以風(fēng)險(xiǎn)控制為核心的中藥外源性有害殘留物標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)初步成效及展望

左甜甜

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

金紅宇＊

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

王瑩

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

劉麗娜

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

魏鋒

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

于健東

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

馬雙成＊

中國食品藥品檢定研究院

國家藥品監(jiān)督管理局中藥質(zhì)量研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

中藥是中華民族的瑰寶，自古以來在預(yù)防和治療疾病中都發(fā)揮著重大作用。中藥安全性問題被全社會(huì)高度關(guān)注，隨著環(huán)境污染的日益嚴(yán)重，中藥在種植過程農(nóng)藥、化肥的濫用，中藥飲片炮制、加工不規(guī)范等都可能影響到中藥質(zhì)量，影響廣大人民群眾的用藥安全。同時(shí)，有害殘留物問題嚴(yán)重影響中藥品質(zhì)并已成為阻礙中藥出口和中藥走向國際化的主要問題之一，妨礙了中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

中藥可能存在的外源性有害殘留物主要包括重金屬及有害元素、農(nóng)藥殘留、真菌毒素、二氧化硫等。其檢測(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、安全標(biāo)準(zhǔn)已成為影響中藥國際貿(mào)易的最重要技術(shù)壁壘之一，成為制約中藥走向國際化、現(xiàn)代化的“瓶頸”。具體來講，中藥基質(zhì)復(fù)雜，有害殘留物檢測(cè)指標(biāo)多、含量低、測(cè)定難度大、檢測(cè)技術(shù)缺失，增加了監(jiān)管的難度。此外，中藥外源性有害殘留物的科學(xué)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是制定合理限量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)，更是保障中藥安全的重要技術(shù)手段。然而，中藥作為藥品，有其自身的特點(diǎn)，受環(huán)境因素（包括水、土壤等）影響較多。因此，迫切需要建立符合中藥使用特點(diǎn)的外源性有害殘留物檢測(cè)技術(shù)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及安全標(biāo)準(zhǔn)體系，以期為健全中藥有害殘留物安全技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)體系、有效應(yīng)對(duì)藥害事件發(fā)生、保障人民用藥安全提供技術(shù)支撐；同時(shí)，為客觀、科學(xué)地評(píng)價(jià)中藥外源性有害殘留物對(duì)人體的健康風(fēng)險(xiǎn)，以及制定科學(xué)、實(shí)用、與國際接軌的殘留物安全標(biāo)準(zhǔn)提供重要的科學(xué)依據(jù)，并促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)高質(zhì)量發(fā)展。

本文梳理了中藥外源性有害殘留物檢測(cè)技術(shù)和限量標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)展過程，通過對(duì)國家藥典委員會(huì)中藥安全性質(zhì)量控制專業(yè)委員會(huì)（原第十一屆國家藥典委員會(huì)中藥風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估專業(yè)委員會(huì)）成立后所建立的符合中藥使用特點(diǎn)的外源性有害殘留物安全性評(píng)價(jià)體系（包括收錄于《中國藥典》2020年版中的一系列檢測(cè)方法、限量標(biāo)準(zhǔn)、指導(dǎo)原則等），以及在應(yīng)對(duì)突發(fā)藥品安全事件發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)、評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)、控制風(fēng)險(xiǎn)所取得的一系列成效進(jìn)行總結(jié)，以期為中藥質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)提供參考思路。

1 中藥外源性有害殘留物檢測(cè)平臺(tái)建設(shè)

由中國食品藥品檢定研究院和國家藥典委員會(huì)牽頭，組織全國 20 余家藥品檢驗(yàn)單位及部分科研院所，在“十一五”到“十三五”期間依托于國家科技重大專項(xiàng)以及國務(wù)院藥品醫(yī)療器械審評(píng)審批制度改革課題等建立了中藥400余種農(nóng)藥多殘留GC-MS/MS 和LC-MS/MS 檢測(cè)平臺(tái)、40 種重金屬檢測(cè)平臺(tái)、基于金屬元素指紋圖譜的藥材產(chǎn)地分析方法、基于in vitro PBET/Caco-2 和in vitro PBET/MDCK 細(xì)胞模型的中藥重金屬生物可給性分析方法、中藥真菌毒素LC-MS/MS 檢測(cè)平臺(tái)、16 種多環(huán)芳烴檢測(cè)方法以及二氧化硫殘留量測(cè)定方法，極大地提升了我國中藥外源性有害殘留物的整體檢測(cè)技術(shù)水平，并達(dá)到國際先進(jìn)水平。

1.1 建立中藥農(nóng)藥多殘留檢測(cè)平臺(tái)

