豬偽狂犬病的病原學及診斷技術(shù)要點

張穩(wěn)苗

(獻縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 滄州 062250）

近些年，我國的養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展迅速，在一些龍頭企業(yè)帶動下，規(guī)模化養(yǎng)豬場越來越多，幾乎占據(jù)主導優(yōu)勢。但一些疾病也開始流行，豬偽狂犬病就是其中的一種，每年都給我國的養(yǎng)豬業(yè)造成不小的損失。豬偽狂犬病是一種病毒性、傳染疾病，被國家列為二類傳染性疾病，可見其危害性有多大。

因此，迫切需要加強對養(yǎng)殖戶豬偽狂犬病的防控和凈化指導。正是在此背景下，本文對豬偽狂犬病的病原學、流行病學、臨床癥狀、診斷方法進行歸納和總結(jié)，希望對國內(nèi)獸醫(yī)同行和廣大養(yǎng)豬戶有所幫助。

1 病原學特點

從病毒分類來講，豬偽狂犬病毒（PRV）分別屬于α 皰疹病毒科和水痘病毒屬。發(fā)育成熟的PRV 結(jié)構(gòu)具備典型泡狀病毒的結(jié)構(gòu)特征，其外體是二十面，外形為球形或者橢圓形。

PRV 的直徑多在160～180 納米，核衣的直徑則更小，在105～120 納米。成熟的PRV 病毒粒子包含了四個主要部分，分別是病毒核心、衣殼、蛋白質(zhì)內(nèi)膜和脂質(zhì)雙層膜。病毒的核心實際上是雙鏈性DNA，呈卷軸狀。再往外則是由162個殼粒組成的衣殼，衣殼的最外層被包裹著一層蛋白質(zhì)膜，又稱被膜。病毒的最外層是脂質(zhì)雙層膜，其結(jié)構(gòu)類似細胞膜，表層有長8～10 納米的糖蛋白纖突，它們起到保護病毒和幫助病毒成功感染機體的作用。因此，這些糖蛋白與豬偽狂犬病毒（PRV）的生化特性、生存能力和致病力等密切相關(guān)。

豬偽狂犬病毒（PRV）在自然環(huán)境中具有較強的生存能力。它對溫度敏感，不同溫度下，存活時間差異較大，在37℃環(huán)境中，半衰期為7 小時。25℃條件下最長可存活30 天，8℃條件下可存活46 天。在機體中保持活性時間可達35～40天。雖然PRV 適應環(huán)境的能力很強，但對于一般的消毒劑，抵抗力卻是很弱。日常養(yǎng)殖場使用的石灰水、火堿、漂白粉等消毒劑對其均有較好的殺滅效果，并且常規(guī)的濃度即可殺死。

2 流行病學特點

隨著動物疾病防治和免疫技術(shù)的進步，多個發(fā)達國家宣布已經(jīng)在本國消除了豬偽狂犬病。但在世界大部分國家還時有發(fā)生，我國也不例外。每年都給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，因此，豬偽狂犬病也成為我國重點防控的豬傳染病之一。

2.1 發(fā)病季節(jié)

豬偽狂犬病發(fā)生具有明顯的季節(jié)性，寒冷的冬季是高發(fā)期，春天次之。在夏季和秋季則是零星發(fā)生。這個發(fā)病規(guī)律也符合豬偽狂犬病毒的生化性質(zhì)，在低溫下存活時間更久。因此，該病在春季和冬季尤其要高度重視。但也有報道稱，隨著PRV 不斷變異，一年四季均容易發(fā)生，不可掉以輕心。

2.2 易感動物

在自然條件下，常見的豬、兔、鼠、貓、狐貍、禽類等都容易感染豬偽狂犬病毒，牛、羊的感染概率則較低。在這些易感動物中，兔子最為敏感。與其他動物不同，豬是PRV 的唯一天然宿主，同時也是唯一能夠感染后存活的動物。人則較難感染豬偽狂犬病。

2.3 傳播渠道

豬偽狂犬病的傳播途徑有很多，這是因為其傳染源很廣泛。帶毒的豬和老鼠等都可以向環(huán)境中排毒，是該病的主要傳染源。有報道稱在病豬的乳汁、精液、口腔和鼻腔分泌物中均檢測到了豬偽狂犬病毒。具體傳播方式分為接觸式傳播和垂直傳播兩種。接觸式傳播有碰鼻子、交配等方式，或者健康豬接觸到感染病毒的飲用水、飼料等。垂直傳播是含有病毒的空氣、灰塵或者母豬通過胎盤、乳汁將病毒傳給下一代。另外，由于豬偽狂犬病毒（PRV）可以長期潛伏感染，即便病豬經(jīng)過治療，臨床癥狀消失，但是之后一旦豬的免疫力和抵抗力出現(xiàn)下降，會導致病毒重新被激活，使得豬再次發(fā)病和往環(huán)境中排毒，這一點尤為關(guān)鍵，也是豬偽狂犬病防治容易被忽視的地方。

