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    高效液相色譜法在肺結(jié)核患者利福平血藥濃度監(jiān)測中的應(yīng)用

    2020-01-11 05:01:02邵海峰
    河南醫(yī)學(xué)研究 2020年9期
    關(guān)鍵詞:利福平血藥濃度色譜法

    邵海峰

    (商水縣疾病預(yù)防控制中心,河南 周口 466100)

    肺結(jié)核屬臨床常見嚴(yán)重慢性傳染性疾病,由結(jié)核分歧桿菌感染引起,可侵及機(jī)體多個(gè)臟器,多與患者免疫能力下降、細(xì)胞變態(tài)反應(yīng)升高有關(guān)[1]。利福平是臨床治療肺結(jié)核的一線藥物,屬廣譜抗生素藥物,具有較強(qiáng)抗菌活性,可有效抑制致病菌RNA合成,阻斷其轉(zhuǎn)錄過程,影響DNA及蛋白合成。但患者服藥后血藥濃度個(gè)體差異較大,部分患者可因血藥濃度過低而影響治療效果,長期服藥后還可導(dǎo)致肝功能損傷、藥物半衰期縮短等不良影響,且易產(chǎn)生較高耐藥性[2]。因此,加強(qiáng)利福平血藥濃度監(jiān)測,是保證臨床安全、合理用藥的關(guān)鍵。本研究選取商水縣疾病預(yù)防控制中心收治的127例肺結(jié)核患者,旨在分析高效液相色譜法在肺結(jié)核患者利福平血藥濃度監(jiān)測中的應(yīng)用效果。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。選取2018年5月至2019年5月商水縣疾病預(yù)防控制中心收治的127例肺結(jié)核患者,其中男65例,女62例;年齡23~64歲,平均(44.38±9.58)歲。

    1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)影像學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)測定確診為肺結(jié)核;(2)痰菌檢查結(jié)果為陽性;(3)胸部X片結(jié)果顯示病變呈進(jìn)展或空洞增大趨勢;(4)對(duì)本研究知情并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)存在藥物使用禁忌證;(2)血液類疾??;(3)精神類疾??;(4)認(rèn)知功能障礙;(5)妊娠、哺乳期女性;(6)肝腎功能異常;(7)代謝、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)疾病。

    1.3 測定方法

    1.3.1治療方案 口服利福平(成都奧邦藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H51020707,規(guī)格:0.15 g)實(shí)施聯(lián)合化療,晨起給藥,每日0.45 g。

    1.3.2利福平血藥濃度線性關(guān)系測定 采用高效液相色譜柱(安捷倫,Symmetry C18)進(jìn)行分析,選擇甲醇、乙腈、磷酸二氫鉀(30∶30∶40)為流動(dòng)相,設(shè)置流速為1 mL·min-1,柱溫為40 ℃,檢測波長為340 nm,進(jìn)樣體積為20 μL;精密吸取利福平對(duì)照品適量,加入到空白血漿,分別配制成1 mL血漿藥物濃度為0.3、0.5、2.4、5、10、15、20、25、30 μg·mL-1的樣品溶液,加入磷酸二氫鈉緩沖液10 mL,乙酸乙酯2 mL,漩渦混合2 min,以2 300 r·min-1轉(zhuǎn)速離心5 min,取上清液,采用0.45 μm濾膜過濾后取樣至進(jìn)樣器小瓶進(jìn)樣檢測,觀察色譜圖,作線性回歸方程,分析利福平血藥濃度線性范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系。

    1.3.3患者血藥濃度測定 儀器及參數(shù)設(shè)定同1.3.2,于第5天給藥后8 h采用真空抗凝管采集血樣約2 mL,以3 000 r·min-1轉(zhuǎn)速離心15 min,取上層血漿300 μL,加入甲醇溶液0.5 mL,漩渦混合10 min,以3 000 r·min-1轉(zhuǎn)速離心15 min,取20 μL上層清液進(jìn)樣檢測。

    1.4 觀察指標(biāo)(1)利福平血藥濃度線性范圍。(2)患者服藥5 d后利福平血藥濃度。

    2 結(jié)果

    2.1 利福平血藥濃度線性關(guān)系采用高效液相色譜法測定利福平血藥濃度線性范圍為0.3~30 μg·mL-1,根據(jù)線性回歸方程分析,血漿中利福平在0.3~30 μg·mL-1范圍內(nèi)時(shí),血藥濃度與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.994 1)。

