牛口蹄疫的診斷與防控

翟 艷

貴州省畢節(jié)市七星關(guān)區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州畢節(jié) 551700

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人畜共患傳染病，偶蹄獸最易感。其臨床癥狀主要表現(xiàn)為口黏膜、身體四肢下部和胸部等處的皮下產(chǎn)生水皰和爛斑?？谔阋咭驯籓IE（世界動(dòng)物衛(wèi)生組織）確認(rèn)為A 類動(dòng)物疾病，且一直以來把口蹄疫病列入發(fā)病前必須報(bào)告的A 類動(dòng)物疾病名錄之首，我國將其作為一類傳染病。

口蹄疫病在全世界范圍傳播，特別是歐、亞、非、南美洲地區(qū)最為嚴(yán)重，在我國及周邊國家疫情也十分嚴(yán)峻。成年動(dòng)物感染，一般呈良性經(jīng)過，死亡率較低，但是幼齡動(dòng)物感染，往往發(fā)生惡性口蹄疫，死亡率最高可達(dá)100%?？谔阋卟“? 個(gè)主型、80余個(gè)亞型，主型相互之間無交叉免疫，而亞型相互之間則有交叉免疫，我國主要是A、O 和亞洲I 型，口蹄疫主要通過空氣傳播，呈跳躍式、直線式流行，此種傳播方式可以使口蹄疫從一個(gè)地區(qū)傳播到很遠(yuǎn)的非疫區(qū)，造成口蹄疫的大流行。

1 臨床癥狀

口蹄疫潛伏期長短不一，最長可達(dá)2 周，最短僅2 d。病畜體溫升高，最高達(dá)41 ℃，全身癥狀明顯，并伴有大量流涎、開口時(shí)有吮吸聲；發(fā)病1 d 后唇內(nèi)、口、舌面等黏膜起瘡，起初黃豆大小，此為一期水皰，隨著病情發(fā)展，水皰融合，大小有核桃大，顏色也由原來的淡黃轉(zhuǎn)為灰白色，此時(shí)口掛白沫，像極胡須。2 d 后，水皰完全破潰，破潰處形成紅色潰瘍，體溫恢復(fù)正常。當(dāng)口腔發(fā)生水皰后，趾間和蹄冠的柔嫩部位會(huì)產(chǎn)生水皰，此為二期水皰，二期水皰很快破潰，繼而逐漸痊愈。有些患畜乳頭皮膚上也可見水皰。一般患病動(dòng)物呈良性經(jīng)過，7 d 后可以痊愈；如果蹄部有病變，病程會(huì)有所延長，14～21 d或者更長時(shí)間；病死率較低，一般在1%～2%，該病型叫良性口蹄疫。原發(fā)部位水皰出現(xiàn)1～2 d 后，蹄、乳房皮下等其他部位開始出現(xiàn)水皰，并很快破潰，形成糜爛，大約1 周愈合。如發(fā)生繼發(fā)感染，則有跛行，若有化膿性細(xì)菌感染，可引起化膿，嚴(yán)重的造成蹄匣脫落，此現(xiàn)象稱為“脫靴”，再嚴(yán)重者還可見蹄部變形，無法站立，常臥地不起。

惡性口蹄疫，病死率可達(dá)50%。惡性口蹄疫病牛一般是患牛在病情好轉(zhuǎn)過程中，病情突然惡化，表現(xiàn)虛弱、肌肉顫抖、心跳加速、心率不齊、食欲廢絕、反芻停止、站立不穩(wěn)、行走搖擺，最后常由于心肌炎導(dǎo)致的心臟麻痹而突然死亡。惡性口蹄疫往往發(fā)生在犢牛，犢牛主要表現(xiàn)為出血性腸炎、心肌麻痹。

2 診 斷

2.1 分子生物學(xué)診斷

隨著科技的發(fā)展，分子生物學(xué)診斷技術(shù)也得到了快速發(fā)展，針對口蹄疫診斷，分子生物學(xué)方法可以采用核酸雜交、RT-PCR 等技術(shù)，診斷更加簡便、快捷和敏感。

