孟魯司特鈉聯(lián)合益生菌對嗜酸性粒細(xì)胞性胃腸炎患兒肥大細(xì)胞數(shù)量和IL-5表達(dá)量的影響

董自娟 陳欣濤 呂貞燕▲

1.江蘇省無錫市兒童醫(yī)院兒感染科，江蘇無錫 214000；2.江蘇省無錫市兒童醫(yī)院消化內(nèi)科，江蘇無錫 214000

嗜酸性粒細(xì)胞性胃腸炎（eosinophilic gastroenteritis，EG）屬于自限性變態(tài)反應(yīng)性疾病，臨床可表現(xiàn)為胃腸道黏膜水腫、增厚，局限性或彌漫性嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophils，EOS）浸潤，以排除過敏原、抑制炎癥反應(yīng)、穩(wěn)定肥大細(xì)胞（mast cells，MC）等為治療原則[1]。孟魯司特鈉屬于白三烯受體拮抗劑，作為非激素類的抗炎藥，在臨床上常用于治療哮喘病。高玨雅[2]提出孟魯司特鈉對于治療EG有一定的療效，但在緩解癥狀的同時存在一定的副作用。益生菌可提高人體免疫力，維持腸道平衡，且安全性較高[3]。目前臨床尚未有關(guān)于兩藥聯(lián)合用于小兒EG及對其血清炎性因子及MC影響的研究報道，為提高EG患兒的治療效果，本研究探討孟魯司特鈉聯(lián)合益生菌對EG患兒MC數(shù)量和白介素-5（interleukin-5，IL-5）表達(dá)量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取無錫市兒童醫(yī)院2019年1月至2022年2月收治入院的84例EG患兒作為研究對象，根據(jù)不同治療方式將其分為對照組和試驗組。對照組42例，其中男女比例為26：16，年齡3～10歲，平均（4.54±0.27）歲；病程0.4～7個月，平均（3.26±0.96）個 月；平 均 體 重 指 數(shù)（body mass index，BMI），平 均（15.02±0.95）kg/m2。試 驗 組42例，其中男女比例為28∶14，年齡4～9歲，平均（4.61±0.22）歲；病程0.3～7個月，平均（3.18±0.91）個月；平均BMI（15.08±0.87）kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合Talley對EG的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②伴有腹痛、腹瀉和嘔吐等臨床癥狀；③年齡均＜12歲；④家屬對本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①對本研究藥物過敏者；②合并嚴(yán)重免疫系統(tǒng)和血液系統(tǒng)疾病者；③合并其他重大疾病或惡性腫瘤者；④合并心、肝、腎功能不全者；⑤不愿參與研究或中途退出者。兩組患兒一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過（ZXLS第62號）。

1.2 方法

兩組均連續(xù)治療4周，根據(jù)患兒病情的緩解程度，酌情減少劑量。治療期間采用以氨基酸為主的要素飲食，避免進(jìn)食過敏性食物。

1.2.1 對照組 予以孟魯司特鈉咀嚼片（杭州默沙東制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字J20130054；規(guī)格：5 mg/片）睡前口服，5 mg/d。

1.2.2 試驗組 在對照組的基礎(chǔ)上增加雙歧桿菌四聯(lián)活菌片（杭州遠(yuǎn)大生物制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字S20060010；規(guī)格：0.5 g/片）口服，1.5 g/次，3 次/d。

1.3 癥狀消失時間

比較兩組腹瀉、嘔吐和發(fā)熱癥狀消失時間。

1.4 血清免疫指標(biāo)檢測方法

治療前和治療4周后，抽取兩組晨起空腹靜脈血約3～4 ml，高速離心后得到血清。采用夾心法酶聯(lián)免疫吸附法分析IL-5水平；采用免疫比濁法分析免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）水平。

1.5 EOS和MC數(shù)量檢測方法

治療前和治療4周后，經(jīng)家屬同意，在全身麻醉胃鏡下取兩組胃竇黏膜組織。采用HE染色法在200倍顯微鏡下，取視野內(nèi)隨機(jī)10個EOS數(shù)量，密度取其平均值；采用甲苯胺藍(lán)染色法在400倍顯微鏡下取視野內(nèi)隨機(jī)10個MC數(shù)量，密度取其平均值。