3 臨床癥狀和病理變化

3.1 臨床癥狀

不同日齡的病豬癥狀有較大差異。對于感染豬偽狂犬病毒的仔豬，一般多是急性病癥，死亡率較高。一般感染豬偽狂犬病毒的仔豬第二天便表現(xiàn)出顯著的癥狀：精神萎靡不振、嘔吐腹瀉、刺耳尖叫、高燒不退和呼吸困難等?；疾『笃陂_始出現(xiàn)四肢麻痹、倒地不起等嚴重癥狀。發(fā)病3～5 天內(nèi)，病豬開始大面積死亡。對于15 日齡以內(nèi)的患病仔豬，死亡率高達100%。對于斷奶后的仔豬，情況稍微好些，死亡率降低到30%以內(nèi)。

懷孕母豬感染豬偽狂犬病毒后，表現(xiàn)的突出癥狀有：精神萎靡、高燒、氣喘。有的母豬還會發(fā)生流產(chǎn)、死胎等。當母豬流產(chǎn)之后，出現(xiàn)采食量下降，精神萎靡。成年豬由于免疫力提高，感染后癥狀不顯著。死亡率較低，多數(shù)病豬經(jīng)過一段時間發(fā)熱、呼吸困難等癥狀后，逐漸恢復。但大多數(shù)病豬轉(zhuǎn)變?yōu)榻┴i，出現(xiàn)發(fā)育緩慢、日漸消瘦，空懷母豬發(fā)情和配種困難，種豬多出現(xiàn)不育癥，影響了養(yǎng)殖場的經(jīng)濟效益。

3.2 病理變化

對病死豬進行剖檢，多處組織都有病變。小腦發(fā)生腦膜炎，出現(xiàn)神經(jīng)細胞壞死和崩解。肝小葉區(qū)域出現(xiàn)有大小不一的壞死病灶?？梢姵鲅c，顏色深淺不一。還有部分肝細胞腫大。肺部出現(xiàn)肺炎，有許多界限分明的壞死灶。脾臟也出現(xiàn)明顯的壞死灶，里面有大量紅色壞死物和紅細胞。消化系統(tǒng)，胃腸黏膜壞死，伴隨出血。

4 病情診斷

4.1 病毒分離鑒定

由于豬偽狂犬病是由病毒引起的傳染性疾病，因此對病豬體內(nèi)的病毒進行分離和鑒定就是必不可少的手段。在實驗室中，按照要求，從豬的腦、脾臟等病變部位取少量組織，處理后，將其接種至豬腎細胞或者雞胚原代細胞中，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，確定培養(yǎng)細胞中否出現(xiàn)病變。為了診斷更加精確，可以將分理出的豬偽狂犬病毒進行血清學檢測、PCR 檢測。病毒分離鑒定對實驗室條件、人員素質(zhì)、操作過程要求較高，并且試驗時間長，還需要購買電鏡，適合科研單位，基層往往在人員、設備等方面不具備條件。

4.2 血清學檢測

血清學檢測包括酶聯(lián)免疫、血清中和等檢測手段。酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）具有專一性強、檢測速度快等優(yōu)點，適合對養(yǎng)殖場豬群的大面積篩查。是目前檢測豬偽狂犬病毒的常用方法。在具體操作上，要充分考慮養(yǎng)殖場使用的何種疫苗，避免千篇一律，造成不必要的損失。

血清中和實驗是國際上公認的檢測方法。其操作是將病毒毒株與連續(xù)等比稀釋的血清充分混勻，按照規(guī)定要求進行培養(yǎng)和觀察，通過確定的最終中和效價，來判定是否為陽性。

4.3 PCR 檢測技術(shù)

PCR 是目前體外擴增DNA 最簡單和快速的分子生物學檢測技術(shù)，在實驗室診斷上得到了廣泛應用。目前應用較多的是多重PCR 技術(shù)和實時熒光定量PCR 技術(shù)。兩種方法之間存在著較大差異，各自有自己的優(yōu)勢。多重PCR 可以實現(xiàn)對多種病原同時進行檢測，具有速度快、效率高的優(yōu)勢。實時熒光定量PCR 在技術(shù)上更進一步，與光譜技術(shù)有效結(jié)合，大大提高了檢測效率，同時降低了誤差率。