miRNA在垂體腺瘤中作用機(jī)制的研究進(jìn)展△

孫程圓，邵將，劉超，吳文松，鄭克彬，史彥芳

河北大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 保定 071000

垂體腺瘤在臨床中比較常見，其發(fā)生于顱內(nèi)，在病理上一般呈良性，占所有顱內(nèi)腫瘤的10%～15%[1]。在垂體腺瘤的所有分型中，有一部分呈侵襲性生長，容易壓迫周圍神經(jīng)、硬腦膜、頸動(dòng)脈等，造成30%的患者發(fā)生腦卒中，通過手術(shù)難以完全切除垂體腺瘤，容易造成疾病再次發(fā)生，這也是臨床中治療垂體腺瘤的一大難題，同時(shí)垂體腺瘤的發(fā)病機(jī)制相對(duì)復(fù)雜，目前對(duì)其了解還不夠全面。微小 RNA（microRNA，miRNA）是一種非編碼小RNA，其可通過識(shí)別靶基因的mRNA發(fā)揮作用。miRNA的表達(dá)會(huì)隨著時(shí)間和空間的不同而不同。miRNA與許多疾病相關(guān)因子有關(guān)，例如腫瘤黏附因子、腫瘤血管生成因子等。相關(guān)文獻(xiàn)表明，miRNA與垂體腺瘤細(xì)胞的增殖、分化、凋亡有關(guān)，在垂體腺瘤尤其是侵襲性垂體腺瘤（invasive pituitary adenomas，IPA）中發(fā)揮重要作用[2-5]。

1993年，Lee最先發(fā)現(xiàn)miRNA在腫瘤中的重要意義，而后越來越多的文獻(xiàn)證明miRNA與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，甚至可作為一些腫瘤的標(biāo)志物，對(duì)腫瘤的診斷和治療具有重要意義[3]。有研究者將催乳素（prolactin，PRL）型垂體腺瘤患者和健康者的外周血miRNA水平進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)PRL型垂體腺瘤中存在特征性的miRNA，且其可能與PRL型垂體腺瘤的發(fā)病有關(guān)[4]。特征性的miRNA不僅對(duì)于疾病的診斷具有重要意義，還可作為藥物治療靶點(diǎn)。本文對(duì)miRNA在垂體腺瘤中作用機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在更加深入地了解垂體腺瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，從而為其臨床治療提供新思路。

1 垂體腺瘤的分型

垂體腺瘤起源于垂體前后葉及顱咽管上皮殘余細(xì)胞，依據(jù)是否分泌激素可分為功能性和非功能性。相對(duì)而言，非功能性垂體腺瘤（non-functional pituitary adenomas，NFPA）的比例較低，僅占25%～35%[6]。

1.1 功能性垂體腺瘤

由于分泌的激素不同，功能性垂體腺瘤可分為PRL型、生長激素（growth hormone，GH）型、促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）型和促腎上腺皮質(zhì)激素（adrenocorticotropic hormone，ACTH）型等。其中，PRL型占32%～66%，GH型占8%～16%，ACTH型占2%～6%，TSH型占1%[5]。

1.1.1 PRL型垂體腺瘤PRL型垂體腺瘤是垂體腺瘤中最常見的類型，其主要發(fā)生于女性患者中，腫瘤生長相對(duì)緩慢?；颊叱１憩F(xiàn)為不孕、閉經(jīng)以及溢乳等癥狀。男性PRL型垂體腺瘤中約80%為大腺瘤，以占位效應(yīng)為主，可能會(huì)出現(xiàn)頭暈、頭痛、惡心嘔吐等表現(xiàn)，甚至?xí)蛄鲶w過大而壓迫視神經(jīng)造成偏盲表現(xiàn)[6]。

目前PRL型垂體腺瘤的主要治療方式是手術(shù)、放療及藥物治療，然而手術(shù)和放療并不能將腫瘤完全切除，很容易引起腫瘤復(fù)發(fā)，同時(shí)還會(huì)損傷正常組織，造成垂體無法正常分泌激素。臨床上治療PRL型垂體腺瘤的主要藥物是溴隱亭，患者常常需要終身服用，而長期服用溴隱亭會(huì)產(chǎn)生耐藥性，這也是藥物治療無法完全治愈腫瘤的重要因素[2-3]。

