底砂粒徑對(duì)方斑東風(fēng)螺生長(zhǎng)、消化、抗氧化及底質(zhì)的影響

梁晶 邢詒炫 呂布 臧戰(zhàn) 劉子嶺 唐賢明 於鋒 Hebert Ely Vasquez 戰(zhàn)欣 鄭興 顧志峰

(1 海南大學(xué)海洋學(xué)院,海口 570228; 2 海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院,?？?571126)

方斑東風(fēng)螺(Babyloniaareolata)俗稱“花螺”,隸屬于軟體動(dòng)物門(Mollusca)、腹足綱(Gastropoda)、前鰓亞綱(Prosobranchia)、新腹足目(Neogastropoda)、蛾螺科(Buccinidae)、東風(fēng)螺屬(Babylonia),主要分布于我國(guó)東南沿海地區(qū),是我國(guó)最有開發(fā)前景的優(yōu)良水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一[1-2]。方斑東風(fēng)螺營(yíng)底棲生活,具有潛砂的習(xí)性,除攝食活動(dòng)以外,多數(shù)時(shí)間潛埋在底砂里,因此底質(zhì)的構(gòu)成、狀態(tài)與其存活和生長(zhǎng)狀態(tài)有著密切關(guān)系[3-4]。

本課題組在長(zhǎng)期生產(chǎn)試驗(yàn)及對(duì)養(yǎng)殖戶的走訪調(diào)研中發(fā)現(xiàn),近年來,海南方斑東風(fēng)螺養(yǎng)殖過程中常常發(fā)生底砂發(fā)黑發(fā)臭現(xiàn)象,而惡劣的底砂環(huán)境對(duì)方斑東風(fēng)螺的生存和生長(zhǎng)會(huì)造成一定的負(fù)面影響。此外,底砂本身的粒徑、酸堿度等理化性質(zhì)也可能會(huì)對(duì)底棲生物造成一定的影響[5]。研究表明,河蜆(Corbiculafluminea)更傾向于選擇細(xì)砂底質(zhì)及水流緩慢區(qū)域作為棲息地[6];粒徑為0.5～2.0 mm的底砂更適合于10～15 mm規(guī)格的魁蚶(Scapharcabroughtonii)稚貝養(yǎng)殖[7];毛蚶(S.kagoshimensis)在粒徑380～830 μm的細(xì)砂底質(zhì)中潛砂行為更為活躍[8]。因此,底砂作為生境的主要組成部分之一,是底棲動(dòng)物相關(guān)研究的重要對(duì)象。

目前關(guān)于方斑東風(fēng)螺的研究報(bào)道主要集中在繁育技術(shù)[9]、環(huán)境脅迫應(yīng)激[10-11]、養(yǎng)殖技術(shù)[12-13]、營(yíng)養(yǎng)需求[14-17]、病害防治[18]等方面,鮮見關(guān)于底質(zhì)本身理化因子對(duì)其生長(zhǎng)生理影響的相關(guān)報(bào)道。為探究不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺養(yǎng)成效果的影響,本研究選用3種不同粒徑的養(yǎng)殖底砂,開展了為期30 d的方斑東風(fēng)螺稚螺養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn),以期為進(jìn)一步優(yōu)化方斑東風(fēng)螺稚螺養(yǎng)成階段的養(yǎng)殖管理技術(shù)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料、設(shè)施及管理

方斑東風(fēng)螺稚螺由海南坤田海洋生物科技有限責(zé)任公司提供,在微流水養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)7 d后,挑選規(guī)格均勻、健康、活力較好的稚螺作為試驗(yàn)對(duì)象。試驗(yàn)稚螺的初始體質(zhì)量、殼高、殼寬分別為(0.263 3±0.003 3)g、(10.67±0.11)mm、(7.06±0.15)mm。

