中藥干預骨髓間充質干細胞治療骨質疏松癥的研究進展

李靈達,熊 勇,周廣文,楊傲飛,呂浩源

(1. 湖北中醫(yī)藥大學,湖北 武漢 430060;2. 湖北中醫(yī)藥大學附屬湖北省中醫(yī)院,湖北 武漢 430060;3. 湖北中醫(yī)藥大學黃家湖醫(yī)院,湖北 武漢 430065)

骨質疏松癥(osteoporosis,OP)是一種以骨量快速降低和骨小梁微觀結構變稀疏,以及因此導致骨強度降低和骨折風險增加為特征的,與機體代謝、內(nèi)分泌紊亂高度相關的全身性骨骼疾病[1-2]。在我國有著數(shù)量龐大的OP患者群體,40歲以上人口中女性患病率高達20.6%,男性發(fā)病率也有5.0%[3]。患者因骨質流失,骨強度降低導致的骨質疏松性骨折和長期慢性全身骨痛等極大地降低了患者生活質量,提高了遠期死亡風險[4-5]。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是分化于中胚層的具有強大的多向分化、自我更新潛能的多能干細胞,在一定生化環(huán)境下可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞、神經(jīng)細胞等,其低免疫原性和相對易于獲取的特點使其成為目前各類組織修復的最理想種子細胞,在防治骨質疏松方面,骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的研究最為深入,成效也最為顯著。但單純的BMSCs移植療法仍面臨三大難題:體內(nèi)存活率低、自發(fā)歸巢數(shù)量有限、成骨分化效率不理想。中醫(yī)藥的現(xiàn)代化為解決以上難題提供了新策略。本文將從促進成骨分化、抑制成脂分化、促進遷移歸巢、抑制破骨細胞活化、干預外泌體、結合生物復合材料等方面對中藥干預BMSCs治療OP的研究進展進行綜述。

1 中醫(yī)學對BMSCs移植防治OP的認識

1.1中醫(yī)對OP的認識 中醫(yī)古籍未見“骨質疏松癥”這一病名,現(xiàn)在一般將OP歸于“骨極”“腎虛腰痛”“痹證”“骨枯”“骨痿”“骨縮”“骨痹”“痿癥”等中醫(yī)病癥范疇。如《千金要方·骨極》提到如果“腎病”則會出現(xiàn)“牙齒苦痛”“不能久立”“身癖腦髓酸”等癥狀,并稱之為“骨極”?！秱浼鼻Ы鹨健つI臟脈論第一》中指出:“足少陰氣絕”則會出現(xiàn)“腰脊痛不可以俯仰屈伸”等癥狀,并將此癥命名為“骨枯”。《扁鵲心書》云:“骨縮病此由腎氣虛憊,腎主骨,腎水既涸則諸骨皆枯,漸至短縮。”以上所述的身長縮短、牙齒及全身骨骼疼痛、脊柱畸形和屈伸不利、腰痛、關節(jié)疼痛等癥狀均與OP相吻合。OP的核心病機是腎虛,其標在骨而其本在腎。如《素問·陰陽應象大論》曰“腎主身之骨髓”,《醫(yī)經(jīng)精義·五臟所主》中有:“腎藏精,精生髓,髓生骨,故骨者腎之所合也;髓者,精之所生也,精足則髓足,髓在骨內(nèi),髓足者則骨強。”高度概括了腎-骨-髓之間的相互關系,即腎中精氣盛衰決定著髓與骨的功能強弱。如果腎氣虧虛,精髓不能充養(yǎng)于骨則會出現(xiàn)《素問·痿論》中描述的“骨枯髓減”, 最終導致“骨痿”。根據(jù)中醫(yī)臟腑辨證理論一般將OP分為腎陰陽俱虛證、腎陽虧虛證、腎虛血瘀證、肝腎陰虛證、脾腎陽虛證、脾胃虛弱證以及氣滯血瘀證7個常見證型[6],可見,OP的病位在腎肝脾三臟,以腎虛為核心病機,常伴有肝失條達和脾失健運,具有本虛標實的特點,本虛主要責之于腎,標實主要責之于瘀血阻滯。

