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    脈動真空滅菌器液體程序最小裝載模式驗證的探索與研究

    2023-05-18 15:21:28李欣范宇張彥文錢磊
    機電信息 2023年9期

    李欣 范宇 張彥文 錢磊

    摘 要:從滅菌在醫(yī)藥食品行業(yè)的作用以及滅菌器原理出發(fā),闡述脈動真空滅菌器的工作技術特點。通過溫度變化及最終滅菌溶液的檢測結果數(shù)據(jù)來衡量滅菌器的最小裝載量驗證,提供最小裝載驗證的可行措施,為企業(yè)生產過程中脈動真空滅菌器的驗證認證提供支持。

    關鍵詞:滅菌;滅菌器;驗證;最小裝載

    中圖分類號:R181.9? 文獻標志碼:A? 文章編號:1671-0797(2023)09-0063-03

    DOI:10.10.19514/j.cnki.cn32-1628/tm.2023.09.018

    0? ? 引言

    在醫(yī)藥食品領域,滅菌既是安全保障,也是生產的最基本需要。滅菌(Sterilization)是指用物理或化學方法殺滅全部微生物,包括致病和非致病微生物以及芽孢,使之達到無菌保障水平。滅菌常用的方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。滅菌的徹底程度受滅菌時間與滅菌劑強度的制約。脈動真空滅菌器采用濕熱滅菌法,廣泛應用于醫(yī)療食品行業(yè),是通過蒸汽在高壓環(huán)境下對物品進行滅菌的重要設備。

    1? ? 滅菌原理

    微生物對滅菌劑的抵抗力取決于原始存在的群體密度、菌種或環(huán)境賦予菌種的抵抗力。濕熱滅菌有巴氏消毒法、蒸汽滅菌法以及過熱滅菌方式。其中脈動真空滅菌器的蒸汽加壓滅菌和過熱滅菌效果最好,脈動真空滅菌器能通過控制飽和蒸汽的溫度和時間,使蛋白質變性,從而將微生物殺死,并使耐熱芽孢在30 min內失去活性,從而達到滅菌的目的?,F(xiàn)階段,除具備滅菌功能的應用外,對某些易被高壓破壞的物質,如某些糖或有機含氮化合物,通過脈動真空滅菌器控溫功能將溫度控制在110 ℃以下,滅菌時長15~30 min,也可達到降低微生物負載的作用。

    2? ? 法規(guī)要求

    《歐盟人用和獸用藥品生產質量管理規(guī)范指南》(以下簡稱《歐盟指南》)[1]附錄提出:所有滅菌工藝都應建立經驗證的裝載模式,并且裝載模式應定期進行再驗證;還應考慮最大裝載和最小裝載,作為裝載驗證策略的一部分。在對《歐盟指南》要求進行分析時,成都生物制品研究所有限責任公司對現(xiàn)有脈動真空滅菌器執(zhí)行的滅菌固體、液體程序進行了梳理,并采取了相應措施。

    3? ? 脈動真空滅菌器固體、液體程序的應用

    固體程序采用脈動真空方式,通過真空泵將滅菌器內室氣體排出,達到脈動設定壓力限度后,從夾層往內室注入飽和蒸汽,一般整個過程脈動真空三次,以徹底消除內室冷點,并在此過程中排除溫度死角和小裝量效應。這個過程中壓力反復上升、下降,溫度曲線類似于脈沖波,故命名為“脈動”[2]。固體程序主要用于不銹鋼類、器械類、膠塞鋁蓋、塑料類材質物品滅菌,此類物品在低壓和高溫互相切換條件下較為穩(wěn)定,不易發(fā)生形變或析出顆粒等物質。同時,在固體程序中使用大小裝載模式進行滅菌,增加了滅菌次數(shù),可能導致生產協(xié)調時間不足、浪費資源以及縮短滅菌物品壽命等問題。通過上述分析,判斷固體程序采用脈動真空方式不會對所滅菌物品產生影響。

    液體程序采用氣體置換方式,因為液體一般放置于玻璃瓶中進行滅菌處理,若使用脈動真空方式,易將瓶內液體抽出,既損壞了待滅菌液體,又不能達到滅菌效果。置換程序主要如下:滅菌器在液體升溫階段,內室一邊從夾層進入蒸汽,一邊從排汽口排汽,依靠重力的作用逐漸將內室冷空氣置換出去,盡可能減少內室溫度死角。置換程序出氣方式與脈動程序不同,有效保護了待滅菌物體,但此種方式升降溫較為緩慢,滅菌時間長[3]。

    4? ? 最小裝載的研究

    液體程序滅菌時間長,待滅菌物品大多為培養(yǎng)基或生產使用的稀釋液等,長時間的高溫條件易使有配制濃度要求的稀釋液蒸發(fā)量增大,增加液體濃度,也可能使培養(yǎng)基等物質失活變性。成都生物制品研究所有限責任公司生產的23價肺炎球菌多糖疫苗使用的磷酸鹽緩沖液,每次用于多糖的配制,使用量約為10萬mL,在《歐盟指南》[1]附錄生效前,進行了最大裝載量驗證,且驗證完成后對磷酸鹽緩沖液取樣進行了檢測,檢測項目為pH和氯化鈉含量。為了響應對滅菌器最小裝載的驗證測試要求,增加最小裝載測試的研究工作,并擬在執(zhí)行裝載再驗證時進行應用。

