仔豬亞硝酸鹽急性中毒致死劑量的探究

陳德純，吉文匯，黃 堅(jiān)，湯 承*

（1.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610041；2.動(dòng)物醫(yī)學(xué)四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041）

亞硝酸鹽普遍用于食品加工等行業(yè)［1］。機(jī)體攝入過量亞硝酸鹽，會(huì)影響血紅蛋白運(yùn)輸氧的過程，亞硝酸鹽在機(jī)體中可以把氧合血紅蛋白氧化為高價(jià)鐵血紅蛋白，失去運(yùn)輸氧氣的功能，最終導(dǎo)致各組織器官缺氧［2］，出現(xiàn)頭暈、昏迷甚至休克等反應(yīng)，可因呼吸衰竭致死［3］。常有人誤食亞硝酸鹽中毒的報(bào)道［4］，中毒后的臨床表現(xiàn)有頭暈、心悸、嘔吐、腹瀉等癥狀。亞硝酸鹽中毒也多發(fā)生于豬，偶有牛、馬、羊等家畜發(fā)生［5-6］。目前，關(guān)于仔豬亞硝酸鹽中毒的已有一些報(bào)道，但關(guān)于不同劑量引發(fā)亞硝酸鹽中毒的臨床表現(xiàn)和救治效果的研究較少。本試驗(yàn)通過復(fù)制仔豬低劑量亞硝酸鹽（0.25 g/kg）和高劑量亞硝酸鹽（0.50 g/kg）中毒模型，來探究豬亞硝酸鹽中毒的發(fā)生發(fā)展情況，為防治亞硝酸鹽中毒提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)分組 仔豬45頭，分為三組：試驗(yàn)組低劑量組（0.25 g/kg 亞硝酸鈉），高劑量組（0.50 g/kg亞硝酸鈉）和對(duì)照組（等體積的生理鹽水），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只。

1.2 試劑 分析純亞硝酸鈉（純度99.0%，成都市科龍化工試劑廠），亞甲藍(lán)注射液（哈爾濱生物制品二廠有限責(zé)任公司），維生素C注射液，0.9%生理鹽水注射液，犬眠寶注射液。

1.3 臨床體征觀測(cè) 先對(duì)仔豬進(jìn)行系統(tǒng)的檢查，包括呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)等的系統(tǒng)檢查。測(cè)量仔豬安靜狀態(tài)下的體溫、脈搏、呼吸數(shù)和體重，觀察仔豬的可視黏膜及耳血管的顏色，口腔唾液和精神狀態(tài)，采食和飲水情況，糞便和尿液狀況，口腔唾液量和肛門外周分泌物等。

1.4 中毒模型復(fù)制 將亞硝酸鈉用生理鹽水配制成30%溶液濃度。低劑量組按每千克體重0.25 g/kg 灌服，高劑量組按每千克體重0.50 g/kg灌服，對(duì)照組灌服等體積的生理鹽水。保定者雙手擒住豬的耳朵，右肘夾緊仔豬胸腹。術(shù)者從仔豬嘴角或口腔正中持灌藥器將亞硝酸鈉溶液注入豬的口腔深部，另一只手撫摸其咽部促使其吞咽。記錄灌服時(shí)間，并隨時(shí)觀察仔豬的臨床癥狀如呼吸方式、呼吸數(shù)和精神狀態(tài)等。

1.5 中毒的解救 各組隨機(jī)選取2只仔豬，待仔豬出現(xiàn)中毒癥狀的時(shí)候，助手用手指壓迫豬耳基部阻塞血液流通，使血管充盈怒張，注射者左手抓住豬耳，以10°～15°的角度向近心端刺入血管，如有回血，表示針頭已刺入血管，此時(shí)放開耳根部，按每千克體重0.2 mL緩慢注入亞甲藍(lán)注射液，同時(shí)肌注維生素C注射液6 mL。觀察并記錄解救效果。

1.6 仔豬的剖檢 試驗(yàn)組仔豬因高度呼吸困難窒息而死后，立刻進(jìn)行剖檢；對(duì)照組仔豬先用“犬眠寶”麻醉后，心臟注射飽和氯化鉀溶液進(jìn)行安樂死，隨后剖檢。

1.7 數(shù)據(jù)分析 用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用單因素方差分析各組間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 生理體征變化 在灌服亞硝酸鈉前后，檢測(cè)試驗(yàn)組和對(duì)照組仔豬的體溫、心率、呼吸數(shù)等情況（詳見表1）。

表1 各組仔豬攻毒前后生理體征對(duì)比

2.2 試驗(yàn)組仔豬發(fā)病情況（表2）低劑量試驗(yàn)組在灌服亞硝酸鈉溶液后1.5～2 h發(fā)病，口吐白沫，多次嘔吐，精神沉郁，呈祈禱姿勢(shì)有腹痛的表現(xiàn)，后喜臥，逐漸站立不穩(wěn)，倒地，呼吸困難，呼吸和心率增加。仔豬出現(xiàn)劃水樣姿勢(shì)，神經(jīng)癥狀明顯，出現(xiàn)腹瀉排便、排尿5～7 次。眼結(jié)膜顏色由粉紅色逐漸變白，耳根部和鼻盤由粉色轉(zhuǎn)為藍(lán)紫色，呼吸呈深而大的節(jié)律，耳、鼻、四肢厥冷，肌肉戰(zhàn)栗，末期出現(xiàn)強(qiáng)直性痙攣，窒息而死。