1.1.2 GH型垂體腺瘤GH型垂體腺瘤占全部垂體腺瘤的9%～11%，在臨床上常表現(xiàn)為肢端肥大癥或巨人癥，同時(shí)可因腫瘤組織的占位效應(yīng)而對(duì)周圍的重要結(jié)構(gòu)造成壓迫[7-8]。此外，GH過度分泌可導(dǎo)致代謝紊亂，進(jìn)而引起糖尿病、高血壓、心肌肥厚、睡眠呼吸暫停綜合征等一系列并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[9-10]。目前，手術(shù)是GH型垂體腺瘤的首選治療方式，但治療效果仍不令人滿意[8-9]。對(duì)于手術(shù)無法臨床治愈的患者，藥物治療如奧曲肽及蘭瑞肽等生長抑素類似物可作為首選治療方案[11-12]。

1.1.3 TSH型垂體腺瘤 由于TSH型垂體腺瘤的治療與原發(fā)性甲亢截然不同，采用原發(fā)性甲亢的常用治療方法，可能會(huì)導(dǎo)致延誤診治，增加腫瘤組織纖維化及侵襲性生長的可能[13]，因此臨床更強(qiáng)調(diào)診斷的準(zhǔn)確性。目前TSH型垂體腺瘤的治療以外科手術(shù)為一線治療方法，而關(guān)于其藥物治療，臨床研究數(shù)據(jù)已證實(shí)了生長抑素類似物的有效性[14-15]。生長抑素類似物的治療效果相對(duì)較好，但藥物價(jià)格昂貴，對(duì)于經(jīng)濟(jì)條件差或不能耐受其不良反應(yīng)的患者可選擇抗甲狀腺藥物（antithyroid drug，ATD）、多巴胺受體激動(dòng)劑等治療。

1.1.4 ACTH型垂體腺瘤ACTH型垂體腺瘤中約有50%為微腺瘤，只有10%會(huì)出現(xiàn)占位效應(yīng)。ACTH型垂體腺瘤一般女性患者較多。ACTH型垂體腺瘤主要表現(xiàn)為向心性肥胖、滿月臉、水牛背等[16-17]。垂體ACTH分泌過多可導(dǎo)致庫欣綜合征，研究表明，庫欣綜合征患者基本上都有焦慮、抑郁情緒[18]。ACTH型垂體腺瘤主要有3種治療方法：藥物治療、手術(shù)和放療。目前外科手術(shù)是功能性垂體腺瘤的首選治療方式，大多數(shù)病理類型的垂體腺瘤首選手術(shù)治療，而多巴胺受體激動(dòng)劑敏感的PRL型垂體腺瘤患者則可采用藥物治療[19]。

1.2 NFPA

NFPA是垂體腺瘤中的一種，約占全部垂體腺瘤的25%[20]。近年來，垂體意外瘤的檢出率逐年增高[21]。美國內(nèi)分泌協(xié)會(huì)垂體意外瘤臨床實(shí)踐指南提示，垂體意外瘤是指常在進(jìn)行與垂體無關(guān)的影像學(xué)檢查中發(fā)現(xiàn)的垂體病變，NFPA與其類似，其缺乏血清激素明確指標(biāo)及代表性癥狀和體征，一旦查出，已是較大的侵襲性瘤體，因其缺乏癥狀，因此容易漏診[22]。由于NFPA在發(fā)展初期缺乏臨床癥狀，直至生長為大腺瘤時(shí)才被發(fā)現(xiàn)，此時(shí)NFPA多數(shù)已侵犯周圍組織，呈侵襲性生長，手術(shù)難以完全切除且極易復(fù)發(fā)[23]。因此，放療可對(duì)手術(shù)起到重要的補(bǔ)充作用，但并不是所有的患者都適合放療，非必要的放療易引起患者垂體功能低下和視神經(jīng)損傷等，造成二次損傷[24]。因此，需要篩選關(guān)鍵基因作為分子標(biāo)志物來預(yù)測(cè)垂體腺瘤對(duì)放射線的抵抗及敏感性。