依托于以上課題，筆者團(tuán)隊(duì)建立了涵蓋多種技術(shù)、方法互補(bǔ)又有機(jī)聯(lián)系的農(nóng)藥多殘留檢測(cè)平臺(tái)，主要包括前處理和檢測(cè)平臺(tái)兩部分內(nèi)容。根據(jù)中藥藥用部位不同，干擾成分各異的特點(diǎn)，建立農(nóng)藥殘留前處理技術(shù)平臺(tái)，提取方法包括超聲、振蕩、勻漿等；凈化方法包括凝膠滲透色譜、固相萃取、固相分散凈化等。所建立的檢測(cè)平臺(tái)涵蓋3 個(gè)子平臺(tái)[1-5]：①常用農(nóng)藥檢測(cè)平臺(tái)。檢測(cè)技術(shù)包括高效率的氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS/MS） 和液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS/MS）技術(shù)，以及高專屬性的氣相、液相技術(shù)，兼顧篩查定性與準(zhǔn)確定量的技術(shù)要求；檢測(cè)指標(biāo)涵蓋我國禁限用農(nóng)藥、高毒農(nóng)藥、常用農(nóng)藥，涉及農(nóng)藥300 余種，單體成分420 個(gè)。多數(shù)農(nóng)藥檢測(cè)靈敏度達(dá)到0.01mg/kg 的國際規(guī)范要求。開發(fā)了氣相色譜（GC）分析中的分析保護(hù)劑技術(shù)，有效克服基質(zhì)效應(yīng)，提升檢測(cè)靈敏度，使用高效、方便。②禁用農(nóng)藥檢測(cè)平臺(tái)。采用GC-MS/MS 和HPLC-MS/MS 技術(shù)，根據(jù)質(zhì)譜的特點(diǎn)和要求，兼顧不同基質(zhì)的復(fù)雜性，歸納總結(jié)了3 套樣品前處理方法，包括直接提取法、快速樣品處理法及固相萃取法，為不同性質(zhì)的樣品提供了前處理選擇，最終形成了藥材及飲片33種禁用農(nóng)藥多殘留測(cè)定法。此方法已被收錄于《中國藥典》2020年版，對(duì)于植物類藥材及飲片禁用農(nóng)藥加以監(jiān)控，是從源頭上保障中藥品質(zhì)的重要舉措，故此平臺(tái)方法的建立具有很強(qiáng)的社會(huì)價(jià)值。③農(nóng)藥多殘留高通量篩查平臺(tái)。利 用 LC-QTOF 和 APGCQTOF 結(jié)合數(shù)據(jù)庫建立了中藥近500 種農(nóng)藥的快速高通量篩查平臺(tái)，并采用不同基質(zhì)藥材驗(yàn)證平臺(tái)的可靠性。此平臺(tái)相比于常規(guī)方法，更加快速易操作，且避免多種農(nóng)藥對(duì)照品的購買和測(cè)定，既能節(jié)省資源，又可提高檢驗(yàn)效率和質(zhì)量，可應(yīng)用于中藥農(nóng)藥殘留的初步篩查。此外，針對(duì)中藥種植中使用的植物生長素，建立了23 種植物生長素多殘留檢測(cè)平臺(tái)，開展樣品篩查，并在黨參、麥冬等品種中對(duì)比研究了植物生長素對(duì)中藥質(zhì)量的影響。

1.2 建立中藥重金屬及有害元素檢測(cè)平臺(tái)

所建立的檢測(cè)平臺(tái)涵蓋40 種有毒有害元素，涵蓋原子吸收分光光度法（AAS）、原子熒光分光光度法（AFS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）3 種檢測(cè)技術(shù)，可保證涉及的每種元素都至少有2種方法可供檢測(cè)選擇。這樣既充分發(fā)揮了3 種方法各自優(yōu)勢(shì)，技術(shù)互補(bǔ)，又可以互相驗(yàn)證，應(yīng)用單位也可以根據(jù)檢測(cè)成本、檢測(cè)目的不同進(jìn)行靈活選擇。此外，采用ICPMS 首創(chuàng)性地建立了中藥重金屬及有害元素的系列分析方法，包括：多種毒性元素非靶向快速篩查分析平臺(tái)、基于金屬元素指紋圖譜的藥材產(chǎn)地分析方法、基于體外生理原理提取法（in vitro PBET）的中藥重金屬生物可給性分析方法、基于in vitro PBET/細(xì)胞模型的中藥重金屬生物利用度分析方法、基于高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法（HPLC-ICP-MS） 和生物可給性的砷形態(tài)、價(jià)態(tài)分析方法。

1.2.1 多種毒性元素非靶向快速篩查分析平臺(tái)

中藥經(jīng)微波消解前處理后，筆者團(tuán)隊(duì)采用ICP-MS，選擇全譜元素快速掃描模式，測(cè)定27 種重金屬及有害元素的殘留量[6]，并將所建立的方法應(yīng)用于2015年國家藥品抽檢的西洋參和山楂樣品分析中。結(jié)果顯示，西洋參和山楂中鉛、鎘、砷、汞、銅的殘留量均低于藥典限定范圍。西洋參含有多種人體所必需的微量元素，如錳、鐵、鋅、硒、錫等，其中鐵的含量最高，鋅的含量其次。山楂中鐵、鋅、錳等含量較豐富。《美國藥典》通則＜232＞及歐洲藥品管理局（European Medicines Agency，EMA）頒布的金屬催化劑在西洋參和山楂中的含量均很低。而鋁、銅、鋇這3 種元素，對(duì)健康可能具有潛在的危害，在西洋參和山楂中均有一定的含量。

