鴨疫里默氏桿菌病疫苗的應(yīng)用現(xiàn)狀和前景

葛忠凱，馮陽(yáng)，關(guān)秀春，丁樹龍，周忠號(hào)

摘 要：鴨疫里默氏桿菌病是養(yǎng)鴨業(yè)中常見(jiàn)的一種傳染病，發(fā)病的臨床特征為機(jī)體的器官漿膜發(fā)生漿液纖維素滲出炎癥，引發(fā)多種器官疾病，不利于雛鴨的生長(zhǎng)發(fā)育，嚴(yán)重者會(huì)死亡。目前，最好的預(yù)防方法是進(jìn)行疫苗免疫，選擇合適的鴨疫里默氏菌病疫苗進(jìn)行免疫接種，從而降低鴨疫里默氏菌病的發(fā)病率。目前疫苗主要為滅活疫苗、減毒活疫苗、菌體成分疫苗和聯(lián)合疫苗等種類，每種又有不同的制備方式。本文對(duì)鴨疫里默氏桿菌疫苗種類及免疫效果等應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行概述，并對(duì)疫苗開發(fā)前景進(jìn)行了展望，以期開發(fā)出一種免疫廣譜性好的疫苗，從而促進(jìn)養(yǎng)鴨業(yè)的綠色、健康、高速發(fā)展。

關(guān)鍵詞：鴨疫里默氏菌；疫苗；免疫；養(yǎng)殖

中圖分類號(hào)：S852.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：1673-1085（2023）05-0054-05

在鴨類的養(yǎng)殖中，影響最大的疾病為鴨疫里默氏桿菌病，該病是由鴨疫里默氏桿菌引起的一種急性或慢性敗血癥傳染病[1]。其主要特征為引起機(jī)體外觀神經(jīng)癥狀和臟器纖維素性滲出，可引發(fā)腦膜炎、纖維素性心包炎、氣囊炎和肝周炎等疾病，因此又被成為鴨疫綜合征、鴨傳染性漿膜炎和新鴨病等[2]。該病的臨床表現(xiàn)為咳嗽、眼部和鼻部的分泌物增多、腹瀉、頭頸部發(fā)生震顫或歪斜，出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)等癥狀[3]。鴨疫里默氏菌桿病不利于鴨的健康生長(zhǎng)，發(fā)病率和致死率較高，經(jīng)常引起雛鴨的大量死亡，帶來(lái)較大經(jīng)濟(jì)損失[4]。在治療過(guò)程中，雖然使用抗菌藥物具有一定效果，但由于抗菌藥物的長(zhǎng)期使用，導(dǎo)致鴨疫里默氏桿菌的耐藥性增加，敏感性降低，因此治療效果降低[5]。所以，通過(guò)接種相關(guān)疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)病菌的抵抗力，降低藥物使用量，是預(yù)防鴨疫里默氏桿菌病及降低發(fā)病率的重要措施，有助于養(yǎng)鴨業(yè)的健康、綠色、高效發(fā)展。本文對(duì)鴨疫里默氏桿菌病疫苗的應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了概述。

1 鴨疫里默氏菌病

鴨疫里默氏桿菌是一種革蘭氏陰性球桿菌，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢，能夠形成莢膜，單個(gè)或成對(duì)存在，以滑行的方式運(yùn)動(dòng)，可在血液瓊脂、胰酶大豆瓊脂及巧克力瓊脂培養(yǎng)基中生長(zhǎng)培育[6]。鴨疫里默氏桿菌的血清型較多，目前較為認(rèn)同的為25種，且不同血清型之間的交叉保護(hù)性較低，這就要求在疫苗免疫的過(guò)程中，疫苗的抗原血清型與養(yǎng)殖中流行菌株的血清型最大程度吻合，才能保證免疫效果最佳[7]。