2 miRNA與垂體腺瘤

2.1 miRNA對(duì)腫瘤的作用

近年來越來越多的文獻(xiàn)表明miRNA異常表達(dá)可能會(huì)引起腫瘤的發(fā)生。研究表明，miRNA-125b可能通過調(diào)節(jié)AT豐富結(jié)構(gòu)域3B（AT-rich interaction domain 3B，ARID3B）基因的表達(dá)參與乳腺癌的發(fā)生[25]。另有文獻(xiàn)報(bào)道，miRNA-622可能通過RAS信號(hào)通路調(diào)控肺癌的發(fā)生[26]。miRNA-378與胃癌的發(fā)生有關(guān)，其可作為早期胃癌的診斷標(biāo)志物[27]。Zhou 等[28]研究表明，提高miRNA-141-3p 的表達(dá)對(duì)膠質(zhì)瘤的治療具有重要意義，其可能是通過影響替莫唑胺的療效從而影響p53信號(hào)通路來發(fā)揮作用。Maiter和Delgrange[29]的研究則提出，miRNA-146b-5p在生物體內(nèi)可能有抑癌基因的作用，其表達(dá)升高有利于增強(qiáng)替莫唑胺對(duì)U87/TR、U251/TR細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲的作用。Wang等[30]研究表明，miRNA-625表達(dá)升高有助于提高替莫唑胺對(duì)膠質(zhì)瘤的治療效果，其研究還發(fā)現(xiàn)，miRNA-505在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中可能具有抑癌基因的作用，其可通過調(diào)控WNT/β-聯(lián)蛋白（βcatenin）信號(hào)通路影響替莫唑胺的療效。上述研究提示，miRNA在腫瘤的發(fā)生中具有重要作用，其可能會(huì)通過影響替莫唑胺等化療藥物的療效影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤患者的預(yù)后，因此推測(cè)miRNA也許可以通過影響替莫唑胺等化療藥物的療效來治療IPA，但目前相關(guān)報(bào)道甚少，需要更深入地進(jìn)行探討。

2.2 IPA與miRNA的相關(guān)性

Wang等[30]研究表明，磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）、蛋白激酶 B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）通路對(duì)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial mesenchymal transformation，EMT）具有調(diào)控作用。Zhou等[31]研究發(fā)現(xiàn)，PI3K和AKT在IPA中的表達(dá)水平明顯升高，同時(shí)磷酸酶及張力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）表達(dá)水平會(huì)隨之降低。Zheng等[32]研究表明，EMT可通過影響上皮細(xì)胞黏附和細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。He等[33]通過相關(guān)技術(shù)發(fā)現(xiàn)了一系列與IPA相關(guān)的miRNA，如miRNA-34a、miRNA24及miRNA-126等。Yu等[34]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-133可通過調(diào)控EMT影響叉頭框C1（forkhead box C1，F(xiàn)OXC1）基因表達(dá)，從而減緩垂體腺瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲。Cui等[35]研究通過聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）發(fā)現(xiàn)，miRNA-106b在IPA中可能作為原癌基因，其在IPA中的表達(dá)水平高于非侵襲性腫瘤。Zheng等[32]通過瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miRNA-106b可通過影響PTEN的表達(dá)對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路造成一定影響，從而促進(jìn)侵襲性腫瘤的發(fā)生。通過上述兩個(gè)實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，miRNA-106b對(duì)于IPA的發(fā)生起到非常重要的作用。He等[33]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-148-3p和miRNA-152在IPA中可起到抑癌基因的作用，其可通過降低白細(xì)胞分化抗原促進(jìn)垂體腺瘤細(xì)胞凋亡，抑制垂體腺瘤向惡性方向發(fā)展。Yu等[34]研究應(yīng)用PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，IPA中miRNA-24、miRNA-93的表達(dá)水平均低于非侵襲性垂體腺瘤。Cui等[35]研究表明，miRNA-21在垂體腺瘤中可起到抑癌基因的作用，其可作用于配對(duì)樣同源域2（paired like homeodomain 2，PITX2）基因的3'-非翻譯區(qū)（3'-untranslated region，3'-UTR）序列，從而抑制細(xì)胞增殖?？v觀一系列相關(guān)研究，許多miRNA已被證實(shí)與IPA的發(fā)病機(jī)制相關(guān)。