1.2.2 基于金屬元素指紋圖譜的藥材產(chǎn)地分析方法

筆者團(tuán)隊(duì)以當(dāng)歸為研究對(duì)象，以15 種金屬元素為檢測(cè)指標(biāo)，首次提出一種用于藥材產(chǎn)地分析的四步驟綜合性策略，對(duì)樣品進(jìn)行了系統(tǒng)性地產(chǎn)地分析及安全性評(píng)價(jià)[7]。步驟1 為樣品收集，包括收集道地藥材以及來自非道地產(chǎn)區(qū)的樣品；步驟 2 為采用ICPMS 建立中藥金屬元素指紋圖譜；步驟3 為化學(xué)計(jì)量學(xué)分析，包括聚類分析、主成分分析（PCA）和自組織映射神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)（SOM）等多元統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)不同產(chǎn)地藥材金屬元素進(jìn)行聚類和評(píng)價(jià)，并找到不同產(chǎn)地樣品存在差異的指標(biāo)；步驟 4 為風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，對(duì)不同產(chǎn)地藥材金屬元素的安全狀況及風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示，來自不同產(chǎn)地的56 批當(dāng)歸藥材中不同元素的平均含量呈現(xiàn)如下規(guī)律：磷＞鎂＞鋁＞鐵＞錳＞鋅＞鍶＞銅＞釩＞鈉＞鎳＞鉛＞砷＞硒＞鎘，且多元統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，來自同一產(chǎn)地的樣品基本可以較好地聚類在一起。該研究建立了當(dāng)歸藥材中多元素全定量分析方法，所提出的四步驟綜合性分析策略可準(zhǔn)確、高效地分析和評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地當(dāng)歸的無機(jī)元素，為藥材的道地性與元素的相關(guān)性研究提供一種新的研究模式，并為道地藥材的質(zhì)量控制、資源的可持續(xù)利用提供新思路。

1.2.3 基于in vitroPBET 的中藥重金屬生物可給性分析方法

在實(shí)際情況中，中藥重金屬殘留量不一定會(huì)被人體完全吸收，若將中藥本身重金屬的殘留總量用于中藥重金屬的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可能會(huì)高估其對(duì)人體的危害。針對(duì)部分動(dòng)物藥重金屬殘留量較高的情況，筆者團(tuán)隊(duì)以in vitro PBET 為前處理方法，以ICP-MS 為測(cè)定方法，首創(chuàng)性地建立了地龍等9種72 批次動(dòng)物藥中鉛、鎘、總砷、總汞和銅的人體生物可給性分析方法。結(jié)果表明，9 種動(dòng)物藥中鉛、鎘、砷、汞和銅的生物可給性為1.5%～51.3%，胃相中的生物可給性大于腸相，且元素在胃相和腸相的生物可給性均遵從如下規(guī)律：鎘＞砷＞鉛＞銅＞汞[8]。將中藥重金屬生物可給性視為經(jīng)口的最大生物利用率用于機(jī)體對(duì)重金屬內(nèi)暴露總量的計(jì)算，既反映了機(jī)體暴露污染物的最壞情況，達(dá)到保護(hù)大多數(shù)人群的目的，又可以避免傳統(tǒng)的評(píng)估中假設(shè)污染物全部被機(jī)體吸收，導(dǎo)致政府采取不必要且昂貴的干預(yù)措施[9]。

1.2.4 基于in vitroPBET/細(xì)胞模型的中藥重金屬生物利用度分析方法

筆者團(tuán)隊(duì)采用跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)技術(shù)，以我國傳統(tǒng)動(dòng)物藥地龍為研究對(duì)象，首次通過in vitro PBET 模擬胃、腸消化的二步消化法，建立體外消化/MDCK 細(xì)胞模型。進(jìn)一步與 ICP-MS 聯(lián)用測(cè)定地龍中砷和鎘的生物利用度[10]。結(jié)果顯示，經(jīng)過MDCK 細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)后, 地龍中鎘的生物利用度為10.13%～64.16% ; 砷的生物利用度為2.72%～46.57%。同時(shí)，通過in vitro PBET 模擬胃、腸消化的二步消化法建立體外消化/Caco-2 細(xì)胞模型，并與ICPMS 聯(lián)用，建立適用于中藥基質(zhì)的重金屬生物利用度第二種評(píng)價(jià)模型[11-13]。結(jié)果顯示，經(jīng)過Caco-2 細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)后，3 批白花蛇舌草中鎘的生物利用度為1.60%～6.62%[12]，13 批地龍中鎘的生物利用度為3.29%～14.17%，9 批水蛭中鎘的生物利用度為4.32%～12.61%[13]。體外模擬消化/細(xì)胞模型是測(cè)定中藥重金屬生物利用度的全新并有效的技術(shù)手段。該研究為客觀、科學(xué)地評(píng)價(jià)中藥重金屬對(duì)人體的健康風(fēng)險(xiǎn)提供新思路，為制定科學(xué)、合理的重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)，并節(jié)約了中藥資源。

