發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)及抗氧化能力的影響

謝苗苗, 李 笑, 胡 建, 阿依姑·蘇來(lái)曼,白俊宇, 武慧敏, 胡忠澤,2*, 王奪標(biāo), 孟 玲

(1.安徽科技學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,安徽 鳳陽(yáng) 233100;2.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)調(diào)控與健康安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽 鳳陽(yáng) 233100; 3.安徽標(biāo)王農(nóng)牧股份有限公司,安徽 淮北 235000; 4.安徽省正大源飼料集團(tuán)有限公司 安徽 淮北 235000)

自2020年7月1日起,我國(guó)全面實(shí)施飼料禁抗,為保障畜禽養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)效率和品質(zhì),許多企業(yè)開(kāi)始將目光投向天然植物提取物、腸道健康劑、酸化劑、消化酶等飼料添加劑。這些添加劑既可以提高動(dòng)物的免疫力和生產(chǎn)性能,又可以減少食品中藥物殘留的問(wèn)題。其中,天然植物提取物是比較熱門(mén)的飼料添加劑之一,這些提取物可以調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生物群落,增強(qiáng)腸內(nèi)免疫屏障,提高消化吸收率,從而提高動(dòng)物的食欲和生產(chǎn)性能。其中中草藥及其提取物以其低毒副作用及具有的營(yíng)養(yǎng)性、獨(dú)特天然性和生物活性,受到畜牧工作者的重視[1]。中草藥成分十分復(fù)雜,主要藥用成分包括但不限于具有抗應(yīng)激、抗菌及增強(qiáng)機(jī)體免疫作用的黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、多糖類(lèi)、皂苷類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、揮發(fā)油等多種活性成分[2]。中藥炮制的一種重要方法是利用微生物進(jìn)行發(fā)酵,在發(fā)酵過(guò)程中,微生物代謝產(chǎn)生多種胞外酶,如木質(zhì)素酶、纖維素酶和果膠酶等,能催化降解植物細(xì)胞壁,提高細(xì)胞膜的通透性,能使中草藥活性物質(zhì)釋放更充分或被代謝得到活性更好的物質(zhì)[3],還能將中草藥中的大分子物質(zhì)分解成易吸收的小分子物質(zhì),從而提高藥物療效[4]。據(jù)谷巍等[5]報(bào)道,經(jīng)發(fā)酵后,中草藥中某些成分含量提高了1～4倍。王曉冰等[6]研究發(fā)現(xiàn),黃芪發(fā)酵后所產(chǎn)生的多糖類(lèi)物質(zhì),最多可達(dá)到傳統(tǒng)萃取技術(shù)的5倍,且經(jīng)過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)使用傳統(tǒng)制藥用量的1/28發(fā)酵黃芪的用量,就具有同等藥效。蘇貴龍[7]將黃芪利用非解乳糖鏈球菌FGM發(fā)酵后,其根莖多糖、皂苷、黃酮類(lèi)等主要活性成分的浸出率可得到有效提高。金順義等[8]研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵后的中草藥較未發(fā)酵的中草藥提高了生物堿、皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)和多糖類(lèi)的含量。高鵬輝等[9]試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),將發(fā)酵過(guò)的中藥材加入飼糧中,可使仔豬的日平均食量增加、腹瀉率降低、免疫力增強(qiáng)。姜萊等[10]研究表明,使用發(fā)酵中草藥可以提高肉雞的生長(zhǎng)性能,改善血清指標(biāo)水平,呈現(xiàn)和抗生素相似的促生長(zhǎng)效果。本試驗(yàn)復(fù)方中草藥由黃芪、黨參、當(dāng)歸、陳皮、茯苓、白術(shù)、香附、甘草等配伍組成,再經(jīng)植物乳桿菌、黑曲霉、枯草芽孢桿菌、酵母菌等發(fā)酵處理,探究發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞的生長(zhǎng)性能、抗氧化能力及血清生化指標(biāo)的影響,為發(fā)酵中草藥在青腳麻雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)藥物 購(gòu)自亳州市蕊苑花茶有限責(zé)任公司的中藥材(黃芪、當(dāng)歸、黨參、白術(shù)、陳皮、甘草、茯苓、香附)按配比將中藥材粉碎后經(jīng)40目篩,對(duì)經(jīng)篩后的中藥材進(jìn)行發(fā)酵處理,其初始水分37.33%,其中菌液接種量為4%,菌種質(zhì)量配比為黑曲霉∶乳酸菌∶枯草芽孢桿菌∶酵母菌=3∶3∶2∶1,將其置于帶有單向呼吸閥的發(fā)酵袋中進(jìn)行發(fā)酵,初始溫度為29.9 ℃,發(fā)酵時(shí)間為3 d;抗菌肽(0.6 g/kg酵母肽,英惠爾生物技術(shù)有限公司);99%苯甲酸鈉(瑞多食品公司)。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 1日齡雄性青腳麻雞192只,體質(zhì)量為(35.72±0.52) g,購(gòu)自安徽標(biāo)王農(nóng)牧股份有限公司。