IPA是神經(jīng)外科醫(yī)師面臨的巨大挑戰(zhàn)。許多研究探討了miRNA在垂體腺瘤發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用，但很少有研究探討侵襲性相關(guān)miRNA在IPA中的作用。有研究者應(yīng)用GEO數(shù)據(jù)庫下載的GSE46294 miRNA表達(dá)譜篩選侵襲性和非侵襲性PRL型垂體腺瘤之間差異表達(dá)的miRNA（differentially expressed miRNA，DEM），應(yīng)用miRTarBase預(yù)測(cè)了前3位高表達(dá)和低表達(dá)DEM的潛在靶基因，并應(yīng)用DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行了潛在功能注釋和通路富集分析，應(yīng)用Cytoscape軟件構(gòu)建了蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）和miRNA-樞紐基因相互作用網(wǎng)絡(luò)。在侵襲性和非侵襲性PRL型垂體腺瘤之間共鑒定出43個(gè)DEM，其中19個(gè)上調(diào)和24個(gè)下調(diào)的miRNA。對(duì)上調(diào)和下調(diào)程度最高的前3位miRNA分別預(yù)測(cè)了170個(gè)和680個(gè)靶基因，這些基因參與了功能富集途徑，如RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA模板轉(zhuǎn)錄、WNT信號(hào)通路、蛋白質(zhì)結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性（序列特異性DNA結(jié)合）等。在PPI網(wǎng)絡(luò)中，選取上調(diào)和下調(diào)DEM連通性最高的前10個(gè)基因作為樞紐基因。通過構(gòu)建miRNA-樞紐基因網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)大多數(shù)樞紐基因受hsa-miRNA-489和hsa-miRNA-520b的潛在調(diào)控。靶向hsa-miRNA-489和hsa-miRNA-520b可能為侵襲性PRL型垂體腺瘤的診斷和治療提供新的思路[36]。

2.3 miRNA與垂體腺瘤基因表達(dá)的關(guān)系

關(guān)于垂體腺瘤與miRNA表達(dá)的研究近幾年才開始，相關(guān)研究還相對(duì)較少，這些研究提示miRNA表達(dá)異常將會(huì)影響垂體腺瘤的發(fā)生發(fā)展。連小蘭等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在NFPA中，一些miRNA（如miRNA-135a、miRNA-140-5p、miRNA-582-3p和 miRNA-938）可以通過調(diào)控轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）信號(hào)通路調(diào)節(jié)相關(guān)靶基因SMAD、MEG及DLK1等的表達(dá)，從而參與腫瘤的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，與ACTH型垂體腺瘤相關(guān)的miRNA（如let-7a、miRNA-15a、miRNA-16、miRNA-21、miRNA-141、miRNA-150等）可影響腫瘤細(xì)胞的增殖，其水平改變很可能會(huì)導(dǎo)致腫瘤的再次發(fā)生[16]。以上的研究對(duì)象是通過手術(shù)切除的腫瘤組織，并未對(duì)外周血中miRNA表達(dá)與垂體腺瘤的關(guān)系進(jìn)行探討。另外，目前臨床上最常見的PRL型垂體腺瘤與miRNA的關(guān)系還未有相關(guān)文獻(xiàn)支持。有研究認(rèn)為，miRNA對(duì)PRL型垂體腺瘤的發(fā)生發(fā)展有著重要意義，通過檢測(cè)PRL型垂體腺瘤患者的外周血發(fā)現(xiàn)了一些miRNA表達(dá)的改變，其中8個(gè)miRNA表達(dá)水平升高，13個(gè)miRNA表達(dá)水平降低[17]。同時(shí)，為了更全面地了解試驗(yàn)結(jié)果及樣品分類，還應(yīng)用雙向聚類分析法分析了樣本量較小的標(biāo)本，但因樣本量不足造成結(jié)果的可靠性存在爭議，需要進(jìn)一步核驗(yàn)。但是這些結(jié)果已表明，通過檢測(cè)外周血miRNA診斷PRL型垂體腺瘤是可操作的。

