外周血淋巴細(xì)胞的VCS 參數(shù)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性的相關(guān)性

馬瀟馳，張金彪（通信作者）

河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷科 （河北滄州 061001）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種臨床常見(jiàn)的自身免疫性疾病。淋巴細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫功能紊亂及細(xì)胞凋亡異常是SLE發(fā)病的重要原因，尤其是T 淋巴細(xì)胞凋亡增多，其產(chǎn)生的大量DNA、核小體等均可能成為自身抗原，刺激B 淋巴細(xì)胞活化[1]。在SLE 的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中常伴隨著淋巴細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化，原因可能與SLE 的疾病活動(dòng)性相關(guān)[2]。血細(xì)胞分析儀的淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)[包括淋巴細(xì)胞體積（lymphocyte volume，LV）、淋巴細(xì)胞電導(dǎo)率（lymphocyte conductivity，LC）、淋巴細(xì)胞光散射性（lymphocyte scatter，LS）]能對(duì)各類(lèi)淋巴細(xì)胞的形態(tài)變化進(jìn)行充分的表達(dá)和描述[3]。本研究通過(guò)觀察不同活動(dòng)期SLE 患者及健康對(duì)照組的外周血淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)，旨在探討不同疾病狀態(tài)下的淋巴細(xì)胞形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化情況，尋找對(duì)疾病診斷和活動(dòng)性判斷有價(jià)值的參數(shù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月至2021 年3 月河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院風(fēng)濕免疫科收治的134 例SLE 患者作為研究對(duì)象，根據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)指數(shù)（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）評(píng)分將患者分為活動(dòng)組（83 例，SLEDAI評(píng) 分≥10 分）和 緩 解 組（51 例，SLEDAI 評(píng) 分<10 分），另選取同期的健康體檢者60 名作為對(duì)照組?；顒?dòng)組男16 例，女67 例；年齡21～68 歲，平均（36.53±13.56）歲；平均病程（7.23±3.78）年。緩解組男10 例，女41 例；年齡22～66 歲，平均（37.18±13.11）歲；平均病程（8.23±4.14）年。對(duì)照組男11名，女49 名；年齡 22～67 歲，平均（36.78±13.31）歲。3 組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：SLE 患者的臨床資料完整，符合1997 年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)推薦的SLE 診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，自愿參加本研究且已簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他自身免疫性疾病和炎癥疾病的患者；合并嚴(yán)重心血管疾病的患者；合并惡性腫瘤的患者；合并其他嚴(yán)重的原發(fā)性疾病的患者；近期有輸血史的患者。

1.2 方法

采集3 組清晨空腹靜脈血2 ml，采用EDTAK2 抗凝，利用Beckman-Coulter LH750 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)，記錄LV、LC、LS 及各參數(shù)的平均分布寬度（standard deviation，SD），試劑為儀器原裝配套試劑。

1.3 觀察指標(biāo)

比較3 組的LV、LC、LS 及各參數(shù)的SD。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以±s表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用LSD檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)；繪制ROC 曲線，分析LV 診斷SLE 活動(dòng)期的價(jià)值，并確定最佳截?cái)嘀担籔<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組外周血淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)及各參數(shù)的SD 比較

活動(dòng)組的LV 高于緩解組和對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；活動(dòng)組的LC 低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；活動(dòng)組的LVSD、LC-SD、LS-SD 和緩解組的LV-SD、LS-SD均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組外周血淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)及各參數(shù)的SD 比較

2.2 外周血淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)與SLE 疾病活動(dòng)性的相關(guān)性

Pearson檢驗(yàn)結(jié)果顯示，活動(dòng)組的LV 與SLE疾病活動(dòng)性成正相關(guān)（r=0.586，P<0.05），見(jiàn)圖1；其余參數(shù)與SLE 疾病活動(dòng)性均無(wú)相關(guān)性，見(jiàn)表2。

圖1 活動(dòng)組LV 與SLE 疾病活動(dòng)性的相關(guān)性

表2 外周血淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)與SLEDAI 的相關(guān)性

2.3 LV 診斷活動(dòng)期SLE 的ROC 分析

根據(jù)活動(dòng)組和對(duì)照組的LV 數(shù)據(jù)繪制ROC 曲線。ROC 分析結(jié)果顯示，LV 診斷活動(dòng)期SLE 的曲線下面積為0.848（95%CI為0.780～0.915），最佳截?cái)嘀禐?5.29 fl，此時(shí)約登指數(shù)為0.688，診斷靈敏度為77.1%，特異度為91.7%，見(jiàn)圖2。

