵菌與甲維鹽協(xié)同交互作用類型的計算參照Huang等［28］的方法，具體公式如下：

Me=Ma+Mb×（1-Ma） ?（1）

χ2= （Mab-Me）×100×（Mab-Me） Me ??（2）

公式中，各項含義如下：

Ma：甲維鹽單獨對斜紋夜蛾2齡幼蟲的實際校正死亡率；

Mb：高毒力菌株單獨對斜紋夜蛾2齡幼蟲的實際校正死亡率；

Mab：菌藥復(fù)配劑對斜紋夜蛾2齡幼蟲的實際校正死亡率；

將計算得出的χ2與χ2值進行比較，在χ2表格中查找df=1對應(yīng)的P值為3.841。

當χ2＜3.841，則表示白僵菌和甲維鹽混用表現(xiàn)出拮抗作用；

當χ2＞3.841，則表示白僵菌和甲維鹽混用表現(xiàn)出協(xié)同增效作用。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?甲維鹽對球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率及菌絲生長的影響

不同濃度的甲維鹽均不影響球孢白僵菌SCAUJH19的孢子萌發(fā)率（圖1）。經(jīng)0.5 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L濃度的甲維鹽處理3 d后，球孢白僵菌SCAUJH19 孢子萌發(fā)率分別為97.04%、96.70%、96.11%、98.01%和97.26%。

甲維鹽在不同濃度下對球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長的影響存在差異。由圖2可知，經(jīng)0.5 mg/L、2.5 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L甲維鹽處理7 d后的球孢白僵菌SCAUJH19菌落直徑分別為42.95 mm、 44.58 mm、41.98 mm、40.28 mm、33.18 mm。第7 天時球孢白僵菌SCAUJH19菌絲直徑隨著甲維鹽濃度的增加而減小。高濃度（10和20 mg/L）的甲維鹽對菌株SCAUJH19菌落生長有顯著影響，但低濃度（5.0、2.5、0.5 mg/L）甲維鹽處理對菌株生長無顯著影響。

2.2 ?球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽兩者組合對斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測定

由表2可知，在球孢白僵菌SCAUJH19和甲維鹽聯(lián)合作用對斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力測定中，組合T6（1×108 孢子/mL+1.5 mg/L）、T8（1×108 孢子/mL+0.5 mg/L）、T10（1×107 孢子/mL+1.0 mg/L）的復(fù)配劑處理7 d后，最高校正死亡率分別為100%、90%、95%，表現(xiàn)出協(xié)同增效作用。這3種復(fù)配組合均有較好的增效效果，其中1×108 孢子/mL 的球孢白僵菌SCAUJH19和1.5 mg/L的甲維鹽組合死亡率最高。同時各組合處理的致死中時間（LT50） 均低于各菌液單劑處理，且差異顯著（表3）。

2.3 ?不同劑型對斜紋夜蛾幼蟲的生物測定

SCAUJH19與甲維鹽可濕性粉劑和油懸浮劑復(fù)配劑型對斜紋夜蛾不同齡期幼蟲均有較好的致死效果?？蓾裥苑蹌┫♂?000、500、250、100、50倍對斜紋夜蛾2、3、4、5齡幼蟲處理3 d后的致死率分別為71.11%～96.39%、66.67%～94.58%、53.33%～83.33%、36.67%～100%（圖3）。第3天時，油懸浮劑稀釋1000、500、250、100、50倍對2、3、4、5齡斜紋夜蛾幼蟲的致死率分別為83.33%～100%、93.95%～100%、93.33%～100%、100%～100%（圖4）。