2.3.1 let- 7與高遷移率族蛋白 A 2（high mobility group A 2，HMGA 2） 在IPA中l(wèi)et-7呈低表達(dá)，HMGA2呈高表達(dá)[26]。HMGA2是一種非組蛋白染色體蛋白，自身難以轉(zhuǎn)錄，一般情況下表達(dá)水平非常低或者不表達(dá)，但在早期胚胎階段或惡性腫瘤組織中高表達(dá)。HMGA2可影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，從而使其他基因無法進(jìn)行正常轉(zhuǎn)錄，HMGA2可通過提高E2F轉(zhuǎn)錄因子1（E2F transcription factor 1，E2F1）的表達(dá)活性促進(jìn)垂體腺瘤細(xì)胞增殖[27]，HMGA2也可以上調(diào)垂體轉(zhuǎn)錄因子1（pituitary transcript factor 1，PIT1）的表達(dá)誘導(dǎo)垂體腺瘤的發(fā)生[28]。HMGA2表達(dá)水平升高可能預(yù)示著腫瘤增大，腫瘤惡性程度更高，侵犯的組織更多，Ki-67增殖指數(shù)也會(huì)明顯升高，表明HMGA是引發(fā)垂體腺瘤的重要分子。也有研究表明，HMGA2基因與腫瘤的發(fā)生具有一定關(guān)系[29]。

2.3.2 miRNA-493與半乳凝素 3（galectin 3，Gal- 3）在ACTH型垂體腺瘤中，miRNA-493表達(dá)水平降低而Gal-3表達(dá)水平升高。有文獻(xiàn)表明，miRNA-493在垂體腺瘤中的表達(dá)受Gal-3和RUNX家族轉(zhuǎn)錄因 子2（RUNX family transcription factor2，RUNX2）調(diào)控，而Gal-3是β蛋白半乳糖苷凝集素家族一員，在多種組織細(xì)胞中存在，與腫瘤的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，其可影響腫瘤細(xì)胞的黏附和遷移[30]。Zheng等[32]研究顯示，人類垂體腺瘤中Gal-3受RUNX1和RUNX2調(diào)節(jié)，RUNX1和RUNX2可與Gal-3啟動(dòng)基因的不同位點(diǎn)直接結(jié)合，從而影響垂體腺瘤的生成。該研究以HP75細(xì)胞系作為模型進(jìn)行研究，采用干擾小RNA（small interfering RNA，siRNA）抑制RUNX1或RUNX2的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Gal-3的表達(dá)水平也會(huì)隨之下調(diào)，而HP75細(xì)胞系的增殖速度則會(huì)減慢，另外免疫組化研究也證實(shí)RUNX1和RUNX2的表達(dá)會(huì)影響垂體腺瘤中Gal-3的表達(dá)。表明Gal-3具有抑制垂體腺瘤細(xì)胞凋亡的作用，對(duì)于一些腫瘤細(xì)胞的生存具有重要意義，這也提示Gal-3可能參與IPA的發(fā)生。

2.3.3 miRNA-26 a與蛋白激酶 C δ（protein kinase C,delta，PRCKD）和多形性腺瘤基因 1（pleiomorphic adenoma gene 1，PLAG 1） 有 研 究 者 以ACTH型垂體腺瘤細(xì)胞系A(chǔ)tT20作為模型進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)miRNA-26a表達(dá)上調(diào)，并且miRNA-26a可通過調(diào)控PRCKD基因降低細(xì)胞周期蛋白E1（cyclin E1，CCNE1）的表達(dá)，抑制miRNA-26a的表達(dá)可使G1期延長，促進(jìn)ACTH型垂體腺瘤形成[7]。PRCKD是蘇氨酸或絲氨酸激活劑，在細(xì)胞發(fā)育的各個(gè)階段均具有重要作用[31-32]。Yu等[34]研究發(fā)現(xiàn)，在IPA中miRNA-26a表達(dá)水平明顯升高，PLAG1表達(dá)水平卻會(huì)隨之降低；miRNA-26a可能通過調(diào)控PLAG1的表達(dá)影響垂體腺瘤的生成，但目前相關(guān)機(jī)制尚未十分清楚，需要進(jìn)一步深入探討。

