天津市新生兒聽力及耳聾基因聯(lián)合篩查結(jié)果分析

劉宏彥 劉慧坤 冷俊宏

天津市婦女兒童保健中心（天津 300070）

新生兒耳聾是一種常見的出生缺陷。早期診斷和干預(yù)是實現(xiàn)耳聾患兒“聾而不啞”的關(guān)鍵因素。新生兒聽力篩查可早期篩出絕大部分先天性聾兒，但對遺傳性因素所致的遲發(fā)型或藥物型耳聾存在一定的局限性。而新生兒耳聾基因篩查可檢出耳聾易感基因所致的遲發(fā)型耳聾患者[1]。天津市先后于2005年開展了新生兒聽力篩查，2012年開展了新生兒耳聾基因篩查。經(jīng)過近十年的聯(lián)合篩查工作，天津市已經(jīng)建立了比較完善的新生兒聽力篩查診斷系統(tǒng)。全市設(shè)有產(chǎn)科或兒科診療科目的醫(yī)療機構(gòu)借助此系統(tǒng)開展聽力篩查工作。天津市婦女兒童保健中心作為天津市唯一一家聽力復(fù)篩和障礙診治中心負責(zé)項目管理工作。本文對天津市2018年新生兒聽力和耳聾基因聯(lián)合篩查工作進行分析，了解本地區(qū)的聽力障礙發(fā)生率，揭示耳聾基因的流行病學(xué)情況，及致聾基因與聽力表型的關(guān)系，為耳聾基因診斷和遺傳學(xué)咨詢提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2018年1月1日—12月31日在天津市全部助產(chǎn)機構(gòu)出生的新生兒作為研究對象。納入標準：①日齡為出生后48小時至28天；②家長簽署新生兒聽力及耳聾基因聯(lián)合篩查知情告知書并自愿參加篩查。排除標準：①患有新生兒呼吸窘迫綜合征及先天性疾病（如先天性腦發(fā)育異常、先天性心臟病等）；②生后7日內(nèi)死亡的患兒。本研究通過天津市婦女兒童保健中心倫理委員會審批（No.津政發(fā)[2012]24號）。

根據(jù)聽力學(xué)診斷結(jié)果分為聽力正常組和聽力障礙組；聽力障礙組分為雙耳聾組和單耳聾組；根據(jù)耳聾程度分為輕中度聾組和重度極重度聾組。

1.2 方法

1.2.1 聽力篩查方法 在本市助產(chǎn)機構(gòu)出生的新生兒在家屬簽署知情同意書的前提下進行新生兒聽力篩查，同時根據(jù)《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范（2010年版）》新生兒聽力損失高危因素內(nèi)容，調(diào)查登記研究對象的聽力障礙高危因素[2]。聽力篩查未通過或有聽力障礙高危因素者于生后42 天至天津市婦女兒童保健中心復(fù)篩；聽力復(fù)篩未通過者在生后3 個月內(nèi)進行聽力學(xué)診斷；通過聽力學(xué)診斷確診為聽力障礙的患兒進行臨床干預(yù)。聽力初篩采用德國MAICO的ERO-SCAN篩查型耳聲發(fā)射儀（DPOAE）進行篩查；聽力復(fù)篩采用MAICO的MB11自動聽性腦干反應(yīng)儀（AABR）和DPOAE 進行聽力測試；聽力學(xué)診斷包括聲導(dǎo)抗和聽覺電生理測試。采用美國GSI-33型中耳分析儀以1 kHz和226 Hz探測音進行聲導(dǎo)抗測試。采用美國GSI Audera 聽性腦干誘發(fā)電位測試儀在隔聲屏蔽室進行聽性腦干反應(yīng)（ABR）測試。以ABR波V反應(yīng)閾≤30 dB作為2～4 kHz反應(yīng)閾正常的標準，以ABR 波V 反應(yīng)閾＞30 dB 作為聽力損失標準。聽力障礙分級標準：ABR 波V 反應(yīng)閾值31～50 dBnHL 為輕度聾；51～70 dBnHL 為中度聾；71～90 dBnHL為重度聾；反應(yīng)閾值≥91 dBnHL為極重度聾[3]。當雙耳聾程度不同時以耳聾程度較低的一側(cè)為標準。