1.2中醫(yī)學對BMSCs的認識 現(xiàn)代中醫(yī)學者一般把BMSCs歸于“腎精”的抽象概念范疇,認為BMSCs是“腎精”在細胞層面的具象表現(xiàn)。二者來源相似,《靈樞·經(jīng)脈》云:“人始生,先成精……皮膚堅而毛發(fā)長。”“腎精”源于父母生殖之精的陰陽和合,BMSCs源于胚胎早期的中胚層,同為機體的生命根源。兩者都調(diào)控著機體的生長壯老,如《素問·上古天真論》中代表腎精充盈功能活躍的“天癸”隨著年齡增長逐漸“天癸竭”,出現(xiàn)頭發(fā)脫落,牙齒枯槁,面容憔悴甚至“無子”等一系列“形壞”的表現(xiàn)。相似的,BMSCs的增殖活性、多向分化能力也會隨著年齡的增長而逐漸減退,導致機體衰老[7]。具體到骨生理方面,二者在骨骼發(fā)生、發(fā)育、生長以及修復和重建過程中都承擔著重要角色。中醫(yī)學認為“腎藏精,主骨”,腎陰陽協(xié)調(diào),腎精充足,則骨骼壯實。BMSCs最早發(fā)現(xiàn)于骨髓中,其成骨活性也最強,對維持骨的正常生理功能意義重大。

1.3OP與BMSCs的關系 BMSCs在多種轉錄因子、信號通路、mRNA等的調(diào)控下從成骨祖細胞到成骨前體細胞,逐步分化為成骨細胞,最后礦化為骨細胞,這一分化過程是骨骼形成、發(fā)育、修復、重建的核心環(huán)節(jié)[8]。OP的發(fā)生和BMSCs的功能降低者互為因果。隨著機體老化,BMSCs的活性降低,干性逐漸喪失,凋亡增加,成骨分化減弱,成脂分化增強,歸巢效率大幅降低,這些都是導致骨質疏松的重要因素[9-10]。反過來,OP患者以及易患OP的人群(如老年人、絕經(jīng)后女性、長期大量使用糖皮質激素者)的骨髓微環(huán)境會引起B(yǎng)MSCs活性降低、成脂分化大于成骨分化、歸巢率低下的病理表現(xiàn)[1]。OP的防治方面,大量實驗研究證明BMSCs移植以及促進BMSCs增殖、成骨、歸巢等手段均能高效阻斷這一病理性因果循環(huán)[10-12]。

2 中藥通過多途徑干預BMSCs治療OP的實驗研究現(xiàn)狀

2.1中藥對BMSCs增殖以及成骨分化的影響 BMSCs的成骨分化和促進成骨細胞成熟的能力調(diào)控著骨組織的生理病理全過程。中藥可調(diào)控成骨相關的信號通路及其啟動因子和效應原件。通路方面,以Wnt、BMP通路的研究最廣泛且深入。轉錄因子方面,RUNX家族轉錄因子2 (Runx-2)和Osterix等效應轉錄因子決定著成骨分化走向。

2.1.1中藥單味藥、中藥單體對BMSCs增殖以及成骨分化的影響 淫羊藿苷(icariin,ICA)可與雌激素受體結合發(fā)揮弱雌激素效應,高巳東等[13]通過療效對比發(fā)現(xiàn)相較于單獨使用ICA或雌激素(estrogen,E2),ICA與E2協(xié)同使用對大鼠BMSCs成骨分化的促進作用更明顯。此外,ICA對內(nèi)環(huán)境E2水平的雙向調(diào)節(jié)作用和上調(diào)核內(nèi)雌激素受體α(estrogen receptor-α,ERα)表達的作用,可消除激素替代療法的不良反應。實驗表明淫羊藿素能通過激活BMP-2/RUNX2/OSX信號通路誘導BMSCs向成骨細胞分化,起到抗骨質疏松的作用[14]。值得注意的是淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ的代謝產(chǎn)物中都包含淫羊藿素,因而淫羊藿在體內(nèi)的抗骨質疏松活性強大且持久。Wnt/β-catenin通路是BMSCs向成骨細胞方向分化成熟的關鍵路徑。在經(jīng)典路徑中的GSK3β(glycogen synthase kinase 3 beta)可對β-catenin進行降解從而抑制下游成骨相關基因的表達,而LRP5/6(low-density lipoprotein receptor-related protein 5/6)與Wnt蛋白結合可活化GSK-3β結合蛋白(GBP)從而抑制GSK3β,保證足量的β-catenin進入細胞核,使RUNX2與Osterix的mRNA表達增加,改善成骨分化率。相關研究發(fā)現(xiàn)骨碎補含藥血清對BMSCs的增殖及成骨分化的促進作用機制可能與Wnt/β-catenin信號通路的激活有關[15]。薛海鵬等[16]直接給予大鼠不同濃度骨碎補水煎液灌胃,成骨相關指標檢測結果證實骨碎補飲片以水煎服的方式也能有效誘導BMSCs定向成骨。關于黃芪上調(diào)血清維生素D對于BMSCs成骨分化的意義,李倩等[17]的實驗研究表明這一作用是黃芪通過上調(diào)維生素D活化酶CYP27B1 mRNA,下調(diào)維生素D滅活酶CYP24A1 mRNA并調(diào)節(jié)其相應蛋白的表達,從而維持穩(wěn)定的血清1,25(OH)2D3(維生素D在體內(nèi)代謝后發(fā)揮作用的活性成分)含量,為BMSCs成骨分化提供了所需的微環(huán)境。李應福[18]發(fā)現(xiàn)低劑量組(4.2 μL/100 g)麝香可顯著提高大鼠BMSCs的堿性磷酸酶(ALP)活性,增加鈣化結節(jié)數(shù)量,上調(diào)Ⅰ型膠原表達量,證明了麝香具有良好的促BMSCs定向成骨作用。楊鋒等[19]發(fā)現(xiàn)補骨脂素可提高BMSCs的ALP活性,利用生物芯片和生物信息學工具對這一過程中l(wèi)ncRNA的表達差異變化進行篩選和分析,得出差異最顯著的兩個lncRNA(XR009483、XR007366),用PCR技術進行檢測并比對。提示補骨脂素促進BMSCs成骨分化作用的機制與XR009483、XR007366的表達差異高度相關。