2.3.4 miRNA-133與FOXC 1miRNA-133在垂體腺瘤中可作為抑癌基因，其主要的作用機(jī)制可能是通過與FOXC1基因相互作用來抑制腫瘤形成。在IPA中，F(xiàn)OXC1可通過影響EMT對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移造成影響[33]。FOXC1是轉(zhuǎn)錄因子的一員，可通過與基因啟動(dòng)子結(jié)合或與其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用促進(jìn)轉(zhuǎn)錄過程。有研究表明，F(xiàn)OXC1可影響腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期，同時(shí)也會(huì)影響腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[33]。上述文獻(xiàn)報(bào)道為IPA提供了一條新的治療思路。

2.3.5 miRNA-145與AKT 3在IPA中，miRNA-145發(fā)揮抑制腫瘤發(fā)展的作用，這可能是通過調(diào)控雷帕霉素靶蛋白（mechanistic target of rapamycin kinase，MTOR）通路實(shí)現(xiàn)的。有文獻(xiàn)報(bào)道，在IPA組織中，miRNA-145表達(dá)水平顯著降低，而PI3K、AKT3、MTORmRNA表達(dá)水平卻會(huì)隨之升高，同時(shí)miRNA-145表達(dá)水平越高，IPA細(xì)胞的侵襲性就越強(qiáng)，越不容易發(fā)生細(xì)胞凋亡[34]。

2.3.6 miRNA-132、miRNA-15 a及miRNA-16與性別決定區(qū) Y框轉(zhuǎn)錄因子 5（SRY-box transcription factor 5，SOX 5） 在IPA組織及細(xì)胞系中，SOX5表達(dá)水平會(huì)隨著miRNA-132、miRNA-15a及miRNA-16表達(dá)水平的降低而升高，miRNA-132、miRNA-15a及miRNA-16對(duì)垂體腺瘤細(xì)胞的抑制可能是通過影響SOX5的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的，同時(shí)這條通路可能還會(huì)受miRNA-132甲基化作用及EMT的影響。以大鼠垂體腺瘤細(xì)胞為模型，加入甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑后，miRNA-132表達(dá)水平會(huì)增加，這表明miRNA-132甲基化對(duì)于IPA的發(fā)生有一定影響[35]。

2.3.7 miRNA-183與增殖細(xì)胞核抗原結(jié)合因子（proliferating cell nuclear antigen-clamp associated factor，PCLAF，也稱KIAA0101） 在PRL型垂體腺瘤中，miRNA-183可發(fā)揮抗腫瘤作用，其機(jī)制可能是調(diào)節(jié)靶基因KIAA0101。研究表明，miRNA-183、KIAA0101的表達(dá)與垂體腺瘤侵襲性腫瘤標(biāo)志物Ki-67、p53具有同步性，提示miRNA-183與KIAA0101對(duì)IPA的發(fā)生具有重要意義[36]。

2.3.8 miRNA-106 b與PTEN在IPA中，miRNA-106b表達(dá)水平明顯升高，其可通過負(fù)調(diào)控PTEN的表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲，同時(shí)miRNA-106b還會(huì)影響PI3K/AKT信號(hào)通路。有研究者以小鼠垂體腺瘤細(xì)胞為模型進(jìn)行探討，發(fā)現(xiàn)抑制miRNA-106b的表達(dá)或促進(jìn)PTEN的表達(dá)均可以抑制垂體腺瘤細(xì)胞的增殖和侵襲[37]。上述研究提示，miRNA-106b與PTEN在IPA中具有重要作用，可作為治療IPA的新靶點(diǎn)。