1.2.5 基于HPLC-ICP-MS和生物可給性的砷形態(tài)、價(jià)態(tài)分析方法

基于HPLC-ICP-MS 檢測(cè)系統(tǒng)和生物可給性，筆者團(tuán)隊(duì)建立了動(dòng)物藥中砷形態(tài)、價(jià)態(tài)（包括三價(jià)砷、五價(jià)砷、一甲基砷、二甲基砷、砷甜菜堿、砷膽堿等）分析方法，并基于形態(tài)、價(jià)態(tài)砷的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[14-15]。結(jié)果表明，砷的生物可給性為12.1%～69.1%,三價(jià)砷和五價(jià)砷為主要形態(tài)、價(jià)態(tài)[14]。

1.3 建立中藥真菌毒素檢測(cè)平臺(tái)

筆者團(tuán)隊(duì)建立了HPLC 柱后光化學(xué)衍生熒光法及HPLC-MS/MS 檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)指標(biāo)包括黃曲霉毒素等多種真菌毒素，方法檢出限達(dá)到0.3μg/kg 以下，專屬性強(qiáng)，達(dá)到國際先進(jìn)水平[16-17]。此外，筆者團(tuán)隊(duì)建立了膠體金免疫層析技術(shù)，用于定量檢測(cè)中藥黃曲霉毒素B1，可提高檢測(cè)效率，降低檢測(cè)成本[18]。為保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性，進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果準(zhǔn)確。

1.4 建立二氧化硫殘留量測(cè)定法

中藥存在非法過度硫黃熏蒸的現(xiàn)象。從滿足監(jiān)管需要出發(fā)，筆者團(tuán)隊(duì)建立了中藥二氧化硫殘留量蒸餾-滴定測(cè)定法。為進(jìn)一步提高該方法的專屬性和靈敏度，建立了二氧化硫殘留量離子色譜法（IC）。根據(jù)二氧化硫易被酸分解、蒸餾的性質(zhì)，設(shè)計(jì)了水蒸氣蒸餾裝置，所有實(shí)驗(yàn)室可自行搭建，成本低，使用方便、高效。離子色譜法專屬性強(qiáng)，方法檢出限達(dá)到1mg/kg。該離子色譜法為首創(chuàng)，達(dá)到國際先進(jìn)水平。

依托于所建立的二氧化硫殘留量測(cè)定法，筆者團(tuán)隊(duì)針對(duì)2013年媒體報(bào)道硫熏當(dāng)歸等現(xiàn)象，快速反應(yīng)，明確硫熏的作用，鎖定硫熏中藥的范圍，評(píng)估殘留情況及毒性影響，提出了硫黃熏蒸是藥材產(chǎn)地初加工的一種形式，有利于部分藥材的干燥、貯藏，但不應(yīng)用于藥材的增色。并提出了可以適度硫熏的10 個(gè)藥材品種名單，有區(qū)別地?cái)M定了允許適度硫熏和禁止硫熏的藥材二氧化硫殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。隨后，筆者團(tuán)隊(duì)廣泛開展了硫熏對(duì)中藥質(zhì)量影響研究工作，同時(shí)規(guī)范硫熏工藝，積極開發(fā)硫熏替代方法。

在《中國藥典》2010年版增補(bǔ)本收錄二氧化硫殘留限量標(biāo)準(zhǔn)后，中國食品藥品檢定研究院適時(shí)開展全國評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)，各省局嚴(yán)厲打擊藥材非法硫熏行為。通過上述工作，藥材二氧化硫殘留量合格率從低于50%提升至80%以上。

2 符合中藥使用特點(diǎn)的中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)體系建設(shè)

筆者團(tuán)隊(duì)以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的科學(xué)理論為依據(jù)，總結(jié)近幾年的實(shí)踐數(shù)據(jù)與經(jīng)驗(yàn)，系統(tǒng)設(shè)計(jì)，通過開展多省市的普通居民入戶調(diào)查以及醫(yī)院處方系統(tǒng)調(diào)查，獲取中藥消費(fèi)頻率和消費(fèi)量等重要數(shù)據(jù)，結(jié)合中藥合理的健康指導(dǎo)值分配系數(shù)以及中藥煎煮（提?。┖蠓玫挠盟幪攸c(diǎn)，提出符合中藥使用特點(diǎn)的中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的原則和基本程序[19]。

在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估過程中，危害識(shí)別和危害特征描述的核心目的是確定劑量-反應(yīng)關(guān)系或健康指導(dǎo)值。筆者團(tuán)隊(duì)及時(shí)追蹤國際相關(guān)研究進(jìn)展，對(duì)于世界衛(wèi)生組織（WHO）、美國環(huán)境保護(hù)局（USEPA）等國際公認(rèn)的健康指導(dǎo)值進(jìn)行匯總、比較和論證，確認(rèn)適用于中藥外源性有害殘留物的健康指導(dǎo)值。

暴露評(píng)估是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的核心內(nèi)容。筆者團(tuán)隊(duì)充分考慮中藥的暴露特點(diǎn)，首創(chuàng)性地提出了適用于中藥暴露量（Exp）的計(jì)算公式：