2.1.2中藥復方對BMSCs增殖以及成骨分化的影響 朱余俊等[20]收集OP患者手術中取出的骨髓分離BMSCs并培養(yǎng)傳代。制備復方補腎活血顆粒含藥血清后,以不同濃度對人BMSCs進行干預,結果發(fā)現(xiàn)5%劑量組對人BMSCs的增殖和促成骨分化作用最突出,Wnt/PI3K-AKT信號通路中的PI3K、AKT、P-AKT、LRP5、β-catenin mRNA和蛋白的高表達可能是其刺激人BMSCs增殖和成骨的內(nèi)在機制。高舉會等[21-22]發(fā)現(xiàn)相較于福善美組和誘導劑組,左歸丸、右歸丸對大鼠BMSCs的促成骨分化作用都更顯著,且二者的機制都涉及Hedgehog信號通路的激活,都可以上調(diào)BMSCs中SHH、GLI1的mRNA表達量,除此之外左歸丸還能增加BMP2、SMO、GPR48的表達。周湘琳等[23]將補腎健骨方制備為不同濃度的含藥血清(5%、10%、15%、20%、25%)加入細胞培養(yǎng)基中,分別對大鼠BMSCs和ROBs進行體外培養(yǎng),結果發(fā)現(xiàn)20%含藥血清提升ROBs的各項增殖和成骨指標最明顯,10%含藥血清對大鼠BMSCs的增殖和成骨活性促進作用最顯著。

2.2中藥對BMSCs成脂分化的影響 OP患者髓腔內(nèi)脂肪含量顯著高于正常人,這與BMSCs的成脂分化活性增強而成骨能力降低高度相關。一般而言,能夠促使BMSCs向成脂細胞分化的因素,反過來會抑制向成骨分化,而誘導成骨分化的因子也能夠抑制脂肪細胞的分化成熟[24],故具有抑制成脂分化功能的藥物也具備促進成骨的作用,進而實現(xiàn)對BMSCs成骨-成脂分化的雙向調(diào)節(jié)。