2.3.9 miRNA-106b-25與微小染色體維持缺陷蛋白 7（minichromosomemaintenancecomplex component 7，MCM 7） 在侵襲性ACTH型垂體腺瘤中，miRNA-106b-25的表達(dá)水平會(huì)升高，進(jìn)而影響其靶基因MCM7的表達(dá)。MCM7是微小染色體維持蛋白家族成員之一，在真核生物細(xì)胞內(nèi)具有非常重要的作用，其可影響DNA復(fù)制過程，從而參與細(xì)胞周期調(diào)控，同時(shí)MCM7也被作為預(yù)測(cè)腫瘤增殖的標(biāo)志。研究表明，MCM7可以與Ki-67增殖指數(shù)一同增長，miRNA-106b-25與MCM7在侵襲性ACTH型垂體腺瘤中具有重要作用，可作為診斷ACTH型垂體腺瘤的標(biāo)志物，但目前還缺少更多的臨床數(shù)據(jù)支持[38]。

3 長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）與垂體腺瘤

lncRNA是一類長度超過200個(gè)核苷酸的非編碼RNA，根據(jù)其在DNA上的位置可分為正義lncRNA、反義lncRNA、雙向lncRNA、內(nèi)含子lncRNA和基因間lncRNA。與不同物種中高度保守的miRNA不同，lncRNA通常保守程度較低，且以高度組織特異性的方式低水平表達(dá)，其表達(dá)譜常?？梢宰鳛榧膊』虬l(fā)育狀態(tài)的重要標(biāo)志。lncRNA可以通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、miRNA分子海綿和染色質(zhì)修飾等不同的分子機(jī)制調(diào)節(jié)生物過程。越來越多的研究表明，lncRNA在垂體腺瘤的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，并參與調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、自噬和轉(zhuǎn)移。一直以來，lncRNA H19被認(rèn)為是多種腫瘤的癌基因。Wu等[39]研究表明，血漿外泌體lncRNA H19在人類原發(fā)性垂體腺瘤中表達(dá)下調(diào)，并通過抑制真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1（Eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1，4E-BP1）的磷酸化抑制腫瘤生長。另有研究報(bào)道，lncRNA H19可以作為競爭性內(nèi)源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）抑制腫瘤細(xì)胞中miRNA-93a的表達(dá)，使自噬相關(guān)基因7（autophagy related gene 7，ATG7）表達(dá)水平升高，從而上調(diào)泌乳素瘤對(duì)于多巴胺激動(dòng)劑的敏感性[40]。因此，血漿外泌體H19可作為泌乳素瘤藥物反應(yīng)的生物標(biāo)志物。另外，這種含有大量miRNA結(jié)合位點(diǎn)的非編碼RNA與miRNA結(jié)合后通過抑制作用間接調(diào)控miRNA下游靶基因表達(dá)的作用稱為RNA分子海綿作用。Cheng等[41]通過Kaplan-Meier分析、隨機(jī)生存森林分析和受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析，鑒定出1個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因[碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶12（carbohydrate sulfotransferase 12，CHST12）]和 2 個(gè) lncRNA[COA6 反 義 RNA1（COA6 antisense RNA 1，COA6-AS1）和RP11-23N2.4]與NFPA的腫瘤再生長顯著相關(guān)。該研究表明，蛋白質(zhì)編碼基因和lncRNA聯(lián)合檢測(cè)可能有助于預(yù)測(cè)NFPA患者的預(yù)后。體內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA小核仁RNA宿主基因（small nucleolar RNA host gene，SNHG）7在垂體腺瘤中表達(dá)異常上調(diào)與不良預(yù)后有關(guān)，lncRNA SNHG7基因敲除可以降低腫瘤細(xì)胞存活率，抑制腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲[42]。另外，lncRNA SNHG6/miRNA-994/RAB11A信號(hào)通路在調(diào)節(jié)IPA細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和EMT等過程中起到重要作用[43]。lncRNA SNHG6和miRNA-994可作為治療IPA的新靶點(diǎn)。IPA中l(wèi)ncRNA X非活性特異性轉(zhuǎn)錄本（X inactive specific transcript，XIST）競爭性結(jié)合miRNA-424-5p可上調(diào)堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）的表達(dá)。lncRNA XIST或bFGF缺乏和miRNA-424-5p上調(diào)均可抑制IPA細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)細(xì)胞周期停滯和凋亡[44]。大鼠垂體腺瘤細(xì)胞系GH3和MMQ中過表達(dá)lncRNA尿路上皮癌相關(guān)基因1（urothelial cancer associated 1，UCA1）可顯著促進(jìn)葡萄糖攝取和乳酸生成，而沉默lncRNA UCA1可以明顯抑制腫瘤細(xì)胞的生長[45]。lncRNA Pvt1原癌基因（Pvt1 oncogene，PVT1）可通過激活β-catenin、c-Myc和細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表達(dá)促進(jìn)垂體腺瘤細(xì)胞的增殖、遷移和EMT[46]。PVT1基因敲除可以抑制垂體腺瘤細(xì)胞遷移和腫瘤進(jìn)展。以上研究結(jié)果表明，lncRNA可參與垂體腺瘤的發(fā)生發(fā)展，通過干預(yù)lncRNA改善預(yù)后具有可行性。