1.2.2 耳聾基因檢測方法 采集新生兒足跟血于濾紙片上，應(yīng)用二代測序技術(shù)對我國人群常見4個耳聾基因20個位點進行檢測。包括GJB2基因（235delC，35delG，167delT，299_300delAT，176_191dell6）、GJB 3基因（538 C＞T，547 G＞A）、SLC 26 A 4基因（281 C＞T，589 G＞A，IVS 7-2 A＞G，1174 A＞T，1226G＞A，1229C＞T，IVS15+5G＞A，1975G＞C，2027T＞A，2162C＞T，2168A＞G）、線粒體12SrRNA基因（1555A＞G，1494C＞T）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以例數(shù)（百分比）表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher精確概率法檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 聽力篩查

2018年全市助產(chǎn)機構(gòu)共分娩102 610例新生兒，排除19例生后7日內(nèi)死亡的患兒和拒絕參加新生兒聽力篩查的21 例新生兒，最終納入102 570 例新生兒進行聽力篩查。其中聽力初篩未通過者9 307 例（9.1%），有聽力障礙高危因素10 405例（10.1%）。共15 992例（未通過聽力篩查但無聽力障礙高危因素5 587 例，有聽力障礙高危因素但聽力篩查通過6 685 例，既未通過聽力篩查又有聽力障礙高危因素3 720 例）應(yīng)進行聽力復(fù)篩，實際來診10 568 例（66.1%）。10 568例聽力復(fù)篩嬰兒中684例未通過，應(yīng)進行聽力學(xué)診斷，實際完成423例（61.8%），最終確診210例（0.2%）具有不同程度的聽力障礙。

210例聽力障礙患兒中雙耳聾114例，單耳聾96例。雙耳聾組中15例為極重度聾；16例重度聾（雙耳對稱性重度聾6例，一耳極重度、一耳重度聾10例）；20例中度聾（雙耳對稱性中度聾11例，一耳極重度、一耳中度聾5例，一耳重度、一耳中度聾4例）；63例輕度聾（雙耳對稱性輕度聾48例，一耳極重度、一耳輕度聾3例，一耳重度、一耳輕度聾1例，一耳中度、一耳輕度聾11例）。單耳聾組96例患兒中極重度聾36例，重度聾11例，中度聾23例，輕度聾26例。

2.2 耳聾基因檢測

102 570例新生兒中共72 866例進行了耳聾基因篩查，檢出耳聾基因變異3 924例（5.4%），其中單基因純合變異（均質(zhì)變異）146例，單基因復(fù)合雜合變異14例，多基因復(fù)合雜合變異68例，單基因雜合變異（異質(zhì)變異）3 696例。GJB2基因發(fā)生變異3 510例（4.8%），其中235delC位點1 294例，占耳聾基因變異患兒的33.0%；SLC26A4基因發(fā)生變異3 244例（4.5%），其中IVS7-2A→G位點1 039例，占耳聾基因變異患兒的26.5%；GJB3基因發(fā)生變異314例（0.4%），其中538C→T位點263例，占耳聾基因變異患兒的6.7%；線粒體12SrRNA基因發(fā)生變異151例（0.2%），其中1555A→G位點143例，占耳聾基因變異患兒的3.6%。

2.3 不同組間耳聾基因變異率比較

進行聽力學(xué)診斷的423例患兒中，聽力障礙組耳聾基因變異率高于正常組；聽力障礙的210 例患兒中，雙耳聾組的耳聾基因變異率高于單耳聾組；114例雙耳聾患兒中，重度極重度聾組的耳聾基因變異率高于輕中度聾組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。47例耳聾基因變異的聽力障礙患兒中，雙耳聾組純合/復(fù)合雜合變異率高于單耳聾組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表1 不同分組耳聾基因變異率比較