3 ?結(jié)論與討論

白僵菌具有寄主范圍廣、致病性強、不易產(chǎn)生抗性和對環(huán)境友好等優(yōu)點，但也存在作用效果慢、對田間環(huán)境要求高等缺點［29-30］。研究蟲生真菌與殺蟲劑的相容性是開發(fā)菌藥復(fù)配劑的前提，從而能更充分發(fā)揮真菌的殺蟲作用［31-32］。本文對球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽的相容性研究表明，0.5～20 mg/L甲維鹽對球孢白僵菌SCAUJH19 孢子萌發(fā)率無顯著影響，且低濃度甲維鹽（0.5～5 mg/L） 對球孢白僵菌SCAUJH19菌絲生長也無影響。顧麗嬙等［33］研究發(fā)現(xiàn)，甲維鹽在第5天時對球孢白僵菌ACCC30111菌落生長的抑制率僅7.1%。Zhang等［34］對白僵菌SB063和甲維鹽的相容性進行了研究，發(fā)現(xiàn)0.3125～2.5 mg/L甲維鹽對白僵菌SB063的孢子萌發(fā)率影響較小，但0.625～5 mg/L甲維鹽對白僵菌SB063的菌落生長有顯著抑制作用。上述研究與本文研究中甲維鹽對球孢白僵菌SCAUJH19孢子萌發(fā)率無顯著影響的結(jié)果一致，但甲維鹽處理對白僵菌SB063的菌落生長有顯著抑制作用，卻對球孢白僵菌ACCC30111和SCAUJH19無顯著抑制作用。黃志等［35］研究發(fā)現(xiàn)，5種化學(xué)農(nóng)藥對綠僵菌菌株MA4和JF-813的相容性因菌株不同而不同，猜測甲維鹽對白僵菌SB063、球孢白僵菌ACCC30111和SCAUJH19菌絲生長抑制作用不同可能與白僵菌菌株有關(guān)。

白僵菌往往與殺蟲劑混合施用，一方面既可延緩害蟲對殺蟲劑的抗性，另一方面也彌補了白僵菌自身的不足［36］。本研究在測定菌株SCAUJH19和甲維鹽不同組合對斜紋夜蛾2齡幼蟲的毒力中，組合T6（1×108 孢子/mL+1.5 mg/L）、T8（1×108 孢子/mL+0.5 mg/L）、T10（1×107 孢子/mL+1.0 mg/L）的復(fù)配劑在處理7 d時最高校正死亡率分別達100%、90%和95%，表現(xiàn)出協(xié)同增效作用，且3個組合的LT50明顯短于球孢白僵菌SCAUJH19單用濃度的LT50。李春香等［37］研究發(fā)現(xiàn)甲維鹽亞致死劑量和濃度為1×107 孢子/mL的白僵菌孢子懸浮液復(fù)配后第10天對甜菜夜蛾 Spodoptera exigua 防效為90.7%，高于菌液對照的防效。王勝華等［38］研究發(fā)現(xiàn)，甲維鹽與白僵菌或蘇云金桿菌混用，均具有延長藥劑持效性、延緩抗藥性發(fā)展、節(jié)約一次施藥用工成本等優(yōu)點。這些結(jié)果都與本文研究中球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽表現(xiàn)出的協(xié)同增效作用一致。王峰等［39］研究發(fā)現(xiàn)藥菌混用處理的LT50顯著縮短，1/10推薦濃度的吡蟲啉與2×106 孢子/mL的中等濃度白僵菌孢子混用殺蚜速率最快，LT50縮短了近30 h，與本文研究球孢白僵菌SCAUJH19與甲維鹽聯(lián)用比球孢白僵菌菌株單用的LT50縮短的結(jié)果一致，低劑量化學(xué)農(nóng)藥可能抑制了害蟲生理和免疫活性，使原來對病原菌不敏感的寄主成為易感類群［37］，復(fù)配劑能縮短對斜紋夜蛾的致死時間，從而彌補了球孢白僵菌SCAUJH19前期致死效果不佳的缺點。