4 miRNA對(duì)垂體腺瘤的診斷和預(yù)后評(píng)估價(jià)值

miRNA異常表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，尤其是血液中miRNA的作用受到極大關(guān)注，這對(duì)于垂體腺瘤的診斷和預(yù)后評(píng)估具有重要意義。目前的研究主要是針對(duì)腫瘤中miRNA表達(dá)特征的分析，但是其在體液與組織中的特異性和一致性亟待進(jìn)一步探索。miRNA表達(dá)水平在腫瘤大小、侵襲程度不同的垂體腺瘤組織中呈現(xiàn)明顯的臨床異質(zhì)性。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)miRNA-140的表達(dá)在兩種類型垂體腺瘤微腺瘤與大腺瘤中顯著不同，提示其可作為一種潛在的診斷標(biāo)志物。此外還發(fā)現(xiàn)，miRNA-405b、miRNA-214、miRNA-503等表達(dá)水平與NFPA大小具有相關(guān)性[47]。研究發(fā)現(xiàn)，血清中miRNA表達(dá)水平與腫瘤大小、臨床分期及患者生存時(shí)間有關(guān)[48]。

5 小結(jié)與展望

隨著對(duì)miRNA的深入研究，不斷有新的miRNA被發(fā)現(xiàn)與一些腫瘤疾病存在關(guān)聯(lián)，如何通過干擾這些miRNA的作用來治療疾病成為目前需要探討的問題。目前醫(yī)學(xué)上干擾miRNA作用的方式主要有兩種，第一種是針對(duì)在疾病中表達(dá)相對(duì)較低的miRNA，可通過補(bǔ)充類似的miRNA發(fā)揮治療作用；第二種方式是針對(duì)于在疾病中表達(dá)相對(duì)較高的miRNA，可利用反義寡核苷酸的方式，或者通過導(dǎo)入外源性miRNA與靶RNA競爭性結(jié)合，導(dǎo)致促進(jìn)疾病發(fā)生發(fā)展的miRNA無法發(fā)揮相應(yīng)作用。目前對(duì)于這兩種干擾miRNA作用的方式并不成熟，很多還處于初期階段，還無法在臨床上使用。

與溴隱亭敏感性PRL型垂體腺瘤相比，溴隱亭抵抗性PRL型垂體腺瘤中出現(xiàn)了41個(gè)差異表達(dá)的miRNA，這為垂體腺瘤的治療帶來了新思路，但目前通過miRNA治療IPA的相關(guān)報(bào)道還比較少見。IPA中存在多種miRNA，但目前只探討了一小部分miRNA在IPA中的相關(guān)調(diào)控機(jī)制。IPA的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及多個(gè)基因和蛋白，其中miRNA因具有重要作用而受到廣泛關(guān)注。miRNA的調(diào)控機(jī)制并不簡單，一個(gè)miRNA可能會(huì)對(duì)多個(gè)因子有作用，而一個(gè)因子也可能受多個(gè)miRNA調(diào)控，同時(shí)miRNA不容易進(jìn)行提取，容易被降解或修飾，因此對(duì)miRNA的研究還任重道遠(yuǎn)。通過構(gòu)建miRNA在垂體腺瘤中的相關(guān)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，將有利于臨床中對(duì)于垂體腺瘤的診治，而通過檢測(cè)體液中相關(guān)miRNA診斷垂體腺瘤也成為一個(gè)重要的方式。