黃保成 胡秀月 駱美花 羅陽蘭 王燦琴* 韋仕巖 韋嬌君
(1田林縣科學(xué)技術(shù)情報(bào)研究所,廣西田林 533300;2田林縣經(jīng)濟(jì)作物站,廣西田林 533300;3廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所,廣西南寧 530007)
靈芝Ganoderma lucidum,是一種珍貴藥食兩用真菌[1],含有多糖、三萜類、肽類、核苷等多種活性成分,具有提高人體免疫力[2],抑制腫瘤細(xì)胞生長,抗氧化[3],保肝護(hù)肝[4]等作用。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,靈芝消費(fèi)量逐年增長,栽培靈芝的規(guī)模也逐年擴(kuò)大。廣西壯族自治區(qū)栽培靈芝以椴木為主要原料,產(chǎn)量已遠(yuǎn)不能滿足市場需求,因此必須因地制宜發(fā)展代料栽培靈芝產(chǎn)業(yè)。
目前代料栽培靈芝多以棉籽殼、雜木屑等[5-6],樹木修剪下腳料[7]或農(nóng)副產(chǎn)品為主。廣西非棉花產(chǎn)區(qū),棉籽殼價(jià)格是當(dāng)?shù)仄渌蟽r(jià)格的幾倍,因此,采用棉籽殼栽培靈芝,原料成本過高不利于提高廣西靈芝產(chǎn)業(yè)的競爭力。雜木屑原料成分不穩(wěn)定,導(dǎo)致靈芝生產(chǎn)及農(nóng)藝性狀不穩(wěn)定,不利于工廠化生產(chǎn)管理,難以保證靈芝的商品特征,給生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)銷售帶來不確定性。
廣西是桉樹主產(chǎn)區(qū),每年產(chǎn)生大量的桉樹加工副產(chǎn)物(桉木屑和桉樹皮),其中大部分被隨意堆放或被丟棄,其滲出物常會對土壤和水體造成嚴(yán)重污染[8]。近年來的研究表明,桉木屑栽培靈芝[9],能夠促進(jìn)靈芝菌絲生長,污染率低。為此,筆者以桉樹加工剩余物為主料,對比堆料發(fā)酵不同時(shí)間栽培靈芝的效果?,F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。
(1)供試靈芝菌株:美國大靈芝,由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所食用菌育種研究室提供。(2)原料:試驗(yàn)栽培原料包括桉木屑、桉樹皮、棉籽殼、麩皮、過磷酸鈣、石膏、升溫發(fā)酵劑(淮安大華生物科技有限公司)。桉樹樹種為尾葉桉,桉木屑來自木材加工廠;棉籽殼來自新疆;桑枝屑為廣西地產(chǎn)。所有試驗(yàn)原料均新鮮、干燥、無霉變、未生蟲。(3)栽培料配方:桉木屑55%,桉樹皮25%,麩皮16%,石膏粉1%,過磷酸鈣1%,石灰粉2%。
1.2.1 原料前處理
桉木屑過篩(孔徑4 mm)去除雜質(zhì),曬干備用;新鮮桉樹皮加工粉碎成5~12 mm長段,曬干,備用。
1.2.2 拌料、堆料發(fā)酵
按配方稱取除麩皮以外的其他原料,干拌均勻,再加水調(diào)含水量為60%,同時(shí)用石灰調(diào)節(jié)上述物料的pH 至8.0~9.0(滅菌后pH 降至6.0~7.0),調(diào)好水分和pH 后將物料堆成高為1.2 m、寬為1 m 的料堆,料堆長度依堆料量而定,在料堆中間每隔0.8 m,用直徑為5 cm 的木棍從上向下打一透氣孔,每隔4 d 翻堆一次。發(fā)酵時(shí)間設(shè)0 d、4 d、8 d、12 d、16 d,共5個(gè)處理。
1.2.3 發(fā)酵料裝袋
按比例將麩皮加入發(fā)酵物料中,并攪拌均勻,然后將上述物料的含水量重新調(diào)至60%,pH 調(diào)至7.0,然后選用厚0.04 mm、長×寬為170 mm×330 mm、單頭開口的聚丙(乙)烯袋裝料。
1.2.4 滅菌
若采用聚乙烯袋裝料,采取常壓滅菌:6 h 內(nèi)將溫度上升至98 ℃左右,并保持恒溫12 h 后?;?,待滅菌鍋內(nèi)溫度降至60 ℃時(shí)出鍋;若采用聚丙烯袋裝料,則采取高壓滅菌:0.14 MPa、溫度為120 ℃的條件下蒸汽滅菌2 h,滅菌結(jié)束待壓力降至0 時(shí)即可出鍋。
1.2.5 接種
將滅菌后的料袋移至接種室,待料溫降至35 ℃時(shí),按無菌操作規(guī)程接種,每個(gè)料袋的用種量為20 g。接種后料袋的接種口先套上已消毒的塑料套環(huán),再用已滅菌的二層報(bào)紙固定。接種后將料袋移至培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)菌絲。試驗(yàn)每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30袋。
1.2.6 發(fā)菌與出芝管理
發(fā)菌、出芝管理同常規(guī)。
