子宮內(nèi)膜癌組織中Bcl-2、Bmi-1的表達(dá)情況及臨床意義

周 璐 劉亞楠 靳曉冬

子宮內(nèi)膜癌(endometrial cancer)作為常見的婦科惡性腫瘤，已呈現(xiàn)總體發(fā)病年齡提前和發(fā)病率穩(wěn)步上升的趨勢[1-2]。根據(jù)國家腫瘤中心的數(shù)據(jù)顯示，2015年中國新出現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌病例63 400例，死亡21 800例[3]。大多數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者在早期被診斷出并能得到及時治療，但是有少數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者被發(fā)現(xiàn)已為晚期或發(fā)生復(fù)發(fā)等情況，其治療療效以及預(yù)后均較差，且缺少特效的治療方法，其5年生存率大約為25%～30%[4-5]。BCL-2 是細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白 BCL-2 家族的創(chuàng)始成員，可誘導(dǎo)(促細(xì)胞凋亡)或抑制(抗細(xì)胞凋亡)細(xì)胞凋亡[6]?？沟蛲鯞CL-2被歸類為致癌基因[7]。Bmi-1是 Polycomb Repressive Complex 1(PRC1) 的組成部分，通過組蛋白 H2A 的泛素化影響許多基因的表達(dá)[8]。Bmi-1通過調(diào)節(jié)自身更新和分化，在包括癌癥干細(xì)胞在內(nèi)的干細(xì)胞生物學(xué)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。因此本研究選取了Bcl-2、Bmi-1水平將其與子宮內(nèi)膜癌中的臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)進(jìn)行研究分析，旨在為子宮內(nèi)膜癌確立生物標(biāo)志物的進(jìn)一步研究提供數(shù)據(jù)參考?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2018年8月至2019年8月我院收治的子宮內(nèi)膜癌患者58例。年齡35～70歲，平均(53.21±6.86)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《子宮內(nèi)膜癌診治規(guī)范》[9]中關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)后病理診斷為子宮內(nèi)膜癌，且患者行手術(shù)治療；②患者術(shù)前未行放、化療等其他治療；③患者的臨床資料完整；④患者及家屬已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并患有婦科炎癥患者；②合并其他惡性腫瘤；③合并處于妊娠狀態(tài)患者。

1.2 免疫組化檢測Bcl-2、Bmi-1水平

采用免疫組織化學(xué)檢測Bcl-2、Bmi-1表達(dá)，以鼠抗人Bcl-2、Bmi-1單克隆抗體為一抗，用已知陽性切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照，用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，參考標(biāo)準(zhǔn)，Bcl-2、Bmi-1陽性產(chǎn)物均位于細(xì)胞核，視野中出現(xiàn)粗細(xì)一致的棕黃色為陽性染色，無棕色反應(yīng)為陰性染色。在陽性顆粒密集部位隨機(jī)選取10個200倍視野，計數(shù)每個視野中細(xì)胞的染色情況，取平均值。根據(jù)陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)對其進(jìn)行分級，陰性為陽性細(xì)胞數(shù)<10%；陽性為陽性細(xì)胞數(shù)>10% 。根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)將患者分為Bcl-2陽性組(n=48)和Bcl-2陰性組(n=10)；Bmi-1陽性組(n=52)和Bmi-1陰性組(n=6)。

1.3 收集臨床資料以及隨訪資料

收集患者年齡、性別、組織學(xué)分級、腫瘤最大徑等臨床資料。采用電話及門診或住院復(fù)查等方式進(jìn)行隨訪2年，了解患者生存情況。隨訪時間截止 2021 年8月。根據(jù)隨訪結(jié)果將患者分為死亡組(n=22)和生存組(n=36)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 Bcl-2、Bmi-1表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

Bcl-2表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度無相關(guān)性(P均>0.05)，與臨床分期以及浸潤深度有關(guān)(P均<0.05)；Bmi-1表達(dá)與臨床分期、浸潤深度、分化程度無關(guān)(P均>0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，具體見表1。