式中，C 為外源性有害殘留物的實(shí)測(cè)值；W 為人體體重，一般為63kg；AT 為平均壽命天數(shù)=365 天×70年；t 為考慮中藥煎煮（提取）后服用的用藥特點(diǎn)，經(jīng)過煎煮等方式提取后中藥外源性有害殘留物的轉(zhuǎn)移率。對(duì)于評(píng)估過程中所涉及的其他中藥特有的重要參數(shù), 包括中藥服用頻率（EF）、服用時(shí)間（ED）、服用量（IR）等，筆者團(tuán)隊(duì)對(duì)所積累的24 038份入戶調(diào)查和2193 份中藥處方調(diào)查報(bào)告數(shù)據(jù)進(jìn)行梳理，反復(fù)論證，確定上述參數(shù)，最終建立符合中藥使用特點(diǎn)的暴露量的計(jì)算模型（即暴露評(píng)估模型）。

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的第4 步為風(fēng)險(xiǎn)特征描述，建立符合中藥使用特點(diǎn)的健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型，具體研究方法如下。

對(duì)于農(nóng)藥殘留，采用危害指數(shù)法分別進(jìn)行急性和慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。對(duì)于重金屬及有害元素，根據(jù)WHO 推薦的2 種風(fēng)險(xiǎn)特征描述方法。對(duì)于已確立健康指導(dǎo)值的重金屬，建議采用危害指數(shù)法（HI）對(duì)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行描述：

Exp 為公式（1）計(jì)算得到的暴露量；SF 為安全因子；HBGV即健康指導(dǎo)值，為WHO 推薦的最新參考值。若HI ≤1，則健康風(fēng)險(xiǎn)較低；若HI ＞1，則風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)予以關(guān)注。

對(duì)于尚未建立或已撤銷健康指導(dǎo)值的重金屬，建議采用暴露限值法（MOE）對(duì)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行描述：

Exp 為公式（1）計(jì)算得到的暴露量；SF 為安全因子；BMDL為WHO 推薦的外源性有害殘留物的基準(zhǔn)劑量下限。若HI ≤1，則健康風(fēng)險(xiǎn)需要被關(guān)注；若HI ＞1，則風(fēng)險(xiǎn)較低。

基于所建立的符合中藥使用特點(diǎn)的中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)體系，筆者團(tuán)隊(duì)對(duì)10種常用的1017 批樣本中農(nóng)藥殘留量進(jìn)行監(jiān)測(cè)、評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)排序，初步得出結(jié)論為農(nóng)藥檢出率較高，但殘留水平低，超標(biāo)率并不高。故歸結(jié)為“面”上風(fēng)險(xiǎn)較小，但在部分“線與點(diǎn)”上可能有較高風(fēng)險(xiǎn)[5]。部分“線與點(diǎn)”上，主要是指在花類和部分果實(shí)類藥材、部分多年生根與根莖類藥材中檢出率高，風(fēng)險(xiǎn)較大，且部分有禁用農(nóng)藥檢出，應(yīng)作為監(jiān)管重點(diǎn)。此外，對(duì)個(gè)別可能污染較為嚴(yán)重的藥材（如人參、枸杞子）開展了大規(guī)模樣品篩查，并采用國際通用的獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣法對(duì)人參中檢出農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行排序，得到人參中含有六氯苯、甲拌磷、總六六六、五氯硝基苯4 種高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，風(fēng)險(xiǎn)得分均≥28；2,4-滴丁酯等5 種中風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，風(fēng)險(xiǎn)得分均在15～20；多菌靈等17種低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，風(fēng)險(xiǎn)得分均≤12[3]。針對(duì)人參、枸杞子存在的農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)問題，向國家藥品監(jiān)管部門發(fā)出了《關(guān)于報(bào)送人參中五氯硝基苯農(nóng)藥殘留安全風(fēng)險(xiǎn)的報(bào)告》和《關(guān)于提請(qǐng)加強(qiáng)枸杞子農(nóng)藥殘留監(jiān)管的報(bào)告》，建議加強(qiáng)地方監(jiān)管，并適時(shí)啟動(dòng)專項(xiàng)監(jiān)督檢查，使風(fēng)險(xiǎn)管理更具科學(xué)性和時(shí)效性。

筆者團(tuán)隊(duì)對(duì)在全國范圍內(nèi)于 2016～2019年常用的、大宗藥材重金屬及有害元素殘留量的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行了風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。結(jié)果顯示，2245 批植物藥中鉛、鎘、砷、汞、銅的平均含量分別為1.566、0.299、0.391、0.074、8.386 mg/kg。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果顯示，對(duì)于一般暴露人群，中藥重金屬的健康風(fēng)險(xiǎn)是可接受的[20]。此外，考慮到重金屬的毒性不僅與其絕對(duì)含量有關(guān)，更與實(shí)際被吸收而發(fā)揮作用的含量密切相關(guān)。筆者團(tuán)隊(duì)將生物可給性及生物有效性納入中藥有害污染物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的范疇。通過In vitro PBET，模擬胃、腸消化對(duì)于藥材中鎘的生物可給性進(jìn)行考察，并應(yīng)用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中。結(jié)果表明，黃連、川芎、烏藥中鎘潛在的非致癌性風(fēng)險(xiǎn)較低，但莪術(shù)的健康風(fēng)險(xiǎn)需要被關(guān)注[9]。并基于所建立的In vitro PBET/ Caco-2 細(xì)胞模型以及In vitro PBET/ MDCK 細(xì)胞模型評(píng)價(jià)重金屬的生物有效性。結(jié)果顯示，經(jīng)過Caco-2 細(xì)胞和MDCK 細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)后，即考慮重金屬的生物有效性后，所有批次地龍和水蛭的風(fēng)險(xiǎn)均可接受[13]。