試驗(yàn)對比分析各處理對靈芝菌絲生長速度、發(fā)菌情況、出菇時(shí)間、成品率、第1 潮菇生物學(xué)效率和料堆溫度變化等影響。
菌絲生長速度(cm/d)=菌絲直線生長長度(cm)/菌絲生長天數(shù)(d);
出芝時(shí)間指從開始接種至原基出現(xiàn)的天數(shù)(d);
栽培袋成品率(%)=成品袋數(shù)(個(gè))/接種袋數(shù)(個(gè))×100;
生物學(xué)效率(%)=鮮芝重(kg)/培養(yǎng)料干重(kg)×100。
由表1 可知,靈芝菌絲平均生長速度排序?yàn)榕囵B(yǎng)料發(fā)酵4 d<8 d<12 d<0 d<16 d,其中培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為4 d,菌絲平均生長速度最快,其次是培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為8 d,菌絲平均生長速度為5.78 mm/d;菌絲平均生長速度,培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為4 d、8 d時(shí)與培養(yǎng)料不發(fā)酵差異極顯著,培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為12 d、16 d時(shí)與培養(yǎng)料不發(fā)酵差異不顯著。
表1 各處理料靈芝菌絲生長速度比較
由表2 可知,采用不同的發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵培養(yǎng)料栽培靈芝,菌絲的滿袋用時(shí)、出芝時(shí)間、成品率、生物學(xué)效率均不同。培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為4 d,靈芝菌絲滿袋用時(shí)和出芝時(shí)間最短,為31 d,生物學(xué)效率最高,為31.07%,靈芝栽培袋發(fā)菌成品率最高,為96%;其次是培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為8 d,生物學(xué)效率為30.11%,成品率為94%。
表2 各處理料栽培靈芝結(jié)果
由表3可知,培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間為4 d,靈芝子實(shí)體平均質(zhì)量最大,其次是培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間8 d,且子實(shí)體最厚;培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間12 d,靈芝的平均菌蓋最大。
表3 各處理料栽培靈芝子實(shí)體的經(jīng)濟(jì)性狀比較
圖1 桉木屑栽培靈芝試驗(yàn)出芝場景
以往研究表明桉木屑栽培食用菌[10],與雜木屑相比,產(chǎn)量、營養(yǎng)成分方面均沒有顯著差異[11],說明桉木屑是栽培食用菌的良好原料。同時(shí)桉屬植物中含有的萜類物質(zhì)具有良好的抑菌作用[12],可有效抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等微生物生長,這可能是桉木屑栽培靈芝發(fā)菌菌包成品率較高的原因。
試驗(yàn)結(jié)果表明,以桉木屑為主料的培養(yǎng)料發(fā)酵4 d、8 d 后栽培靈芝,其菌絲長速最快、長勢最好,污染率較低,且出芝整齊、生物學(xué)效率較高;培養(yǎng)料發(fā)酵0 d、16 d,靈芝各性狀綜合表現(xiàn)都較差。
培養(yǎng)料添加升溫發(fā)酵劑后堆料發(fā)酵,有效加快有機(jī)物分解速度[13],促進(jìn)有效態(tài)氮、磷、鉀的釋放[14]及高分子有機(jī)物的合成[15],提高發(fā)酵效率,同時(shí)有利于靈芝更好地利用物料中的營養(yǎng)元素,提高生物學(xué)效率,同時(shí)提高靈芝品質(zhì);然而發(fā)酵時(shí)間過長,培養(yǎng)料中有機(jī)物含量反而下降,生長其他微生物的風(fēng)險(xiǎn)增加,料袋污染率升高,因此桉木屑培養(yǎng)料發(fā)酵時(shí)間過長反而不利于靈芝菌絲生長。
廣西作為桉樹主產(chǎn)區(qū),利用桉木屑栽培靈芝不僅解決了近年來食用菌原料價(jià)格上漲、生產(chǎn)成本居高不下的問題。同時(shí)也實(shí)現(xiàn)了桉木屑資源化利用,對提高靈芝生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益,促進(jìn)靈芝產(chǎn)業(yè)和桉樹產(chǎn)業(yè)的共同發(fā)展具有非常重要的意義。