2.2.1中藥單味藥、單體對BMSCs成脂分化的影響 相關研究發(fā)現(xiàn)各劑量骨碎補總黃酮組的β-catenin mRNA、RUNX2 mRNA的表達量均較空白組顯著升高,而過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ) mRNA的表達量較空白組沒有明顯變化,提示骨碎補總黃酮可通過Wnt/β-catenin通路上調(diào)成骨相關因子的表達,同時使成脂分化轉錄因子的表達保持原有水平,進而將BMSCs的骨-脂分化維持在正常水平[25]。而王軍松等[26]的實驗則證明了骨碎補總黃酮可介導Wnt/β-catenin信號通路對PPARγ mRNA及蛋白的表達起到強大的抑制作用。李琰等[27]發(fā)現(xiàn)骨碎補水煎液不僅能通過上調(diào)Wnt/β-catenin信號通路中Wnt10b、β-catenin、LRP5 mRNA的表達使去卵巢大鼠骨密度升高,還能下調(diào)PPARγ、LPL mRNA的表達,降低各項成脂指標。張洪躍等[28]的研究發(fā)現(xiàn)補骨脂素對BMSCs的分化傾向也具有雙向調(diào)節(jié)作用,其中抑制成脂傾向的作用是通過下調(diào)C/EBPβ、PPARγ的蛋白表達實現(xiàn)的。劉穎等[29]發(fā)現(xiàn)用朝藿定A干預小鼠原代BMSCs可激活骨保護素(Osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受體活化因子配體(Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)/核因子-κB受體活化因子(Receptor Activator for Nuclear Factor-κB,RANK)信號通路從而上調(diào)OPG/RANKL的比值,進而發(fā)揮促BMSCs成骨分化、促成骨細胞礦化的作用,同時其高劑量組表現(xiàn)出較強的抑制脂向分化能力,通過以上機制朝藿定A可減少骨量流失治療骨質疏松。有研究指出淫羊藿苷的抗骨質疏松作用是通過調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路雙向調(diào)節(jié)BMSCs的定向分化實現(xiàn)的。一方面上調(diào)ALP、RUNX2、骨橋蛋白(OPN)等成骨標志物的表達促BMSCs成骨,同時下調(diào)PPARγ、Adipsin、FABP4等成脂關鍵因子表達以抑制BMSCs脂向分化[30]。

2.2.2中藥復方對BMSCs成脂分化的影響 劉波等[31]發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的大鼠BMSCs中的成脂分化關鍵標記物PPARγ與C/EBPα能在二仙湯含藥血清的干預下顯著降低,BMP-2的表達則被上調(diào),另外二仙湯能上調(diào)OPG的表達,競爭性地減少RANKL與RANK的配對,阻斷骨吸收信號的傳遞,即二仙湯既能夠雙向調(diào)節(jié)BMSCs的分化傾向,又能雙相干預成骨-破骨進程,從而維持骨動態(tài)平衡。陳錦成等[32]發(fā)現(xiàn)PD98059(MAPK信號通路抑制劑)可抑制龜鹿二仙膠含藥血清對大鼠BMSCs的促增殖作用,抑制龜鹿二仙膠含藥血清對Ets1、ERK1/2、CollagenⅠ、RUNX2等成骨相關mRNA和蛋白表達水平的提高,相較于龜鹿二仙膠組,PD98059降低了細胞的ALP活性和礦化程度,高表達成脂轉錄因子PPARγ?？梢?龜鹿二仙膠調(diào)控大鼠BMSCs骨-脂分化平衡的機制與ERK1/2/ Ets1信號通路緊密相關。陳沙等[33]的研究發(fā)現(xiàn)壯骨止痛膠囊可使BMSCs的Beclin1和LC3表達降低,使p62表達升高,PPAR-γ表達降低,ALP活力增強,從而改善骨密度。譚登等[34]報道補腎通絡方可抑制chemerin的表達,降低chemerin介導的炎癥反應程度,又因為chemerin和PPARγ在基因層面有著共同的效應因子,兩者在BMSCs的成脂分化中顯示出正相關,可見補腎通絡方對BMSCs骨-脂分化平衡的調(diào)節(jié)是通過調(diào)控chemerin的表達來實現(xiàn)的。

可見,中藥在調(diào)節(jié)BMSCs成脂分化方面與Wnt/β-catenin和OPG/RANKL/ RANK通路的關系最為密切,而PPARγ和C/EBPβ是最終決定BMSCs向脂肪細胞分化的關鍵轉錄因子。

2.3中藥對BMSCs遷移、歸巢的影響 BMSCs的歸巢(homing)分為動員(motility )、遷移(migration)兩個連貫的步驟,即BMSCs從骨髓進入血液系統(tǒng)及其循趨化因子濃度梯度靶向聚集到待修復組織的過程。研究表明骨質疏松模型大鼠和OP患者的BMSCs歸巢能力明顯不足[35-36]。歸巢作用是連接BMSCs增殖分化與骨組織修復的關鍵環(huán)節(jié),歸巢效率的高低直接決定著BMSCs防治OP的效果優(yōu)劣。與BMSCs歸巢相關的信號轉導路徑仍有待驗證,其中基質細胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)/CXC趨化因子受體4(CXC motif chemokine receptor 4,CXCR4)信號通路是目前學界認可度最高的明星通路,此外,PI3K/AKT、MCP-1/CCR2、MAPK/ERK、PKC等通路也被認為是影響B(tài)MSCs遷移的重要通路[18,37-40]。中藥對BMSCs歸巢的促進作用很好地從分子生物學角度印證了中醫(yī)“補腎、引經(jīng)”理論的科學性[18,41]。