1.1.3 試驗(yàn)器材 卓越450全自動(dòng)生化分析儀(上海科華實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司);Multiskan Go 1510全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(賽默飛世爾科技有限公司);抗氧化試劑盒(南京建成生物工程研究所)

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將192只1日齡青腳麻雞隨機(jī)分成4組,組內(nèi)設(shè)4個(gè)重復(fù),12只雞為1個(gè)重復(fù),A組飼喂基礎(chǔ)飼糧作為陰性對(duì)照,B組按照每千克日糧添加34 g的抗菌肽以及1.5 g的苯甲酸作為陽(yáng)性對(duì)照,C組基礎(chǔ)飼糧中添加1%未發(fā)酵中草藥,D組基礎(chǔ)日糧中添加1%發(fā)酵復(fù)方中草藥。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞采用4層立式籠養(yǎng),試驗(yàn)周期為90 d,試驗(yàn)期內(nèi)自由采食、飲水,24 h光照,常規(guī)疫苗免疫。飼養(yǎng)管理按照NY/T 1871—2010進(jìn)行。

1.4 試驗(yàn)日糧及其組成

試驗(yàn)飼糧為粉狀料,其組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air dry basis)

1.5 樣品采集與檢測(cè)

1.5.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)期內(nèi)記錄每只試驗(yàn)青腳麻雞的1、60、90 d的體質(zhì)量,計(jì)算平均日增重(ADG)。根據(jù)每周每個(gè)重復(fù)的喂料量,計(jì)算平均日采食量(ADFI)。并根據(jù)ADG和ADFI計(jì)算料重比(F/G)。

1.5.2 血清生化指標(biāo) 在試驗(yàn)第60、90天,每重復(fù)隨機(jī)取3只雞,禁食12 h后翅下靜脈采血,將非抗凝采血管于3 500 r/min離心10 min,分離血清后按照全自動(dòng)生化分析儀說(shuō)明書(shū)檢測(cè)白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白球比(ALB/GLB,A/G)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、葡萄糖(GLU)、乳酸脫氫酶(LDH)、尿酸(UA)等指標(biāo)。

1.5.3 抗氧化指標(biāo) 血清抗氧化指標(biāo)按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 21.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn),結(jié)果以 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)青腳麻雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知,在1～60日齡,與A組相比,D組的ADG升高13.58%(P<0.05),F/G降低11.48%(P<0.05),ADFI升高0.4%(P>0.05);與B組相比,D組的ADG、ADFI、F/G分別降低了0.06%、5.13%、4.87%(P>0.05),但未達(dá)到顯著性水平;與C組相比,D組的ADFI、F/G分別降低了0.25%、2.33%,ADG升高了2.17%,但未達(dá)到顯著性水平(P>0.05)。

在61～90日齡時(shí),與A組相比,D組的ADFI、F/G分別降低了2.50%、8.04%,ADG升高了2.43%,但未達(dá)到顯著性水平(P>0.05);與B組相比,D組的ADG、ADFI分別升高了4.47%、6.17%, F/G降低了1.38%,但達(dá)到顯著性水平(P>0.05);與C組相比,D組的ADG、F/G分別降低了0.09%、4.98%,ADFI升高了1.59%,但未達(dá)到顯著性水平(P>0.05)。