試驗(yàn)在海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院科研基地進(jìn)行。采用微流水養(yǎng)殖系統(tǒng),控制水位高度在30 cm。養(yǎng)殖用水為經(jīng)沉淀、砂濾及濾袋過濾后的新鮮海水,每日換水量為660 L。試驗(yàn)期間養(yǎng)殖系統(tǒng)24 h連續(xù)充氧并保證水體溶解氧在7.0 mg/L以上,水溫在22～28 ℃,鹽度為27～29,氨氮<0.02 mg/L。以新鮮牡蠣為餌料,每天傍晚(18:00)投喂1次,投喂量為螺體質(zhì)量的30%。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)時(shí)間為2021年12月—2022年1月。設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)組,分別采用3種不同粒徑的養(yǎng)殖底砂(細(xì)砂1 mm、中砂2 mm和粗砂3 mm),底砂厚度為2.5 cm。每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)3個(gè)平行,每個(gè)平行組150尾試驗(yàn)稚螺。試驗(yàn)開始后,每隔6 d收集1次數(shù)據(jù),時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)分別為6、12、18、24、30 d。生長(zhǎng)數(shù)據(jù)采集及組織樣品的獲得在各時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)當(dāng)日的日常投喂管理前進(jìn)行。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及計(jì)算方法

1.3.1 存活率

R=(Nt/N1)×100%

(1)

式(1)中,R為存活率,N1、Nt分別為試驗(yàn)開始時(shí)和第t天時(shí)稚螺的數(shù)量。

1.3.2 生長(zhǎng)性能相關(guān)指標(biāo)

用分析天平稱量各時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)稚螺的體質(zhì)量;用游標(biāo)卡尺測(cè)量樣品的殼高和殼寬,測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)如圖1所示。

圖1 方斑東風(fēng)螺外殼形態(tài)指標(biāo)測(cè)量模式圖

1.3.3 消化、抗氧化酶活力及膜脂過氧化物含量的檢測(cè)

在試驗(yàn)各時(shí)間標(biāo)記點(diǎn),各試驗(yàn)組測(cè)量完形態(tài)指標(biāo)后,隨機(jī)取3尾稚螺的軟體部組織樣品保存在液氮中,隨后用于淀粉酶(amylase,AMS)、胃蛋白酶(pepsase,PES)、脂肪酶(lipase,LPS)、總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和過氧化氫酶(catalase,CAT)活力的檢測(cè),以及用于丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量測(cè)定。上述指標(biāo)采用南京建成生物科技有限公司的生化試劑盒進(jìn)行檢測(cè),操作方法嚴(yán)格按照說明書的方法進(jìn)行。

1.3.4 底質(zhì)指標(biāo)的檢測(cè)

在試驗(yàn)各時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)分別稱取新鮮底砂10.0 g放入三角瓶中,加入100 mL 2 mol/L的氯化鉀溶液,放入搖床中,在常溫下振蕩30 min后,立即過濾在水樣瓶中,用于底質(zhì)氨氮含量的測(cè)定。另外,各組稱取新鮮底砂10.0 g放入三角瓶中,加入0.1 g硫酸鈣和50 mL水,放入搖床中,在常溫下振蕩10 min,靜置5 min后,取上清液過濾,用于底砂亞硝酸鹽氮含量的測(cè)定。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示。所有數(shù)據(jù)采用EXCEL 2019和DPS 14.5軟件進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行比較 ,設(shè)P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果和分析

2.1 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺存活率的影響

由表1可見,養(yǎng)殖底砂粒徑大小對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺存活率有一定影響,粒徑較小的底砂更利于提高養(yǎng)成過程稚螺的存活率。在試驗(yàn)開始后的前12 d,同一時(shí)間點(diǎn)各試驗(yàn)組的存活率之間無顯著性差異(P>0.05)。在試驗(yàn)第18天時(shí),中砂組和粗砂組存活率開始顯著降低,分別降至(76.44±9.68)%、(81.56±2.57)%,顯著低于細(xì)砂組的(96.44±2.27)%(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的存活率為(92.67±0.94)%,顯著高于中砂組的(58.22±4.57)%和粗砂組的(48.44±1.13)%(P<0.05)。

