張玲玲,許全德
(1.甘肅省酒泉市肅州區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心,甘肅 酒泉 735000;2.甘肅省酒泉市肅州區(qū)東洞鎮(zhèn)人民政府,甘肅 酒泉 735000)
隨著飼料“禁抗”政策的實施,大量的替抗產(chǎn)品被研究和開發(fā),主要有微生態(tài)制劑類、中草藥類、植物提取物類、酸化劑類、抗菌肽等,其中中草藥類替抗產(chǎn)品得到了廣泛的應(yīng)用研究。中草藥具有天然、取材方便、低殘留、價格低廉等特點,作為飼料添加劑使用可以提高畜禽機體的抗病力及免疫力,促進機體生長發(fā)育,進而改善生產(chǎn)性能。五倍子是我國一種傳統(tǒng)的中草藥,產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的90%以上,五倍子中主要的生物活性成分為沒食子酸,其含量約占五倍子提取物總量的3%[1]。沒食子酸是一種酚酸類的化合物,具有抗菌、抗氧化、抗病毒等生物學(xué)功能[2-3]。近些年,五倍子提取物在畜禽、水生生物的養(yǎng)殖中得到廣泛應(yīng)用。在家禽養(yǎng)殖中使用五倍子提取物可以改善家禽腸道健康,提高機體的抗氧化功能,改善生長性能[4]。五倍子提取物在生豬生產(chǎn)中使用,可以改善仔豬腸道健康,降低腹瀉率,提高機體抗氧化功能,改善生長性能[5]。但五倍子提取物在動物機體免疫力方面的應(yīng)用研究并不是很多。因此,本研究以白羽肉雞為試驗對象,探討不同劑量的五倍子提取物對其機體免疫功能的影響,并確定五倍子提取物在肉雞生產(chǎn)中的最適添加量,為五倍子提取物在肉雞生產(chǎn)中高效推廣應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。
本研究使用的五倍子提取物由某生物科技有限公司提供,其中的沒食子酸含量大于5%。
試驗選擇健康的1日齡白羽肉雞800只,隨機分成4個組,每組200只肉雞。各組白羽肉雞分別飼喂含有0 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg五倍子提取物的基礎(chǔ)飼料。試驗周期為3周,試驗結(jié)束后采集肉雞血液,檢測血清免疫指標(biāo)。試驗白羽肉雞的基礎(chǔ)飼料配方見表1。
表1 試驗白羽肉雞的基礎(chǔ)飼料配方
試驗開始前,對養(yǎng)殖場地及養(yǎng)殖設(shè)備進行清洗和消毒處理,晾干后進行試驗。養(yǎng)殖中保證白羽肉雞能自由采食,飲水供應(yīng)充足。白羽肉雞的免疫程序按照養(yǎng)殖場的日常管理規(guī)范進行。養(yǎng)殖中,仔細觀察白羽肉雞的健康狀況,發(fā)現(xiàn)問題及時處理。
試驗結(jié)束當(dāng)天,白羽肉雞晨飼之前,從每組中挑選健康、體重相近的不用肉雞10只,翅下靜脈使用真空抗凝管采集血液約5 mL,靜置2~3小時后,使用離心機3000 r/min離心6~7 min,使用移液槍吸取上層血清于-20℃環(huán)境下保存,備用,用于檢測血清中的免疫指標(biāo)。
本研究中主要檢測白羽肉雞血清中的免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、白細胞介素-6、白細胞介素-10等指標(biāo)。按照試劑盒說明書進行檢測,試劑盒由南京建成生物工程所生產(chǎn)。
免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)先使用Excel簡單整理,再使用SPSS18進行單因子方差分析顯著性,具有統(tǒng)計學(xué)顯著性后再運用鄧肯法兩兩比較,結(jié)果以均值和總標(biāo)準(zhǔn)誤表示,P<0.05表示數(shù)據(jù)具有顯著性差異,P>0.05表示此指標(biāo)數(shù)據(jù)不具有顯著性差異。
不同劑量的五倍子提取物對白羽肉雞血清免疫指標(biāo)的影響如表2所示。由表2數(shù)據(jù)可知,與對照組相比,白羽肉雞生產(chǎn)中使用200 mg/kg的五倍子提取物可以顯著提高血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量(P<0.05);100 mg/kg和400 mg/kg的五倍子提取物有提高免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量的趨勢。200 mg/kg和400 mg/kg的五倍子提取物可以提高白羽肉雞血清中白細胞介素-10的含量(P<0.05);100 mg/kg的五倍子提取物有提高白細胞介素-10含量的趨勢,但未達到顯著性水平(P>0.05)。研究表明,在白羽肉雞生產(chǎn)中使用200 mg/kg和400 mg/kg的五倍子提取物可以有效提高白羽肉雞機體的體液免疫功能和細胞免疫功能,且綜合養(yǎng)殖成本考慮,以200 mg/kg的五倍子提取物添加量最為適宜。
表2 不同劑量的五倍子提取物對白羽肉雞血清免疫指標(biāo)的影響
動物機體的免疫功能與體內(nèi)的免疫球蛋白、細胞因子含量相關(guān),二者對機體的體液免疫功能和細胞免疫功能具有重要作用。免疫球蛋白主要包括免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G,其中免疫球蛋白G含量較高,是機體的主要免疫球蛋白。細胞因子包括抗炎因子和促炎因子,當(dāng)動物機體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)時,抗炎因子含量會提高,抑制促炎因子的生成,增強機體的免疫力。本研究中,使用200 mg/kg和400 mg/kg的五倍子提取物可以有效提高機體的免疫球蛋白及抗炎因子含量,增強了機體的免疫功能,且五倍子提取物的最適添加量為200 mg/kg。范秋麗等[4]研究發(fā)現(xiàn),適量的五倍子提取物可以提高黃羽肉雞空腸中分泌型免疫球蛋白A含量,顯著降低了白細胞介素-6和腫瘤壞死因子含量。童玉鑫等[6]研究表明,在黃羽肉雞生產(chǎn)中使用150 mg/kg、300 mg/kg、450 mg/kg五倍子提取物可以一定程度地提高血清中免疫球蛋白M含量。以上研究結(jié)果與本研究類似,表明五倍子提取物可以通過提高機體內(nèi)免疫球蛋白及抗炎因子含量、降低促炎因子含量來增強機體的免疫力。
本試驗中,在白羽肉雞生產(chǎn)中使用適量的五倍子提取物可以顯著提高其血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量,顯著提高了抗炎因子白細胞介素-10的含量,改善了機體的免疫功能,且五倍子提取物的最適添加量為200 mg/kg。