中醫(yī)理論認為氣機阻滯、血行不暢也是“骨痿”的致病因素,而氣血不利往往表現(xiàn)為BMSCs周圍微環(huán)境的氧分壓低于正常。寧宇[37]發(fā)現(xiàn)柚皮苷提高低氧環(huán)境下BMSCs遷移效率的機制與其能夠激活SDF-1α/CXCR4通路強相關。臨床上麝香經(jīng)常作為引經(jīng)藥治療各種腎虛骨病,現(xiàn)代研究表明其“引藥直達病所”的功效與其激活MAPK/ERK1/2、PI3K/AKT及PKC信號通路從而促進BMSCs向骨組織遷移歸巢緊密相關[18]。楊傲飛[41]運用高通量測序技術對兔成骨細胞外泌體進行測序并分析,得出miR-122-5p是成骨細胞源性外泌體調(diào)控BMSCs分化遷移的重要靶點,而淫羊藿苷可以通過干預這一靶點從而達到促兔BMSCs成骨分化和遷移的目的。孫石磊[42]發(fā)現(xiàn)骨碎補含藥血清結合轉染HO-1和3D支架對大鼠BMSCs干預后可顯著下調(diào)金屬基質蛋白酶抑制劑1(TIMP-1)的表達(P<0.05),上調(diào)金屬基質蛋白酶1(MMP-1)的表達(P<0.05),從而增強BMSCs的遷移能力。余翔等[43]給予骨質疏松大鼠尾靜脈移植同種異體BMSCs(Brd U示蹤標記)并給予龜板水提液灌胃,發(fā)現(xiàn)骨質疏松大鼠椎體內(nèi)Brd U陽性表達顯著高于單純BMSCs移植組(P<0.05);劃痕實驗中龜板組的劃痕區(qū)域在12 h、24 h后BMSCs數(shù)量較空白組顯著增多(P均<0.05);龜板+BMSCs組大鼠在骨微觀結構、骨強度以及組織形態(tài)學方面的改善也最為顯著(P<0.01)。可見龜板可通過提高BMSCs的歸巢量從而提升BMSCs的骨修復效率防治骨質疏松。

2.4中藥通過干預BMSCs對破骨細胞的影響 中藥不僅可以直接作用于破骨細胞,阻礙其激活和分化成熟,還可以通過干預BMSCs,間接抑制破骨細胞的骨破壞效應。蒯鳳等[44]取冬凌草素干預過的BMSCs培養(yǎng)基上清液加入骨髓單核細胞培養(yǎng)基,結果發(fā)現(xiàn)凌草素可以干預BMSCs及其分化的成骨細胞,通過Wnt/β-catenin信號通路下調(diào)其RANKL的表達,上調(diào)OPG的表達,進而使骨髓單核細胞向破骨細胞的分化活性受到抑制。張峻瑋等[45]研究發(fā)現(xiàn)骨碎補可激活Wnt/β-catenin信號通路,使培養(yǎng)于Transwell上室的BMSCs的OPG高表達,RANKL低表達,OPG/RANKL比值下降可使RANKL/RANK信號通路受到抑制,進而降低Transwell下室的骨髓單核細胞向破骨細胞率?？梢?中藥干預BMSCs抑制破骨細胞的分化成熟的機制與Wnt/β-catenin通路和OPG/RANKL/RANK通路的信號傳遞相關。

2.5中藥通過外泌體干預BMSCs對骨修復的影響近年來,隨著對MSCs研究的深入,其局限性(增加致瘤率、排斥反應、倫理困境、體內(nèi)存活率低等)也日益引起關注。研究表明BMSCs逆轉骨質疏松的作用主要是由其旁分泌的外泌體(exosomes,EXO)所介導的,對于調(diào)控成骨-成脂平衡、成骨-破骨平衡、骨組織周圍血管新生起著至關重要的作用。