1.6 腸道菌群檢測方法

治療前和治療4周后，收集兩組大便標(biāo)本。加入生理鹽水稀釋后，在恒溫環(huán)境下，置于培養(yǎng)基上，細(xì)菌培養(yǎng)24～36 h，采用定性定量法檢測乳酸桿菌、腸球菌等菌群數(shù)量。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS 21.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間及組內(nèi)比較采用t檢驗；計數(shù)資料用[n（%）]表示，組間、組內(nèi)比較采用χ2檢驗。P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組癥狀消失時間比較

試驗組嘔吐消失時間、腹瀉消失時間和發(fā)熱消失時間均短于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表1。

表1 兩組癥狀消失時間比較（d，±s）

表1 兩組癥狀消失時間比較（d，±s）

組別 n 嘔吐消失時間 腹瀉消失時間 發(fā)熱消失時間對照組42 2.74±0.95 3.61±1.16 4.76±1.29試驗組42 2.29±0.51 2.95±0.81 4.18±0.86 t值 2.704 3.023 2.424 P值 0.008 0.003 0.015

2.2 兩組血清免疫指標(biāo)比較

治療4周后，兩組IL-5和IgE指標(biāo)水平明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），試驗組IL-5和IgE指標(biāo)水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）；兩組IgM指標(biāo)水平明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），試驗組IgM指標(biāo)水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表2。

表2 兩組血清免疫指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組血清免疫指標(biāo)比較（±s）

注 IL-5：白介素-5；IgE：免疫球蛋白E；IgM：免疫球蛋白M；與同組治療前比較，*P＜ 0.05

組別 n IL-5（ng/L） IgE（IU/ml） IgM（g/L）治療前 治療4周后 治療前 治療4周后 治療前 治療4周后對照組 42 53.26±14.24 42.48±12.49* 142.28±31.25 105.29±24.54* 0.78±0.24 0.98±0.30*試驗組 42 53.59±14.51 34.29±10.51* 140.54±29.61 94.81±22.51* 0.80±0.25 1.15±0.42*t值 0.105 3.251 0.261 2.039 0.374 2.134 P值 0.916 0.002 0.794 0.044 0.709 0.032

2.3 兩組EOS和MC數(shù)量比較

治療4周后，兩組EOS和MC數(shù)量明顯少于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）；試驗組EOS和MC數(shù)量明顯少于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表3。

表3 兩組EOS和MC數(shù)量比較（個/HPF，±s）

表3 兩組EOS和MC數(shù)量比較（個/HPF，±s）

注 EOS：嗜酸性粒細(xì)胞；MC：肥大細(xì)胞；與同組治療前比較，*P＜ 0.05

組別 n EOS MC治療前 治療4周后 治療前 治療4周后對照組4235.26±10.28 6.11±1.12* 14.51±3.28 5.59±2.51*試驗組4235.64±10.19 5.26±1.25* 15.08±3.14 4.29±1.29*t值 0.170 3.282 0.813 2.985 P值 0.864 0.002 0.418 0.004

2.4 兩組腸道菌群數(shù)量比較

治療4周后，兩組雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）；兩組腸球菌和大腸埃希菌數(shù)量明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）；試驗組雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）；試驗組腸球菌和大腸埃希菌數(shù)量明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表4。

表4 兩組腸道菌群數(shù)量比較（cfu/g，±s）

表4 兩組腸道菌群數(shù)量比較（cfu/g，±s）

注 與同組治療前比較，*P ＜ 0.05

組別 n 雙歧桿菌 乳酸桿菌 腸球菌 大腸埃希菌治療前 治療4周后 治療前 治療4周后 治療前 治療4周后 治療前 治療4周后對照組 42 7.15±2.05 8.26±2.15* 6.48±1.29 8.27±2.27* 9.48±2.61 7.85±2.18* 10.39±3.24 8.84±2.61*試驗組 42 7.12±2.09 9.51±2.34* 6.54±1.50 9.69±2.84* 9.53±2.75 6.64±1.53* 10.50±3.38 7.29±2.48*t值 0.066 2.549 0.196 2.531 0.085 2.944 0.152 2.790 P值 0.947 0.012 0.844 0.013 0.932 0.004 0.879 0.007

