兩種定時(shí)人工授精方案對(duì)初產(chǎn)母豬繁殖性能的比較

王燕春

（寧波三生生物科技股份有限公司，浙江 寧波 315012）

1 意義

初產(chǎn)母豬的繁殖性能決定了整個(gè)母豬群的終身生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益。定時(shí)人工授精是批次生產(chǎn)中較為簡(jiǎn)單的繁殖技術(shù)，在批次生產(chǎn)管理中發(fā)現(xiàn)兩種改進(jìn)的定時(shí)人工授精方案可以提高初產(chǎn)母豬的發(fā)情率和產(chǎn)仔率，這一項(xiàng)新的技術(shù)應(yīng)用可能會(huì)提高養(yǎng)豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。

2 背景

近年來(lái)，控制發(fā)情和排卵變得越來(lái)越重要，由于批次流程管理的轉(zhuǎn)變，需要有一群可以隨時(shí)進(jìn)行人工授精的母豬。初產(chǎn)母豬的繁殖性能決定了整個(gè)母豬群的終身生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益 。大多數(shù)母豬在斷奶后4～6 d內(nèi)恢復(fù)發(fā)情，但初產(chǎn)母豬的發(fā)情率較低是一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題。初產(chǎn)母豬推遲發(fā)情可能導(dǎo)致批次生產(chǎn)中斷。有趣的是，定時(shí)人工受精（FTAI）的優(yōu)勢(shì)在于它不需要檢測(cè)發(fā)情，同時(shí)誘導(dǎo)母豬同步發(fā)情后的FTAI可作為提高產(chǎn)仔率的重要手段。

但在生產(chǎn)豬場(chǎng)中，母豬在FTAI后排卵的同步性較差，而且經(jīng)FTAI后初產(chǎn)母豬產(chǎn)仔率降低。本研究旨在評(píng)價(jià)初產(chǎn)母豬經(jīng)兩種定時(shí)人工授精（TAI）處理后的繁殖性能，一種是在發(fā)情時(shí)使用促性腺激素釋放激素（GnRH），另一種是用馬絨毛膜促性腺激素（eCG）和GnRH提高固定時(shí)間授精母豬的產(chǎn)仔率，從而幫助母豬提高產(chǎn)仔率。

3 材料和方法

這項(xiàng)研究是2019年12月在北京養(yǎng)豬育種中心的一個(gè)大型養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行的（大約2 000頭母豬）。北京市農(nóng)林科學(xué)院動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)批準(zhǔn)了本研究中使用的所有程序。

3.1 試驗(yàn)動(dòng)物以及管理

養(yǎng)豬場(chǎng)遵循4周批次生產(chǎn)管理系統(tǒng)。初產(chǎn)母豬品系為長(zhǎng)白豬×大白母豬（n=332）。用自動(dòng)喂料機(jī)喂母豬，喂養(yǎng)方案為：斷奶至妊娠第30天1.8～2.4 kg/d，第31～90天2.5 kg/d，第91～110天3.0～4.0 kg/d，從妊娠110 d至分娩不超過(guò)2 kg/d。母豬在分娩前7 天被轉(zhuǎn)移到帶有單獨(dú)板條箱和板條地板的產(chǎn)房。將母豬置于光照/黑暗條件下各12 h，并于室溫（20℃）下飼養(yǎng)。整個(gè)試驗(yàn)期間，初產(chǎn)母豬可以自由飲水。

3.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

初產(chǎn)斷奶母豬被隨機(jī)分為3組，每組的產(chǎn)仔數(shù)（7～16頭仔豬）與前一組相同，斷奶時(shí)的身體狀況評(píng)分為5分。在斷奶后的7 d內(nèi)，每天進(jìn)行兩次（8:00和16:00）發(fā)情檢測(cè)，技術(shù)人員采用圍欄接觸法和反壓力測(cè)試法，并觀察當(dāng)公豬經(jīng)過(guò)附近時(shí)雌性豬的“站立反射”。對(duì)照組母豬（n=110）不接受激素治療，在斷奶后的發(fā)情期每天授精。eG-TAI組母豬（n=112）斷奶24 h后接受1 000 IU馬絨毛膜促性腺激素和發(fā)情期接受100 ug促性腺激素釋放激素。如果在8:00測(cè)出發(fā)情，則在發(fā)情8 h和32 h進(jìn)行人工授精；如果在16:00測(cè)出發(fā)情，則在發(fā)情后16 h和40 h進(jìn)行人工授精。2e-TAI組母豬（n=110）分別在斷奶后24 h和96 h接受1 000IU馬絨毛膜促性腺激素和100 ug促性腺激素釋放激素，給促性腺激素釋放激素后16 h和40 h授精，在給促性腺激素釋放激素時(shí)或給藥64 h后出現(xiàn)發(fā)情的母豬再次授精，共授精3次。試驗(yàn)方案見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)照組，2e-TAI組，eG-TAI組在初產(chǎn)母豬上的方案