    首先對磷酸鹽的緩沖液裝載量進行評估,按照已完成最大量液體裝載要求,即每次使用10個20 L玻璃瓶進行滅菌工作,對液體受熱情況以及受熱作用時間進行分析,并按照滅菌難易程度,得出使用1瓶緩沖液作為脈動真空滅菌器最小裝載量,受熱更為充分,瓶內液體蒸發(fā)理論上更為明顯,故將此液體程序最小裝載量設置為1瓶緩沖液,液體濃度與正常生產濃度一致,按照pH為7和氯化鈉含量8.3 g/L配制磷酸鹽緩沖液。將磷酸鹽緩沖液配制好后,按照均勻性布點要求執(zhí)行脈動真空滅菌器熱分布布點,熱分布點位布置如圖1所示。

    在熱分布點位布置完成后,根據(jù)實際情況,對最小裝載進行熱穿透探頭布置,布置點位信息如圖2所示。

    針對最小裝載驗證工作,在進行驗證測試前,按照藥品管理指南規(guī)范(現(xiàn)行版)要求,完成脈動真空滅菌器驗證測試前的準備工作,進行BD測試、保壓測試、驗證用探頭的前校準工作,濾器在線SIP、空載熱分布測試。上述測試完成以后,進行最小裝載的熱分布和熱穿透(指示劑布點)測試,在驗證結束后還應對驗證用的探頭進行后校準工作。其他測試項目如報警聯(lián)鎖功能測試,可根據(jù)測試過程發(fā)生情況進行記錄,或穿插在上述測試中進行。

    按正常生產模式,設置脈動真空滅菌器液體滅菌程序:置換1 800 s,滅菌時間3 000 s,滅菌溫度121.0 ℃,內室壓力限度110~120 kPa,夾層壓力限度90~120 kPa;將探頭放置于液體內部進行連續(xù)3次熱穿透測試,抽取樣品送檢進行檢測,獲得pH和氯化鈉結果如圖3所示。

    經測試,探頭放置于液體內部,液體受熱蒸發(fā)溫度和時間均接近,磷酸鹽緩沖液pH和氯化鈉濃度均在內控要求的合格范圍內,pH合格范圍為6.0~7.5;氯化鈉含量合格范圍為7.6~10.0 g/L。由圖3可知,氯化鈉含量沒有變化,pH值接近一致,但略偏低,證明最小裝載測試有效,控制探頭放置于液體內部,液體受影響較小或無影響。

    為確認是否因為探頭放置因素導致蒸發(fā)量發(fā)生變化,對脈動真空滅菌的探頭位置進行調整,此次探頭放置于液體外部,比較3次最大和最小液體裝載測試結果,如圖4所示。

    經測試,探頭放置于液體外部,液體受熱蒸發(fā)溫度和時間產生差異,磷酸鹽緩沖液pH和氯化鈉濃度雖在內控要求的合格范圍內,但氯化鈉和pH含量因蒸發(fā)時間有異,均發(fā)生了變化,氯化鈉含量升高,pH值略偏低,雖均在可控范圍,但已出現(xiàn)時間和溫度差異影響。

    5? ? 研究總結

    經研究,若脈動真空滅菌探頭放置于液體內部,滅菌時長約4.5 h(自升溫開始到滅菌結束可開門情況);而探頭放置于液體外部,滅菌時長約2 h。磷酸鹽緩沖液受溫度作用時間和液體蒸發(fā)因素影響,因裝載量不一致,整個滅菌時長不一,導致結果存在差異。

    經過結果及液體性質分析,磷酸鹽溶液具有自我調節(jié)pH功能,無論大小裝載,pH結果均在合格范圍內,且變化較小;氯化鈉溶液因滅菌時長不一,大小裝載受熱蒸發(fā)程度不同,最小裝載因蒸發(fā)量過多,雖滅菌后的氯化鈉濃度在合格范圍內,但可能引起濃度升高等異常情況。同時,為避免因滅菌原因導致作用后的液體不符合要求,將溫度探頭放置于液體內部滅菌,是最符合條件也是最準確的滅菌方法。

    6? ? 探索與展望

    滅菌是獲得無菌的必要條件,也是食品工業(yè)和醫(yī)藥領域不可或缺的技術。高壓鍋的驗證、不同液體裝載模式的探索,滅菌所涵蓋的內容也比較廣泛,溫度條件、作用時間、冷熱鍋的啟動等都是需要探討與研究的問題。因此,成都生物制品研究所一直以來都力求及時跟進法規(guī)要求,為中國疫苗企業(yè)做好帶頭示范作用,積極奮進,為中國第一支走出國門的疫苗繼續(xù)把好質量關。

    [參考文獻]

    [1] 歐盟委員會.歐盟藥品管理規(guī)則 第4卷 歐盟人用和獸用藥品生產質量管理規(guī)范指南[S].

    [2] 韓昆,宋寧科,劉凱.新華XGI-DM型脈動真空滅菌器原理、維護保養(yǎng)及故障處理[J].醫(yī)療裝備,2013,26(3):90-91.

    [3] 藺建平,郭建軍,亢和平,等.淺談脈動真空滅菌柜脈動滅菌和非脈動滅菌模式的不同及使用要點[J].中國新技術新產品,2022(3):64-66.

    收稿日期:2022-12-27

    作者簡介:李欣(1986—),男,遼寧鐵嶺人,工程師,研究方向:生產工藝設備類驗證。

    通信作者:錢磊(1988—),男,四川敘永人,工程師,研究方向:質量管理。

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