筆者團(tuán)隊(duì)于2015年對(duì)220余種常用藥材、部分中成藥制劑（總計(jì)2100 批次樣品）開展了中藥黃曲霉毒素篩查工作，并進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。結(jié)果表明，黃曲霉毒素雖然整體檢出率不高，但部分品種包括蓮子、檳榔、使君子等檢出較高，其中蓮子檢出率高達(dá)80%[21]。此外，對(duì)全國市場上10種常用藥材及飲片品種的亞硫酸鹽進(jìn)行了初步健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。結(jié)果顯示，從整體水平看，人群單一攝入10 種藥材及飲片暴露二氧化硫的健康風(fēng)險(xiǎn)較低，但對(duì)于二氧化硫殘留量超標(biāo)的樣品，健康風(fēng)險(xiǎn)需要被關(guān)注。不同品種藥材及飲片攝入二氧化硫的風(fēng)險(xiǎn)排序?yàn)辄h參＞粉葛＞牛膝＞天花粉＞天冬＞山藥＞白芍＞白及＞白術(shù)＞天麻[22]。

基于上述系列研究，筆者團(tuán)隊(duì)起草了《中藥中外源性有害殘留物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指導(dǎo)原則》，并擬收錄于第五版《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)工作手冊(cè)》；制定了英文版《中藥中重金屬風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指導(dǎo)原則》（Technical Guidelines for Risk Assessment of Heavy Metals in Traditional Chinese Medicines）、《中藥中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指導(dǎo)原則》（Technical Guidelines for Risk Assessment of Pesticides in Traditional Chinese Medicines）、《 中藥中黃曲霉毒素風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指導(dǎo)原則》（Technical Guidelines for Risk Assessment of Aflatoxin in Traditional Chinese Medicines），提交到WHO；將中藥中重金屬、農(nóng)藥殘留、黃曲霉毒素殘留數(shù)據(jù)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果分別整理成技術(shù)報(bào)告，提交到WHO；通過系統(tǒng)設(shè)計(jì)，開發(fā)和完善了“中藥殘留物數(shù)據(jù)分析與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估系統(tǒng)”軟件，并獲得著作權(quán)，涵蓋中藥外源性有害殘留物數(shù)據(jù)庫、多種統(tǒng)計(jì)分析功能以及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估功能等，旨在以一種系統(tǒng)化的形式達(dá)到智能搜索、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、互聯(lián)網(wǎng)共享的目的。

3 中藥外源性有害殘留物質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)體系建設(shè)

由國家藥典委員會(huì)中藥安全性質(zhì)量控制專業(yè)委員會(huì)（原第十一屆國家藥典委員會(huì)中藥風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估專業(yè)委員會(huì)）牽頭，筆者團(tuán)隊(duì)通過系統(tǒng)設(shè)計(jì)，首創(chuàng)性地建立了能夠反映我國人群中藥消費(fèi)特點(diǎn)的暴露評(píng)估參數(shù)，包括中藥使用頻率、使用量、使用時(shí)間等，充分考慮中藥的暴露特點(diǎn)。并考慮到中藥一般經(jīng)過煎煮后服用或者提取后制成制劑使用的特點(diǎn)，結(jié)合前期研究得到的中藥煎煮（提?。┖笾亟饘俎D(zhuǎn)移率的結(jié)果，提出了符合中藥使用特點(diǎn)的最大限量理論值的計(jì)算公式。與原公式（Exp=IR×C/W）相比，公式（1）中增加了人類平均壽命（AT）、中藥服用頻率（EF）、暴露年限（ED）和加工轉(zhuǎn)移率（t）參數(shù)，修訂了收錄于《中國藥典》2015年版四部的《中藥有害殘留物限量制定指導(dǎo)原則》?；谛抻喓蟮墓?，提出了藥材及飲片（植物類）中重金屬及有害元素一致性限量指導(dǎo)值：鉛不得過5mg/kg，鎘不得過1mg/kg，砷不得過2mg/kg，汞不得過0.2mg/kg，銅不得過20mg/kg。修訂后的《中藥有害殘留物限量制定指導(dǎo)原則》收錄于《中國藥典》2020年版四部通則，同時(shí)《中藥中外源性有害殘留物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指導(dǎo)原則》擬收錄于第五版《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)工作手冊(cè)》[23]。

首次建立了中藥注射劑重金屬及有害元素殘留限量檢查法及限量標(biāo)準(zhǔn)。所建立的中藥注射劑重金屬及有害元素殘留限量檢查法 包 括AAS、AFS 及ICP-MS等。規(guī)定有必要對(duì)樣品是否需要消解進(jìn)行對(duì)比考察，消解方式推薦采用微波消解法。對(duì)于中藥注射劑重金屬及有害元素殘留限量的研究，以半數(shù)致死量（LD50）為主要指標(biāo)，開展毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，確定注射/口服吸收差異系數(shù)為20。以食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)（FAO/WHO）對(duì)各元素評(píng)估報(bào)告中提出的健康指導(dǎo)值（HBGV）為基礎(chǔ)，按照每周7 天，標(biāo)準(zhǔn)體重60kg 折算成每日允許攝入量（ADI）。再按照20 倍注射/口服吸收差異系數(shù)折算注射每日允許攝入量，適度取整調(diào)整，最終確定中藥注射劑重金屬及有害元素的限量標(biāo)準(zhǔn)為：按各品種項(xiàng)下每日最大使用量計(jì)算，鉛不得過12μg，鎘不得過3μg，砷不得過6μg，汞不得過2μg，銅不得過150μg。本法及所制定的限量屬于國際首創(chuàng)，已被《中國藥典》2010年版第二增補(bǔ)本采納。