此病易發(fā)生于出生半個(gè)月左右的幼鴨，發(fā)病率可達(dá)90%以上，若不及時(shí)治療，死亡率可達(dá)80%[8]。春季和冬季因?yàn)槠錃鉁刈兓^大，會(huì)導(dǎo)致發(fā)病率增加，飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生條件差、飼養(yǎng)密度高及飼料營(yíng)養(yǎng)不足等因素都會(huì)導(dǎo)致發(fā)病率上升。該病主要通過(guò)傷口及呼吸道進(jìn)行傳播，不僅感染鴨類，鵝、火雞等禽類也可感染發(fā)病[9]。發(fā)病初時(shí)常出現(xiàn)精神不佳，食量減少，嗜睡，行走不穩(wěn)，排綠色糞便，眼角出現(xiàn)較多分泌物，會(huì)形成較明顯的“淚痕”，鼻孔被分泌物堵住，張口呼吸。有部分病鴨會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)不適癥狀，頭頸部歪斜，甚至頭部朝向背后，死亡時(shí)呈現(xiàn)角弓反張，且大多生長(zhǎng)緩慢形成“僵鴨”[10]。該病最明顯的病理變化是多器官漿膜發(fā)生漿液纖維素滲出炎癥，特別以漿液纖維素性心包炎、肝周炎和氣囊炎最為常見(jiàn)，對(duì)多個(gè)器官造成損傷[11]。因此，若不及時(shí)對(duì)鴨疫里默氏桿菌病進(jìn)行治療和預(yù)防，極易導(dǎo)致鴨禽大量死亡，帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

2 鴨疫里默氏菌桿病疫苗應(yīng)用現(xiàn)狀與展望

目前，針對(duì)鴨疫里默氏桿菌病最有效的預(yù)防措施是接種相關(guān)疫苗，疫苗主要分為滅活疫苗、減毒活疫苗、菌體成分疫苗和聯(lián)合疫苗等種類。

2.1 滅活疫苗

滅活疫苗的種類較多，又可分為福爾馬林滅活疫苗、油乳劑滅活疫苗、氫氧化鋁膠滅活疫苗、添加免疫增強(qiáng)劑的滅活疫苗和多價(jià)滅活疫苗。

2.1.1 福爾馬林滅活疫苗 福爾馬林滅活疫苗的研發(fā)較早，早在1979年就有研究者開始研發(fā)福爾馬林滅活疫苗，并在實(shí)驗(yàn)室和野外環(huán)境對(duì)3周齡的幼鴨進(jìn)行了免疫接種，發(fā)現(xiàn)其保護(hù)效果較好[12]。我國(guó)的張大丙等[13]在病死鴨中分離得到血清型1型的病菌，通過(guò)福爾馬林滅活和福爾馬林超聲滅活后在實(shí)驗(yàn)室和野外進(jìn)行了試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)疫苗的保護(hù)率能夠達(dá)到86.67%～100%，效果良好。高福等[14]制備了雙相油乳劑疫苗，并對(duì)一周左右的幼鴨進(jìn)行接種，飼養(yǎng)兩周后進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比福爾馬林滅活疫苗，雙相油乳劑疫苗使用量可下降一半，且保護(hù)率能達(dá)到91.67%。雷紅宇等[15]以本地區(qū)的病菌為樣本研發(fā)了油乳劑滅活疫苗，皮下注射幼鴨后具有較好的免疫作用，兩次免疫后保護(hù)率能達(dá)到95%以上，且存在時(shí)間久。

2.1.2 氫氧化鋁膠滅活疫苗 日本學(xué)者針對(duì)血清2型病菌研發(fā)出了氫氧化鋁膠滅活疫苗，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其在免疫后兩周的效果最佳[16]。鄧舜州等[17]研究發(fā)現(xiàn)，氫氧化鋁膠滅活疫苗經(jīng)過(guò)二次免疫后可以明顯提高保護(hù)率。程安春等[18]根據(jù)血清1、2、4、5型的鴨疫里默氏桿菌制備了四價(jià)的氫氧化鋁膠滅活疫苗，在免疫接種16 d后能達(dá)到100%的免疫率，且二次免疫后的抗體水平更高，在65 d仍可保持較高水平。