表1 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺存活率的影響 單位:%

2.2 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺生長(zhǎng)性能的影響

從圖2可見,隨著養(yǎng)殖時(shí)間的推移,各組稚螺的體質(zhì)量均呈上升趨勢(shì),但細(xì)砂組上升更為明顯。各試驗(yàn)組稚螺在試驗(yàn)開始后的前12 d體質(zhì)量增長(zhǎng)迅速,第12天時(shí),細(xì)砂、中砂、粗砂組體質(zhì)量分別增至(0.425 4±0.033 9)、(0.396 3±0.016 8)、(0.397 0±0.006 9)g,但各試驗(yàn)組之間不存在顯著性差異(P>0.05)。在試驗(yàn)12 d后,各試驗(yàn)組稚螺的體質(zhì)量增長(zhǎng)幅度逐漸降低。第18天時(shí),細(xì)砂組的體質(zhì)量為(0.496 2±0.025 9)g,顯著高于中砂組的(0.430 6±0.029 0)g和粗砂組的(0.417 9±0.017 3)g(P<0.05),中砂組和粗砂組之間無顯著性差異(P>0.05)。這一差異現(xiàn)象維持至試驗(yàn)結(jié)束。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的體質(zhì)量為(0.560 3±0.026 3)g,顯著高于中砂組的(0.452 0±0.024 6)g和粗砂組的(0.427 5±0.019 6)g(P<0.05)。

注:不同大寫字母代表相同時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)不同粒徑試驗(yàn)組之間存在顯著性差異(P<0.05);不同小寫字母代表相同粒徑試驗(yàn)組不同養(yǎng)殖時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)之間存在顯著性差異(P<0.05)。

從圖3可見,隨著養(yǎng)殖時(shí)間推移,各組稚螺的殼高、殼寬均呈上升趨勢(shì),但細(xì)砂組在18 d后明顯增長(zhǎng)更快。在第6～18天,各試驗(yàn)組稚螺的殼高、殼寬無顯著性差異(P>0.05);但第24天,細(xì)砂組稚螺的殼高、殼寬分別達(dá)到(12.57±0.09)、(8.13±0.01)mm,顯著高于中砂組的(11.91±0.18)、(7.84±0.11)mm和粗砂組的(12.04±0.26)、(7.75±0.1)mm(P<0.05),中砂組和粗砂組之間無顯著性差異(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的殼高、殼寬分別為(12.72±0.06)、(8.50±0.16) mm,顯著高于中砂組的(12.13±0.17)、(7.91±0.13)mm和粗砂組的(12.26±0.02)、(7.90±0.18)mm(P<0.05)。

注:不同大寫字母代表相同時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)不同粒徑試驗(yàn)組之間存在顯著性差異(P<0.05);不同小寫字母代表相同粒徑試驗(yàn)組不同養(yǎng)殖時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)之間存在顯著性差異(P<0.05)。

2.3 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺消化酶活力的影響

不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺胃蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活力的影響見圖4。由圖4可見,隨著時(shí)間的推移,各試驗(yàn)組稚螺的胃蛋白酶和脂肪酶活力總體上均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。第18天時(shí),細(xì)砂組稚螺的胃蛋白酶活力為(44.817±1.644)U/mg,顯著高于中砂組和粗砂組(P<0.05,見圖4-a)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的胃蛋白酶活力為(31.959±0.764)U/mg,各組間無顯著性差異(P>0.05)。試驗(yàn)第18天時(shí),細(xì)砂組稚螺的脂肪酶活力為(41.946±0.000)U/g,顯著高于中砂組的(29.600±6.042)U/g(P<0.05),但與粗砂組差異不顯著(P>0.05,見圖4-b)。試驗(yàn)第18天時(shí),細(xì)砂組稚螺的淀粉酶活力顯著高于中砂組和粗砂組(P<0.05);試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的淀粉酶活力為(2.983±0.013)U/mg,顯著高于中砂組的(1.429±0.009)U/mg和粗砂組的(1.302±0.068)U/mg(P<0.05,見圖4-c),而粗砂組和中砂組之間無顯著性差異(P>0.05)。