選擇10 種常用植物類藥材，涵蓋根莖、果實(shí)、花葉、果皮等不同藥用部位，經(jīng)過連續(xù)3年收集產(chǎn)地及流通渠道的2771 批次樣品。通過交叉復(fù)核建立了專屬性強(qiáng)、可操作性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確的“農(nóng)藥殘留量測(cè)定法-第五法 藥材及飲片（植物類）中禁用農(nóng)藥多殘留測(cè)定法”，并建立 “藥材和飲片檢定通則”中的藥材及飲片（植物類）33 種禁用農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)。此2 項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)收錄于《中國藥典》2020年版四部通則。通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)南蘖繕?biāo)準(zhǔn)，反制源頭種植階段濫用農(nóng)藥亂象，嚴(yán)把中藥安全關(guān)，從點(diǎn)、線、面多個(gè)層次構(gòu)建中藥農(nóng)藥殘留安全標(biāo)準(zhǔn)體系。此外，所建立的“鉛、鎘、砷、汞、銅測(cè)定法”“黃曲霉毒素測(cè)定法-第一法（液相色譜法） 光化學(xué)衍生法”“農(nóng)藥殘留量測(cè)定法-第一法有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法（色譜法）”“藥材和飲片檢定通則-藥材及飲片（礦物類除外）的二氧化硫殘留量不得過150mg/kg”“二氧化硫殘留量測(cè)定法-第三法（離子色譜法）” 5 項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)先后收入《中國藥典》通則[24-25]。

針對(duì)中藥硫黃熏蒸問題，基于廣泛的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，向國家藥典委員會(huì)提出了建議：在黨參、白芍、白術(shù)、白及、葛根、山藥、天花粉、天冬、天麻、牛膝10 種藥材和飲片項(xiàng)下二氧化硫殘留量應(yīng)不得過400mg/kg，并已收入《中國藥典》2010年版增補(bǔ)本。對(duì)于其他不允許硫熏的藥材，二氧化硫殘留量不得過150mg/kg。針對(duì)部分藥材貯藏過程中易染黃曲霉的問題，筆者團(tuán)隊(duì)在廣泛篩查基礎(chǔ)上，擬定了40 余種易染黃曲霉的藥材名單，并向國家藥典委員會(huì)提出建議。目前，《中國藥典》2020年版已收錄柏子仁、蓮子、檳榔、使君子、麥芽、肉豆蔻、決明子、九香蟲、土鱉蟲、馬錢子、蜂房11 個(gè)品種項(xiàng)下的黃曲霉毒素限量標(biāo)準(zhǔn)[26]。針對(duì)中藥農(nóng)藥殘留污染問題，深入產(chǎn)地調(diào)研，結(jié)合中藥種植生產(chǎn)實(shí)際情況，就人參、枸杞子、金銀花、菊花、陳皮等農(nóng)藥殘留污染的重點(diǎn)品種進(jìn)行專項(xiàng)研究，鎖定主要污染的農(nóng)藥種類等風(fēng)險(xiǎn)因素，制定針對(duì)性的檢測(cè)方法，同時(shí)推進(jìn)以農(nóng)藥登記、科學(xué)施用為核心的科研攻關(guān)。目前，《中國藥典》2020年版已在人參、西洋參、紅參3 個(gè)品種項(xiàng)下增加有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留限度要求?；陲L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，《中國藥典》先后在黃芪、枸杞子、甘草、金銀花、山楂、白芍、丹參、西洋參、酸棗仁、梔子、山茱萸、桃仁、三七、人參、黃精、葛根、當(dāng)歸、白芷18 種藥材和飲片項(xiàng)下收錄重金屬及有害元素的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)[26-27]。并基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，將植物類藥材中鎘的限量標(biāo)準(zhǔn)提高到不得過1mg/kg。

綜上，該項(xiàng)目建立的外源性有害殘留物安全技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，總計(jì)42 項(xiàng)先后收錄于《中國藥典》各品種項(xiàng)下。