圖2 LV 診斷活動(dòng)期SLE 的ROC 曲線

3 討論

VCS 技術(shù)是在白細(xì)胞檢測(cè)通道，保持白細(xì)胞與體內(nèi)相同的狀態(tài)下，應(yīng)用電阻抗原理對(duì)淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)。VCS 參數(shù)包括LV（反映細(xì)胞體積大?。C（反映細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞核質(zhì)比例、細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分等）、LS（提供細(xì)胞形態(tài)及胞核結(jié)構(gòu)等信息）[5]。淋巴細(xì)胞VCS 參數(shù)在細(xì)菌、病毒等感染性疾病中的應(yīng)用已有廣泛報(bào)道[6-7]。

SLE 是一種慢性遷延性、反復(fù)發(fā)作的自身免疫性疾病，疾病可分為活動(dòng)期與緩解期。處于不同疾病時(shí)期的患者，其治療方案的選擇亦有差別，因而尋求與SLE 疾病活動(dòng)性相關(guān)的指標(biāo)尤為重要[8]。目前，SLE 疾病活動(dòng)性的判斷主要依據(jù)SLEDAI 評(píng)分[9]。SLEDAI 評(píng)分是將各系統(tǒng)的復(fù)雜表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)合起來(lái)，根據(jù)患者的病情逐條進(jìn)行評(píng)分[10]，此方法受評(píng)估者主觀因素的影響較大，且操作比較復(fù)雜，影響其推廣應(yīng)用。SLE 疾病的活動(dòng)性與淋巴細(xì)胞大小、形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化相關(guān)，這種變化比較微小，很難通過(guò)顯微鏡觀察，但卻可以通過(guò)VCS 參數(shù)發(fā)現(xiàn)，加之VCS 參數(shù)為定量檢測(cè)參數(shù)，受人為因素影響小，結(jié)果更加準(zhǔn)確，且參數(shù)的檢測(cè)可通過(guò)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀自動(dòng)化進(jìn)行，操作較為簡(jiǎn)單。

本研究結(jié)果顯示，活動(dòng)組的LV、LV-SD、LCSD、LS-SD 較高，而LC 較低，說(shuō)明SLE 活動(dòng)期患者淋巴細(xì)胞的體積大小、形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)均發(fā)生了明顯改變，原因可能與T 淋巴細(xì)胞凋亡增多及B 淋巴細(xì)胞異?；罨嘘P(guān)。凋亡細(xì)胞主要表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)改變，胞膜氣泡化、細(xì)胞核固縮、染色體DNA 分解成有規(guī)律的片段；活化的B 淋巴細(xì)胞常表現(xiàn)為細(xì)胞體積增大，胞漿量增多，副染色質(zhì)增多[11]，故反映細(xì)胞體積的LV 明顯增大；細(xì)胞核固縮、胞漿量增多，故反映細(xì)胞核質(zhì)比例的LC 明顯降低。3個(gè)參數(shù)的離散程度均明顯增大，說(shuō)明SLE 活動(dòng)期患者的細(xì)胞形態(tài)變化差異較大。此外，Pearson檢驗(yàn)結(jié)果顯示，活動(dòng)組的LV 與SLE 疾病活動(dòng)性成正相關(guān)（r=0.586，P<0.05）；ROC 分析結(jié)果顯示，LV 診斷活動(dòng)期SLE 的曲線下面積為0.848（95%CI為0.780～0.915），最佳截?cái)嘀禐?5.29 fl，此時(shí)約登指數(shù)為0.688，診斷靈敏度為77.1%，特異度為91.7%，表明以85.29 fl 為臨界值診斷活動(dòng)期SLE 的價(jià)值最高。

綜上所述，外周血淋巴細(xì)胞的VCS 參數(shù)可以反映SLE 患者體內(nèi)淋巴細(xì)胞的形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化，LV 與疾病活動(dòng)性密切相關(guān)，對(duì)判斷SLE 患者是否處于活動(dòng)期具有較好的參考價(jià)值；加之VCS參數(shù)來(lái)源于血常規(guī)分析，具有客觀、快速、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)判斷SLE 患者疾病活動(dòng)性具有較好的應(yīng)用前景。