表2 仔豬發(fā)病時(shí)間和主要臨床癥狀

高劑量試驗(yàn)組仔豬的發(fā)病時(shí)間在35～60 min，灌服亞硝酸鈉后最早出現(xiàn)的是神經(jīng)癥狀，初期正常覓食，不久即站立不穩(wěn)，共濟(jì)失調(diào)，步態(tài)蹣跚，由短時(shí)間的精神興奮立刻轉(zhuǎn)為精神抑制。眼結(jié)膜變白，鼻、口腔黏膜、耳根部轉(zhuǎn)為藍(lán)紫色。心跳急速而亢進(jìn)，呼吸加快，后轉(zhuǎn)為深呼吸。倒地不起，呈劃水樣姿勢(shì)，抽搐，角弓反張，四肢厥冷，眼結(jié)膜變?yōu)樗{(lán)紫色，肌肉戰(zhàn)栗，強(qiáng)直性痙攣，庫斯茂爾氏呼吸，迅速死亡。

低、高劑量試驗(yàn)組出現(xiàn)中毒癥狀的時(shí)間差異較大，同組豬只同時(shí)或相繼發(fā)生。低劑量試驗(yàn)組仔豬在灌服亞硝酸鈉2 h 內(nèi)相繼出現(xiàn)癥狀，中毒發(fā)生時(shí)間比高劑量試驗(yàn)組的長(zhǎng)。對(duì)照組仔豬用生理鹽水灌胃后行為正常，未出現(xiàn)明顯異常。

2.3 解救后的臨床癥狀 低劑量組仔豬在神經(jīng)癥狀明顯的時(shí)候，從耳靜脈推注亞甲藍(lán)注射液，5～10 min后仔豬呼吸困難有所緩解，后精神狀態(tài)逐漸好轉(zhuǎn)，約20min后排出淡藍(lán)色尿液。40min后心率、呼吸等生命體征逐漸恢復(fù)正常，食欲恢復(fù)。

高劑量組仔豬從發(fā)病到死亡的時(shí)間較短，發(fā)病急，救助效果一般，均死亡。

2.4 剖檢病理變化 與對(duì)照組相比，低劑量和高劑量試驗(yàn)組仔豬的血液呈暗紅褐色醬油狀，凝固不良，氣管黏膜有泡沫狀出血；對(duì)照組仔豬的肺部未見異常，試驗(yàn)組仔豬的肺臟發(fā)生水腫，充血，甚至有出血斑；對(duì)照組仔豬的胃底黏膜未見異常，試驗(yàn)組仔豬的胃底黏膜大面積充血、脫落；對(duì)照組仔豬的脾臟未見異常，試驗(yàn)組仔豬的脾臟、肝臟和腎臟呈紫黑色，心外膜上有出血點(diǎn)。

3 討論

亞硝酸鹽主要從氧化作用和擴(kuò)張血管兩個(gè)方面引發(fā)機(jī)體損傷。首先，亞硝酸鹽使血液中的二價(jià)鐵血紅蛋白氧化成三價(jià)鐵血紅蛋白［7］，這種轉(zhuǎn)化是可逆的，少量亞硝酸鹽引發(fā)的高鐵血紅蛋白數(shù)量較少時(shí)，機(jī)體可自行解毒，但當(dāng)約30%以上的高鐵血紅蛋白存在時(shí)，仔豬就表現(xiàn)出明顯的中毒癥狀［8］，當(dāng)高鐵血紅蛋白濃度達(dá)60%～70%時(shí)就會(huì)引起死亡，且病程發(fā)展較快，死亡率高。因高價(jià)鐵血紅蛋白不能輸送氧，且抑制氧合血紅蛋白釋放氧，阻礙氧的輸送和利用，從而引發(fā)全身組織器官缺氧［9］。其次，亞硝酸鹽使仔豬末梢血管發(fā)生擴(kuò)張而導(dǎo)致血壓下降，外周循環(huán)衰竭，這是仔豬耳鼻、四肢等發(fā)生厥冷的原因。亞硝酸鹽對(duì)消化道具有強(qiáng)烈的刺激作用，導(dǎo)致低劑量組和高劑量組仔豬的胃底黏膜均發(fā)生大面積充血、出血，胃黏膜脫落。低劑量組仔豬出現(xiàn)流涎、口吐白沫、嘔吐、腹痛、腹瀉等癥狀。

有研究表明，攝入0.2 g以上的亞硝酸鹽就可引發(fā)中毒，3 g以上則可致死亡［10］。生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)仔豬亞硝酸鹽中毒應(yīng)重在預(yù)防，改善青綠飼料的加工和堆放方式，青綠飼料盡量生喂，不宜放置過久，生、熟青綠飼料應(yīng)攤開敞放，避免長(zhǎng)期堆放；避免采割施用重氮肥或農(nóng)藥的青飼料，減少硝酸鹽或亞硝酸鹽的攝入；避免攝入含硝酸鹽較多的田水或青草漚肥的坑水。

4 結(jié)論

本研究復(fù)制了仔豬亞硝酸鹽中毒模型，低劑量組仔豬灌服亞硝酸鈉后的發(fā)病時(shí)間較高劑量組時(shí)間長(zhǎng)，最先出現(xiàn)消化系統(tǒng)癥狀如流涎、嘔吐、腹瀉等；高劑量組仔豬最初表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀，如站立不穩(wěn)、共濟(jì)失調(diào)等。低劑量組可被特效解救藥亞甲藍(lán)成功救治，而高劑量組發(fā)病較快難以解救。尸體剖檢發(fā)現(xiàn)低、高劑量組仔豬的血液呈暗褐色，凝固不良；胃底黏膜充血、出血和脫落；肝腎臟呈褐色；心包膜有出血斑；肺臟充血、出血。研究結(jié)果表明，0.25 g/kg劑量的亞硝酸鈉即可導(dǎo)致仔豬急性中毒和死亡。