4 展望與建議

4.1 嚴(yán)控中藥外源性有害殘留物污染

中藥作為人們防病治病的特殊商品，其產(chǎn)業(yè)鏈長且復(fù)雜，在種植、加工、貯藏等過程中可能受到外源性有害殘留物的污染，對(duì)使用者的健康產(chǎn)生潛在威脅。建議建立符合GAP 要求的藥材基地，強(qiáng)化科學(xué)規(guī)范種植對(duì)藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展的支撐作用。建議實(shí)施藥材規(guī)范化種植，嚴(yán)選藥材栽培環(huán)境，嚴(yán)禁使用禁用農(nóng)藥，減少使用高毒農(nóng)藥和化肥。改善中藥倉儲(chǔ)條件，避免不恰當(dāng)?shù)膫}儲(chǔ)，包括過量硫熏、超劑量輻照等引入的外源性有害殘留物污染。改進(jìn)藥材包裝和炮制技術(shù)，最大程度地降低運(yùn)輸、加工過程中導(dǎo)致的污染。采取相應(yīng)的措施對(duì)已污染的產(chǎn)地進(jìn)行修復(fù)，包括化學(xué)修復(fù)、物理修復(fù)、微生物修復(fù)等，或?qū)⒍喾N修復(fù)技術(shù)綜合應(yīng)用，以期達(dá)到最佳效果[28-29]。

4.2 建議堅(jiān)持技術(shù)創(chuàng)新，并提升第三方檢測(cè)能力

中藥外源性有害殘留物具有區(qū)別于中藥有效成分的很多特點(diǎn)，從檢測(cè)角度看，殘留量低、檢測(cè)難度大、技術(shù)復(fù)雜、檢測(cè)成本高?？紤]到外源性有害殘留物安全性相關(guān)檢測(cè)成本較高，建議鼓勵(lì)第三方實(shí)驗(yàn)室以及地方藥品檢驗(yàn)所發(fā)揮更大的作用，開展檢測(cè)服務(wù)，并建議開展相關(guān)培訓(xùn)，包括復(fù)雜基質(zhì)條件下多殘留檢測(cè)方法研究與分析質(zhì)量控制技術(shù)，提升檢測(cè)能力，保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。同時(shí)，考慮到大型儀器存在儀器價(jià)格昂貴、不方便攜帶、前處理方法復(fù)雜等問題，建議加快中藥有害物質(zhì)快速檢測(cè)方法（包括酶分析法、膠體金免疫層析法、生物化學(xué)傳感器法、熒光標(biāo)記技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法等）的建立和相關(guān)培訓(xùn)，以實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)、實(shí)地檢測(cè)，加強(qiáng)中藥安全性監(jiān)管。

4.3 建議進(jìn)一步完善中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)體系

目前，筆者團(tuán)隊(duì)初步建立了符合中藥使用特點(diǎn)的確定性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)體系，并指導(dǎo)外源性有害殘留物限量標(biāo)準(zhǔn)的制定。然而，不同年齡階段或人群所經(jīng)歷的風(fēng)險(xiǎn)差異較大，多變性和隨機(jī)性貫穿中藥重金屬風(fēng)險(xiǎn)傳遞的全過程，導(dǎo)致中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的不確定性和潛在復(fù)雜性。有別于以單點(diǎn)值為輸出的傳統(tǒng)確定性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法，概率風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以盡可能定量化表征風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中的不確定性及變異性對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估造成的影響為出發(fā)點(diǎn)，提供暴露風(fēng)險(xiǎn)的范圍和可能性的估計(jì)，避免高估或低估健康風(fēng)險(xiǎn)，促進(jìn)風(fēng)險(xiǎn)管理和決策的改進(jìn)[30-32]。因此，建議進(jìn)一步探索符合中藥使用特點(diǎn)的概率風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法，為制定更加科學(xué)、合理并切合實(shí)際的限量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。此外，建議構(gòu)建中藥外源性有害殘留物風(fēng)險(xiǎn)-效益評(píng)價(jià)體系，包括初步確定風(fēng)險(xiǎn)和效益的潛在因子，建立風(fēng)險(xiǎn)和效益價(jià)值樹，以所治療疾病的性質(zhì)、臨床療效、不良反應(yīng)等因素為代表，分別按其嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間和發(fā)生率的高低，對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)分配權(quán)重，最后采用統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，得到風(fēng)險(xiǎn)效益比，并指導(dǎo)相關(guān)限量的制定。

4.4 建議完善外源性有害殘留物污染監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)庫

《中國藥典》2020年版新增33 種禁用農(nóng)藥殘留一致性限量標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)指導(dǎo)原則以及植物類藥材及飲片重金屬及有害元素一致性限量指導(dǎo)值。由于缺乏較為完善的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，尚無法做到對(duì)中藥農(nóng)藥殘留、重金屬等污染情況的精準(zhǔn)和實(shí)時(shí)把控。通過近十年的研究，筆者團(tuán)隊(duì)基于國家科技重大專項(xiàng)以及國務(wù)院藥品醫(yī)療器械審評(píng)審批制度改革課題等初步構(gòu)建了萬余批次中藥外源性有害殘留物數(shù)據(jù)庫。藥品檢驗(yàn)部門通過日常檢驗(yàn)、藥品評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)工作，也積累了大量外源性有害殘留物污染數(shù)據(jù)。迫切需要將這些數(shù)據(jù)加以梳理、整合和進(jìn)一步完善。建議繼續(xù)積極建立和完善中藥外源性有害殘留物污染監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)庫，構(gòu)建中藥有害殘留物數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。同時(shí)采用科學(xué)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法識(shí)別高風(fēng)險(xiǎn)中藥品種，以提高檢驗(yàn)效率、降低檢測(cè)成本，并為中藥安全性監(jiān)管政策的制定提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)支撐。