2.4 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺抗氧化酶活力及膜脂過氧化物含量的影響

方斑東風(fēng)螺稚螺抗氧化酶活力及膜脂過氧化物含量受養(yǎng)殖底砂粒徑規(guī)格影響見圖5。隨著養(yǎng)殖時(shí)間的推移,各組稚螺的總抗氧化能力(T-AOC)大體上呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)(見圖5-a)。細(xì)砂組在試驗(yàn)第12天時(shí)的T-AOC為(1.944±0.116)mmol/g,顯著高于中砂組的(1.323±0.231)mmol/g和粗砂組的(1.393±0.026)mmol/g(P<0.05);試驗(yàn)結(jié)束時(shí),細(xì)砂組稚螺的T-AOC為(1.272±0.072)mmol/g,顯著高于中砂組和粗砂組(P<0.05)。隨著養(yǎng)殖時(shí)間推移,各組稚螺的CAT活力大體上呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)。第12天時(shí),細(xì)砂組稚螺的CAT活力為(197.122±15.74)U/mg,顯著高于中砂組的(152.457±5.139)U/mg和粗砂組的(123.285±21.756)U/mg(P<0.05,圖5-b),中砂組和粗砂組之間則沒有顯著性差異(P>0.05);在第18天時(shí),3個(gè)試驗(yàn)組間的CAT活力差異顯著(P<0.05),細(xì)砂組最高,中砂組最低。隨著時(shí)間的推移,中砂組稚螺的MDA含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),而粗砂組稚螺的MDA含量大體呈逐漸上升的趨勢(shì),細(xì)砂組的MDA含量先大幅降低,隨后小幅降低。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),粗砂組稚螺的MDA含量顯著高于細(xì)砂組和中砂組(P<0.05,圖5-c)?？傮w上看,粒徑較小的底砂更適合用于稚螺養(yǎng)成階段。

注:不同大寫字母代表相同時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)不同粒徑試驗(yàn)組之間存在顯著性差異(P<0.05);不同小寫字母代表相同粒徑試驗(yàn)組不同養(yǎng)殖時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)之間存在顯著性差異(P<0.05)。

注:不同大寫字母代表相同時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)不同粒徑試驗(yàn)組之間存在顯著性差異(P<0.05);不同小寫字母代表相同粒徑試驗(yàn)組不同養(yǎng)殖時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)之間存在顯著性差異(P<0.05)。

2.5 采用不同粒徑底砂的養(yǎng)殖底質(zhì)中氨氮和亞硝酸鹽氮含量的變化

不同粒徑養(yǎng)殖底砂影響底質(zhì)中氨氮和亞硝酸鹽氮含量變化情況見圖6。隨著養(yǎng)殖時(shí)間推移,各組底質(zhì)中氨氮和亞硝酸鹽氮的質(zhì)量濃度大體上呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)。第18天時(shí),細(xì)砂組底質(zhì)中氨氮的質(zhì)量濃度為(0.842 2±0.006 6)mg/L,顯著高于中砂組的(0.342 3±0.010 1)mg/L和粗砂組的(0.542 9±0.000 1)mg/L(P<0.05),中砂組和粗砂組之間也存在顯著性差異(P<0.05)。該差異現(xiàn)象一直維持至試驗(yàn)結(jié)束。

注:不同大寫字母代表相同時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)不同粒徑試驗(yàn)組之間存在顯著性差異(P<0.05);不同小寫字母代表相同粒徑試驗(yàn)組不同養(yǎng)殖時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)之間存在顯著性差異(P<0.05)。

3 討論

3.1 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺生長(zhǎng)性能的影響

方斑東風(fēng)螺營(yíng)底棲生活,有潛埋習(xí)性,因此,底砂的狀況會(huì)直接影響其生活狀態(tài)。相關(guān)研究表明,養(yǎng)殖底砂會(huì)直接影響底棲生物的存活、生長(zhǎng)、行為反應(yīng)及地理分布。例如,我國(guó)5個(gè)海區(qū)不同群體的毛蚶形態(tài)差異顯著[19];韓國(guó)統(tǒng)營(yíng)與山東蓬萊、山東黃島、江蘇前三島4個(gè)地理群體的魁蚶(Scapharcabroughtonii)在殼頂寬、放射肋寬、放射肋數(shù)量上存在顯著性差異,山東蓬萊與山東黃島及江蘇前三島群體在殼高、背緣長(zhǎng)、殼濕質(zhì)量、放射肋數(shù)量上有顯著性差異[20];徐永健等[21]研究表明,三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)幼蟹養(yǎng)殖時(shí)采用細(xì)砂(粒徑<200 μm)底質(zhì),幼蟹存活率最高。

