縣級獸醫(yī)實驗室常用實驗儀器設備的使用方法和注意事項

孫 賀，王國巖，崔真愛，莊寶策，費維超

1.永吉縣動物疫病預防控制中心，吉林永吉 132200；2.永吉縣農(nóng)村社會事業(yè)服務中心，吉林永吉 132200；3.永吉縣岔路河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務中心，吉林永吉 132200

縣級獸醫(yī)實驗室在我國動物疫病預防與控制體系中有著重要作用，是我國開展動物疫情監(jiān)控管理的基礎平臺。獸醫(yī)實驗室不但能為動物疫情監(jiān)測提供科學精準的技術(shù)支撐，還能夠為所屬區(qū)域的動物流行病調(diào)查，動物疫病診斷等工作開展提供檢驗檢測支持，讓動物疫病預防控制更有效精準。筆者從事獸醫(yī)實驗室動物疫病檢測檢驗工作，結(jié)合工作中的經(jīng)驗，總結(jié)了獸醫(yī)實驗室常用的設備儀器使用方法及注意事項，為同行提供參考。

1 紫外線消毒燈使用方法及注意事項

紫外線消毒燈的消毒作用來源于兩個方面。一是物理消毒，原理是紫外線燈發(fā)出的紫外線可以使細菌病毒等微生物的脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)破壞或者使其發(fā)生改變，這樣微生物立即失去活性，達到消毒的作用；二是間接化學消毒，原理是185 nm的紫外線能夠使空氣中的氧氣發(fā)生化學反應形成臭氧，臭氧能氧化分解細菌內(nèi)部葡萄屬糖所需的酶，使細菌滅活死亡。形成的臭氧能夠直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細胞器和DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡。紫外線消毒燈使用方便，幾乎對所有的微生物都有消殺作用，是獸醫(yī)實驗室必備的消毒裝置。

安裝了紫外線消毒燈的實驗室，紫外線照射消毒5 min左右就可以將衣服等物品上的細菌和病毒殺死，照射30 min可以將空氣中的細菌殺死。要根據(jù)實驗室的面積及舉架高低合理設置紫外線消毒燈布置和數(shù)量，檢測實驗開始前50 min或?qū)嶒為g隔的等待時間可作為紫外燈照射時間，注意每次照射時間不應小于30 min，并且在人員進入前10 min關(guān)閉，進入實驗室要再次確認紫外線燈是否關(guān)閉，以免對身體和眼睛造成傷害。紫外線消毒燈管要定期清潔以保證消毒效果，不要用手直接觸摸燈管，可以用不易掉毛的毛巾或無紡布噴施酒精之后擦拭。這里需要注意，雖然紫外線消毒方便易操作，但是只能作輔助性滅菌工具，必須按照實驗室消毒規(guī)定定期消毒。

2 高速冷凍離心機使用方法及注意事項

離心機通過轉(zhuǎn)頭高速轉(zhuǎn)動使需要分離的包含不同組分的混合物品發(fā)生分離的一種離心設備。獸醫(yī)實驗室中離心機多用于畜禽血清分離，制備紅細胞溶液，核酸提取等實驗操作中。

離心機要水平放置，檢查離心機每個腳座是否都牢靠放置于操作臺上。在使用離心機分離血清等操作時，要對稱放置待離心樣品，若樣品不能呈中心對稱放置時候，可以利用清水配置一個相似的樣品以滿足配平的要求。在進行核酸提取的實驗過程中要使用高速冷凍離心機，使用前必須要提前開機設定要求溫度，關(guān)閉離心機蓋進行預冷。冷凍離心使用結(jié)束后要把轉(zhuǎn)頭拆下倒放在實驗臺上。可用干燥的無紡布或者廚房用紙擦干離心機腔內(nèi)的冷凝水，建議對于冷凍離心機用后要保持機蓋打開狀態(tài)用以使其內(nèi)部得到干燥，防止生銹腐蝕機器。離心機轉(zhuǎn)頭蓋不能浮放在轉(zhuǎn)頭上，因為一旦錯誤啟動，轉(zhuǎn)頭蓋有可能飛出，使轉(zhuǎn)頭蓋或者離心機內(nèi)腔破損。在離心機運行時如果發(fā)現(xiàn)離心機異常抖動或者發(fā)出其他非正常聲音，不能關(guān)閉按電源（POWER）鍵或者直接拔出插頭，要迅速按停止（STOP）鍵，停止鍵有類似“剎車”的效果，可以使轉(zhuǎn)頭迅速停止。在放置樣品的時候要認真檢查待離心樣品的試管否有破裂、老化或者裂紋的情況，以免高速離心時試管破裂污染離心機。