3.3 卵巢超聲

如前所述，5名經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的技術(shù)人員對(duì)每組50頭母豬進(jìn)行了腹部超聲檢查來(lái)確定5個(gè)最大卵泡的平均大小和排卵時(shí)間。在斷奶后96～168 h，間隔8 h（6:00、14:00和22:00）超聲檢查1次，直到排卵結(jié)束。相比于前一次掃描，當(dāng)2個(gè)卵巢中仍存在少于3個(gè)卵泡或大卵泡的數(shù)量時(shí)，則判定為顯著減少。一旦確定為排卵期，母豬在排卵后8 h后再次進(jìn)行確認(rèn)。

3.4 懷孕、分娩和產(chǎn)仔量

懷孕是通過(guò)檢查受精后是否定期恢復(fù)發(fā)情來(lái)確定的。在授精后28 d到35 d之間進(jìn)行經(jīng)腹部超聲檢查，以確認(rèn)沒(méi)有恢復(fù)發(fā)情的母豬懷孕。記錄所有妊娠母豬的產(chǎn)仔和產(chǎn)仔參數(shù)。

3.5 統(tǒng)計(jì)分析

使用IBM SPSS Statistics for Windows，version20.0 （IBM Corp.， Armonk，NY，USA）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以平均數(shù)±SE表示。試驗(yàn)前，用Wilcoxon檢驗(yàn)評(píng)價(jià)母豬組的同種性，檢驗(yàn)前一次妊娠的以下變量：出生仔豬數(shù)、出生活仔數(shù)和斷奶數(shù)。采用單因素方差分析比較各組卵泡直徑、發(fā)情持續(xù)時(shí)間、排卵時(shí)間、產(chǎn)仔數(shù)和斷奶仔豬。采用費(fèi)歇爾精確試驗(yàn)比較各處理組的發(fā)情率、繁殖母豬率、妊娠率和產(chǎn)仔率。由于這些數(shù)據(jù)不是正態(tài)分布的，因此死產(chǎn)數(shù)據(jù)采用Kruskal-Wallis單因素方差分析，顯著性水平設(shè)為P＜0.05。

4 結(jié)果

4.1 馬絨毛膜促性腺激素對(duì)發(fā)情和卵泡發(fā)育的影響

4.1.1 發(fā)情反應(yīng)

2e-TAI組和eG-TAI組在斷奶7 d內(nèi)分別有85.5%和85.7%的發(fā)情，顯著高于對(duì)照組（67.3%，P＜0.05）。2e-TAI組和eG-TAI組的斷奶至發(fā)情間隔分別為99.3 h和100.1 h，顯著短于對(duì)照組（113.5 h；表1）。注射馬絨毛膜促性腺激素后72 h，對(duì)照組、2e-TAI組和eG-TAI組母豬發(fā)情率分別為11.8%、60.4%和44.6%（圖2）。

圖2 斷奶后各時(shí)間點(diǎn)母豬發(fā)情的時(shí)間（h）百分比

4.1.2 卵泡反應(yīng)

通過(guò)間歇性超聲檢查跟蹤了卵泡從斷奶到排卵的發(fā)育過(guò)程（圖1）。發(fā)情開(kāi)始時(shí)，對(duì)照組和eG-TAI組卵泡大小分別為7.5 mm和7.0 mm，顯著大于2e-TAI組（5.7 mm）；然而卵泡大小在排卵期組間相似（分別為8.2 mm、7.7 mm和8.0 mm；P＞0.05；表1）。

4.2 兩種定時(shí)人工授精方案中促性腺激素釋放激素注射時(shí)間對(duì)排卵的影響

4.2.1 促性腺激素釋放激素刺激時(shí)卵泡大小的分布

2e-TAI組在eGG注射后固定時(shí)間（72 h）注射GnRH。由于發(fā)情，eG-TAI注射GnRH的平均時(shí)間為eGG注射后83.3 h，比2e-TAI組晚11.3 h（表1）。卵泡大小分布在eG-TAI組中更為一致，大多數(shù)eGTAI母豬的卵泡為＞6 mm，而大多數(shù)2e-TAI母豬的卵泡為5—6 mm（圖3）。

圖3 母豬使用促性腺激素釋放激素和發(fā)情時(shí)卵泡直徑（mm）

表1 初產(chǎn)母豬不同處理組的發(fā)情率、WEI、EOI、卵泡大小

4.2.2 促性腺激素釋放激素刺激后排卵時(shí)間和分布

2e-TAI組的發(fā)情至排卵間隔（EOI）（39.2 h）明顯長(zhǎng)于eG-TAI組（30.7 h），類似于自然發(fā)情后間隔在對(duì)照組（圖4）。與其他兩組相比，對(duì)照組的排卵時(shí)間分布更為分散，注射GnRH后0—48 h，2e-TAI和eG-TAI的母豬排卵率分別為91.2%和93.3%（圖5）。

圖4 母豬排卵時(shí)間

圖5 發(fā)情期開(kāi)始后（對(duì)照組）和發(fā)情初期促性腺激素釋放激素（GnRH）注射（2e-TAI）或斷奶后 96 h（eG-TAI） 母豬排卵期的比例