2.1.3 添加免疫增強(qiáng)劑的滅活疫苗 除了簡(jiǎn)單滅活后接種的疫苗外，目前還有添加各種佐劑如蜂膠、多糖等物質(zhì)，作為非特異性免疫增強(qiáng)劑來(lái)加強(qiáng)疫苗的免疫效果。蜂膠作為一種傳統(tǒng)天然藥物，其中含有大量的多酚和黃酮物質(zhì)，可增加機(jī)體的免疫力，提高生產(chǎn)性能[19]。林麗超等[20]將蜂膠加入到滅活疫苗后，疫苗保護(hù)率最高可達(dá)到71.4%。魏光河等[21]對(duì)蜂膠的添加量進(jìn)行了篩選，發(fā)現(xiàn)添加高濃度蜂膠的疫苗免疫效果最好、產(chǎn)生抗體的時(shí)間最早且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。王正中[22]以血清2型和11型的病菌為樣本，對(duì)比了不同方式制備疫苗的活性，發(fā)現(xiàn)添加白油佐劑的疫苗免疫效果最好，可達(dá)80%。金爾光等[23]以血清1型病菌為樣本，添加黃芪多糖制備了滅活疫苗，接種于5日齡幼鴨，并于不同時(shí)間進(jìn)行攻毒實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3周后疫苗保護(hù)率仍能達(dá)到90%，且抗體生成的速度較快。

2.1.4 多價(jià)滅活疫苗 由于鴨疫里默氏桿菌具有較多血清型，單一的疫苗不能防治不同的病菌，因此又研發(fā)出了多價(jià)滅活疫苗，使其能夠?qū)Χ喾N血清型的病菌具有抑制活性。謝永平等[24]針對(duì)血清1型、2型和5型的病菌研發(fā)出了油乳劑3價(jià)滅活疫苗，在接種后15 d的保護(hù)率能達(dá)到100%，且免疫期可持續(xù)存在到42 d。程安春等[18]則針對(duì)血清1型、2型、4型和5型病菌研發(fā)出了鋁膠復(fù)合佐劑四價(jià)滅活疫苗，16 d后免疫保護(hù)可達(dá)到100%，其對(duì)T細(xì)胞免疫力增強(qiáng)的時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)22周。

2.2 減毒活疫苗

減毒活疫苗是指通過(guò)人工將病菌的毒性減弱或者篩選出弱毒性的病菌制備成具有活性的疫苗[25-26]。該種疫苗具有抗體產(chǎn)生速度快、存在時(shí)間長(zhǎng)、免疫接種次數(shù)少、減緩機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。有研究者利用低毒性的血清1型、2型和5型病菌制備成活疫苗，通過(guò)口服或者吸入的形式進(jìn)行接種后發(fā)現(xiàn)，該疫苗對(duì)感染1、2、5型病菌的幼鴨具有較好的保護(hù)率，達(dá)68%～100%。

2.3 菌體成分疫苗

菌體成分疫苗是指將病菌的某一部分作為病原體加入到疫苗中，促使機(jī)體對(duì)該部分產(chǎn)生抗體，從而能夠?qū)Σ煌偷耐≡w起到滅殺作用。一般采用菌體成分和細(xì)菌莢膜來(lái)制備亞單位疫苗。羅雅莉等[27]利用鴨疫里默氏桿菌的的序列生物學(xué)信息，分段表達(dá)了TbdR1的抗原表位，將重組蛋白表達(dá)并純化后制備為疫苗，接種于2日齡的雛鴨，通過(guò)攻毒實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該方法制備的疫苗具有較好的保護(hù)作用，用10倍的LD50劑量攻毒后保護(hù)率仍能達(dá)到50%以上。林世棠等[28]用十二烷基硫酸鈉提取病菌中的亞單位成分制備疫苗后接種于7日齡的雛鴨，結(jié)果發(fā)現(xiàn)保護(hù)率能達(dá)到92.5%，效果較好。

2.4 聯(lián)合疫苗

聯(lián)苗是指由兩個(gè)或者兩個(gè)以上的滅活生物體或純化后的抗原進(jìn)行復(fù)配制得，用于預(yù)防多種疾病。劉曉文等[29]選取了三種病株，制備出了鴨坦布蘇病毒、鴨源大腸埃希氏菌和鴨疫里默氏桿菌三聯(lián)苗，并接種于10日齡的雛鴨后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)三次免疫接種后保護(hù)率能達(dá)到100%。Sandhu等[30]研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌和鴨疫里默氏桿菌的二聯(lián)疫苗在實(shí)驗(yàn)室及野外進(jìn)行接種試驗(yàn)后，可保證雛鴨不受O78大腸桿菌和鴨疫里默氏桿菌血清1型、2型和5型的侵害。除此之外，目前DNA和蛋白質(zhì)亞單位的組合復(fù)配疫苗也有望被用于預(yù)防鴨疫里默氏桿菌病，且引發(fā)的抗體水平較高。