3 電熱恒溫箱使用方法及注意事項

電熱恒溫箱主要用于細菌、細胞、微生物等物質(zhì)的培養(yǎng)或者實驗室檢測反應板的溫育，是獸醫(yī)實驗室必備儀器之一。恒溫箱多用于獸醫(yī)檢測中的血清學實驗的酶標板的溫育，或者平衡樣品溫度時使用。

在使用恒溫箱時，要有提前預熱的概念，比如要開展豬口蹄疫檢測實驗時，實驗步驟中要求置于37 ℃溫育60 min，若沒有進行預熱，就需要等待溫度提高到要求溫度，導致檢測時間長，或檢測結(jié)果不準確，所以每次需要使用恒溫箱的實驗要記得提前開機預熱。要按取出時間先后順序依次將所要溫育的反應板擺放在擱板上，各反應板擺放位置要均勻，確保每個需要溫育的反應板的溫度一致。

恒溫箱周圍不可放置易燃、易爆物品。每次使用完畢要關(guān)閉電源，待恢復室溫以后，斷開電源，用對金屬無腐蝕性的酒精消毒。待酒精完全揮發(fā)干燥以后關(guān)閉恒溫箱門，恒溫箱應放在干燥的室內(nèi)以免加熱和控制元件潮濕而影響正常使用。

4 高壓蒸汽滅菌器的使用方法及注意事項

高壓蒸汽滅菌器原理同我們生活中使用的高壓鍋類似，通過電能使水加熱，產(chǎn)生水蒸氣，在密閉的空間內(nèi)，壓力提高，水溫提高，最終滅菌器內(nèi)溫度可達到121 ℃，在高溫高壓的作用下能使細菌或者病毒的有機物質(zhì)迅速發(fā)生不可逆的損壞變性，實現(xiàn)滅菌效果。高壓蒸汽滅菌器是保證實驗室無菌操作和實現(xiàn)生物安全的基本設備。獸醫(yī)實驗室中常用于實驗室廢棄物消毒處理，如離心管、移液槍頭等實驗耗材的消毒處理。

利用高壓蒸汽滅菌進行廢棄實驗耗材滅菌時，開啟高壓滅菌器電源后，必須先檢查水位是否在限定范圍內(nèi)，若水位過低應及時補足水量到合適范圍，方可使用。需要滅菌的物品放置不宜過于密集，要確保蒸汽能夠流通。使用該設備滅菌后，不能立即進行排氣泄壓，若違規(guī)泄壓會導致壓力沸點降低，這樣封閉的容器內(nèi)有可能發(fā)生劇烈的沸騰，使密封的離心管或其他密封性容器發(fā)生爆炸。使用后要等待溫度壓力降低以后，觀察儀器設備儀表或者指示燈，明確提示可以打開方可以開蓋。在進行高壓滅菌時，操作員不應離開現(xiàn)場，隨時觀察設備消毒運行情況，發(fā)現(xiàn)異常情況隨時處理。為了確保滅菌效果，操作員可以采購3M等品牌的專用溫度指示膠帶，消毒以后如果膠紙上的指示劑變色，如3M的溫度指示膠帶會出現(xiàn)黑色橫紋，則說明滅菌效果是可靠的。高壓蒸汽滅菌器產(chǎn)生的高溫蒸汽溫度可達121.3 ℃，操作人員一定要嚴格按照使用要求操作，在使用過程中可戴隔熱手套以免燙傷。