2.2 飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)青腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知,在60日齡時(shí),與A組相比,D組血清中ALB/GLB顯著降低(P<0.05),TG濃度顯著升高(P<0.05),其余各指標(biāo)均無(wú)顯著性(P>0.05);與B組相比,D組血清中ALB、GLB、TP質(zhì)量濃度及AST活性顯著降低(P<0.05),TG濃度顯著升高(P<0.05),其余各指標(biāo)均無(wú)顯著性(P>0.05);與C組相比,D組血清ALB、GLB、TP質(zhì)量濃度及AST活性顯著降低(P<0.05),其余各指標(biāo)均無(wú)顯著性(P>0.05)。在90日齡時(shí),與A組相比,D組血清中ALB/GLB、TC濃度分別降低7.5%、15.90%,但均未達(dá)到顯著性水平(P>0.05);與B組相比,D組血清中GLU濃度量顯著升高(P<0.05),UA濃度顯著降低(P<0.05),其余各指標(biāo)均無(wú)顯著性(P>0.05);與C組相比,D組血清LDH活性顯著降低(P<0.05),其余各指標(biāo)均無(wú)顯著性(P>0.05)。

表3 飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)青腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of compound fermented Chinese herbal medicines added to the diet on the serum biochemical indexes of partridge shank chickens

2.3 飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)青腳麻雞抗氧化能力的影響

由表4可知,在60日齡時(shí),與A組相比,D組血清MDA濃度下降15.11%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分別升高5.43%、11.48%、4.18%、3.01%(P>0.05);與B組相比,D組MDA濃度,T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分別下降10.06%、3.31%、1.98%、7.64%、3.71%(P>0.05);與C組相比,D組MDA濃度及SOD活性分別下降4.22%、2.81%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX及CAT活性分別升高3.10%、6.59%、1.49%(P>0.05)。在90日齡時(shí),與A組相比,D組血清MDA濃度下降19.77%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分別升高2.22%、5.41%、34.02%、15.19%(P>0.05);與B組相比,D組MDA濃度,T-AOC、CAT、SOD活性分別下降5.51%、3.16%、4.88%、4.44%(P>0.05),GSH-PX活性升高0.23%(P>0.05);與C組相比,D組MDA濃度下降2.22%(P>0.05),T-AOC、GSH-PX、CAT、SOD活性分別升高1.29%、3.35%、5.14%、4.03%(P>0.05)。

表4 飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥對(duì)青腳麻雞抗氧化能力的影響Table 4 Effects of compound fermented Chinese herbal medicines added to the diet on the antioxidant capacities of partridge shank chickens

3 結(jié)論與討論

3.1 復(fù)方發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞生長(zhǎng)性能的影響

劉墨晗等[11]研究表明,在飼糧中添加使用復(fù)方發(fā)酵中草藥可以提高綠殼蛋雛雞的生長(zhǎng)性能,促進(jìn)雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育。申紅春[12]的研究證實(shí),在飼糧里加入使用1%的復(fù)方發(fā)酵中草藥,對(duì)天府肉鴨的生長(zhǎng)性能有提高作用。李汝等[13]研究發(fā)現(xiàn),在育肥豬前期,益生菌發(fā)酵中草藥對(duì)生長(zhǎng)性能有顯著改善作用,但在中晚期,作用較小。張濤等[14]研究表明,酶發(fā)酵后的中草藥可改善仔豬生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)中,添加1%復(fù)方發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞的生長(zhǎng)性能并沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響,但在一定程度上提高了ADG和ADFI,降低了F/G,這與前人的研究成果并不完全一致,可能是由于中草藥配方、發(fā)酵菌種組成及發(fā)酵條件的不同,導(dǎo)致結(jié)果不完全一致。本研究中與陽(yáng)性對(duì)照組相比并無(wú)顯著性,但較陽(yáng)性對(duì)照組未降低其效果,表明其可作為抗菌肽同等替代品。