核酸雜交技術(shù)：從病牛身上采集病料，提取遺傳物質(zhì)，將獲取的遺傳物質(zhì)通過電泳固定在硝酸纖維素膜上，利用生物素與DNA 克隆片段進(jìn)行標(biāo)記與雜交，通過氫鍵作用把不能融合的探針洗去，進(jìn)而得到結(jié)合明顯的探針顯影。最后，利用芯片掃描技術(shù)，讀取標(biāo)記的遺傳物質(zhì)，對讀取的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，從而確定病毒株的基因型和血清型[1]。

RT-PCR 技術(shù)：首先，從病毒牛身上采取病料，提取口蹄疫病毒基因RNA，由于RNA 提取對操作人員的要求較高，需特別注意操作流程，避免污染致使RNA 被酶分解，導(dǎo)致提取失敗，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。根據(jù)口蹄疫病毒基因序列，設(shè)計(jì)引物，合成引物，根據(jù)所擴(kuò)增基因大小、引物情況，設(shè)計(jì)RT-RNA 參數(shù)，利用RT-PCR 儀進(jìn)行擴(kuò)增，對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳，比對擴(kuò)增產(chǎn)物大小，從而確定是否為口蹄疫病。

2.2 血清學(xué)診斷

對于口蹄疫病毒毒型的鑒定可以采用血清學(xué)試驗(yàn)法，利用鑒定毒性對于現(xiàn)階段流行毒株可以有針對性地選用同型口蹄疫疫苗，進(jìn)行緊急免疫接種。常用的血清學(xué)試驗(yàn)有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）、微量補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、（乳鼠病毒）中和試驗(yàn)（NT）、免疫擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)（IDPT）、熒光抗體技術(shù)等。近年來，OIE 推薦的間接夾心ELISA 在國際貿(mào)易中廣泛使用，在數(shù)小時(shí)內(nèi)可獲得試驗(yàn)結(jié)果。因?yàn)槊庖呓臃N動(dòng)物3ABC 抗體呈陰性，而感染動(dòng)物3ABC 抗體則呈陽性，若要區(qū)分感染動(dòng)物和免疫接種動(dòng)物，可通過檢測血清中口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC 抗體情況[2]。

2.3 動(dòng)物接種

接種試驗(yàn)動(dòng)物，需要選取2～7 日齡純系乳小鼠，也可選用豚鼠或乳兔進(jìn)行試驗(yàn)接種，選擇其頸背部皮下接種法，接種病毒感染液0.2 mL，若接種后的小鼠在20～30 h 出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)不靈活，用鑷子夾住尾巴或四肢，其已失去知覺，隨著病情發(fā)展，四肢麻痹，呼吸急促，最終死亡，可以確診為口蹄疫。對于瀕死期或新死乳小鼠，可以采集骨骼肌，研磨搗碎，制成10%的病料懸液，可用于傳代接種和鑒定。

3 防控措施

3.1 非疫區(qū)的預(yù)防措施

非疫區(qū)的牛群應(yīng)做好平時(shí)的飼養(yǎng)管理，保持舍內(nèi)衛(wèi)生干凈，制定好平時(shí)消毒計(jì)劃，定期清掃消毒，盡量減少應(yīng)激，避免影響牛群健康。如引種或者其他需要引進(jìn)牲畜，嚴(yán)禁從疫區(qū)或者曾經(jīng)發(fā)生過口蹄疫的國家或地區(qū)引進(jìn)動(dòng)物或動(dòng)物產(chǎn)品，即使引進(jìn)動(dòng)物或動(dòng)物產(chǎn)品為非疫區(qū)，也需要進(jìn)行隔離、檢測，確保為陰性或者非患病動(dòng)物才可混群，如果在隔離或者檢疫過程中發(fā)現(xiàn)陽性病例，需要及時(shí)撲殺并上報(bào)，將動(dòng)物尸體進(jìn)行無害化處理，對于運(yùn)載工具或者被污染的其他物品，必須就地嚴(yán)格消毒，經(jīng)檢測合格方可使用。