EXO的磷脂雙分子層使其具有極強的體內(nèi)外穩(wěn)定性,是中藥活性成分的理想載體。王一凡等[46]采用超聲技術將淫羊藿苷裝載于BMSCs源性EXO內(nèi),觀察ICA-EVs復合物對BMSCs成骨分化的影響,結果相較于ICA組,2周后ICA-EVs復合物組的ALP活性更強,β-catenin、RUNX2表達顯著增高(P<0.01)。郭招娣[47]的實驗發(fā)現(xiàn)異補骨脂素與BMSCs共培養(yǎng)后提取的EXO能激活circ8604/miR-26b-3p/ERα軸從而促進成骨前體細胞的分化成熟。楊傲飛[41]分離培養(yǎng)成骨細胞并用淫羊藿苷干預,提取干預后的EXO與BMSCs共培養(yǎng),結果發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可以調(diào)控miRNA-122-5p在成骨細胞EXO內(nèi)的表達,其表達量與EXO提升BMSCs成骨和遷移活性的作用呈正相關。王禮寧[48]研究發(fā)現(xiàn)脂肪細胞來源的EXO可通過其攜帶的miRNA-122-5p調(diào)控SPRY2介導的MAPK信號通路,進而影響骨髓內(nèi)BMSC的成骨與成脂分化,改善骨脂平衡,而溫腎通絡止痛方可促進脂肪細胞分泌EXO,并通過上述機制發(fā)揮抗骨質疏松效應。

2.6中藥與生物復合材料協(xié)同干預BMSCs治療OP的相關研究 生物復合材料與中藥活性成分相結合應用于骨組織的修復是當前組織工程學的一個前景廣闊的研究方向。大量研究表明生物復合材料的生物兼容性和組織親和性可以顯著提高中藥促BMSCs向成骨細胞分化效率,促進新骨生成,還能作為觀察平臺對BMSCs增殖分化情況進行評估。吳濤等[49]的實驗表明CS/HA復合材料良好的骨誘導、骨傳導性能結合淫羊藿苷的促rBMSCs成骨分化活性,進而更高效地促進骨微結構修復。李東曉等[50]將大鼠BMSCs注入PLA-GOL支架并置于擴散盒內(nèi),植入大鼠背部肌肉,然后給予淫羊藿總黃酮(total flavonoids of herba epimedii,HETF),結果顯示各組PLA-GOL支架內(nèi)BMSCs均可見大量成骨細胞。這一組織工程學方法更好地模擬了中藥對體內(nèi)微環(huán)境中的BMSCs增殖和成骨分化的干預效果,為觀察中藥干預BMSCs分化治療OP提供了更直觀、更還原、更便捷的研究方法。牡荊素與納米支架材料PPCN-G結合使用可高效促進MSCs的體外成骨分化。體內(nèi)注射的PPCN-G在第4周可完全降解,牡荊素與PPCN-G、BMP9結合可顯著改善骨組織微觀結構[51]。研究表明骨碎補含藥血清結合3D干細胞組織工程技術干預大鼠BMSCs,可使BMSCs增殖活躍,凋亡減少,遷移能力增強,成骨轉錄因子高表達,從而發(fā)揮對骨組織的修復作用[42]。

3 小結與展望

綜合前述理論和實驗可知,針對“腎陰陽虛損,腎氣、腎精不足”的糾正貫穿于中藥干預BMSCs防治OP的始終,與《內(nèi)經(jīng)》中“骨痿者,補腎法治之”之說契合,在用藥分類上以單味補腎藥、補腎藥單體活性成分、補腎復方的研究最龐雜且深入,涵蓋BMSCs增殖、分化、歸巢的每一個節(jié)點。另外活血化瘀、補氣理氣類中藥在改善BMSCs所在的微環(huán)境,提高BMSCs生存能力方面也有著舉足輕重的地位。總體來說,中藥干預后的BMSCs在體內(nèi)外均表現(xiàn)出增殖旺盛、存活率提升、成骨分化活躍、歸巢遷移活性增強等特征,可謂療效卓著。但不可避免的,中藥干預BMSCs治療OP的研究仍存在諸多瑕疵:①中藥復方是中醫(yī)辨證論治,整體施治理論的重要踐行方式,但中藥復方干預BMSCs防治OP的研究相對偏少。②骨質疏松動物的造模忽視中醫(yī)證型的模擬還原。③動物體內(nèi)實驗以靜脈移植中藥干預后的BMSCs為主,注射計量尚無公認的統(tǒng)一量化標準。④目前此類研究在機制方面往往局限于探究某單一通路,缺乏網(wǎng)狀多通路交叉印證,特別是BMSCs在骨修復這一連續(xù)性過程中成骨相關通路與歸巢通路之間的銜接對話鮮有研究。筆者認為今后應重視基于BMSCs成骨-歸巢相關通路的交叉對話,深入挖掘中醫(yī)經(jīng)典補腎強骨類復方治療OP的潛力并探明其機制。

利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。