3 前景

近年來(lái)，鴨疫里默氏桿菌病對(duì)養(yǎng)鴨業(yè)的危害嚴(yán)重，造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失，且該病常常與大腸桿菌病合并發(fā)病，不利于快速正確的診斷和治療。該病由于病菌的血清型較為復(fù)雜，交叉保護(hù)性較差，也為該病的治療帶來(lái)較高難度。因此，需要研發(fā)一種臨床能夠快速診斷的檢測(cè)方法，同時(shí)根據(jù)毒力強(qiáng)弱研發(fā)出一種可以重復(fù)多次使用的多價(jià)疫苗，打破疫苗存在單一保護(hù)性的問(wèn)題。所以，未來(lái)疫苗的研發(fā)趨勢(shì)應(yīng)當(dāng)是開發(fā)免疫廣譜性好、特異性強(qiáng)、制備方便且成本低廉的鴨疫里默氏桿菌病疫苗，能夠免疫多種亞型的毒株，從而減少接種次數(shù)。同時(shí)也應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)具有交叉保護(hù)性疫苗的研究力度，可在基礎(chǔ)疫苗的基礎(chǔ)上增添加強(qiáng)疫苗，從而增加免疫效率。目前有關(guān)鴨疫里默氏桿菌病的免疫原性基因和致病關(guān)鍵基因也被逐漸發(fā)掘，疫苗的研發(fā)也開始呈現(xiàn)多樣化發(fā)展，出現(xiàn)了一些亞單位苗、基因缺失弱毒苗和基因工程苗等新型疫苗，從而助力鴨疫里默氏桿菌病的防控。總之，研制出一類安全系數(shù)高、免疫廣譜性強(qiáng)、抗體存在時(shí)間久、使用便捷且適用性廣的疫苗對(duì)預(yù)防鴨疫里默氏桿菌病具有重要意義。除了疫苗接種外，還應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的管理，及時(shí)分欄并更換墊料，做好進(jìn)出場(chǎng)消毒工作，建立科學(xué)健康的養(yǎng)殖管理程序[31]。總之，隨著研究技術(shù)的不斷發(fā)展，鴨疫里默氏菌病的免疫機(jī)理也在不斷被研究和發(fā)現(xiàn)，最終有望開發(fā)出一種安全高效的優(yōu)質(zhì)疫苗用于生產(chǎn)。

4 總結(jié)

鴨疫里默氏菌桿病是一種危害性較大的傳染病，感染后會(huì)降低鴨的生長(zhǎng)性能、損傷器官，得不到有效治療只能被淘汰。雖然藥物治療能夠起到一定作用，但耐藥性和藥物過(guò)量使用的問(wèn)題不利于養(yǎng)鴨業(yè)的綠色發(fā)展且增加經(jīng)濟(jì)成本。因此，通過(guò)選擇合適的疫苗進(jìn)行防治能夠最大程度降低該病帶來(lái)的危害，又符合養(yǎng)殖業(yè)高效、綠色的發(fā)展要求，還有利于減少經(jīng)濟(jì)損失。

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Current Status and Prospects for the Application of Duck Rimanthes Disease Vaccine

GE Zhongkai， FENG Yang， GUAN Xiuchun， DING Shulong， ZHOU Zhonghao

（Qingdao Yibang Bioengineering Co.， Ltd.， Qingdao? 266108，Shandong，China）

Abstract： The clinical features of the disease are plasma fibrinous exudative inflammation of the organ plasma membranes， which causes a variety of organ diseases that are detrimental to the growth and development of ducklings and can lead to death in severe cases. At present， the best method of prevention is to vaccinate against the disease and to choose the appropriate vaccine for duck disease to reduce the incidence of duck disease. The main types of vaccines available are inactivated， live attenuated， bacteriophage component and combination vaccines， each of which is prepared in different ways. Therefore， in order to promote the knowledge and development of duck disease vaccine， this paper provides an overview of the current situation of the application of duck disease vaccine types and immunization effect of Rimmelia duck disease， and the prospect of vaccine development， in order to develop a vaccine with good immune broad spectrum， so as to promote the green， healthy and high speed development of duck farming industry.

Keywords： Rimanthes duck disease; Vaccine; Immunization; Breeding