T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白在小兒支原體肺炎中的表達(dá)及臨床意義

李翔

（福建省福州市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 福州 350001）

小兒支原體肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP）是指由肺炎支原體（Mycoplasma Pneumoniae，MP）引起的兒童急性呼吸道感染，有一定的自限性，好發(fā)于學(xué)齡前期（3周歲至6～7歲進(jìn)入小學(xué)前）及學(xué)齡期（自入小學(xué)始至青春期）兒童[1]。臨床上以發(fā)熱、咳嗽為主要表現(xiàn)，偶爾伴有心肌損害、溶血性貧血等呼吸系統(tǒng)癥狀，以往多采用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療[2]。由于小兒免疫功能低下，器官發(fā)育尚未完全，因此，一旦發(fā)生MPP會(huì)影響其生長(zhǎng)發(fā)育，嚴(yán)重者可發(fā)展成重癥肺炎和難治性MPP，患兒病情重，病程延長(zhǎng)，且易出現(xiàn)肺內(nèi)外并發(fā)癥，部分還可遺留后遺癥，應(yīng)盡快采取有效針對(duì)性措施抑制其炎癥介質(zhì)，組織機(jī)體免疫過(guò)度反應(yīng)對(duì)自身的破壞，減輕細(xì)胞損傷[3]。近年來(lái)有研究報(bào)道，T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白參與肺炎免疫反應(yīng)與炎癥反應(yīng)的全過(guò)程，且免疫球蛋白在兒科肺炎治療中的作用越來(lái)越重要，可有效改善患兒免疫球蛋白水平，提高臨床治療效果，但目前臨床對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白水平評(píng)估病情程度的研究較少[4]?；诖?，本文主要探討T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白在MPP中的表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年7月至2022年7月本院收治的98例MPP患者作為研究對(duì)象的觀察組，選取同期入院體檢且各項(xiàng)指標(biāo)正常的80例健康兒童作為研究對(duì)象的對(duì)照組，對(duì)他們的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意批準(zhǔn)。觀察組中女42例，男56例；年齡2～10歲，平均5.05±1.48歲；其中輕癥肺炎62例，重癥肺炎36例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；患兒經(jīng)臨床表現(xiàn)、影像學(xué)特征結(jié)合病原學(xué)檢查確診為MPP；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重造血系統(tǒng)疾病和傳染病者；合并心、肺、肝、腎等其他臟器并發(fā)癥者；合并惡性腫瘤和全身感染者；存在認(rèn)知功能障礙和心理問(wèn)題者。對(duì)照組中女37例，男43例；年齡3～11歲，平均6.12±0.79歲。兩組兒童男女比例和年齡分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集觀察組患兒入院時(shí)和對(duì)照組健康兒童體檢時(shí)清晨空腹靜脈血。對(duì)比兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)情況、血清免疫球蛋白水平、炎癥細(xì)胞因子水平。分析觀察組中T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白表達(dá)與疾病嚴(yán)重程度之間的相關(guān)性。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 炎性細(xì)胞因子檢測(cè)

采集清晨空腹靜脈血3 mL，3000 rpm離心10min后收集血清，-20℃冷凍待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）對(duì)血清γ-干擾素（Interferon-γ，IFN-γ）、白細(xì)胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、白細(xì)胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）水平進(jìn)行檢測(cè)

1.3.2 T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)

采集清晨空腹靜脈血2 mL全血，肝素鈉抗凝。采用流式細(xì)胞儀（購(gòu)自BD FACSCanto II流式細(xì)胞儀）檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞水平。

1.3.3 免疫球蛋白檢測(cè)

采集清晨空腹靜脈血3 mL，3000 rpm離心10min后收集血清，-20℃冷凍待檢。采用免疫比濁法對(duì)血清免疫球蛋白G（Immune Globulin G，IgG）、免疫球蛋白A（Immune Globulin A，IgA）、免疫球蛋白M（Immune Globulin M，IgM）水平進(jìn)行檢測(cè)（全自動(dòng)生化分析儀均購(gòu)自深圳國(guó)賽 Aristo全自動(dòng)特定蛋白分析儀）。

1.3.4 相關(guān)性分析

采用Spearman分析觀察組中T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白表達(dá)及T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白水平變化與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性（判斷為相關(guān)的指標(biāo)值）。其中相關(guān)系數(shù)的數(shù)值范圍為[-1，1]；判斷標(biāo)準(zhǔn)為：1為正相關(guān)，-1為負(fù)相關(guān)，0為不相關(guān)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 28.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)情況

兩組CD8+細(xì)胞水平、CD4+/CD8+值均無(wú)明顯差異（P＞0.05），觀察組CD3+、CD4+細(xì)胞水平均明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±SD）

表1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±SD）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

組別 例 348D4+/CD8+對(duì)照組 80 68.29±7.35 38.72±6.30 24.38±5.79 41.53±0.30觀察組 98 62.56±6.45a 33.54±5.82a 25.84±5.61 41.40±0.35