本研究表明,不適宜的養(yǎng)殖底砂粒徑會(huì)加劇方斑東風(fēng)螺稚螺養(yǎng)成階段的死亡風(fēng)險(xiǎn),降低存活個(gè)體的生長(zhǎng)性能。在本試驗(yàn)條件下,0～1 mm粒徑的養(yǎng)殖底砂(細(xì)砂)相對(duì)更利于方斑東風(fēng)螺稚螺的存活和生長(zhǎng),而其他較粗的底砂不利于稚螺后續(xù)的生長(zhǎng)。究其原因,可能在于養(yǎng)成階段所用的稚螺個(gè)體較小,其運(yùn)動(dòng)和消化能力不如成螺等大規(guī)格的個(gè)體,因而較細(xì)的養(yǎng)殖底砂相對(duì)更有利于其進(jìn)行潛砂等行為,養(yǎng)殖底砂顆粒過大、過粗糙可能會(huì)使稚螺本身耗費(fèi)巨大的體力、能量開展日常的潛砂行為,甚至在潛砂過程中易受傷而引發(fā)應(yīng)激反應(yīng),不利于其后續(xù)的生長(zhǎng)存活。

3.2 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺消化酶活力的影響

消化酶活力反映了動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力[22]。胃蛋白酶是動(dòng)物胃組織中最重要的消化性蛋白酶,其功能是初步水解食物中的蛋白質(zhì)。方斑東風(fēng)螺為肉食性貝類,因此蛋白酶活力最能反映機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的效率[23-24]。脂肪酶是一類重要的甘油酯鍵水解酶,其活力的高低決定動(dòng)物對(duì)脂肪酸的消化吸收能力[25]。淀粉酶是水解淀粉和糖原酶類的總稱,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中[26]。

本研究中,在試驗(yàn)前期至中期細(xì)砂組和中砂組稚螺的胃蛋白酶活力呈大幅度增長(zhǎng)趨勢(shì),說明較小粒徑的養(yǎng)殖底砂有利于促進(jìn)方斑東風(fēng)螺稚螺消化吸收,而粗砂組稚螺的胃蛋白酶活力相對(duì)較低,說明大規(guī)格的養(yǎng)殖底砂(粗砂)不利于促進(jìn)稚螺消化吸收。相關(guān)研究表明,消化酶的活力受物種、生理狀態(tài)、溫度、餌料、個(gè)體規(guī)格以及養(yǎng)殖方式等影響[27-28]。產(chǎn)生以上結(jié)果的原因可能是粗砂粒徑過大,稚螺無法實(shí)現(xiàn)潛砂,導(dǎo)致休息不佳,能量大量消耗。值得注意的是,本試驗(yàn)結(jié)束前6 d,當(dāng)?shù)貧鉁伢E降,本試驗(yàn)采用微流水養(yǎng)殖系統(tǒng),養(yǎng)殖水溫也受到了一定的影響。水溫的變化會(huì)引起生物機(jī)體消化能力的變化[29],這可能是養(yǎng)殖最后時(shí)間節(jié)點(diǎn)稚螺消化酶活力呈現(xiàn)不規(guī)則波動(dòng)的原因之一。合適的養(yǎng)殖底砂在一定程度上具有一定的溫度波動(dòng)緩沖作用,因此在后續(xù)的試驗(yàn)中可開展養(yǎng)殖底砂與溫度波動(dòng)相關(guān)性的研究。

3.3 不同粒徑養(yǎng)殖底砂對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺抗氧化酶活力及膜脂過氧化物含量的影響

所有需氧生物體內(nèi)均有一套抗氧化系統(tǒng)以應(yīng)對(duì)氧化脅迫。抗氧化系統(tǒng)可分為非酶促和酶促系統(tǒng),其功能是清除體內(nèi)過量的活性氧,保護(hù)機(jī)體不受氧化損傷,因此總抗氧化能力(T-AOC)的大小常被用作評(píng)估機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)[30-32]。T-AOC是機(jī)體內(nèi)抗氧化能力的總體體現(xiàn)[33];CAT在機(jī)體內(nèi)催化H2O2分解形成氧和水,從而阻斷產(chǎn)生活力極高的羥自由基反應(yīng),是消除H2O2對(duì)細(xì)胞毒性作用的酶[34]。研究表明,CAT等抗氧化酶活力與動(dòng)物發(fā)育階段[35]、環(huán)境因子[36-37]、餌料[38]、藥物[39]等有關(guān)。MDA是脂質(zhì)過氧化物分解后的重要產(chǎn)物,其產(chǎn)生量的多少能代表膜脂過氧化的程度,也可間接反映組織抗氧化能力的強(qiáng)弱。一般來說,MDA含量越高,生物體所受的壓力越大[40]。