可濕性粉劑是含有原藥（孢子粉）、載體、填料、表面活性劑、輔助劑并粉碎得很細的農(nóng)藥制劑［40］。真菌油懸浮劑是將分生孢子懸浮在油中而制成油懸液的一種制劑產(chǎn)品，有延長孢子的貯存期、耐雨水沖刷能力強和使用方便等優(yōu)點［41-43］。本文采用不同劑型配方完成了對復(fù)配劑劑型的研發(fā)，獲得了可濕性粉劑和油懸浮劑兩種復(fù)配劑型，且對不同齡期的斜紋夜蛾幼蟲進行了室內(nèi)毒力測定。兩種復(fù)配劑型對不同齡期的斜紋夜蛾幼蟲均有較好的致死效果，致死率最高均可達100%。油懸浮劑對高齡斜紋夜蛾幼蟲的致死力要優(yōu)于可濕性粉劑。據(jù)報道，通過使用油性昆蟲病原真菌制劑來控制相比于使用水性制劑具有更好的防治效果。例如，Cazorla等[44]利用13種球孢白僵菌菌株的水基制劑和油基制劑對長紅錐蝽 Rhodnius Prolixus （Triatomine）的4齡幼蟲進行防治，結(jié)果顯示，油基分生孢子懸浮液相比于水基分生孢子懸浮液能顯著提高菌株對長紅錐蝽的死亡率和藥效，同時降低菌株的致死中時間（LT50）。因此，針對防治對象選擇合適的劑型，對于田間的推廣應(yīng)用具有重要的意義。

（責任編輯：胡吉鳳）

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Synergistic Interaction Between the Entomopathogenic Fungus Beauveria bassiana SCAUJH19 and Emamectin Benzoate Against Spodoptera litura

Li Jiaying1，Xiao Zhipeng2，Zhang Shen1，Cai hailin3，Teng Kai4，Zeng Weiai3，Wu Shaolong5，Zhou Xiangping1*

（1.Yongzhou Tobacco Company of Hunan Province，Yongzhou，Hunan 425000，China; 2.Hengyang Tobacco Company of Hunan Province，Hengyang，Hunan 421200，China; 3.Changsha Tobacco Company of Hunan Province，Changsha，Hunan 410000，China; 4.Xiangxi Tobacco Company of Hunan Province，Xiangxi，Hunan 416000，China;5.Hunan Province Tobacco Company，Changsha，Hunan 410000，China）

Abstract：

The combination of entomogenous fungi and pesticides could make up for their shortcomings and provide new strategies for pest control.In order to determine the compatibility of ?Beauveria bassiana ?SCAUJH19 with emamectin benzoate and their joint toxicity and compound preparation against ?Spodoptera litura ，this study determined the effects of different concentrations of emamectin benzoate mixed with ?B.bassiana ?SCAUJH19 on conidia germination and colony growth of the strain，the toxicity of the combination of ?B.bassiana ?SCAUJH19 and emamectin benzoate to ?S.litura ?2nd instar larvae，and conducted the compound preparation according to the optimal combination of fungi and pesticides.The results showed that ?B.bassiana ?SCAUJH19 had good compatibility with emamectin benzoate.The minimum conidia germination rate of ?B.bassiana ?SCAUJH19 treated with 0.5 mg/L-20 mg/L emamectin benzoate was 96.11%-98.01% after 3 days of inoculation.On the 7th day，the colony diameters of ?B.bassiana ?SCAUJH19 treated with 0.5 mg/L，2.5 mg/L and 5.0 mg/L emamectin benzoate were 42.95 mm，44.5 mm and 41.98 mm，respectively，which had no significant difference compared with the control.Different combinations of ?B.bassiana ?SCAUJH19 and emamectin benzoate 1×108 conidia/mL+1.5 mg/L，1×108 conidia/mL+0.5 mg/L and 1×107 conidia/mL+1.0 mg/L induced 100%，95% and 95% corrected mortality rates of instar larvae of ?S.litura ?after 7 days of application，which were significantly higher than mortality rates observed for individual treatments of ?B.bassiana ?SCAUJH19 or emamectin benzoate.The median lethal time （LT50） values observed for three combinations were also lower than those observed for individual treatments of ?B.bassiana ?SCAUJH19 or emamectin benzoate.The oil-based emamectin benzoate+ B.bassiana ?formulation caused 100% mortality of 2nd，3rd，4th，and 5th instar larvae after 3 days of treatment.The highest mortality rates of ?S.litura ?2nd，3rd，4th，and 5th instar larvae induced by wettable powder were 96.39%，94.58%，83.33%，and 100% after 3 days of treatment.The compound oil-based suspension concentrates and wettable powder showed considerable efficacy against ?S.litura ?larvae，

and the lethality of oil suspension concentrate on S.litura ?mature larvae was better than that of wettable powder.

Keywords：

Spodoptera litura ; entomopathogenic fungi; insecticides; compatibility; virulence