表2 聽力障礙患兒耳聾基因變異類型分析

2.4 隨訪

本中心將210 例聽力障礙患兒轉(zhuǎn)診至康復(fù)機構(gòu)接受后續(xù)的干預(yù)救助管理。截止至2019年12月，通過隨訪獲知有45例患兒佩戴了助聽器并定期進行言語功能訓(xùn)練；28 例患兒暫緩佩戴助聽器，需定期隨診；其他患兒接受臨床醫(yī)學(xué)觀察。

3 討論

天津市聽力篩查和診斷機構(gòu)根據(jù)《新生兒聽力篩查工作規(guī)范和技術(shù)規(guī)范》開展常規(guī)工作。2018年，新生兒聽力篩查初篩未通過率9.1%，聽力損失高危因素占比10.1%。經(jīng)過復(fù)篩和診斷工作，最終確診210 例聽力障礙患兒，新生兒聽力障礙率為0.2%。這與全國新生兒耳聾發(fā)生率報道一致。從全市篩查診斷系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)部分嬰兒由于失訪后續(xù)未完成聽力復(fù)篩和診斷。失訪原因考慮為，①因醫(yī)學(xué)知識匱乏存在認知的誤區(qū)，家長認為兒童在日常生活中有聽覺反應(yīng)即為不聾；②天津欠發(fā)達地區(qū)的復(fù)篩診斷率很低，路途遙遠且后期就診費用等是家長重點關(guān)注的問題。為此，《天津市婦女兒童健康提升計劃（2021—2030年）》針對復(fù)篩和診斷的兒童進行了相應(yīng)費用的減免政策，同時定期指派醫(yī)生深入基層開展聽力復(fù)篩工作，針對家長進行個體化的聽力醫(yī)學(xué)知識的健康教育工作。

兒童最常見的耳聾基因包括GJB 2基因、GJB 3基因、SLC26A4、線粒體12SrRNA基因。2012年天津市開展新生兒常見耳聾基因篩查項目，在國內(nèi)率先開展4 個基因20 位點的篩查。本研究發(fā)現(xiàn)天津地區(qū)新生兒耳聾基因變異率為5.4%，高于國內(nèi)其他地區(qū)的報道[4-7]。一方面天津市開展的耳聾基因篩查包括4 個基因20 個位點，比國內(nèi)其他地區(qū)篩查更加全面；另一方面新生兒耳聾基因變異率存在地域流行特點。有研究表明GJB 2基因變異導(dǎo)致了＞50.0%的遺傳性耳聾，且變異位點最多見的是235delC[8]。本研究結(jié)果顯示GJB2變異率為4.8 %，其中235 delC 位點占耳聾基因變異患兒的33.0 %，與我國GJB 2基因變異特點一致。本研究結(jié)果顯示線粒體12 SrRNA 基因變異率為0.2%，針對這部分患兒應(yīng)及時告知家長及母系家族人員終生禁用氨基糖苷類抗生素，避免藥物性耳聾發(fā)生[9]。相關(guān)研究報道GJB2和SLC26A4基因變異所致耳聾以重度或極重度聾為主；GJB2基因變異致聾一般表現(xiàn)為雙耳聾，多呈對稱性；SLC26A4基因變異致聾可呈現(xiàn)雙耳對稱或非對稱性的，聽力障礙程度可有進行性改變[10-11]。本研究中，雙耳聾的耳聾基因變異率高于單耳聾，重度極重度聾基因變異率高于輕中度聾，均符合致聾基因相關(guān)的聽力表型特點。相關(guān)研究表明GJB 2基因純合和雜合突變可導(dǎo)致的不同程度的聽力損傷；SLC26A4基因的純合和復(fù)合雜合突變多表現(xiàn)重度聾或極重度聾[12-15]。本研究中雙耳聾的純合/復(fù)合雜合變異率高于單耳聾，但不同耳聾程度之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這可能與本研究樣本量較小有關(guān)，將來需要大樣本數(shù)據(jù)進行驗證。

新生兒聽力和耳聾基因聯(lián)合篩查項目開展近十年，已經(jīng)成為天津市耳聾三級預(yù)防最有效的措施。《天津市婦女兒童健康促進計劃衛(wèi)生經(jīng)濟學(xué)評價報告》指出新生兒聽力篩查項目成本效益比為1:23.9，具有良好的社會經(jīng)濟學(xué)效益。