    2.2 服藥5 d后利福平血藥濃度高效液相色譜法檢測結(jié)果顯示,127例肺結(jié)核患者中,血藥濃度0.3~0.5 μg·mL-19例,0.5~30 μg·mL-1117例,僅1例患者因血藥濃度<0.3 μg·mL-1未經(jīng)高效液相色譜法測出,高效液相色譜法檢測有效率為99.21%(126/127)。

    3 討論

    肺結(jié)核主要通過呼吸道傳播,易出現(xiàn)低熱、乏力、咳嗽、咯血等臨床癥狀,嚴(yán)重威脅患者生命安全。

    利福平是臨床治療肺結(jié)核的一線用藥,屬利福霉素類抗菌藥物,可有效殺滅結(jié)核分歧桿菌,且口服吸收較好,可于2 h左右達(dá)到血藥濃度峰值。由于個(gè)體差異較大,患者服藥后血藥濃度易受影響,長期服藥后可使藥物半衰期縮短,血藥濃度下降,還可產(chǎn)生耐藥性、肝功能損傷等毒副作用,影響治療效果。學(xué)者認(rèn)為,應(yīng)加強(qiáng)利福平血藥濃度監(jiān)測,實(shí)現(xiàn)服藥劑量個(gè)性化,優(yōu)化并縮短療程對(duì)肺結(jié)核患者的治療具有重要意義[3]。本研究采用高效液相色譜法對(duì)肺結(jié)核患者進(jìn)行利福平血藥濃度測定,所用色譜柱可在乙腈-磷酸鹽體系中準(zhǔn)確分離并分析利福平濃度,將檢測波長設(shè)置為利福平特征吸收波長,可有效避免溶劑峰對(duì)利福平濃度分析造成影響,且對(duì)溶劑無干擾作用。利福平為一種弱酸,在酸性環(huán)境下穩(wěn)定性較高,在流動(dòng)相配制及樣品提取中應(yīng)采用緩沖液將流動(dòng)相調(diào)節(jié)至弱酸性,既往多以乙腈作為流動(dòng)相,可使利福平保持最佳穩(wěn)定性,但價(jià)格較昂貴。本研究所用流動(dòng)相為甲醇、乙腈、磷酸二氫鉀混合溶液,比例性質(zhì)較穩(wěn)定,且具有良好分離效果,經(jīng)濟(jì)實(shí)用,長久放置后其質(zhì)量及濃度不易發(fā)生變化[4]。本研究所建立的高效液相色譜血藥濃度線性范圍為0.3~30 μg·mL-1,結(jié)果顯示,在此范圍內(nèi)血藥濃度與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.994 1),126例肺結(jié)核患者可通過高效液相色譜法檢測其血藥濃度,有效率為99.21%。這說明借助高效液相色譜法可實(shí)現(xiàn)肺結(jié)核患者利福平血藥濃度監(jiān)測,及時(shí)發(fā)現(xiàn)個(gè)體差異引起的血藥濃度偏離,采取有效解決方案,為實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療提供數(shù)據(jù)支持?;颊哐帩舛绕蛣t表示劑量不足,血藥濃度低、代謝快均是導(dǎo)致耐藥性發(fā)生的主要原因,通過血藥濃度監(jiān)測有利于及時(shí)對(duì)患者實(shí)施足量給藥,減少耐藥性發(fā)生;其次血藥濃度過高可嚴(yán)重影響患者肝功能,根據(jù)血藥濃度監(jiān)測結(jié)果及時(shí)減少用藥劑量,可有效避免毒副作用發(fā)生。通過高效液相色譜法對(duì)肺結(jié)核患者利福平血藥濃度進(jìn)行監(jiān)測,可為臨床安全合理用藥及不良反應(yīng)監(jiān)測提供參考依據(jù),對(duì)臨床治療具有重要指導(dǎo)意義[5]。

    綜上,采用高效液相色譜法可準(zhǔn)確測定肺結(jié)核患者服用利福平治療期間血藥濃度,且操作簡便、快速,適用于肺結(jié)核患者治療監(jiān)測,對(duì)臨床安全、合理用藥具有重要指導(dǎo)意義。

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