3 討論

目前，EG的發(fā)病原因尚不明確，已知可能與過敏反應(yīng)、免疫功能障礙等有關(guān)[5]。通過積極治療后，雖然有一定的復(fù)發(fā)概率，但預(yù)后效果良好，且暫無病變病例相關(guān)報道[6]。在治療上，一方面可控制過敏性食物的攝入，如含蛋白質(zhì)較高的牛奶、雞蛋、魚蝦等[7]；另一方面進(jìn)行藥物治療，臨床常用的藥物為糖皮質(zhì)激素類，如潑尼松等，這類藥物雖然療效較為明顯，但停藥后復(fù)發(fā)率較高。有臨床數(shù)據(jù)顯示，EG的復(fù)發(fā)率高達(dá)55%，且長期服用糖皮質(zhì)激素類藥物，可能會影響患兒的正常發(fā)育[8]。

有研究得出，在過敏原從外界進(jìn)入人體胃腸道后，可產(chǎn)生特異性IgE抗體與MC表面抗體結(jié)合，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)過敏反應(yīng)。在同種過敏原再次進(jìn)入后，可與胃黏膜過敏表面產(chǎn)生活化反應(yīng)，大量釋放EOS，通過組織浸潤使機(jī)體組織損傷。EOS是免疫反應(yīng)和過敏反應(yīng)過程中的主要細(xì)胞，具有殺傷細(xì)菌的功能[9]。錢淑怡等[10]提出，絕大多數(shù)EG患者在發(fā)病時，EOS呈高表達(dá)狀態(tài)，因此EOS可作為診斷EG的指標(biāo)之一。MC在整個過敏反應(yīng)發(fā)生過程當(dāng)中極為關(guān)鍵，亦可作為診斷指標(biāo)之一[11]。MC在活化后可釋放前列腺素和白三烯等物質(zhì)，IL-5作為其中的細(xì)胞因子之一，可刺激EOS增殖和分裂，引起一系列以黏膜組織損傷為主的臨床癥狀[12]。

孟魯司特鈉屬于白三烯受體拮抗劑，具有抑制和阻斷白三烯進(jìn)行炎性反應(yīng)的作用，臨床上除治療哮喘病外，也常用于治療EG，其耐受性良好，但可能引發(fā)胃腸道不適以及免疫系統(tǒng)紊亂等副作用[13]。雙歧桿菌四聯(lián)活菌片可改善胃腸道內(nèi)環(huán)境，減輕腹瀉、便秘等癥狀。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)治療后試驗組各臨床癥狀消失時間顯著短于對照組，提示孟魯司特鈉與雙歧桿菌四聯(lián)活菌片聯(lián)合用于EG患兒，可明顯改善其臨床癥狀，促進(jìn)疾病恢復(fù)。分析其原因可能是雙歧桿菌四聯(lián)活菌片具有調(diào)節(jié)腸道菌群、加固腸道屏障的作用。此外，經(jīng)治療4周后，兩組EOS和MC數(shù)量明顯少于治療前，推測與孟魯司特鈉可有效抑制EOS的活性有關(guān)。而試驗組EOS和MC數(shù)量明顯少于對照組，提示聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片后，由于輔助用藥降低了孟魯司特鈉的不良反應(yīng)，更大可能發(fā)揮了孟魯司特鈉的藥理作用。

尉佳林等[14]提出，過敏引起的EG患者中，絕大多數(shù)出現(xiàn)IgE指標(biāo)升高的情況。本研究也驗證了這一點(diǎn)，治療前兩組IL-5和IgE指標(biāo)均呈現(xiàn)升高狀態(tài)，經(jīng)治療4周后，兩組指標(biāo)水平均有下調(diào)，試驗組更為顯著。推測孟魯司特鈉聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片治療后，在抑制體內(nèi)炎性反應(yīng)的同時保護(hù)了胃腸道功能有關(guān)。在比較兩組腸道菌群時發(fā)現(xiàn)，經(jīng)治療4周后，試驗組雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量明顯高于對照組，而腸球菌和大腸埃希菌數(shù)量明顯低于對照組（P＜ 0.05）。分析其原因可能是聯(lián)合雙歧桿菌四聯(lián)活菌片可有效促進(jìn)腸道有益菌繁殖，抑制腸道內(nèi)致病菌，維持正常腸道蠕動，從而調(diào)節(jié)腸道菌群[15]。

綜上所述，孟魯司特鈉聯(lián)合益生菌對EG患者M(jìn)C數(shù)量和IL-5表達(dá)量有明顯的抑制作用，可加快臨床癥狀消失，值得推廣應(yīng)用。