本研究表明,較細(xì)的養(yǎng)殖底砂更適合于稚螺養(yǎng)成階段的環(huán)境,而較粗的養(yǎng)殖底砂會(huì)造成稚螺較大的應(yīng)激反應(yīng),并使其在潛砂過程中受傷。該結(jié)果與王庚申等[41]對(duì)日本囊對(duì)蝦(Marsupenaeusjaponicus)養(yǎng)殖的相關(guān)研究結(jié)果不一致,可能是由于品種、環(huán)境因子、底質(zhì)粒徑及底質(zhì)類型不同所致。本試驗(yàn)中,粗砂組方斑東風(fēng)螺稚螺的平均MDA含量最高,說明粗砂組稚螺細(xì)胞受損的程度較高,從而導(dǎo)致其免疫防御能力下降。這與王庚申等[41]的研究結(jié)果一致,原因可能在于養(yǎng)成過程中,較細(xì)的養(yǎng)殖底砂相對(duì)更有利于其潛砂行為,而且在稚螺鉆砂和移動(dòng)過程中,細(xì)砂能減小其身體與底質(zhì)之間的摩擦力,從而不易受傷。

3.4 底質(zhì)中氨氮和亞硝酸鹽氮含量的變化

底質(zhì)不僅是底棲水生動(dòng)物的棲息場(chǎng)所,還是氮、磷等生源要素的重要蓄積庫和細(xì)菌繁殖場(chǎng)所,承擔(dān)著凈化水體的作用,在一定條件下,其吸附的營(yíng)養(yǎng)鹽還會(huì)在分子擴(kuò)散和生物擾動(dòng)等作用下重新釋放到養(yǎng)殖水體中[42]。氨氮是水產(chǎn)養(yǎng)殖水環(huán)境中主要的有毒物質(zhì),當(dāng)其質(zhì)量濃度達(dá)到一定程度后,會(huì)對(duì)養(yǎng)殖生物產(chǎn)生明顯的毒害作用。氨氮質(zhì)量濃度受養(yǎng)殖生物糞便、分泌物、殘餌等含氮有機(jī)物分解的影響[43-44]。亞硝酸鹽氮主要是含氮有機(jī)物在微生物的作用下氧化形成的中間產(chǎn)物,是水產(chǎn)養(yǎng)殖中誘發(fā)暴發(fā)性疾病的重要環(huán)境因子[45]。

本研究表明,底砂粒徑對(duì)底質(zhì)指標(biāo)(氨氮、亞硝酸鹽氮)影響較大,細(xì)砂組養(yǎng)殖底質(zhì)中氨氮含量基本上均顯著高于中砂組和粗砂組。筆者認(rèn)為,細(xì)砂組稚螺未受到較強(qiáng)的環(huán)境脅迫,因此攝食良好,排泄量多,導(dǎo)致底質(zhì)中的氨氮含量較高。譚春明等[10]研究了氨氮脅迫對(duì)方斑東風(fēng)螺的影響,結(jié)果表明,在氨氮質(zhì)量濃度低于200 mg/L的條件下,方斑東風(fēng)螺死亡率極低。本試驗(yàn)中,細(xì)砂組底質(zhì)的氨氮含量雖然顯著高于其他組,但一直在養(yǎng)殖水質(zhì)安全的濃度范圍內(nèi),因此對(duì)方斑東風(fēng)螺稚螺的生長(zhǎng)沒有造成不利影響。

4 結(jié)論

在方斑東風(fēng)螺養(yǎng)成階段,底質(zhì)對(duì)其生長(zhǎng)、消化酶、抗氧化性能及環(huán)境氨氮、亞硝酸鹽氮含量有顯著的影響。細(xì)砂組養(yǎng)殖條件下方斑東風(fēng)螺稚螺的存活率最高,生長(zhǎng)速度最快,且其淀粉酶、總抗氧化能力及CAT平均活力總體均高于中砂組和粗砂組。細(xì)砂組底質(zhì)中的氨氮含量雖高,但一直處于養(yǎng)殖動(dòng)物的安全濃度范圍內(nèi)。研究結(jié)果表明,粒徑1 mm規(guī)格的底砂較適合于方斑東風(fēng)螺養(yǎng)成階段。