表1 Bcl-2、Bmi-1表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系/例

2.2 生存組與死亡組Bcl-2、Bmi-1表達(dá)情況比較

生存組的Bcl-2、Bmi-1表達(dá)水平明顯低于死亡組(P<0.05)，見表 2。

表2 生存組與死亡組 Bcl-2、Bmi-1表達(dá)情況比較/例

2.3 影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后多因素logistic分析

多因素logistic 回歸分析顯示，Bcl-2、Bmi-1均為影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨立危險因素(P<0.05)， 見表3。

表3 影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的多因素logistic分析

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是一種女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率逐年上升[10]。一般分為兩類，一種是激素依賴型，占大多數(shù)，術(shù)后預(yù)后較好，一種是非激素依賴型，術(shù)后易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或腫瘤復(fù)發(fā)，死亡率高，臨床化療多以鉑類藥物為主[11-12]。子宮內(nèi)膜癌是臨床常見的女性生殖道惡性腫瘤，發(fā)病率在近年來呈不斷上升的趨勢，一般在50～70歲年齡段高發(fā)，且有年輕化發(fā)展的趨勢[13]。在我國，每年子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率為0.634%，病死率為0.218%[14]。手術(shù)為主的綜合治療可提高子宮內(nèi)膜癌患者生存率，但侵襲或轉(zhuǎn)移者仍預(yù)后不良[15]。癌癥的發(fā)生為多機(jī)制、多因素的復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生被認(rèn)為是一個多步驟的過程，涉及激素調(diào)節(jié)、基因突變、粘附分子和細(xì)胞凋亡的協(xié)調(diào)相互作用，但是目前子宮內(nèi)膜癌確切的病理機(jī)制尚未明確[16-18]。 臨床上子宮內(nèi)膜癌患者一般首選手術(shù)治療，常配合化療聯(lián)合治療[19]。然而患者在化療過程中易出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)，治療依從性有所降低，從而對治療效果產(chǎn)生了一定的影響[20]。

BCL-2 是細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白 BCL-2 家族的創(chuàng)始成員，已被證明會導(dǎo)致多種癌癥，包括淋巴瘤[21]。有研究表明，BCL-2 的破壞會導(dǎo)致細(xì)胞死亡[22]。已知BCL-2也參與了化療藥物耐藥性的發(fā)展，進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了靶向BCL-2的重要性癌癥治療中的基因[23]。Bmi-1 是一種多梳基因家族成員，在細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞永生化和細(xì)胞衰老中起著重要作用[24]。近年來，大量研究表明Bmi-1參與了干細(xì)胞自我更新和分化的調(diào)控[25]。Bmi-1參與細(xì)胞過程，如 DNA 修復(fù)、增殖、生長、衰老和細(xì)胞凋亡[26]。Bmi-1通過調(diào)節(jié)自身更新和分化，在包括癌癥干細(xì)胞在內(nèi)的干細(xì)胞生物學(xué)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[27]。越來越多的研究證明，Bmi-1在許多人類癌癥中的過度表達(dá)與疾病進(jìn)展和治療失敗相關(guān)[28]。研究證實了 Bmi-1 參與了腫瘤的發(fā)生以及侵襲、轉(zhuǎn)移和化學(xué)抗性[29]。本研究中Bcl-2與臨床分期以及浸潤深度有關(guān)， Bcl-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。 Bcl-2、Bmi-1 在誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌的同時，還參與侵襲轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程，加快疾病的進(jìn)展。生存組的Bcl-2、Bmi-1表達(dá)水平明顯低于死亡組。多因素logistic 回歸分析顯示，Bcl-2、Bmi-1均為影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨立危險因素。這提示其和子宮內(nèi)膜癌預(yù)后有一定關(guān)系，通過測定其表達(dá)情況能夠輔助預(yù)后的評價。

綜上，本研究證實了Bcl-2、Bmi-1 水平與子宮內(nèi)膜癌患者的病理參數(shù)的關(guān)系以及對化療耐藥預(yù)測的價值評估，為了未來尋求一種有效與子宮內(nèi)膜癌相關(guān)的生物標(biāo)志物提供了的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。然而本研究由于樣本量少以及中心單一等不足對研究結(jié)果存在一定的偏移，在未來的研究中需要更具前瞻性以及擴(kuò)大樣本量，來對結(jié)果進(jìn)一步完善。