3.2 復(fù)方發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體的生長(zhǎng)狀況和代謝水平可以通過(guò)血清生化指標(biāo)得到直接反映[15]。血液中ALT和AST是動(dòng)物體內(nèi)參與體內(nèi)轉(zhuǎn)氨基作用的兩種活力最強(qiáng)的轉(zhuǎn)氨酶[16]。通常在正常范圍內(nèi),血清中ALT和AST的活性提高,不僅對(duì)動(dòng)物氨基酸合成有促進(jìn)作用,而且對(duì)蛋白質(zhì)的代謝效率也有改善作用[17]。解軍亮等[18]將1%復(fù)方發(fā)酵中草藥添加在基礎(chǔ)日糧中,可以提高斷奶仔豬ALT活性及AST活性。本研究結(jié)果表明,飼糧中添加復(fù)方發(fā)酵中草藥,青腳麻雞血清中ALT與AST活性均升高,這與解軍亮研究相同。而血清總膽固醇的含量又能反映出體內(nèi)脂質(zhì)的代謝情況,血清中總膽固醇含量越高,心腦血管、腎臟疾病的發(fā)生率越高[19]。范作良等[20]的研究表明,將發(fā)酵的中草藥制劑添加到飼糧中,能使蛋雞血清TC含量明顯降低。本試驗(yàn)結(jié)果表示,D組血清中TC含量降低,這與范作良的研究結(jié)果一致。血清中白球蛋白比是血清中白蛋白與球蛋白含量的比值,反映了機(jī)體的免疫情況的強(qiáng)弱,同時(shí)血清TP、ALB含量也反映了動(dòng)物機(jī)體中蛋白質(zhì)含量的代謝情況[21]。鄒志恒等[22]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加0.4%的發(fā)酵中草藥可以顯著提高仔豬血清中球蛋白和總蛋白的含量。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,在飼糧中添加發(fā)酵復(fù)方中草藥可以顯著降低白球蛋白比,有效提高機(jī)體的免疫功能,這與前人結(jié)果一致。本研究中發(fā)酵中草藥與陽(yáng)性對(duì)照組相比,部分結(jié)果并未達(dá)到顯著改善效果,但仍有改善作用,如ALT活性提高,UA含量的降低均可以改善機(jī)體的脂質(zhì)代謝,這可能是由于配方成分的原因,從而使結(jié)果未達(dá)顯著性,因此可在配方基礎(chǔ)上稍作調(diào)整使其達(dá)到更好的效果。

3.3 復(fù)方發(fā)酵中草藥對(duì)青腳麻雞抗氧化能力的影響

機(jī)體的抗氧化能力在很大程度上反映動(dòng)物的健康狀況,其血清中的T-AOC,SOD、GSH-PX、CAT和MDA作為抗氧化防御系統(tǒng)的重要組成部分,對(duì)氧化和抗氧化劑之間的穩(wěn)態(tài)具有非常顯著的影響[23]。T-AOC代表了動(dòng)物身體整體的抗氧化性;機(jī)體內(nèi)清除活性氧的抗氧化酶有SOD和GSH-PX,SOD能清除超氧陰離子自由基,GSH-PX能清除過(guò)氧化物和羥基,促使其代謝處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)[24];MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)生物氧化損害程度的最終產(chǎn)物之一[25]。張敏等[26]研究表明,添加0.25%復(fù)方銀杏葉發(fā)酵中草藥制劑,可以提高21日齡肉雞的血清中T-AOC含量。鮑菊等[27]報(bào)道了在飼糧中添加0.5%發(fā)酵中草藥顯著提高了斷奶仔豬血清中T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性。董延江等[28]將3%發(fā)酵中藥添加到飼糧中,可使斷奶仔豬血清中GSH-PX活性顯著提高。楊濛等[29]研究在基礎(chǔ)飼糧中添加了0.5%富鍺發(fā)酵中藥制劑,發(fā)現(xiàn)其顯著降低了血清的MDA含量,且顯著升高了SOD、GSH-PX、T-AOC、CAT活性。本研究結(jié)果表明,飼糧添加復(fù)方發(fā)酵中草藥可以提高肉雞血清T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性,降低了血清MDA含量,與鮑菊、楊濛等的研究結(jié)果一致。這是由于配方中黃芪、黨參等中草藥富含豐富的黃酮類(lèi)物質(zhì),而發(fā)酵可以促進(jìn)黃酮類(lèi)物質(zhì)的釋放,從而提高機(jī)體的抗氧化能力。本研究中抗氧化指標(biāo)相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組來(lái)說(shuō),有所改善,綜合以上結(jié)果發(fā)現(xiàn)其可以作為抗生素替代品應(yīng)用于養(yǎng)雞生產(chǎn)中。

綜上,飼糧添加1%發(fā)酵中草藥,可提高青腳麻雞血清ALT和AST活性,降低白蛋白/球蛋白的比值和TC含量,使青腳麻雞部分血清生化指標(biāo)得到改善。飼糧添加1%發(fā)酵中草藥,能夠提高肉雞血清T-AOC、CAT、SOD、GSH-PX活性,降低血清MDA含量,從而改善青腳麻雞的抗氧化功能。