4.3 定時(shí)人工授精方案對(duì)母豬繁殖性能的影響

2e-TAI組斷奶母豬的配種率為100%，高于對(duì)照組（67.3%，P＜0.05）和eG-TAI組（85.7%，P＜0.05）。2e-TAI組受精率（82.7%）顯著低于對(duì)照組（93.2%）和eG-TAI組（95.8%）。然而，考慮到所有母豬在斷奶時(shí)分配的情況，2e-TAI組（82.7%）和eG-TAI組（82.2%）的妊娠率相似，但顯著高于對(duì)照組（62.7%）。2e-TAI和eG-TAI組的產(chǎn)仔率（分別為75.5和76.8%）顯著高于對(duì)照組（56.4%）。3組數(shù)據(jù)中每窩總產(chǎn)仔數(shù)、每窩產(chǎn)活仔數(shù)、每窩產(chǎn)死仔數(shù)基本一致。而2e-TAI和eG-TAI組中，相比對(duì)照組分別多出196頭和224頭，每100頭斷奶母豬的產(chǎn)仔量分別為850頭和878頭（表2）。

表2 不同處理組初產(chǎn)母豬的授精率、配種率、妊娠率、產(chǎn)仔率、總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、死胎數(shù)

5 討論

本研究旨在確定4周批生產(chǎn)模式管理下，2e-TAI和eG-TAI方案對(duì)初產(chǎn)斷奶母豬繁殖性能的影響。初產(chǎn)母豬的繁殖性能是影響?zhàn)B豬業(yè)生產(chǎn)能力和經(jīng)濟(jì)效益的主要因素。初產(chǎn)母豬的發(fā)情率和產(chǎn)仔率是母豬批次生產(chǎn)管理的關(guān)鍵因素。提高初產(chǎn)母豬的這些比率對(duì)于減少非生產(chǎn)天數(shù)和延長(zhǎng)其使用壽命是重要的。以往的研究表明，eGG與促黃體素（LH）和卵泡刺激素（FSH）功能相似，它可以誘導(dǎo)卵泡發(fā)育和發(fā)情同步。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組中有更多的初產(chǎn)母豬在斷奶后7 d內(nèi)表現(xiàn)出發(fā)情。這與Ellen對(duì)初產(chǎn)母豬的研究相一致：斷奶后注射1000 IU eGG在7 d內(nèi)表現(xiàn)出高發(fā)情率。

經(jīng)腹部超聲檢查確定排卵時(shí)間。2e-TAI組母豬注射GnRH后39.2 h排卵，與外源性GnRH刺激時(shí)相同。但eG-TAI組母豬的斷奶至發(fā)情間隔與對(duì)照組相似，兩組均有較大的排卵前卵泡，但2e-TAI組卵泡較小，可能導(dǎo)致斷奶至發(fā)情間隔較長(zhǎng)。外源性促性腺激素已被用于刺激卵泡發(fā)育和誘導(dǎo)母豬斷奶后排卵，在母豬排卵前2～5 h內(nèi)刺激黃體生成素分泌，可縮短母豬的發(fā)情排卵間隔。LH刺激卵泡的生長(zhǎng)，注射后72 h卵泡直徑約為5～6 mm，發(fā)情時(shí)增大至6～7 mm。因此，與2e-TAI相比，eG-TAI能有效促進(jìn)卵泡生長(zhǎng)和排卵，縮短斷奶發(fā)情間隔。

LH峰與發(fā)情有關(guān)，但存在著很大的差別。如果母豬表現(xiàn)出同步的發(fā)情，它們的排卵時(shí)間是分散的。在斷奶母豬中，從發(fā)情開(kāi)始到排卵間隔的變化降低了標(biāo)準(zhǔn)授精程序在排卵后24 h內(nèi)發(fā)生的可能性。當(dāng)使用eG-TAI方案時(shí)，排卵可以被精確地定時(shí)，從而通過(guò)確保至少一個(gè)人工授精發(fā)生在最大的生育時(shí)間，從而提高斷奶母豬的產(chǎn)仔率。如果在GnRH注射時(shí)或在2e-TAI組64 h后檢測(cè)到站立發(fā)情，則可進(jìn)行授精。該方法可有效防止提前或推遲發(fā)情母豬的誤配，較定時(shí)人工受精技術(shù)提高該批次斷奶母豬的產(chǎn)仔率。

研究表明，eGG注射提高了排卵率，但也對(duì)胚胎生存能力產(chǎn)生了負(fù)面影響，可能是因?yàn)樗黾恿伺怕亚俺氐穆雅莶痪恍?，?dǎo)致了胚胎發(fā)育的不同步。因此，我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在總出生數(shù)和活產(chǎn)數(shù)上沒(méi)有差異。但試驗(yàn)組中每100頭斷奶母豬的產(chǎn)仔數(shù)比對(duì)照組多196頭和224頭，顯著提高了母豬的繁殖性能。

6 結(jié)論

本文的結(jié)果表明，初產(chǎn)母豬采用TAI方案處理后，在斷奶和分娩的7 d內(nèi)顯著提高了發(fā)情率，使得初產(chǎn)母豬納入批次化生產(chǎn)管理成為可能，最大限度地減少非生產(chǎn)天數(shù)造成的損失。