5 生物安全柜使用方法和注意事項

生物安全柜是生物實驗室必備的實驗儀器，是獸醫(yī)實驗室開展如非洲豬瘟病毒PCR檢測等涉及核酸提取操作的必備實驗設備，使用生物安全柜能夠有效地保護實驗操作者的生物安全。

生物安全柜過濾裝置是消耗品，一旦出現(xiàn)過濾器壽命終結(jié)的提示，應盡快停止使用，同時檢測機器是否存在其他異常。通知廠家專業(yè)人員對該設備進行過濾器完整性和氣流流速的檢測，若不能滿足要求，則禁止使用并立即通知相關(guān)人員更換空氣過濾器。在生物安全柜的實驗操作應控制動作幅度，特別是需要手臂移出的時候動作一定要慢、要穩(wěn)，以免過快過大的動作擾亂氣流，使病原微生物外溢。實驗所需要的物品盡量放置在正前方，避免經(jīng)常扭動頸部。在安全柜工作區(qū)域中合理擺放物品，減少操作距離。移動物品時使用整個肩膀和胳膊而不要只使用手腕。建議每持續(xù)2 h，休息5～10 min舒展和調(diào)節(jié)肢體，減少疲勞。使用生物安全柜時需做好個人生物安全保護措施，如戴好口罩、面罩等。

在實驗結(jié)束后要清理生物安全柜的臺面，避免造成污垢殘留。對于生物安全柜消毒的常規(guī)方法可以使用75%濃度的酒精，配合不掉屑的紗布清理為最佳。經(jīng)過實驗人員多年經(jīng)驗，不建議使用脫脂棉類的產(chǎn)品擦拭臺面，因為會造成細微棉絮掛在臺面上，長時間易滋生細菌。不建議使用含氯的清潔劑，如新吉爾滅等進行擦拭，含氯的清潔劑長期使用會對不銹鋼臺面造成一定的腐蝕。

如果安全柜發(fā)生報警，且常規(guī)檢查不能解決，那么就要聯(lián)系專業(yè)的維護工程師詢問如何解決，由工程師電話或現(xiàn)場指導，進行設備維護等工作。針對過濾器使用壽命到期，需要專業(yè)的工程師來進行熏蒸消毒后拆除更換，替換下來的過濾器要作為實驗廢物做專門處理，不可當作生活垃圾處理。

6 超純水機使用注意事項

獸醫(yī)實驗室中主要使用超純水機用于制備超純水，用來以配制PBS磷酸緩沖液，洗板機用后清洗管路等作用。

通過超純水取水時，要先放掉20～50 mL的水，為了避免混入空氣，可以讓純水沿容器壁流入，這樣就可以有效避免濺起水花混入空氣。能有效降低空氣帶來的污染；超純水機的最終端濾器后請不要連接軟管，直接取水才能獲得更高純度的超純水。不要使用長期儲存在儲水桶中的超純水，因為在長期儲存過程中，會有雜質(zhì)、微生物污染水質(zhì)，有可能會影響最終的實驗結(jié)果。超純水機中的過濾裝置需要定期更換或清洗，因為濾芯無法自動清洗、排除過濾出的雜質(zhì)，在雜質(zhì)長期積累后就會導致出水純度受到影響。

若是實驗室純水儀出現(xiàn)問題，或者濾芯需要更換而未能及時更換的間期，此時實驗室若需使用純水，最簡單的方式就是購買市面上的“娃哈哈”純凈水，該純凈水完全滿足獸醫(yī)實驗室所需要純凈水的標準要求。筆者多次使用“娃哈哈”純凈水配制PBS緩沖液，未見對實驗結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響。

縣級獸醫(yī)實驗室擔負著我國基層動物疫病檢驗化驗等動物疫情防控任務，正確科學地使用獸醫(yī)實驗室的設備是影響檢驗結(jié)果的重要因素?；鶎荧F醫(yī)實驗室檢驗化驗人員要不斷學習和總結(jié)實驗設備儀器的使用方法和注意事項，進而提高獸醫(yī)實驗室檢測能力，提高檢測結(jié)果準確率，為我國的縣鄉(xiāng)動物防疫工作的開展提供精確的實驗數(shù)據(jù)支撐。