2.2 兩組免疫球蛋白檢測(cè)情況

兩組血清IgG、IgA水平均無(wú)明顯差異（P＞0.05），觀察組血清IgM水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組免疫球蛋白水平比較（±SD）

表2 兩組免疫球蛋白水平比較（±SD）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

組別 例 IgG(g·L-1) IgA(g·L-1) IgM(g·L-1)對(duì)照組 80 9.75±1.57 0.70±0.25 1.17±0.29觀察組 98 10.16±1.80 0.68±0.22 1.99±0.38a

2.3 兩組炎癥細(xì)胞因子水平

觀察組血清IFN-γ水平為21.36±7.65 ng·L-1，IL-2水平為 4.87±1.54 ng·L-1，IL-4水平為9.87±2.13 ng·L-1，IL-6水平為12.36±3.74 ng·L-1；對(duì)照組血清IFN-γ水平為5.94±1.39 ng·L-1，IL-2水平為6.73±1.85 ng·L-1，IL-4水平為6.30±1.68 ng·L-1，IL-6水平為5.25±1.38 ng·L-1。觀察組血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），而血清IL-2水平明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.4 觀察組中T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白表達(dá)相關(guān)性

觀察組中T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=0.368，P＜0.05）；T淋巴細(xì)胞亞群水平與疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)（r=0.245，P＜0.05）；免疫球蛋白表達(dá)與疾病嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)（r=-0.421，P＜0.05）。

3 討論

MPP是常見(jiàn)的兒童呼吸道感染，約占小兒肺炎的20%，在密集人群可達(dá)50%，主要是經(jīng)過(guò)呼吸道（如健康人吸入患者打噴嚏、咳嗽時(shí)排出的口、鼻分泌物之后均有可能被感染）進(jìn)行傳播[1,2]。

目前MPP的發(fā)病機(jī)制尚未闡明，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，是因?yàn)闄C(jī)體在受到MP感染后出現(xiàn)免疫功能紊亂情況，引發(fā)炎癥反應(yīng)，呼吸道上皮吸附能力發(fā)生紊亂[6]。淋巴細(xì)胞是正常免疫系統(tǒng)中最重要的細(xì)胞群之一，在免疫應(yīng)答過(guò)程中，淋巴細(xì)胞發(fā)育成為功能不同的亞群，當(dāng)各亞群的數(shù)量和功能出現(xiàn)異常時(shí)，機(jī)體就會(huì)出現(xiàn)免疫紊亂和病理變化[7]。因此，觀察MPP患兒的免疫功能、炎性因子水平變化及具有重要臨床意義，對(duì)于淋巴細(xì)胞亞群的分析也是檢測(cè)細(xì)胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo)，可以反映機(jī)體當(dāng)前免疫狀態(tài)。本次研究中觀察組CD3+、CD4+細(xì)胞水平均低于對(duì)照組，血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平均遠(yuǎn)高于對(duì)照組，而血清IL-2水平遠(yuǎn)低于對(duì)照組。提示T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+細(xì)胞均參與MPP患兒機(jī)體免疫應(yīng)答，且能促進(jìn)抗體產(chǎn)生，介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答，抑制炎癥因子水平。CD3+表達(dá)于全部T細(xì)胞表面，是T細(xì)胞共有的表面標(biāo)志，能反映機(jī)體細(xì)胞免疫應(yīng)答的能力，主要?dú)≡w感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，CD4+主要識(shí)別MHCII類分子結(jié)合的外源性多肽抗原，具有輔助或誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的功能，部分細(xì)胞也有殺傷和抑制功能[8]。免疫球蛋白指具有抗體（Ab）活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白，具有提高免疫力、保衛(wèi)人體正常組織的防御功能，可有效的吞噬外界進(jìn)入人體的致病因子、細(xì)菌、病毒或自身產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞，引發(fā)全身性免疫反應(yīng)，提高人體內(nèi)吞噬細(xì)胞、白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的殺菌效果[9]。在MP感染后，體液免疫檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，IgM是最早產(chǎn)生的一種抗體，MP感染l-2 w內(nèi)，體內(nèi)產(chǎn)生IgM及IgA，而IgG一般在感染后2 w才開(kāi)始升高[12]。本次研究中兩組血清IgG、IgA水平比較均無(wú)明顯差異，而觀察組血清IgM水平高于對(duì)照組，推測(cè)其原因可能是IgM抗體形成時(shí)間一般在機(jī)體感染后7 d，一般在感染后20-28 d達(dá)到高峰，且MP感染有一定的潛伏期，一般在14-21 d，因此，患者發(fā)生臨床癥狀并就診時(shí)，IgM抗體水平往往已經(jīng)處于較高的水平。綜上所述，T淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白水平與MPP疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)，且炎癥細(xì)胞因子參與MPP疾病的發(fā)生與發(fā)展，可作為臨床輔助診斷的參考指標(biāo)，為臨床診斷治療提供依據(jù)。