3.2 口蹄疫流行區(qū)的預(yù)防措施

對于口蹄疫流行區(qū)，應(yīng)堅(jiān)持免疫接種，免疫接種前需要鑒定當(dāng)?shù)亓餍锌谔阋叩念愋?，確定病型后選擇疫苗。目前，口蹄疫疫苗有滅活苗、合成肽苗，口蹄疫滅活苗應(yīng)用較廣，選擇當(dāng)?shù)亓餍卸局晖偷目谔阋邷缁蠲缃臃N動(dòng)物后，需要定期檢測抗體水平，對于漏免動(dòng)物需要及時(shí)補(bǔ)免，對于不宜免疫的動(dòng)物，當(dāng)其恢復(fù)健康時(shí)需及時(shí)免疫，從而提高群體免疫水平。免疫接種的目的是為了建立免疫帶，防止疫情擴(kuò)散。

針對不同性別、不同用途的牛，其免疫接種程序不同。針對種公牛、后備牛，每半年免疫1 次，注射方式采用肌肉注射；針對生產(chǎn)母牛，在其生產(chǎn)前3個(gè)月肌肉注射滅活苗；犢牛，4、5 月齡首免，間隔半年加強(qiáng)免疫，以后每間隔半年免疫接種1 次[3]。

對于口蹄疫流行區(qū)，牛的圈舍、場地和抗腐蝕的用具均需要用2%燒堿液或者10%石灰乳潑灑消毒；動(dòng)物排出的糞便，最好選用酚類消毒藥進(jìn)行徹底消毒或者堆積發(fā)酵后再處理；對于口蹄疫流行區(qū)內(nèi)的動(dòng)物皮毛需要利用甲醛熏蒸消毒，經(jīng)檢疫無問題后才可使用；對于肉品需要自然產(chǎn)酸熟化或者采用2%乳酸消毒處理。

3.3 發(fā)病時(shí)的防控措施

當(dāng)牛群發(fā)生口蹄疫時(shí)，疫情需要在第一時(shí)間上報(bào)，不能超過24 h，以免耽誤疫情。確定疫情后，立即劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)，按“早、快、嚴(yán)、小”的原則，立即采取封鎖、隔離、檢疫、消毒等措施。撲殺疫點(diǎn)疫區(qū)內(nèi)所有易感動(dòng)物，撲殺后尸體進(jìn)行無害化處理，被污染的工具、飼料、墊草等均需嚴(yán)格按照要求就地處理，對于受威脅區(qū)易感動(dòng)物可以采用康復(fù)血清或高免血清進(jìn)行接種，也可以采用緊急免疫方式建立免疫帶以防疫情擴(kuò)散。當(dāng)疫區(qū)內(nèi)最后1 頭患病動(dòng)物痊愈或者死亡、撲殺后，連續(xù)觀察14 d 后未出現(xiàn)新的病例，且檢測無陽性病例，經(jīng)終末消毒，采樣檢測無問題，經(jīng)申請，原封鎖單位可解除封鎖。

3.4 口蹄疫的治療

對于感染口蹄疫的患病動(dòng)物不允許治療，應(yīng)就地?fù)錃?，并對尸體與糞便進(jìn)行無害化處理。但對于某些珍貴種用動(dòng)物或其他特殊情況，可經(jīng)報(bào)批后在嚴(yán)格隔離的條件下予以治療。

4 結(jié)語

養(yǎng)牛業(yè)是當(dāng)前熱門的畜牧養(yǎng)殖種類，且每頭牛經(jīng)濟(jì)價(jià)值較大，可為養(yǎng)牛戶帶來較為豐厚的經(jīng)濟(jì)收益，但是一旦發(fā)生口蹄疫，不僅給養(yǎng)牛業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失，還會(huì)影響經(jīng)濟(jì)貿(mào)易。養(yǎng)牛人員應(yīng)加強(qiáng)對口蹄疫的防控意識，積極落實(shí)口蹄疫防控工作，采取綜合防控措施，配合政府做好口蹄疫疫苗接種工作，從而保障牛群健康，防止?？谔阋叩陌l(fā)生和傳播，減少經(jīng)濟(jì)損失。